利用精子冷冻、体外受精技术进行昆明小鼠育种初探

在昆明(KM)小鼠标准化研究中,采集武汉生物制品研究所、上海第一生化制药厂普通级KM小鼠的精子并冷冻运输,冻融精子与中科院上海实验动物中心KM雌鼠的超排卵体外受精(IVF)得到杂交一代2细胞胚胎,用中科院动物中心KM鼠冻融精子对照.无菌条件下2细胞胚胎移植入SPF级假孕鼠,受体饲养于独立通气笼具(IVC)中.平均产仔率为51.9%,离乳率100%.三种群12周龄KM雄鼠精子冷冻复苏率,IVF率,移植成绩均无显著差异(P>0.05).仔鼠经微生物、寄生虫学检测达SPF标准.结果表明,利用冷冻精子,通过IVF、胚胎移植能够方便快速的建立种群间杂交一代,并实现生物净化.     

武汉所昆明小鼠生产性能试验研究

目的 了解目前昆明小鼠的生长发育和繁殖性能，方法 从1999年开始对武汉所昆明（KM）小鼠体重增长和生产性能进行了统计分析。结果 昆明小鼠初配产仔率100%，平均初生重1.82g，平均日增重：0-42日龄，雄鼠0.80g，雌鼠0.60g;42-112日龄 ，雄鼠0.15g，雌鼠0.13g；平均窝产仔数9.69只，胎间隔29.18d，离乳成活率91.05%。结论 为我国昆明小鼠生物学指标的建立提供了依据。     

离乳昆明种小鼠死亡原因初探

实验动物对环境温度要求十分严格,尤其是昆明种小鼠(KM)须限定在19～29℃[1]的范围内饲养,室温若低于或高于此范围,则对其生长、发育、健康状况产生影响,甚至造成死亡,故创造一个合适的温度条件,对小鼠饲养、繁殖至关重要。本文旨在探讨低温对离乳KM小鼠死亡率的影响。1　发病情况　　本实验中心于1996年11月初～11月末,饲育的1月龄离乳KM小鼠相继有200余只发生死亡,死亡前均呈现竖毛、弓背、消瘦、打颤,走路摇摆,常群集在鼠盒角,部分小鼠出现腹泻,后逐渐死亡。同室饲育的成年鼠及幼鼠则未发生此现象。2　诊断及原因　　为分析发生离乳鼠…     

小鼠品系影响胚胎移植成功率的比较研究

目的:探讨不同受体鼠和供体鼠品系对胚胎移植成功率的影响以及不同品系胚胎混合移植的可行性. 方法:以Balb/c雄鼠和C57BL/6雌鼠杂交F1代(B6CF1)小鼠24只和昆明鼠(KM鼠)14只作为供体鼠,共取状态良好的受精卵362颗,分别或混合回种于8只B6CF1和16只KM受体鼠输卵管内,比较两种品系鼠的产仔率. 结果:除同品系回种可产仔外,KM鼠和B6CF1杂交鼠受精卵交叉回种B6CF1或KM受体鼠以及两品系受精卵混合回种均可产仔. 其中B6CF1受体鼠产仔率(29.0%)明显高于KM受体鼠(7.0%),B6CF1供体鼠产仔率(16.0%)也略高于KM供体鼠(11.0%);杂交B6CF1受精卵同品系回种产仔率最高(32.0%),KM鼠受精卵同品系回种产仔率仅4.0%,而B6CF1和KM鼠作为受体鼠混合回种两品系受精卵的产仔率分别为25.0%和15.0%. 结论:不同品系小鼠胚胎可交叉或混合回种,小鼠胚胎移植技术不受品系限制,但同品系胚胎移植成功率更高;B6CF1作为胚胎移植实验动物明显优于KM鼠.     

两个昆明小鼠封闭群部分生物学特性的比较

目的比较河南医利大学实验动物中心昆明(KM)小鼠与河北医科大学KM小鼠两个封闭群部分生物学特性的差异。方法测量小鼠身长,尾长,血液指标,尾椎节数及长度。结果身长无差异,血液常规指标6项无差异。20周龄、30周龄尾长差异显著;30周龄河南医科大学实验动物中心KM小鼠尾骨为节,而从河北医科大学引进的KM小鼠封闭群为28节。结论河南医科大学实验动物中心KM小鼠与河北医科大学KM小鼠存在尾长和尾椎节数差异。     

中国KM(昆明)小鼠遗传组成及起源的研究(摘要)

中国KM(昆明)小鼠是一株远交系小鼠,在我国已封闭饲养近50年,交配繁殖达150多代,广泛地应用于生物学、医学研究及药品、生物制品的检定,是我国用量最大的实验小鼠。但由于对其遗传背景缺乏完整了解,对中国KM小鼠的遗传来源及KM小鼠各亚群间存在     

年龄、性别对封闭群小鼠脑内Munc18-1含量及血清甲状腺激素水平的影响

目的①探讨年龄、性别对封闭群小鼠(KM、ICR)不同脑区Munc18-1含量的影响;②探讨年龄、性别对封闭群小鼠(KM、ICR)血清甲状腺激素水平的影响;③探讨Munc18-1含量与血清甲状腺激素水平之间的相关性。方法①选取3个年龄段(22月龄老年组、11月龄中年组、6月龄青年组)昆明小鼠和2个年龄段(12月龄中年组、7月龄青年组)ICR小鼠;②应用Western blot检测小鼠嗅球、额叶、顶叶、腹侧海马及背侧海马中Munc18-1和内参蛋白β-actin蛋白的表达。Munc18-1灰度值与β-actin灰度值的比值作为Munc18-1相对含量;②采用放射免疫法检测小鼠血清甲状腺激素水平;③用方差分析、Spearman秩相关检验进行统计学分析。结果①22月龄昆明小鼠背侧海马Munc18-1含量显著高于中年鼠和青年鼠(P<0.05),且以老年雌鼠显著(P<0.05),而中年昆明小鼠与青年鼠之间未发现显著性差异(P>0.05);12月龄ICR小鼠背侧海马Munc18-1相对含量显著高于青年鼠(P<0.05),且以雌鼠显著(P<0.05)。②22月龄昆明小鼠血清FT3、FT4水平显著低于青年鼠(P<0.05),且FT3显著低于中年鼠(P<0.05),以雌鼠显著(P<0.05),而中年与青年鼠之间未发现显著性差异(P>0.05);12月龄ICR小鼠血清FT3水平显著低于青年鼠(P<0.05),以雌鼠显著(P<0.05)。③昆明小鼠和ICR小鼠背侧海马Munc18-1含量均与FT3呈负相关(P<0.05)。结论①封闭群小鼠背侧海马Munc18-1含量可出现年龄相关性显著升高,其中以雌鼠升高更明显;②封闭群小鼠可出现年龄相关性血清甲状腺激素水平显著降低,其中以雌鼠降低更明显;③血清甲状腺激素水平降低可能是导致背侧海马Munc18-1含量升高的原因之一。     

昆明小白鼠生长繁殖性能的观察

昆明小鼠 (KM)在哺乳动物中 ,由于其体型最小 ,易于控制 ,抗病力和适应力很强 ,生长繁殖快 ,繁殖率和成活率都很高 ,因此成为我国应用最多的实验小鼠 ,被广泛用于药理、毒理、病理、细菌引起的传染病研究和生物制品的鉴定 [1 ] 。为了解昆明小鼠在稳定的饲养环境条件下的生长繁殖能力 ,本文对哺乳期仔鼠的生长及种鼠繁殖能力等生物学特性作了统计分析 ,现报道如下。1　材料和方法1.1　实验动物　在本实验动物中心饲养的 KM小鼠中 ,随机选育种 5 0～ 6 0日龄 4 0只 ,雌、雄各半 ,进行交配繁殖。1.2　饲养环境条件1.2 .1　饲养室内温度控制…     

Friend鼠白血病病毒对BALB/c小鼠和KM小鼠的影响

目的：探讨Friend鼠白血病病毒（FLV）对BALB/c和KM小鼠体质量、胸腺和脾脏的影响。方法：以齐多夫定片（AZT）作为阳性药物,用FLV攻击BALB/c和KM小鼠,观察各鼠系的体质量、胸腺和脾脏变化情况。结果：FLV能引起BALB/c和KM小鼠脾肿大,各鼠系脾指数与正常鼠脾指数差异有统计学意义（P〈0.01）。AZT对BALB/c和KM小鼠具有明显的抑制脾肿大作用（P〈0.05）。各鼠系小鼠的体质量和胸腺变化差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：FLV对KM小鼠体质量、胸腺和脾脏的影响程度相当于BALB/c小鼠。     

GF级KM小鼠生长曲线、主要脏器参数及生理生化指标的测定分析

目的 采用对SPF级KM小鼠进行剖宫产术,用无菌奶妈代乳方法,培育出GF级(即无菌级)KM小鼠,了解GF级KM小鼠的生长发育并绘制出生长曲线;测定其不同生长阶段的主要脏器重量及血液生理生化值并进行比较分析.方法 ①分别称取60只(雌雄各半)0～112日龄GF级KM小鼠体重,绘制其生长曲线;②随机抽取28、56、112日龄的KM小鼠60只(雌雄各半),活体称重,依次剖取心、肝等主要脏器称重;③小鼠眼眶采血,测定其血常规和生化值.结果 GF级KM小鼠的体重随着日龄的增长而逐渐增加,断奶后1～2周内增重最为迅速,4周后的雄鼠体重明显高于雌鼠;主要脏器(心、肝、脾、肺、脑等)重量随年龄增大均逐渐增加,盲肠体积增大尤其明显,而胸腺随着日龄的增加而逐渐萎缩,其重量迅速减轻;同一日龄GF级KM小鼠的雌雄间血常规和生化值指标均存在差异,但随着年龄的增加差异的项目逐渐增多.结论 GF级KM小鼠生长发育和血液生理生化的研究结果可为KM小鼠的标准化及最终成为国际标准品系提供基础数据.     

小鼠2细胞期胚胎移植方法的探讨

目的以近交系C57BL/6J小鼠作为供体胚小鼠，封闭群ICR小鼠及昆明鼠作为假孕体，对2细胞期的胚胎移植方法和假孕鼠品系进行对比探讨。方法经超数排卵的C57BL/6J雌鼠于正常雄鼠交配，取受精卵，培养到2细胞期，进行输卵管伞移植和输卵管壁移植，妊娠产仔。结果从KM为假孕鼠，对2细胞期胚胎进行的输卵管壁移植的妊娠数量最多18只，90%的妊娠率，产仔数最多188只，产仔率达34.8%。结论输卵管壁移植的技术简单易行具有较高的妊娠率及产仔率。     

近交系C57小鼠与封闭群昆明小鼠超排卵数的比较

目的 观察C5786小鼠(近交系)和昆明小鼠(封闭群)超排卵后卵母细胞数量的差别.方法 分别对4周龄和7周龄C5786小鼠与昆明小鼠注射孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG),进行超排卵处理,观察小鼠超排卵母细胞数量.结果 超排卵母细胞数量为:4周龄昆明小鼠(16.2±2.5)个/只,7周龄(25.2 ±3.1)个/只;4周龄C5786小鼠(9.8±1.2)个/只,7周龄C5786小鼠(18.1±2.2)个/只.超排卵母细胞数量在同种小鼠不同周龄间和同周龄不同小鼠间比较,均有统计学差异(P<0.05).结论 昆明小鼠超排卵母细胞数量高于C5786小鼠.     

中国昆明系小鼠(KM)下颌骨形态遗传的初步研究

封闭饲养近40年,繁殖达140代的中国昆明系小鼠(KM),现已广泛应用于生物医学研究和药品生物制品检定。但其遗传背景尚缺乏完整的了解,各地区饲育的群体之间的遗传变异状况也不清,以至未获国际公认和注册。为了研究并确定KM的遗传特性,本研究组按课题分工,根据Festing创立的小鼠下颌骨形态分析法,对北京、上海和长春3地区4个群体KM进行了测试分析。     

先天性白内障小鼠主要脏器重量和血液生理生化指标的分析

目的建立SPF级先天性白内障小鼠体重及主要脏器重量,血液生理生化等指标的背景资料。方法以28日龄及56日龄正常KM小鼠为对照组,以同日龄先天白内障小鼠为实验组,分别测定小鼠体重、主要脏器重量以及血液生理生化指标。结果与28日龄KM小鼠相比较,同日龄白内障小鼠各项指标均无统计学意义;与56日龄KM小鼠相比较:(1)小鼠体重、心、肝、脾、肺、肾、雄鼠睾丸重量差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。(2)血液学检查数据显示:雌鼠的平均血小板压积、血小板分布宽度以及雄鼠的白细胞、血小板、淋巴细胞比率差异有统计学意义(P0.01)。(3)血液生化学检查数据显示碱性磷酸酶、尿酸、葡萄糖、总蛋白、雄鼠谷丙转氨酶、白蛋白、雌鼠的尿素、甘油三酯差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论 56日龄白内障小鼠与同日龄KM小鼠相比,体重及主要脏器重量以及部分生理生化指标有一定的差异。研究结果可以为科研人员提供参考数据。     

不同来源KM小鼠在药物抑瘤作用重复实验中的结果差异原因初探

采用上海 A、B、C三家专业实验动物繁育生产单位的 KM小鼠进行景洪哥纳香甲素 (GC-5 1 )对 KM小鼠肝癌实体瘤抗癌作用的重复实验并测定了其胸腺、脾脏重量。结果表明该药物对不同单位 KM小鼠的抑瘤率有明显差异 (P<0 .0 1 )。三家单位 KM小鼠的胸腺、脾脏重量也有明显差异 (P<0 .0 1 ) ,剖检发现 ,其中两家单位小鼠的胸腺分叶较多。实验过程中 ,小鼠均无死亡现象 ,体重增长基本一致。结果提示 ,国家有关部门应尽早采取措施促使 KM小鼠的标准化 ,使 KM小鼠能早日成为国际上认可的标准化实验动物。     

NJS近交系小鼠生化标记基因位点的遗传概貌测定

对由南京军区医学动物实验中心以高胆固醇高血脂为定向选育目标所培育的起源于KM(昆明)小鼠的NJS近交系小鼠(动脉粥样硬化症动物模型),进行生化标志基因位点的遗传概貌测定,并与同样起源于KM小鼠的其他几个品系的遗传概貌进行比较。共测定了NJS品系小鼠12条染色体上的26个生化标记基因位点的基因型。结果表明,NJS基础群F_(22)成年小鼠的被测位点均已纯合,符合近交系小鼠的要求,所测定的遗传概貌可作为本品系小鼠今后遗传质量监测的判定指标。在NJS小鼠的第1号染色体上,异柠檬酸脱氢酶(Idh—1)位点呈纯合的b等     

不同品系小鼠主动脉弓缩窄压力负荷模型的比较

目的 比较两种不同品系小鼠建立主动脉弓缩窄压力负荷模型后心脏形态及功能变化的差异.方法 将雄性KM小鼠及C57BL/6小鼠各一组随机分为术前(n=10)、假手术组(n=10)及主动脉弓缩窄(TAC)组(n=30).术前及术后8周应用高频心脏超声、血流动力学、心脏病理组织学方法进行检测,并进行死亡原因观察.结果 (1)KM小鼠及C57BL/6小鼠缩窄组围手术成功率分别为80%及87%,8周存活率分别为67%及77%.(2)与各假手术组比较,缩窄术后8周KM及C57BL/6小鼠TAC组心脏超声指标左心室收缩期、舒张期前壁厚度(Awsth;Awdth),左心室收缩期、舒张期后壁厚度(Pwsth;Pwdth)、左室重量指数(LVMI)、动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室压力上升和下降最大速率(dp/dtmax;dp/dtmin)及病理解剖指标心脏重量指数(H w/Bw)、左心室重量(LVw)、左心室重量指数(LV w/Bw)均显著增加(均P＜0.05),显示左心室肥孱KM缩窄组左心室收缩末期、舒张末期内径(LVESd LVEDd)、左心室舒张末期外径(EXL VDd)较其假手术组显著增加(均P＜0.05);与C57BL/6缩窄组比较,术后8周KM缩窄组LVESd、LVEDd、EXLVDd、LVw、肺脏重量指数(Lungw/Bw)显著增加(均P＜0.05).结论 KM小鼠主动脉弓缩窄动物模型与C57BL/6小鼠实验结果相似,均产生左室肥厚,但KM小鼠较早出现离心性肥厚趋势.     

三个远交群小鼠群体遗传特性的比较研究

对上海地区 ICR 系小鼠的2个远交群和昆明系(KM)小鼠的1个远交群共120只小鼠,用同工酶电泳法和免疫双向扩散法在10个位点上进行了基因型测试,分别计算其表型频率和基因频率,对 ICR 群体之间、ICR 与 KM 群体之间以及国内外 ICR 群体之间的遗传特性进行了比较研究。在被测3个群体和对照用1个群体中,ICR 群体Ⅰ的遗传性状同对照群相近,ICR 群体Ⅱ的遗传性状同 KM 群体相近。本文还探讨了 ICR小鼠和 KM 小鼠的历史渊源与其遗传特性的联系。     

吗啡对不同来源KM小鼠的镇痛、耐受和身体依赖性的比较

用吗啡对 A、B、C三家实验动物繁殖生产专业单位 KM小鼠进行镇痛、耐受性和身体依赖性的比较实验 ,结果显示 ,A、B、C三家单位 KM小鼠的利用率分别为 70 %、77%和 81%。吗啡热板法镇痛 ED50 分别为 3.6 1、3.6 4和 5 .10 mg/kg,A单位 KM小鼠吗啡镇痛起较最快 ,维持时间最长 ,C单位 KM小鼠最弱。吗啡的耐受性实验结果表明 ,三家单位的 KM小鼠之间没有差异 ,但是吗啡的身体依赖性实验结果表明 ,B、C单位KM小鼠与 A单位小鼠之间有显著性差异 (P<0 .0 1)。结果提示 ,用吗啡对 KM小鼠进行整体实验时 ,必须使用同一来源的动物 ,此外 ,…     

定向培育短尾KM小鼠初报

封闭群KM小鼠经4代定向培育已成为尾静脉清晰的短尾KM小鼠群。对其尾长和生长繁殖性能进行测定分析的结果表明:经定向培育后的短尾群小鼠4周龄时尾长为67.5±6.0mm,明显短于未经选育的对照群(80.3±12.6mm;P<0.01);其窝产仔数、窝离乳仔数及仔鼠体重与对照群间无明显差异(P>0.05)