表皮生长因子受体基因突变与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性研究

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理特征的相关性.方法 选取2016年1月至2019年12月我院收治的171例NSCLC患者,分析NSCLC患者EGFR基因突变情况及EGFR基因突变与临床病理特征的关系.结果 171例NSCLC患者EGFR基因突变率为40.94％,其中敏感...     

扩增阻滞突变系统检测晚期非小细胞肺癌患者外周血游离DNA中EGFR基因突变

目的探究外周血游离DNA(cf DNA)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的可行性。方法收集2013年7月-2014年1月湖北省肿瘤医院收治50例确诊为晚期NSCLC患者的肿瘤组织及配对的外周血样本,分别提取肿瘤组织DNA及cf DNA,采用基于实时荧光定量PCR的扩增阻滞突变系统(ARMS)检测两类样本中EGFR基因突变。结果以肿瘤组织的结果为准,cf DNA中检出突变的特异性为97.2%(35/36),敏感度为78.6%(11/14),一致性为92.0%(46/50),且具有和肿瘤组织相同的EGFR基因突变类型。结论 cf DNA和肿瘤组织的EGFR基因突变类型相同,一致性、特异性和敏感度较高,对于晚期难以获得组织的NSCLC患者,外周血可代替肿瘤组织应用于临床EGFR基因突变检测。     

PCR-SSCP筛检非小细胞肺癌EGFR基因突变的临床应用

目的对PCR-SSCP筛检非小细胞肺癌EGFR基因突变的临床价值进行评价分析。方法随机抽取在2010年1月—2012年7月间该院收治的非小细胞肺癌临床患者病例100作为研究对象,分别采取DNA测序法和PCR-SSCP法对研究对象展开EGFR基因突变检测,并将DNA测序法作为金标准,对PCR-SSCP的准确性进行评价。结果经统计得知,有DNA测序法检出32例患者中发生EGFR基因突变者31例,检出率为31.0%,经PCR-SSCP法检测出突变者34例,检出率为34.0%,两组差异不存在统计学意义(P>0.05)。结论采取PCR-SSCP法对非小细胞肺癌EGFR基因突变进行筛检的准确性较高,值得对其给予关注。     

焦磷酸测序分析表皮生长因子受体21号外显子基因突变方法的建立

目的建立表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)21号外显子基因突变的焦磷酸测序方法。方法用纯野生和纯突变的EGFR21质粒DNA按比例配制7份不同突变比例的DNA样本和1份正常人血液样本,对焦磷酸测序技术检测EGFR21基因突变方法进行验证,制备175例非小细胞肺癌标本g DNA,应用Qigene Pyro Mark Q24焦磷酸测序仪进行EGFR21基因的焦磷酸测序。结果建立了可同时检测EGFR基因21号外显子L858R和L861Q突变的焦磷酸测序方法,175例非小细胞肺癌标本中共检测出EGFR21突变型样本29例,总突变率为16.57%(29/175),其中L858R突变占14.29%(25/175),L861Q突变占2.28%(4/175)。结论 EGFR21基因突变的焦磷酸测序新方法具有快速、简便、灵敏度和准确度高的优点,特别适合于科研和临床批量检测的需要。     

豫西南地区结直肠癌患者EGFR、KRAS、BRAF基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨豫西南地区结直肠癌患者表皮生长因子受体(EGFR)、Kirsten鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)、B-Raf原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BRAF)基因突变与临床病理特征的关系,为结直肠癌的精准医学及靶向治疗提供依据。方法选取2014年6月—2016年12月收治的结直肠癌手术切除患者268例,采用荧光定量PCR法检测EGFR基因18、19、20、21号外显子及KRAS基因12、13位密码子和BRAF基因15号外显子突变情况,比较不同临床病理特征的EGFR、KRAS、BRAF基因突变情况。结果豫西南地区结直肠癌患者EGFR、KRAS、BRAF基因突变频率分别为30%、30%、18.6%,EGFR基因突变类型为4种,以19-Del和L858R最常见,KRAS基因突变类型主要为Gly12Asp,BRAF基因突变类型主要为V600E。EGFR、KRAS基因在男性、年龄≥60岁患者中突变率均高于女性、年龄60岁患者(均P0.05),不同肿瘤部位、浸润深度及淋巴结转移的EGFR、KRAS、BRAF基因突变率比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。结论豫西南地区结直肠癌患者中,EGFR、KRAS基因突变与性别、年龄有关,BRAF基因突变与患者性别、年龄无关,EGFR、KRAS、BRAF基因突变与肿瘤部位、浸润深度及淋巴结转移均无关。     

焦磷酸测序法和直接测序法检测非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变的比较研究

目的比较PCR-直接测序法和PCR-焦磷酸测序法检测表皮生成因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)基因突变的一致性和差异性,探寻适应于临床检测体细胞EGFR基因突变的方法,为非小细胞癌患者的个体化用药提供理论依据。方法采用双盲的方法应用PCR-直接测序法和PCR-焦磷酸测序法检测13例(17个突变点)已知突变比例DNA样本中EGFR外显子18、19、20和21的突变情况,分析2种检测方法对各种突变的检出率和检准率;另选择实验室收集的100例非小细胞肺癌组织标本,分别采用直接测序法和焦磷酸测序法检测EGFR外显子18、19、20和21的突变情况,结果比较采用卡方检验。结果 2种检测方法对于检测EGFR18、19、20和21的结果差异有统计学差异,但焦磷酸测序法的准确度和灵敏度更高,操作更加简便。结论与直接测序法相比,PCR-焦磷酸测序法更加适用于临床检测体细胞基因突变,能够更好地识别突变比例较低的组织样本,对临床指导非小细胞肺癌TKI类药物个体化用药与预测其药物疗效都具有重要意义,值得临床进一步推广应用。     

非小细胞肺癌表皮生长因子及间变性淋巴瘤激酶基因检测及临床病理特征

目的研究汉族人群中表皮生长因子(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突变和间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase, ALK)基因融合在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者中的阳性率及其与临床病理特征的关系。方法收集本院非小细胞肺癌临床手术患者522例,通过ARMS-PCR方法检测NSCLC标本中EGFR基因突变和ALK基因的常见基因融合变异,分析其与患者的病理学分型、性别和年龄等临床指标的相关性。结果对共522例NSCLC手术标本检测了EGFR基因突变,并同时对其中149例标本检测了ALK基因的常见基因融合变异。EGFR基因与ALK融合基因突变阳性率分别为42.91%(224/522)与7.38%(11/149)。EGFR基因突变多发生于女性和腺癌中。另外在149例同时检测了EGFR基因突变和ALK基因融合的标本中,有1例(0.67%,1/149)检测到了EGFR基因突变合并ALK基因融合的罕见驱动基因双突变。结论在汉族人群非小细胞肺癌患者中,EGFR基因突变与患者的性别及病理学分型等临床指标存在明显相关性。ALK基因融合及EGFR、ALK双突变共存型基因突变率虽然较低,但其意义不容忽视,临床医生应给予充分重视。     

肺腺癌患者EGFR基因突变情况及影响因素分析

目的 探讨肺腺癌患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变情况及与临床、影像学及病理学特征的相关性。方法 选择2017年8月至2021年7月在海南省某肿瘤医院诊治的370例肺腺癌患者作为研究对象,根据EGFR基因检测结果分为野生型组和突变型组,将2组患者的性别、年龄、分期、腺癌类型、IASLC分级、组织学亚型、CT影像学特征等对EGFR突变的影响进行单、多因素分析。结果 经EGFR基因检测,共有EGFR基因突变患者172例,EGFR野生型患者198例,基因突变率为46.49%;其中EGFR基因19号外显子突变75例,占突变组43.60%;EGFR基因21号外显子突变97例,占突变组59.40%。经多因素Logistic回归分析,女性、有吸烟史、有毛刺征、有空气支气管征、乳头型浸润型黏液性腺癌是EGFR突变的危险因素（均P<0.05）,微浸润腺癌是EGFR突变的保护因素（P<0.05）。EGFR基因19号外显子、21号外显子突变患者的临床资料、影像学及病理学特征均无明显差异（均P>0.05）。结论 肺腺癌患者EGFR基因突变具有相关的影像学、病理学特征,对制定患者的个性化...     

DA8600测序平台对EGFR基因检测最低DNA用量的探讨

目的基于DA8600测序平台,探讨Ampli Seq建库方法检测EGFR基因突变所需最低样本DNA用量,以评估下一代测序(next generation sequencing,NGS)检测技术的性能。方法本研究选择10例EGFR突变的石蜡包埋组织样本,分别取1 ng、5 ng、10 ng、20 ng样本DNA进行文库构建,使用DA8600半导体测序仪进行检测,并比较检测结果。结果 10 ng和20 ng DNA用量均可全部准确检出EGFR基因突变;5 ng DNA用量准确检出7例EGFR基因突变,1例文库质量不合格无法进行测序,1例无法检出EGFR突变,1例测序数据量不足检测失败;1 ng DNA用量构建文库全部质量不合格,无法进行测序。结论通过对10例样本不同DNA用量构建文库的检测结果分析,说明10 ng DNA即可采用Ampli Seq建库方法在DA8600半导体测序仪进行EGFR基因突变检测。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变与扩增的比较及其与血清CEA水平的关系

目的比较分析非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与扩增的关系,并探讨其与血清癌胚抗原(CEA)水平有无相关性。方法对270例确诊非小细胞肺癌的肺组织标本(包括手术切除及经纤支镜活检取得)用实时荧光定量PCR法技术检测EGFR基因突变状态,用荧光原位杂交技术检测EGFR基因的扩增情况。治疗前抽取患者静脉血,用化学发光法检测血清CEA水平。结果 270例NSCLC中EGFR基因突变率为31.11%,EGFR基因扩增率为20%,基因突变并扩增的占10.74%。基因突变组、基因扩增组、基因突变并扩增组和基因无突变无扩增组血清CEA平均水平分另为[3.03(1.68-6.22)]ng/mL、[3.19(1.8-17.17)]ng/mL、[3.39(1.85-20.87)]ng/mL和[2.54(1.5-4.62)]ng/mL。基因突变组与基因扩增组、基因突变组与基因无突变无扩增组血清CEA比较无显著性差异(P>0.05)。基因扩增组与基因无突变无扩增组、基因突变并扩增组与基因无突变无扩增组血清CEA比较有显著性差异(P<0.05)。EGFR基因突变、基因扩增及基因突变并扩增与血清CEA水平有明显相关性。结论在NSCLC中EGFR基因突变率大于扩增率,其机制有待进一步阐明。EGFR基因与血清CEA水平有明显相关性。血清CEA水平有可能成为指导非小细胞肺癌EGFR靶向治疗的指标。     

表皮生长因子受体及其突变状况在肺癌患者外周血表达的初步研究

目的 对表皮生长因子受体（EGFR）及其突变状况在肺癌患者外周血中的表达进行分析研究.方法 随机入组在2009年1月至2012年1月间我院收治的肺癌患者62例,以及同期体检健康者60例,对其EGFR及其突变状况在外周血表达水平进行比较分析.结果 肺癌组患者肿瘤EGFR及其突变的表达水平明显高于对照组,且两组差异具有统计学意义（P＜0.05）.结论 EGFR及其突变水平的过度表达,可能是肺癌进程的重要标志.     

人类EGFR基因突变核酸标准物质的研制

目的:研制人类表皮生长因子受体(EGFR)基因突变核酸标准物质,为国内体外诊断产品生产厂家、行业检验机构和临床用户提供检验标准和参考依据。方法:利用数字聚合酶链反应(PCR)方法,对多种含有EGFR基因突变核酸混合后进行定量,制备EGFR基因4种常见的突变类型(包括p.G719S、p.E746_A750delELREA、p.T790M和p.L858R)预期值为20%、10%、5.0%、2.5%、1.0%和0.5%的6种不同突变频率的标准物质。结果:研制出人类EGFR基因突变核酸标准物质一套,共含有RM-1、RM-2、RM-3、RM-4、RM-5和RM-6共6支,每支含有p.G719S、p.E746_A750delELREA(p.Ex19del)、p.T790M和p.L858R的4个特性值,同一个标准物的特性值之间具有相似的突变频率水平;两种数字PCR平台的定值表现出良好的一致性,且具有较好的均匀性和稳定性。结论:研制的人类EGFR基因突变核酸标准物质已基本具备了溯源的属性特征,经不同实验室的努力合作和市场产品的测试反馈,将对我国的分子诊断市场提供重要的指导和借鉴意义。     

185例华南地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的探讨华南地区非小细胞肺癌（NSCLC）表皮生长因子受体（EGFR）基因突变特点及与临床特征的关系。方法收集本院185例NSCLC肿瘤组织，分别提取DNA，采用荧光PCR法扩增EGFR基因第18、19、20、21号外显子，对扩增片段进行DNA正反向测序并分析。结果185例NSCLC中，62例（33．5％）EGFR基因突变，其中18、19、20、21外显子突变分别为2例、41例、5例、14例；共见突变类型16种，热点突变类型为19外显子DelL747→P752（P753S）（构成比8．1％）、DelE746→A750（构成比45．1％）和21外显子L858R（构成比22．6％）；其中4例19外显子突变正、反向测序结果不一致。见20外显子2361G→A沉默突变（28．1％）；女性突变率显著高于男性（46．2％vs24．3％，X2=9．670，P=0．002）。不吸烟者突变率高于吸烟者（41．4％vs17．1％，X2=7．380，P=0．007）。腺癌患者突变率高于鳞癌患者（38．3％vs6．3％，X2=6．426，P=0．011）。临床Ⅲ期患者突变率显著低于临床Ⅱ期、Ⅳ期患者（10．8％vs53．8％，X2=8．026，P=0．003；10．8％vs41．3％，X2=9．518，P=0．002）。同时，未发现EGFR基因突变率与年龄相关。结论华南地区NSCLC患者EGFR基因突变以19、21外显子突变为主。突变率以女性、不吸烟、腺癌者较高。     

利用激光捕获显微分离技术和突变分析法检测肺癌病人痰细胞的K—ras和p53基因突变

[目的]探索激光捕获显微分离技术在检测肺癌病人K-ras和p53基因突变的应用。[方法]以3种不同的基因突变分析法对20例患者的痰细胞进行基因突变分析：①以PCR＋DGGE方法分析K—ras基因突变，以PCR＋SSCP方法分析p53基因突变；②以PCR十MAE＋DGGE方法分析K—ras基因突变；以PCR＋MAE＋SSCP方法分析p53基因突变；③以激光捕获显微分离技术和突变分析法检测肺癌病人痰细胞的K—ras和p53基因突变。[结果]在20例患者中，以现有的方法仅发现有15％（3／20）的基因突变，而激光捕获显微分离技术则发现有60％（12／20）的基因突变。[结论]激光捕获显微分离技术和突变分析法能高效灵敏检测肺癌病人痰细胞的K—ras和p53基因突变。     

基底细胞样型浸润性乳腺癌组织中VDR和EGFR的表达及意义

目的探讨基底细胞样型浸润性乳腺癌(BLBC)组织中维生素D受体(VDR)、表皮因子生长受体(EGFR)的表达情况,并分析其病理作用。方法采用免疫组织化学SP法对50例BLBC和54例非BLBC乳腺癌(对照组)组织进行VDR、EGFR检测,并行相关性分析。结果 BLBC组织标本中的VDR、EGFR阳性表达率分别是24.00%(12/50)、82.00%(41/50),与对照组相比,差异有统计学意义(P0.05)。VDR与EGFR表达水平的相关分析发现,VDR蛋白与EGFR蛋白在BLBC组织中表达呈负相关(P0.01)。结论 VDR和EGFR参与BLBC的发生与发展;VDR低表达及EGFR表达率较高,提示BLBC可能对1,25(OH)2D3及类似物不敏感,而EGFR可以作为BLBC治疗的新靶点。     

人乳头瘤病毒基因分型检测方法及质量评价

人乳头瘤病毒基因分型检测对子宫颈病变的早期发现、宫颈细胞学异常的评估和管理,病程的进展,高度宫颈上皮内瘤变治疗后的随访,以及人群的流行病学状态和病毒疫苗的研制有重要意义。目前国内外对人乳头瘤病毒进行基因分型的方法主要集中在以靶序列扩增为基础的检测技术和以信号放大为基础的检测技术两方面。但在HPV的检测应用中存在一定的困惑,如何评价这些方法,保障临床检测质量,更好地为临床服务,是检测机构思考的问题。本文就人乳头瘤病毒基因分型检测方法及质量评价要点进行简要阐述。     

EGFR、MMP-9和AQP1在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和水通道蛋白1（AQP1）在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化sP法检测EGFR、MMP-9和AQP1在上皮性卵巢癌、卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织的表达情况。结果EGFR、MMP-9和AQP1在正常卵巢组织中的阳性表达率分别为20．0％、10．0％、10．0％;在卵巢良性肿瘤组织中阳性表达率分别为33．3％、25．0％、20．0％;在上皮性卵巢癌组织中阳性表达率分别为86．0％、84．0％、84．0％。EGFR、MMP-9和AQP1在上皮性卵巢癌组织与正常卵巢和卵巢良性肿瘤组织阳性表达率的差异有统计学意义（X^2EGFR=15．0～16．5,X^2MMP,9=6．6～7．8,X^2AQP1=9．3—9．6,均P〈0．05）。EGFR、AQP1和MMP-9表达在肿瘤的组织学分级和临床分期中差畀具有统计学差畀（X^2EGFR组织学分级=13．5,X^2MMP母组织学分级=11．5,X^2AQPI组织学分级=9．6,X^2EGFR临床分期=13．5,X^2MMP-9临床分期=11．5,X^2AQP组织分级=9．7,均P〈0．05）。结论EGFR、MMP-9和AQP1在上皮性卵巢癌的发生、发展过程中起着重要的作用。     

EGFR酪氨酸激酶域基因突变和非小细胞肺癌的靶向治疗

EGFR靶向抑制剂，是目前NSCLC靶向治疗的研究热点之一。临床研究表明，患者对EGFR靶向抑制剂的疗效存在明显的差异。本文就EGFR酪氨酸激酶域基因突变与NSCLC靶向治疗的相关性进行了回顾，探讨预示其疗效的标志物，有助于EGFR抑制剂在NSCLC治疗中的最优化使用。