核因子-κB受体活化因子配体和骨保护素在慢性根尖周炎病损组织中的表达

目的:检测核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor κB ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)这两个调控骨吸收的关键因子,在人类根尖肉芽肿(periapical granuloma,PG)和根尖囊肿(radicular cyst,RC)病损组织中的表达.方法:选择小鼠单克隆抗体为一抗,采用免疫组织化学Envison法检测20例根尖肉芽肿和20例根尖囊肿组织中RANKL和OPG的表达.选择6例因正畸需要拔除的健康牙齿的牙周膜组织作为对照.结果:在根尖肉芽肿和根尖囊肿组织中的RANKL蛋白表达均明显强于对照组中的RANKL表达[(43.74±8.40)vs(15.47±2.59),(40.33±7.53)vs(15.47±2.59),均P=0.000],但根尖肉芽肿和根尖囊肿组织之间的RANKL表达差异无统计学意义.在根尖肉芽肿、根尖囊肿和对照组中的OPG蛋白表达水平分别为27.81±5.17,26.35±3.86和24.33±3.50,3组间的OPG表达差异无统计学意义.根尖肉芽肿和根尖囊肿组织中的RANKL/OPG比率与对照组相比,均有显著上升[(1.59±0.26)vs(0.64±0.10),(1.54±0.24)vs(0.64±0.10),均P=0.000],但RANKL/OPG的比率在根尖肉芽肿和根尖囊肿两组间的差异无统计学意义.结论:RNAKL和OPG均能表达于慢性根尖周炎病损组织中.RANKL可能与慢性根尖周炎骨吸收活动关系密切,同时RANKL和OPG可能在根尖周病的疾病进展中发挥了重要作用.     

核因子-κB受体活化因子配体和骨保护素在慢性根尖周炎病损中的表达及其与炎症浸润的关系研究

背景：核因子-κB受体活化因子配体（Receptor activator of NF-κB ligand,RANKL）和骨保护素（Osteoprotegerin,OPG）是近十年来发现的调节破骨细胞分化成熟和骨吸收功能的关键因子。本研究旨在探讨RANKL和OPG的表达及其与慢性根尖周病损的炎性浸润之间的关系。方法：采用免疫组化方法分别检测40例慢性根尖周炎病损中的RANKL、OPG表达和T淋巴细胞、B淋巴细胞和巨噬细胞的表达。并对病损组织的炎症程度和三种炎症细胞表达水平分别分级。结果：轻、重度炎性浸润二组间的RANKL表达差异有统计学意义（P＜0.05）。T,B淋巴细胞和巨噬细胞的各自不同表达分级各组中的RANKL的表达差异有统计学意义（P＜0.05）。RANKL/OPG比率和炎症细胞浸润无关。结论：RANKL的表达水平和慢性根尖周炎的免疫炎性反应关系密切,RANKL在慢性根尖周炎疾病进展中发挥了重要的作用。     

Toll样受体和核转录因子-κB在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的:探讨子痫前期患者胎盘组织中Toll样受体4(TLR4)以及核转录因子(NF-κB)表达及意义。方法:选取50例子痫前期患者(轻度子痫前期20例,重度子痫前期30例)作为研究对象,以30例正常晚孕妇女作为正常对照,采用免疫组化及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定胎盘组织中TLR4及NF-κB的定位及表达。结果:轻、重度子痫前期患者胎盘组织中TLR4及NF-κB蛋白和mRNA的表达水平均明显高于正常晚孕妇女(P0.05)。且随着病情加重,两者表达均增强;子痫前期胎盘组织中TLR4和NF-κB的表达呈正相关(P0.05)。结论:TLR4介导的炎症因子释放可能是导致子痫前期发生的重要原因之一。     

壮骨止痛方对骨质疏松大鼠核因子κB受体活化因子配体和骨保护素的影响

目的 探讨壮骨止痛方对骨质疏松大鼠核因子κB受体活化因子（receptor activator of NF-κB,RANK）、核因子κB受体活化因子配体（receptoractivator of NF-κB ligand,RANKL）和骨保护素（osteoprotegrin,OPG）表达的影响。方法 将实验动物分为假手术组、模型组、壮骨止痛方高剂量治疗组、壮骨止痛方低剂量治疗组、雌二醇组5组,用酶联免疫免法测定大鼠血清中OPG、RANKL的水平。结果 模型组大鼠血清OPG降低、RANKL水平升高,经壮骨止痛方药物干预后,大鼠血清OPG水平明显下降、RANKL水平明显下降。结论 壮骨止痛方药物可以降低大鼠血清RANKL/OPG的比值,激活RANKL/RANK/OPG信号系统,达到预防治疗骨质疏松的作用。     

核因子-κB在中耳胆脂瘤中的表达

目的 观察核因子-κB(NF-κB)在中耳胆脂瘤中的表达,探讨其在胆脂瘤上皮细胞高度增殖过程中的作用.方法 应用免疫组化法检测26例胆脂瘤上皮、20例正常外耳道皮肤中NF-κB及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况.结果 胆脂瘤上皮细胞均出现明显的NF-κB核转位,NF-κB及PCNA的表达显著高于正常外耳道皮肤组织,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 中耳胆脂瘤上皮具有高度增殖能力,NF-κB在胆脂瘤组织中的激活可能是中耳胆脂瘤上皮细胞过度增殖的一个原因.     

心房颤动患者血浆骨保护素、核因子κB受体活化因子配体水平及临床意义

目的探讨心房颤动患者血浆骨保护素(osteoprotegerin,OPG)及核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator ofnuclear factor kappa B ligand,RANKL)水平及临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测40例阵发性房颤、39例持续性房颤、43例永久性房颤患者及40例窦性心律对照者血浆中OPG、RANKL水平。结果阵发性房颤组、持续性房颤组、永久性房颤组患者血浆中OPG、RANKL水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),持续性房颤组、永久性房颤组患者与阵发性房颤组相比血浆中OPG、RANKL水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),而持续性房颤组、永久性房颤组患者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OPG、RANKL与房颤的发生和持续可能相关。     

核转录因子-κB的研究进展

核转录因子-κB存在于体内多种细胞内,活化后与特定的靶基因启动子结合,从而启动基因转录,参与多种疾病的发病过程。本文综述了NF-κB在各种疾病中的作用及研究进展。     

核因子-κB与动脉粥样硬化的治疗进展

动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是一种发生于大中动脉的慢性渐进性炎性疾病，特征是泡沫细胞聚集于血管壁并产生大量化学因子、细胞因子及生长因子。随着人们生活方式的改变，动脉粥样硬化越来越受到关注，其发病机制是目前研究的热点。核转录因子-κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）是一类能与多种基因启动子或增强子部位位点发生特异性结合并促进其转录的蛋白质，可以调控AS形成中多种炎性因子的表达，从而参与AS的发生发展，因此以NF-κB为靶点的药物具有广阔的开发前景。本文就NF-κB与动脉粥样硬化的治疗进展作一综述。     

核因子-κB信号通路的研究进展

核因子-κB(NF-κB)信号转导通路是近年来研究的热点,它广泛参与机体内许多生理和病理过程,调节百余种靶基因的表达。本文详细综述了NF-κB信号转导系统的组成、经典的激活途径以及与人类疾病的相关性。     

前列腺素E2调节成骨细胞核因子-κB受体激活物配基和护骨素表达的信号通路研究

目的 探讨前列腺素E2(PGE2)对大鼠成骨细胞核因子-κB受体激活物配基(RANKL)和护骨素(OPG)mRNA表达的调节及其信号转导机制.方法 培养大鼠UMR106成骨细胞,采用不同浓度的PGE:和不同的信号通路调节剂干预细胞后,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR检测RANKL和OPG mRNA的表达水平.结果 PGE2、福司可林和db-cAMP均促进RANKL mRNA表达和抑制OPG mRNA的表达,RANKL mRNA表达分别为对照组的2.8倍(P=0.002)、2.2倍(P=0.006)和2.1倍(P=0.005).OPG mRNA表达分别为对照组的12%(P<0.01)、85%(P=0.005)和70%(P=0.013).A23187则下调RANKL和OPG表达58%(P=0.002)和53%(P=0.017).KT-5720下调PGE2诱导的RANKL mRNA表达约53%(P<0.01),而白屈菜红碱、维拉帕米、钙调蛋白抑制剂(W7、KN-62和PD98059)则对PGE:诱导的RANKL mRNA表达无明显影响(P>0.05).KT-5720、维拉帕米和W7分别阻断PGE2对OPG mRNA表达的抑制作用47%(P=0.01)、38%(P=0.029)和43%(P<0.01),而KN-62、PD98059和白屈菜红碱则均不影响PGE2对OPG表达的调节(P>0.05).结论 PKA信号通路介导了PGE2诱导的RANKL表达,而PGE2对OPG表达的下调作用则由PKA和Ca2+钙调蛋白信号通路介导.     

Receptor activator of nuclear factor kappa B ligand and osteoprotegerin expression in chronic apical periodontitis: possible association with inflammatory cells

Background  Receptor activator of nuclear factor kappa B (NF-κB) ligand (RANKL) and osteoprotegerin (OPG) have been recently shown to play important roles in bone resorption. The aim of this study was to investigate the possible association between the expression of bone resorption regulators (RANKL and OPG) and inflammatory cell infiltration in chronic apical periodontitis.

Methods  The samples of chronic periapical lesions (n=40) and healthy periapical tissues (n=10) were examined for immunohistochemical analysis of RANKL and OPG. Lesion samples were further analyzed for the inflammatory infiltration condition. The inflammatory cell infiltration was scored in relation to immunohistochemical reactivity for CD3, CD20 and CD68.

Results  The number of RANKL-positive cells and the ratio of RANKL/OPG in chronic apical periodontitis were significantly higher than those in healthy periapical tissues (P <0.001). The number of RANKL-positive cells was higher in lesions with severe inflammatory infiltration than in those with light inflammatory infiltration (P <0.05). Significantly increased RANKL expression was found with T lymphocytes (CD3⁺), macrophages (CD68⁺) and B lymphocytes (CD20⁺) infiltration (P <0.05). No association was found between the ratio of RANKL/OPG and inflammatory cell infiltration.

Conclusions  RANKL expression was increased with T, B lymphocytes and macrophages infiltration, respectively in chronic periapical lesions. RANKL appears to be closely related to periapical inflammatory infiltrates. The relative ratio of RANKL/OPG may be a key determinant of RANKL-mediated bone resorption.

     

龈沟液中核因子活化因子受体配体和骨保护素水平的检测

目的检测龈沟液(gingivalcervicalfluid,GCF)中核因子活化因子受体配体(receptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)水平,探讨GCF中RANKL、OPG及RANKL/OPG与慢性牙周炎的关系。方法采用滤纸条法收集牙周健康者(health,H)和慢性牙周炎患者(chronicperiodontitis,CP)GCF样本,用ELISA法检测GCF中RANKL和OPG浓度,同时对检测牙的根尖片进行灰度分析。结果CP组GCF中RANKL浓度(118.93±41.91)pg/μL明显高于H组(39.15±14.83)pg/μL(P<0.01);CP组GCF中OPG浓度(70.73±23.47)pg/μL明显低于H组(261.28±99.13)pg/μL(P<0.01);CP组GCF中RANKL/OPG的比值(1.95±1.07)高于H组(0.19±0.13)(P<0.01)。CP组GCF中RANKL和OPG浓度及RANKL/OPG比值与菌斑指数(plaqueindex,PLI)和龈沟出血指数(sulcusbleedingin-dex,SBI)无明显相关;OPG浓度与牙周探诊深度(probingdepth,PD)和牙周附着丧失(attachmentloss,AL)呈负相关关系;RANKL浓度和RANKL/OPG比值与患牙根尖片灰度呈负相关关系。结论GCF中RAN-KL和OPG水平及RANKL/OPG的比值与牙周组织的炎症状态相关性不明显,但与慢性牙周炎患者牙周组织的骨破坏有明显相关,提示GCF中RANKL、OPG及RANKL/OPG的比值可作为慢性牙周炎牙槽骨组织破坏的一项较敏感和客观的指标。     

前列腺素过氧化物酶2 mRNA在慢性根尖周炎病损组织中的表达

目的:检测前列腺素过氧化物合成酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA在慢性根尖周炎病损组织中的表达及其与病理学表现之间的关系,并对COX-2的表达进行细胞定位, 探讨COX-2在慢性根尖周炎发病中的作用.方法: 采用RT-PCR法,从mRNA水平检测COX-2在10例慢性根尖肉芽肿及3例根尖囊肿组织中的表达,3例因阻生拔除的健康第3磨牙牙周膜组织作为对照,分析COX-2的表达与慢性根尖周病损的病理学表现(包括病损的病理分型、炎症细胞浸润程度)之间的关系, 并分析COX-2与病损范围、临床症状之间的关系.采用免疫组化的方法,对COX-2在病损组织中的表达进行细胞定位.结果: 在根尖肉芽肿病损和根尖囊肿组织中,COX-2 mRNA与β-actin水平的比值较正常牙周膜组织明显增高,分别为 0.36±0.29和0.51±0.07,但根尖肉芽肿和根尖囊肿组织之间差异无统计学意义.COX-2 mRNA在中度炎症细胞浸润组较轻、重度炎症细胞浸润组明显增高(0.76±0.11 vs 0.11±0.01,0.76±0.11 vs 0.23±0.06,P＜0.05).有临床症状的根尖周病损组的COX-2 mRNA有增高的趋势,COX-2 mRNA与病损大小无关.免疫组化结果显示,COX-2主要在浸润的炎症细胞及上皮细胞中表达,血管内皮细胞未见表达.结论: COX-2在慢性根尖周炎的发病中具有重要的作用,但也提示存在其它细胞因子的协同作用.     

超声对大鼠牙根吸收过程中骨保护素及核激活因子受体配体表达的影响

摘要：目的研究低强度脉冲超声(LIPUS)对大鼠正畸性牙根吸收过程中骨保护素(OPG)及核激活因子受体配体(RANKL)
表达的影响。方法32只Wistar雄性大鼠(6~8周),随机分成4组：阴性空白对照1组、实验组2组(100 MW/cm2超声组和
150 MW/cm2超声组),接受LIPUS作用;对照组1组,不接受LIPUS作用,每组8只。100 g初始力值加载于大鼠右侧上颌中
切牙与第一磨牙之间10 d。每组取上颌第一磨牙及其牙周组织,制作以上颌第一磨牙为中心的、近远中方向的组织切片,
行OPG、RANKL免疫组化染色,光镜观察并作免疫组化光密度分析,对实验结果进行单因素方差分析。结果LIPUS超
声组OPG 表达上调(P<0.05),100 MW/cm2 与150 MW/cm2 超声组间OPG 表达有统计意义(P<0.05);LIPUS 超声组
RANKL表达下调(P<0.05),两超声组间RANKL表达有统计学意义(P<0.05)。结论LIPUS通过调节OPG/RANKL比值,
进一步调节破骨细胞分化,进而对大鼠正畸性牙根吸收有治疗作用。     

根尖切除术对种植体伴慢性根尖周炎骨修复的影响

目的 探讨根尖切除术对于种植体伴邻牙慢性根尖周炎病例的骨组织修复及愈合的影响研究。方法 选择2017年12月至2018年6月符合种植适应证,且种植区邻牙伴有慢性根尖周病变的患者22例。随机分为实验组和对照组,每组11例。实验组在行种植手术的同时,对邻牙的根尖周病变行根尖切除手术及根管治疗术。对照组则进行种植手术,对邻牙的根尖周病变行常规根管治疗术。术后6个月及1年复诊,追踪观察种植体与邻牙根尖周病变的状况,进行统计学分析。结果 临床检查显示,根尖病变患牙对照组1例出现松动度,1例出现牙周袋,与实验组相比,P<0.05;种植体在实验组及对照组均无临床症状,P>0.05。影像学检查显示,根尖病变患牙实验组中两组骨愈合率无统计学差异;种植体对照组中,2例种植体无骨结合,两组间有统计学差异,P<0.05。术后1年,临床检查结果显示,根尖病变患牙对照组各1例患者出现黏膜红肿及窦道、脓肿,与实验组相比,P<0.05;种植体对照组中,分别各1例出现叩、触诊异常,松动,牙周袋,两组间有统计学差异,P<0.05。影像学检查显示,根尖病变患牙实验组中两组骨愈合率无统计学差异;种植体实验组中,11例种植体骨结合正常,对照组中,1例种植体无骨结合,与对照组比较差异有统计学意义,P<0.05。结论 在种植体邻牙伴有慢性根尖周炎时,在实施种植手术的同时,对邻牙进行根尖切除术,有利于种植体的骨修复和提高临床种植成功率。     

脂联素对人成骨细胞护骨素和核因子κB受体活化素配体表达的影响

目的 探讨脂联素影响骨代谢的可能作用机制.方法 体外培养人成骨细胞,(1)分别加入0、3、10和30 mg/L的脂联素作用48 h;(2)加入0或30 mg/L脂联素分别作用12、24、48 h;采用荧光定量PCR和ELISA方法检测护骨素和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达.另将人成骨细胞与CD14+外周血单个核细胞(PBMC)共培养,加入30 mg/L脂联素作用14 d,行破骨细胞标志酶抗酒石酸磷酸酶染色.结果 0、3、10和30 mg/L的脂联素作用48 h,成骨细胞护骨素mRNA和蛋白表达分别为100%±9%、68%±7%、47%±8%、30%±5%与(9.2±0.3)、(6.6±0.4)、(4.1±0.4)、(2.6±0.4)ng/ml,RANKL mRNA和蛋白表达分别为100%±5%、165%±8%、213%±6%、316%±10%与(1.3±0.2)、(2.1±0.1)、(2.3±0.2)、(2.8±0.1)ng/ml.脂联素对护骨素表达的抑制和对RANKL表达的促进作用均呈剂量和时间依赖性(P＜0.05).脂联素干预成骨细胞与CD14+PBMC共培养体系可诱导破骨细胞生成.结论 脂联素可通过抑制护骨素表达、诱导成骨细胞RANKL表达,诱导破骨细胞生成,这可能是脂联素影响骨代谢的作用机制之一.