ELISPOT检测在结核性脑膜炎诊断中的研究

目的利用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测脑脊液中结核抗原特异性的INF-γ分泌细胞数量,研究其在结核性脑膜炎诊断中的价值。方法对104例结核性脑膜炎患者和40例非结核性脑膜炎患者进行脑脊液与血的ELISPOT检测,并与脑脊液抗酸染色涂片、结核菌培养、荧光定量PCR、结核抗体检测进行敏感度和特异性的比较。结果脑脊液ELISPOT检测的敏感度为67.3%、特异性为89.2%,PV+值94.3%优于其他检测方法,差别具有统计学意义(P0.05),脑脊液ELISPOT检测具有较好的诊断价值(Kappa=0.856,P0.001)。结论脑脊液ELISPOT检测对结核性脑膜炎诊断的敏感度及特异度高,有望成为快速诊断结核性脑膜炎的一种方法。     

结核感染T细胞斑点试验诊断结核性心包积液的意义

结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB ）通过酶联免疫斑点技术（ELISPOT ）检测外周血中经结核菌特异性抗原刺激后释放γ干扰素的T细胞,诊断结核分枝杆菌感染具有较高的敏感性和特异性,本文主要针对我院收治的高度怀疑结核性心包积液患者的外周血液行ELISPOT检测,探讨该方法对结核性心包积液的诊断价值。     

酶联免疫斑点技术在结核病诊断中的应用现状

酶联免疫斑点技术（ELISPOT）由Czerkinsky等[1]于1983年根据酶联免疫吸附实验（ELISA）而建立的一种体外检测单细胞水平特异性抗体分泌细胞功能的免疫学新技术.起初用于检测B淋巴细胞分泌抗体的数量来推断B淋巴细胞的功能,后来用于检测T淋巴细胞分泌细胞因子的数量来推断T淋巴细胞功能.Lalvani等首先将ELISPOT用于结核病的诊断后,相关报道日益增多.现将ELISPOT在结核病诊断中的进展综述如下.     

酶联免疫斑点法诊断结核性脑膜炎临床研究

目的探讨酶联免疫斑点法（enzyme linked immune spot assay,ELISpot）对结核性脑膜炎的诊断价值。方法选取我院根据临床表现疑为结核性脑膜炎的患者26例,以ELISpot检测分泌IFN—γ的结核分枝杆菌ESAT-6及CFP-10抗原特异性T细胞水平。结果在所有入组患者中,根据诊断标准,明确诊断为结核性脑膜炎者15例,诊断为非结核性中枢神经系统感染者11例,ELISpot检测的敏感度为80．00％[95％可信区间（confidence interval,CI）51．9％-95．7％1,特异度为100％（95％CI71．5％-100．0％）;阳性预测值为100％（95％CI73．5％～100．0％）,阴性预测值为78．6％（95％CI49．2％～95．3％）。结论EHSpot对结核性脑膜炎有较高的诊断价值。     

结核性和非结核性脑膜炎患者脑脊液中ADA及NSE表达水平的对比分析

目的探讨脑脊液腺苷脱氨酶（ADA）及神经元特异性烯醇化酶（NSE）表达水平在结核性脑膜炎（TBM）患者诊断中的应用价值。方法利用免疫学技术对TBM患者、无菌性脑膜炎患者及非中枢神经系统病患者脑脊液中的ADA、NSE含量及血清NSE含量进行测定。结果 TBM患者脑脊液中ADA含量明显高于无菌性脑膜炎组及对照组（P〈0.01）,无菌性脑膜炎患者脑脊液中的ADA含量与对照组比较没有明显变化（P〉0.05）。TBM组脑脊液/血清NSE比值比与对照组比较差异有统计学意义（P=0.001）。结论脑脊液ADA含量测定有助于TBM的诊断。脑脊液/血清NSE比值比可能成为一个早期诊断结核性脑膜炎的参数。     

TB-SA结核分枝杆菌抗体检测对结核性胸膜炎的诊断意义

目的评估胸水和血清特异性TB—sA结核抗体对结核性胸膜炎的诊断价值。方法用TB—sA抗体IgG检测试剂盒（酶联免疫法）分别检测121例结核性胸膜炎和30例非结核性胸膜炎胸水、血清标本中的TB—SA结核抗体,分析实验资料。结果121例结核性胸膜炎组中,胸水检测TB-sA抗体的敏感性为68．60％,血清检测TB—sA抗体的敏感性为33．88％。30例非结核性胸膜炎组胸水检测的特异性为96．67％,血清检测特异性为96．67％。结论胸水TB-SA抗体检测在结核性胸膜炎的诊断和鉴别诊断中具有较重要的参考价值。     

结核γ-干扰素酶联免疫斑点检测在结核性心包积液诊断中的应用

目的 探讨结核菌特异性γ-干扰素（interferon-gamma,IFN-γ）酶联免疫斑点（enzyme-linked immunosorbent spot,ELISPOT）检测对结核性心包积液的诊断价值.方法 采用结核菌特异性IFN-γ ELISPOT技术同时检测20例结核性心包积液患者（TP组）和14例非结核性心包积液患者（Non-TP组）外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）及心包积液单核细胞（pleural effusion mononuclear cells,PEMC）中结核菌特异性IFN-γ水平.结果 TP组PBMC和PEMC结核菌特异性IFN-γ水平均显著高于Non-TP组,差异有统计学意义（P＜0.01,P＜0.01）.TP组心包积液中结核菌特异性IFN-y水平显著高于外周血IFN-γ水平,差异有统计学意义（P＜0.01,P＜0.01）.PBMC ELISPOT检测结核性心包积液的敏感性和特异性分别为80.0％和85.7％;而PEMC ELISPOT敏感性和特异性为90.0％和85.7％.结论 结核菌特异性IFN-γELISPOT技术对结核性心包积液诊断和鉴别诊断具有很好的辅助价值.     

三种检测方法对结核性胸膜炎诊断价值的探讨

目的探讨腺苷脱氨酶（ADA）,结核蛋白芯片,结核分枝杆菌特异性酶联免疫斑点技术（ELISPOT）三种方法在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。方法对102例结核性胸膜炎患者的胸腔积液、血清和48例非结核性胸膜炎患者的胸腔积液、血清分别用ADA、结核蛋白芯片和结核分枝杆菌特异性ELISPOT三种方法进行检测。结果胸液中的ADA、结核蛋白芯片和结核分枝杆菌特异性ELISPOT的灵敏性分别是84.3%、52.9%、97.1%,特异性分别是85.4%、89.6%、97.9%;血清中的ADA、结核蛋白芯片和结核分枝杆菌特异性ELISPOT的灵敏性分别是31.4%、74.5%、91.2%,特异性分别为75.0%、93.8%、95.8%。结论胸水的ADA检测,血清的结核蛋白芯片检测,胸水与血清的结核分枝杆菌特异性ELISPOT检测对结核性胸膜炎有较高的灵敏性与特异性,对结核性胸膜炎有较高的临床诊断价值。     

酶联免疫斑点试验检测技术（Elispot）在诊断结核性脑膜炎中的应用

目的评价酶联免疫斑点技术（Elispot）检测外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素（IFN-r）水平在结核性脑膜脑炎中的应用价值。方法回顾性分析本院73例结核性脑膜脑炎患者及16例非结核性脑膜脑炎患者外周血Elispot结果,同时分析脑脊液腺苷脱氨酶（ADA）水平、TB-DNA（PCR）结果,比较三种技术在诊断结核性脑膜炎的作用。结果 Elispot在诊断结核性脑膜脑炎中的敏感性及准确性高于脑脊液ADA、TB-DNA（PCR）检测,差异具有统计学意义（P〈0.05）;而特异性比较三者无明显差异（P〉0.05）。结论 Elispot技术在结核性脑膜脑炎中具有良好的辅助诊断价值,其诊断价值优于脑脊液ADA、TB-DNA（PCR）检测。     

结核性脑膜炎合并脑血栓形成1例

结核性脑膜炎作为神经内科的一种常见病，在目前医学诊断技术条件下，确诊率高，误诊很少，并且抗结核药物的联合应用，加强了治疗效果，死亡率明显降低。而结核性脑膜炎并发脑血栓形成的报道较少。在我院还是首次，现报告1例如下。     

比较结脑病人血液和脑脊液IFN-γ的表达水平

目的采用结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点(Elispot)检测结核性脑膜炎病人外周血和脑脊液细胞中IFN-γ的表达,评价该方法在结核性脑膜炎诊断中的应用情况。方法采用自建立的结核分枝杆菌特异性IFN-γElispot检测技术(简称Elispot)检测16例结核性脑膜炎病人PBMC和脑脊液中结核菌特异性IFN-γ水平。结果 ELISPOT检测两种细胞分别在ESAT6蛋白和Pool A多肽的作用下,释放的IFN-γ水平均没差别(P0.05);两种标本ELISPOT检测阳性率没有差异(P0.05)。结论建立的结核特异性的Elispot检测诊断方法适用于脑脊液标本的检测,并且其检测效果与外周血细胞的检测是基本一致。     

ELISPOT辅助临床结核病诊断价值分析

目的探讨ELISPOT在结核病诊断中的应用价值。方法分离TB患者54例和非TB患者52例的外周血单个核淋巴细胞,并采用以结核分枝杆菌特异性蛋白ESAT-6和CFP-10为抗原的ELISPOT试验技术进行结核分枝杆菌（Mtb）特异性T淋巴细胞免疫反应的检测,同时做痰涂片、痰培养、PPD试验和胶体金法检测。以临床明确诊断为标准,比较分析评价不同检测方法的敏感度和特异度。结果 TB-ELISPOT的敏感度（Se）90.7%、特异度（Sp）96.15%、阳性预测值（PPV）0.96、阴性预测值（NPV）0.91、阳性似然比（＋LR）23.55和阴性似然比（-LR）0.1;胶体金法的Se 59.26%、Sp 88.46%、PPV0.84、NPV 0.68、＋LR 5.14和-LR 0.46;PPD试验的Se 64.81%、Sp 82.69%、PPV 0.80、NPV 3.74、＋LR 0.69和-LR 0.43;痰涂片的Se 40.74%、Sp 100.00%、PPV 1.0、NPV 0.62、＋LR〉10和-LR0.52;痰培养的Se 25.93%、Sp 100.00%、PPV 1.0、NPV 0.57、＋LR〉10和-LR0.77。统计结果显示ELISPOT检测的敏感度明显高于其它常用结核病诊断方法。ELISPOT在痰涂片和痰培养阴性的TB患者中的阳性检出率分别为84.38%和87.5%。结论 ELISPOT是一种敏感度和特异度均较高的结核病免疫学辅助诊断方法,有助于提高诊断结核感染的阳性检出率,且耗时短,可作为临床结核病诊断尤其是菌阴结核病的重要辅助手段之一,具有较高的临床推广价值。     

002 应用检测T细胞法诊断儿童结核瘸的研究

儿童结核病临床表现非特异性，标本收集困难，结核分枝杆菌（MTB）培养时间过长，结核菌素试验（TST）又受多种因素影响，导致TST诊断的敏感性下降。作者采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测对MTB抗原敏感的特异性T淋巴细胞诊断结核病，缩短了时间，提高了结核病诊断的敏感性。     

聚合酶链反应快速诊断结核性脑膜炎

聚合酶链反应快速诊断结核性脑膜炎唐小平，罗惠娟，黄已实，卢群馨近年来，国外陆续报道用聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断结核性脑膜炎（结脑），显示出独特的优点。我们应用ＰＣＲ技术检测了５０例结脑患者的脑脊液（ＣＳＦ）标本，并与其它方法的检测结果进行比较，现将结...     

Amplisensor—聚合酶反应定量检测脑脊液中结核分支杆菌DNA的研究

目的 探讨Amplisensor-聚合酶反应（Amplisensor-PCR)定量检测脑脊液中结核分支杆菌DNA（TB－DNA）对结核性脑膜炎的诊断价值。方法 采用Amplisensor-PCR对117例结核性脑膜炎患者及36例非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本进行检测,并与PCR（凝胶电泳后,经溴化乙锭染色）、涂片、培养法比较。结果 Amplisensor-PCR的敏感性显著高于涂片及培养,阳性率分别为57．13％、1．7％、6．7％（P＜0．001）。结论 Amplisensor-PCR可以通过标准曲线划定检出下限,并可换算出标本中原始的靶DNA值,同时具有较高的特异性和敏感性,对结核性脑膜炎的诊断有一定的临床意义。     

脑脊液ADA、IL-1p、PPD—IgG检测对结核性脑膜炎的诊断价值

分别采用酶法、酶联免疫吸附（ELISA）法检测结核性脑膜炎56例、病毒性脑膜炎21例、非脑炎20例患者脑脊液中腺苷脱氨酶（ADA）、白细胞介素1B（IL-1p）活动水平及结核抗体（PPD—IgG）阳性率。结果结核性脑膜炎患者脑脊液中ADA、IL-1β水平、PPD—IgG阳性率明显升高，与病毒性脑膜炎、非脑炎患者比较有统计学意义（P〈0．01）。认为ADA、IL-1β活性升高和PPD—IgG阳性可作为结核性脑膜炎的早期诊断依据。     

新的检测方法能够对结核病作出更快、更准确的诊断

椐Medscape．com10月12日报道（原载N Engl J Med2006；1539-1550，1606—1608），一种新的被称为显微镜观察药物敏感性（MODS）的分析方法能够对TB提供比目前的金标准检测更快、更准确的诊断。     

结核感染T细胞斑点试验在结核性脑膜炎早期诊断中的意义

结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)占结核病的10%～20%,是常见严重的肺外结核病,其预后与早期诊断及治疗密切相关.结核感染T细胞斑点(T-SPOT-TB)试验是利用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测感染者的特异性T细胞来诊断结核病的一种新方法,利用结核分枝杆菌感染者外周血单个核细胞(PBMC)中存在结核感染特异性T细胞,这些T细胞在受到致病性结核分枝杆菌特异抗原刺激后分泌IFN-γ而设计的试验.     

PCR与DIBT检测脑脊液结核分支杆菌的价值

应用ＰＣＲ法扩增结核杆菌ＤＮＡ重复序列１２３ｂｐ片段；用酶斑免疫结合技术（ＤｏｔＩｍｍｕｎｏｂｉｎｄｉｎｇＴｅｃｈｎｉｑｕｅ，ＤＩＢＴ）检测结核分支杆菌抗原成分。结果：结核性脑膜炎患者脑脊液的两项检测阳性率分别为８１％（４３／５３）和７３．５％（３９／５３）。疾病早期ＰＣＲ阳性检出率高于ＤＩＢＴ，中晚期二者有阳性交叉现象。     

胸液中IFN-γ对结核性胸膜炎的诊断价值

目的探讨利用酶联免疫斑点(Elispot)法检测胸水结核分枝杆菌特异性IFN-γ在诊断结核性胸膜炎的价值。方法对147例结核性胸膜炎患者(结核性胸膜炎组)、69例非结核性胸膜炎患者(对照组)胸水单个核细胞结核菌抗原特异性IFN-γ分泌水平进行检测,对比两者的检测差异。结果结核性胸膜炎组患者胸水IFN-γ水平显著高于对照组(P0.001)。结论利用酶联免疫斑点技术检测胸液标本结核分枝杆菌特异性IFN-γ可用于结核性胸膜炎的诊断及鉴别诊断。