化疗药物诱导急性白血病细胞凋亡及机制

化疗是急性白血病（AL）治疗最重要和最基础的手段。已知化疗药物对细胞蛋白质及DNA有损伤和抑制等毒性作用。过去认为,化疗药物是通过这些作用而直接杀死白血病细胞的。自70年代发现凋亡现象以来,认识到细胞还存在另一种死亡形式,从而开始了对化疗药物诱导白血病细胞凋亡及机制的研究。本文将对这一研究进展作一综述。     

化疗药物诱导急性白血病细胞凋亡及机制

化疗是急性白血病(AL)治疗最重要和最基础的手段。已知化疗药物对细胞蛋白质及DNA有损伤和抑制等毒性作用。过去认为,化疗药物是通过这些作用而直接杀死白血病细胞的。自70年代发现凋亡现象以来,认识到细胞还存在另一种死亡形式,从而开始了对化疗药物诱导白血病细胞凋亡及机制的研究。本文将对这一研究进展作一综述。     

SODD和Survivin在化疗药物诱导白血病细胞凋亡中的作用

为了研究死亡结构域沉默子（SODD）、survivin、caspase3、caspase8及caspase9在化疗药物诱导白血病细胞凋亡中的变化,以进一步明确凋亡调控基因的调控机制和寻找药物作用新靶点,采用Annexin V/PI双标记流式细胞术检测化疗药物作用后Jurkat细胞凋亡发生率;采用免疫印迹法分析SODD、caspase3、caspase8及caspase9蛋白表达的变化;采用RT-PCR检测survivin mRNA表达的变化;采用免疫组织化学SABC法检测survivin蛋白表达的变化。结果表明：SODD及survivn高表达均抑制肿瘤细胞凋亡,VCR具有时间依赖性特异下调SODD蛋白的功能并能有效诱导Jurkat细胞凋亡,在该凋亡过程中caspase3、caspase8酶原呈时间依赖性逐渐被水解剪切,而caspase9及survivin均无明显变化趋势。结论：SODD参与了VCR诱导白血病细胞凋亡过程,VCR通过下调SODD表达并启动受体配体介导途径诱导Jurkat细胞凋亡,在该过程中线粒体凋亡途径并未被启动。     

化疗药物诱导白血病细胞凋亡对Fas/FasL途径依赖性的研究

化疗药物除通过同各自的靶点直接作用外 ,也可以通过诱导细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞。文献报道化疗药物诱导白血病细胞凋亡与Ｆａｓ/ＦａｓＬ途径有关[1 3 ] ,我们对此进行了研究 ,并探讨化疗药物与ＦａｓＬ联用的疗效及其机制 ,期望为白血病的治疗提供新的线索。材料和方法1　主要试剂　柔红霉素 (ＤＮＲ)、阿糖胞苷 (Ａｒａ Ｃ)、碘化丙锭(ＰＩ)购自Ｓｉｇｍａ公司 ;原位末端标记 (ＴＵＮＥＬ)试剂盒购自博士德公司 ;可溶性Ｆａｓ配体 (ｓＦａｓＬ) ,小鼠抗人Ｆａｓ单抗 (ＩｇＧ1) ,白血病细胞系ＨＬ 6 0、Ｋ5 6 2、Ｕ937由华中科技大学同济…     

化疗药物体外诱导急性髓系白血病细胞凋亡的临床意义

我们采用ＴｄＴ介导的脱氧核苷酸切口和缺口末端标记法 (ＴＵＮＥＬ)及超微结构观察等方法 ,对 18例初治急性髓系白血病 (ＡＭＬ)患者骨髓白血病细胞进行体外化疗药物诱导凋亡与临床疗效关系的初步研究 ,以探讨体外化疗药物诱导白血病细胞凋亡在临床化疗疗效预测中的实际应用价值。病例和方法1　病例和标本　 18例初治ＡＭＬ患者来自第二军医大学长海医院血液科和上海医科大学华山医院血液科。其中男 8例 ,女 10例 ;中位年龄 46岁 (14～ 70岁 ) ;Ｍ1 1例 ,Ｍ2 9例 ,Ｍ31例 ,Ｍ44例 ,Ｍ5 2例 ,Ｍ71例。所有患者均经形态学、细胞化学 (Ｍ7经电…     

caspase 3 在化疗药物诱导白血病细胞NB4凋亡中的变化及意义

我们对临床常用的两种抗肿瘤药物足叶乙甙(Vp16)和柔红霉素(DNR)，以及G-CSF、GM-CSF对急性白血病细胞凋亡的影响进行了研究，并检测了凋亡过程中caspase3活性的变化，以探讨白血病细胞凋亡的作用机制。     

腺苷诱导白血病细胞发生凋亡

腺苷诱导白血病细胞发生凋亡张群洲周克元凌光鑫我们曾对腺苷的药理作用机制作了系列研究，在此基础上我们用体外培养的方法进一步观察了它对ＨＬ－６０细胞凋亡的诱导作用，并在方法上进行了适当的探索。材料和方法１腺苷处理ＨＬ－６０细胞腺苷溶于ＲＰＭＩ１６４０中，...     

急性白血病患者化疗前后骨髓活检中细胞凋亡的观察

我们对 2 0例急性白血病 (ＡＬ)治疗前后骨髓活检塑料包埋切片进行了形态学观察 ,并对其出现率和数量进行了比较。试图确定骨髓活检塑料包埋切片病理观察急性白血病患者体内细胞凋亡 ,可能成为早期观察临床患者用药疗效的指标。1　资料与方法1 1　病例资料　 2 0例均为本院未经治疗的急性白血病患者 ,其中男 12例 ;女 8例 ,平均年龄 43 5岁。按ＦＡＢ分型标准进行类型确定 ,急性非淋巴细胞性白血病 (ＡＮＬＬ) 14例 (Ｍ2ａ2例 ,Ｍ2ｂ1例 ,Ｍ56例 ,Ｍ3 4例 ,Ｍ4 1例 ) ,急性淋巴细胞性白血病 6例。1 2　化疗方法　ＡＮＬＬ用ＨＡ方案 (高三尖…     

细胞凋亡与白血病耐药

本文概述了凋亡相关的基因、酶及其他蛋白因子、激素受体、离子、细胞内微管结构改变等诸多因素在白血病耐药中发挥的作用，分析了凋亡和白血病耐药间的密切联系，从凋亡角度揭示了白血病耐药机制的复杂性。由于白血病耐药的机制常因不同的白血病类型、不同的药物而不同，因此，上述各凋亡相关因素与耐药的关系也不能适用于所有各类白血病对各种抗肿瘤药物的耐药。     

p53基因诱导白血病细胞凋亡的机制研究

目的：探讨p53基因诱导白血病细胞凋亡过程中内源性TGF-β1、TNF-α、端粒酶活性、Bcl-2表达的改变及其意义。方法：利用脂质体将温敏型p53基因[pN53cG(Val135)]导入p53基因缺失的白血病细胞系HL-60、K562细胞，经G418筛选，获得稳定表达p53蛋白的抗性克隆细胞HL-60pN53cG，K562-pN53cG细胞。采用缺口末端标记法、片段化DNA分析、RT-PCR、定量PCR、ELISA、PCR-ELISA、流式细胞术等方法检测外源性p53基因诱导白血病细胞凋亡过程中TGF-β1、TNF-α、bcl-2、端粒酶反转录酶(hTERT)mRNA表达变化、细胞上清TGF-β1水平和端粒酶活性及。TGF-β1、TNF-α反义PS-ODNS对白血病细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达的影响。结果:①外源性野生型p53基因诱导细胞凋亡过程中内源性。TGF-β1和TNF-α mRNA表达上调，bcl-2及hTERT mRNA表达下调，细胞培养上清TGF-β1蛋白水平明显升高，端粒酶活性水平下降；②TGF-β1、TNF-α反义PS-ODNS能够明显抑制野生型p53基因诱导细胞凋亡的发生，并使细胞bcl-2 mRNA及蛋白表达恢复到处理前的水平。结论：p53基因诱导白血病细胞凋亡可通过上调内源性TGF-β1和TNF-α水平，下调hTERT mRNA表达及端粒酶活性，抑制bcl-2基因表达而发挥作用。     

急性早幼粒细胞白血病诱导分化及凋亡的药物治疗

急性早幼粒细胞白血病（APL）的诱导分化及凋亡的治疗是目前血液学研究热点之一。本文就诱导APL细胞分化及凋亡的药物研究进展作一综述。     

薏苡仁诱导急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡及其机制

本研究探讨薏苡仁油对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的增殖和凋亡效应及其作用机制。分别用0．4．0．8,1．6mg／ml的薏苡仁油作用Jurkat细胞24小时,用CCK法检测细胞增殖,应用Hoechst33258染色、PI及PI／AnnexinV染色后流式细胞仪来检测细胞凋亡,然后采用JC-1染色分析线粒体膜电位。结果表明：0．8和1．6mg／ml的薏苡仁油能显著抑制Jurkat细胞增殖;随着薏苡仁油浓度的增加,凋亡细胞数目增多,线粒体膜电位降低。结论：薏苡仁油对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞有明显的抗增殖和促凋亡作用,而且此效应与线粒体膜电位降低有关,本研究结果为临床应用薏苡仁油治疗白血病提供了实验依据。     

孤啡肽诱导白血病细胞K562凋亡

本研究探讨孤啡肽对白血病细胞K562增殖的影响及诱导凋亡的作用，采用MTT（四唑氮蓝）法检测不同浓度的孤啡肽对K562细胞生长的影响，应用瑞氏染色、电子显微镜观察药物作用后K562细胞形态的改变，流式细胞术检测孤啡肽对K562细胞细胞凋亡作用，DNA琼脂糖凝胶电泳观察孤啡肽作用后K562细胞内DNA的损伤程度。结果表明：10^-6～-10^-13mol／L孤啡肽明显抑制K562细胞的生长，且存在时间依赖性，而剂量依赖性不明显；10^-6-10^-7、10^-9、10^-12mol／L孤啡肽作用72小时后显示明显的细胞毒作用。与对照组相比，10^-9mol／L孤啡肽作用72小时后K562细胞出现典型凋亡特征；流式细胞术检测发现：0、10^-7、10^-8、10^-9mol／L孤啡肽作用72小时后出现凋亡峰，凋亡率分别为0％、22．8％、23．8％、26．5％；DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型的梯状条带。结论：孤啡肽能够抑制K562细胞增殖，诱导其凋亡。     

化疗药物与细胞因子协同作用引起小鼠T淋巴瘤细胞凋亡

本实验旨在了解化疗药物和细胞因子协同作用对细胞凋亡的影响。在培养的小鼠Ｔ淋巴瘤ＲＭＡ细胞系中加化疗药物地塞米松（ＤＥＸ）、足叶乙甙（ＶＰ１６）、三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）及维甲酸（ＡＴＲＡ）以及培养细胞中先分别与细胞因子ＩＬ－２,ＩＬ－６和ＧＭ－ＣＳＦ共同培养后再加入上述药物,观察对引起细胞凋亡的影响。四种化疗药均能抑制ＲＭＡ细胞增殖,ＤＥＸ,ＶＰ１６和Ａｓ２Ｏ３可以诱导细胞凋亡,单独使用ＡＴＲＡ不     

低氧对化疗药物诱导的肝癌细胞凋亡的影响

目的：分析低氧条件对肝癌细胞化疗敏感性的变化,从细胞水平研究低氧环境对化疗药物诱导的肝癌细胞凋亡的影响。方法：测定不同浓度化疗药物（CDDP、EPI、GEM、MMC）对细胞死亡率的影响及IC50值,对人肝癌细胞SMMC-7721化疗药物处理,经过常氧及低氧不同环境培养下,分析肝癌细胞死亡率以及凋亡情况。结果：实验结果显示,化疗药物作用浓度与细胞死亡率正相关;低氧培养条件下化疗药物引起的细胞死亡率明显低于常氧培养组,两组有显著差异（P〈0.05）;低氧环境下化疗药物诱导的SMMC-7721细胞凋亡率明显降低（P〈0.05）。结论：低氧环境下肝癌细胞对化疗药物的不敏感与低氧引起肝癌细胞凋亡能力下调有关。     

氧化砷诱导早幼粒细胞白血病细胞凋亡及其分子机制的初步研究

目的：了解氧化砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的细胞和分子机制。方法：以早幼粒细胞白血病细胞株ＮＢ４细胞等为研究对象，利用流式细胞仪，ＤＮＡ电泳，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ、Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹，免疫组化等手段，观察Ａｓ２Ｏ３对ＡＰＬ的作用。结果：Ａｓ２Ｏ３能显著诱导ＮＢ４细胞凋亡，而不影响ＨＬ－６０和Ｕ９３７的生长和存活。氧化砷能有效降低ＮＢ４细胞中ｂｃｌ－２基因的表达，而对其它几种凋亡相关基因（包括ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂａｘ和ｂｃｌ－ＸＬ）的ｍＲＮＡ水平无影响。结论：这可能是Ａｓ２Ｏ３诱导ＮＢ４细胞凋亡的分子机制之一。     

中药诱导白血病细胞凋亡的研究近况

<正>细胞凋亡又称细胞程序性死亡(Apoptosis APO),是1972年首先由英国学者Kerr等提出,用以描述一种在细胞形态学上有别于细胞坏死(Necrosis)的细胞死亡过程(Progammed cell death,PCD),是在某些生理或病理条件下,细胞接到某种信号的触发后主动参与并遵循一定程序的较慢的死亡过程,不仅在细胞的发育、分化、成熟、死亡中起着重要的作用,而且在抗肿瘤药物治疗以及白血病治疗中生长     

Fenretinide诱导白血病细胞凋亡的机理研究

Fenretinide（4-HPR）是人工合成的全反式维甲酸衍生物,能够通过诱导凋亡抑制多种肿瘤细胞生长和增殖,但是其机理尚不很清楚.本研究考察4-HPR对几种白血病细胞的影响,并用U937为对象研究其作用机制.在研究中进行了细胞生长和增殖实验,以膜联蛋白检测细胞凋亡,测定活性氧（ROS）和线粒体跨膜电位（△ψm）及用Western blot检测蛋白表达.研究结果表明,4-HPR能够剂量依赖性地抑制多种白血病细胞株的增殖,进一步发现4-HPR能够诱导U937细胞发生凋亡,并且此凋亡可以被维生素C所抑制.此凋亡过程伴有活性氧的升高,线粒体跨膜电位的下降,以及酶原型胱冬酶-8（caspase-8）,-3的蛋白水平表达下降.结论：4-HPR可能通过升高细胞内ROS的水平,造成线粒体膜损伤,引发由caspase家族成员介导的凋亡,提示4-HPR可能是一种线粒体靶向的药物.     

细胞色素C对阿糖胞苷诱导白血病细胞凋亡的影响

【目的】探讨细胞色素C（CytC）对小剂量阿糖胞苷（LD-Ara—C）诱导白血病细胞凋亡的影响。【方法】用HL-60白血病细胞株进行传代培养,MTT试验检测Ara—c和Cyt C不同药物浓度对白血病细胞增殖的影响,流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡。【结果】12μg／ml浓度以下的CytC具有促进HL-60细胞增殖的作用,不同浓度的CytC干预后HL-60细胞凋亡率均低于干预前（P〈0．01）。联合应用CytC和LD-Ara—C,HL-60细胞凋亡率明显高于单用LD-Ara—C组（P〈0．01）。【结论】外源性CytC在12μg／ml浓度以下时仅能促进白血病细胞增殖,联合应用CytC和LD-Ara—C可增强LD-Ara—C诱导白血病细胞凋亡的作用。