哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群的变化及其意义

目的探讨流式细胞仪检测哮喘患儿淋巴细胞亚群的变化及意义。方法采用三色免疫荧光标记法,应用流式细胞仪检测54例哮喘患儿及15名健康儿童外周血CD4^＋、CD8^＋、γ/δTCR^＋T细胞和CD19＋B淋巴细胞的比例,计算CD4^＋/CD8^＋比值,并进一步检测患者辅助性淋巴细胞（Th）1和Th2亚型的变化。结果与对照组相比,哮喘患儿CD4^＋T细胞比例、CD4^＋/CD8^＋比值均明显升高（P均〈0.05）;γ/δTCR^＋T细胞则明显降低（P〈0.01）;Th1细胞比例减少（P〈0.05）,Th2细胞增多（P〈0.01）。结论哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群比例发生明显改变,CD4^＋T和Th2细胞比例增高以及γ/δTCR^＋T细胞降低是其特征之一;流式细胞仪检测可为哮喘病情监测和治疗方案拟定提供依据。     

急性髓性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子的变化及其临床意义

目的探讨急性髓性白血病(AML)患者外周血T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子的变化及临床意义。方法采用流式细胞仪及酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测50例健康者及30例AML患者治疗前后T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子水平。结果初诊AML患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著低于健康组,CD8+显著高于健康组,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,AML组患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著升高,CD8+显著降低,与初诊时比较差异具有统计学意义(P0.05),但与健康组比较差异仍具有统计学意义(P0.05)。初诊AML患者外周血白介素2(IL-2)、干扰素(IFN-γ)均显著低于健康组,IL-4、IL-10显著高于健康组,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,AML组患者外周血IL-2、IFN-γ均显著升高,IL-4、IL-10显著降低,与初诊时比较差异具有统计学意义(P0.05),但与健康组比较差异仍具有统计学意义(P0.05)。结论 T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子对AML患者病情评估、疗效判定及预后评估具有一定临床价值。以调节T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子为免疫治疗方案,可能为AML的临床治疗提供新思路。     

骨髓增生异常综合征患者Th1/Th2细胞平衡改变的临床意义

目的：探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血CD4^＋、CD8^＋细胞亚群平衡的改变，以及与活化T细胞之间关系的临床意义。方法：选择14例难治性贫血患者（RA）和1例难治性贫血伴原始细胞增多患者（RAEB）的外周血，在PMA、Ionomycin、Monensin存在的条件下体外培养，进行细胞膜表面抗原和细胞内因子染色，并用流式细胞仪计数外周血表达CD3^＋ CD8^-IFN-γ^＋细胞（Th1）、CD3^＋CD8^-IL-4^＋细胞（Th2）、CD3^＋CD8^＋IF-γ^＋细胞（Tcl）、CD3^＋CD8^＋IL-4^＋细胞（Tc2）的百分率。结果与活化T细胞之间关系做相关性分析。结果：MDS组患者Th1细胞高于正常对照组（P〈0．05），体内的Th细胞向Th1细胞漂移，产生过多的造血抑制因子如IFN-γ，TNF-β等。Th2，Tc1，Tc2细胞与正常对照组相比无显著差异（P〉0．05）；CD4^＋CD45RO^＋细胞的百分率和Th1细胞的百分率呈正相关，相关系数为r=0．573（P〈0．05），CD4^＋CIN5RA^＋细胞的百分率和Th1细胞的百分率呈负相关，相关系数为r=-0．509（P=0．05），而和Th2，Tc1，Tc2的百分率无明显的相关性（P〉0．05）。结论：MDS患者存在有Th1／Th2细胞因子网络的失衡以及过多的造血抑制因子，且这些因子主要来源于T淋巴细胞。     

类风湿关节炎患者外周血T细胞亚群极化状态的分析

目的 探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者外周血T细胞亚群极化状态，分析RA的免疫学发病机制，为RA免疫治疗的可能性提供理论依据。方法 收集RA患者及健康者外周抗凝静脉血，分离纯化淋巴细胞。FITC标记的抗CD3单抗，Cy5标记的抗CD4、CD8单抗，PE标记的抗CD30单抗，以CD3／CD4，CD3／CD8设门作三色流式细胞术（Tris-color flowcytometry），分析RA患者T细胞亚群极化状态。结果 与正常对照相比，RA患者外周血CD4^＋细胞百分率显著升高（P〈0.01），CD8^＋细胞百分率无明显变化（P〉0．05），CD4^＋／CD8^＋比例明显升高（P〈0．05）；CD3^＋CD4^＋CD30^-细胞百分率．CD4^＋CD30／CD41CD30^＋和CD8^CD30^-/CD8^＋CD30^＋比例均明显升高（P〈0．01），而CD3^＋CD4^＋CD30^＋、CD3^＋CD8^＋CD30^＋及CD3^＋CD8^＋CD30^-细胞百分率无明为变化（P〈0.05）。结论 RA患者外周血存在细胞免疫功能失调，T细胞亚群极化状态发生改变，呈明显的Th1/Tcl型细胞优势；Th1／Tol型细胞介导的细胞免疫可能与RA的免疫学发病机制有关。     

骨髓增生异常综合征患者T细胞亚型和CD3zeta表达的分析

免疫介导的骨髓抑制和(或)造血异常被认为是导致MDS患者血细胞减少的重要机制之一。本研究旨在通过分析11例骨髓增生异常综合征患者外周血T淋巴细胞亚群及CD3zeta的表达，以进一步评价MDS患者的免疫状态，探讨MDS患者血细胞减少可能的原因。对11例诊断明确的MDS患者，用流式细胞术计数外周血表达IFNγ^ CD4^ 细胞(Th1)、IL4^ CD4^ 细胞(Th2)、IFNγ^ CD8^ 细胞(Tc1)及IL4^ CD8^ 细胞(Tc2)，同时分析CD3zeta在T细胞亚群中的表达。结果显示：CD8^ 细胞在MDS患者外周血中比例明显升高；T细胞亚群Th1／Th2、Tc1／Tc2比值与正常对照无显著差异；T细胞活化信号传导通路上的功能蛋白CD3zeta在CD8^ 细胞中的表达明显增高。结论：MDS患者外周血T细胞亚群比例异常，以CD8^ 细胞增高为主要表现；CD3zeta在CD8^ 细胞中表达明显增高，在CD4^ 细胞中变化不大，提示MDS患者细胞免疫的过度活化主要与CD8^ 细胞有关；T细胞介导的细胞免疫过度活化是MDS患者外周血细胞减少的重要机制之一。     

HLA-A^＊0201／WTl五聚体联合胞内IFNγ染色在检测白血病患者外周血WT1特异性T细胞中的应用

本研究探讨五聚体及胞内因子染色在定性定量检测抗原特异性T细胞中的应用价值。用RT—PCR方法检测受试者WT1表达水平;用HLA—A＊0201／wTl五聚体及胞内IFNγ染色检测14例表达HLA—A＊020l的白血病患者全相合移植前后及其供者外周血中的WT1特异性T细胞。结果表明：14例供者中2例有低水平WT1表达,白血病患者均有不同水平的WT1表达。14例供者均未检测到WT1＋CD8^＋CTL和WT1^＋IFNγ^＋细胞;移植前14例患者中2例可检出WT1^＋CD8^＋CTL,3例检出WTl^＋IFNγ^＋细胞,二者间无明显差异（P=0．357）,而移植后均可检出WT1^＋CD8^＋CTL和WT1^＋IFNγ^＋细胞,明显高于移植前（P值均〈0．01）。移植后大部分患者均在30天内检出WT1^＋CD8^＋CTL和WT1^＋IFNγ＋细胞,但后者检出率高于前者（P=0．014）。14例患者中WT1^＋CD8^＋CTL峰值中位数为0．18％,而WT1^＋IFNγ^＋细胞峰值中位数为0．83％,明显高于前者（P=0．005）;WT1^＋CD8^＋CTL峰值中位时间为移植后75天,WT1^＋IFNγ^＋细胞峰值中位时间为移植后105天,但二者间无明显差异（P=0．455）。结论：五聚体及胞内IFNγ染色能有效检测白血病患者外周血中白血病抗原特异性T细胞;两种方法联合检测有助于抗原特异性T细胞的准确定性定量检测。     

同种异体手移植术后患者的早期免疫学状态

背景：同种异体肢体移植在动物实验中已有大量免疫学方面的研究，但由于临床只是早期的探索，对其临床免疫学研究需要进一步积累。目的：动态分析异体手移植患者术后早期免疫学状态的变化。设计：对照实验。单位：解放军广州军区广州总医院骨科，解放军第一军医大学南方医院创伤骨科和检验科。对象：实验组纳入解放军广州军区广州总医院骨科两例单侧异体手移植的患者．观察时间1999—09／2000—03。健康对照组为同期本院体检者20人，男12人，女8人．年龄20～45岁，均为自愿者，无活动性免疫性和感染性疾病。方法：2例手移植患者手术前1和3d各采外周血1次，术后第1周采血1次／d，2-4周采血3次／周，5～8周采血2次／周，9～16周采血1次／周，5～6个月采血2次／月。①运用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群（CD3^＋，CD4^＋，CD8^＋T细胞），用ELISA法检测血清群体反应性抗体，免疫透射比浊法测定血清C反应蛋白，酶动力法检测血清肌酸肌酶。②混合淋巴细胞反应：以丝裂霉素C处理的供体外周血淋巴细胞作刺激细胞，^3H—TDR掺入法检测患者外周血淋巴细胞对供体移植抗原的增生反应（阴性：刺激指数的均值与1无显著性差异，反之为阳性）。以自体相同处理过的外周血淋巴细胞代替供体刺激细胞作为对照，计算每一标本的刺激指数（刺激指数=实验cpm／对照cpm）作为比较指标。健康对照组20人均采外周血检测外周血T细胞亚群（CD3^＋，CD4^＋，CD8^＋T细胞）、血清群体反应性抗体、C反应蛋白和肌酸肌酶；20人随机分为10组，互为供受体，行外周血混合淋巴细胞反应。主要观察指标：①外周血T细胞亚群（CD3^＋，CD4^＋，CD8^＋T细胞）。②血清群体反应性抗体。③C反应蛋白。④肌酸肌酶。⑤混合淋巴细胞反应。结果：①术后1周内CD3^＋，CD4^＋，CD8^＋T细胞明显下降，1周后除CD8^＋细胞比术前升高外均逐渐恢复至术前水平[CD3^＋：（66．43&;#177;4．56）；CD4^＋：（30．55&;#177;3．94）；CD8^＋：（33．45&;#177;2．69）]。实验组与健康对照组差异无显著性。②血清群体反应性抗体为0～10％，与对照组差异无显著性。③血清C-反应蛋白为0-0．359mg／L，与对照组差异无显著性。④血清肌酸肌酶肌酸肌酶为25-170mmol／L，与对照组差异无显著性。⑤移植后混合淋巴细胞反应为阴性，5个月后转为阳性。对照组均为阳性。结论：T细胞亚群的短期的变化与长期的再分布与免疫抑制剂密切相关，说明免疫抑制剂对异体手移植术后T细胞亚群有明显的影响。免疫诱导方案使患者处于免疫抑制状态．有效地避免了早期排斥反应的发生，但患者还未达到特异性耐受，还需要免疫抑制剂的抑制。     

LMP2混合肽负载树突状细胞与EB病毒感染患者外周血单个核细胞共培养产生识别EB病毒抗原的T细胞

LMF2是EB病毒感染细胞后表达的一种蛋白。本研究探讨应用适于不同HLA分型的EB病毒-LMF2抗原混合肽（MIX—LMF2）体外刺激EB病毒感染患者外周血单个核细胞，诱导产生EB病毒抗原特异性的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）。取EB病毒相关噬血细胞综合症患者的外周血，分离并诱导培养树突状细胞，在培养过程中用EB病毒MIX—LMF2混合肽刺激，促成熟后在体外激活自体T淋巴细胞，每周刺激1次，共刺激2次；同时对部分分离的淋巴细胞在培养过程中不予以刺激作为对照。用基因扫描T细胞受体（TCR）B基因图谱的方法观察培养前后的T细胞克隆分布变化；用流式细胞术检测T淋巴细胞的表型变化；将培养的细胞和靶细胞共培养检测IFN—γ的分泌以研究CTL细胞抗原特异性的细胞毒作用。研究结果表明，基因扫描TCRβ基因结果显示体外培养改变了患者的TCRβ基因图谱，培养前为寡克隆的TCRβ基因家族在培养后出现与正常人相似的多峰分布，提示淋巴细胞亚群分布恢复正常；流式细胞分析显示培养前的淋巴细胞CD3^＋、CD3^＋ CD8^＋、CD^＋ CD45RA^- CD45RO^＋比例分别为70．73％、42．99％、27．56％。用负载EB病毒LMF2肽2次刺激体外培养后，上述的淋巴细胞表型分别升高为95．17％、52．54％、81、41％。NK细胞（CD3^- CD56^＋）、调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋）比例变化不大，分别从培养前的2.12％，0．03％变化为2.35％．0．02％。CD3^＋ CD45RA^- CD45RO^＋细胞增长比例较大，表明2次刺激后大部分的初始型T淋巴细胞被激活。IFN—γ分泌检测结果显示。当负载LMF2肽的DC细胞作为靶细胞时，刺激1次的细胞分泌IFN—γ量和刺激2次的细胞分泌IFN-γ量明显高于同期未刺激细胞分泌IFN-γ量（P〈0．05）。而对于未负载LMP2的DC细胞作为靶细胞时，IFN-γ检测结果则显示无统计学意义（P〉0.05）。结论：用负载EB病毒MIX—LMF2肽的树突状细胞（De）刺激T淋巴细胞的培养方法。可以改变患者T淋巴细胞克隆分布，产生识别EB病毒的特异性T淋巴细胞。     

自身免疫性溶血性贫血患者外周血T细胞亚群的检测

目的 分析自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血T细胞亚群极化状态,探讨AmA的免疫学发病机制。方法 收集AIHA患者及健康者外周抗凝静脉血,分离纯化淋巴细胞。FITC标记的抗CD3单抗,Cy5标记的抗CD4、CD8单抗,PE标记的CRTH2单抗,以CD3／CD4、CD3／CD8设门作双色流式细胞术,分析AIHA患者T细胞亚群极化状态。结果与正常对照相比,AIHA患者外周血CD4^＋细胞百分率显著升高（P〈0．01）,CD8^＋细胞百分率变化不显著（P〉0．05）,CD4^＋／CD8^＋比例显著升高（P〈0．05）;CD3^＋CD4^＋CRTH2^-T细胞百分率、CD4^＋CRTH2^-T／CD4^＋CRTH2^-T和CD8^＋CRTH2^-T／CD8^＋CRTH2^＋T比例均显著升高（P〈0．01）,而CD3^＋CD4^＋CRTH2^＋T、CD3^＋CD8^＋CRTH2^-T及CD3^＋CD8^＋CRTH2^＋T细胞百分率的变化不显著（P〉0．05）。结论 AIHA患者外周血存在细胞免疫功能失调,T细胞亚群极化状态发生改变,呈明显的Th1／Tc1型细胞优势;Th1／Tc1型细胞介导的细胞免疫可能与AIHA的免疫学发病机制有关。     

四色法流式细胞术分析正常人T细胞亚群中IFN-γ和IL-4的表达

目的：研究IFN-γ和IL-4在正常人T淋巴细胞亚群中的表达情况。方法：50例正常人的外周血在PMA、ionomycin和BFA存在的奈件下在体外短期培养，进行细胞膜表面抗原和细胞内细胞因子染色，再用流式细胞仪对CD3 、CD3 CD8 、CD3 CD8-细胞内的IFN-γ和IL-4进行测定。并对分析方法中的一些测定条件进行了探讨。结果：正常人9．89％-33．39％的CD3 CD8-细胞为Th1细胞，0．64％-6．87％为Th2细胞，14．00％-63．76％的CD3 CD8 细胞为Tcl细胞，0．92％—5．44％为Tc2细胞；Th1、Tcl细胞百分比明显多于Th2、Tc2细胞，并且Tcl细胞百分比比Th1细胞多，而同时分泌两种细胞因子的Th0、Tc0细胞均较少。结论：T淋巴细胞各个亚群产生IFN-γ和IL-4的能力明显不同且正常人分泌细胞因子的能力有较大的个体差异。     

特发性血小板减少性紫癜患儿外周血T细胞亚型的分析

T细胞亚型分化漂移可能与一些自身免疫病的发病机制有关。本研究旨在通过分析特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thromboeytopenic purpura，ITP）患儿外周血Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞的平衡状态，探讨T细胞亚群失衡在ITP发病机制中的作用。收集30例ITP患儿外周抗凝静脉血，分离纯化得T细胞．以PE标记的抗CRTH2单克隆抗体和Cy5标记的抗CD4、CD8单克隆抗体作双色流式细胞术检测，分析ITP患儿Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2比例的变化。结果显示：ITP患儿外周血T细胞与健康儿童相比，Th细胞百分率及Th／Tc比例明显下降（P〈0.05），Tc细胞百分率无明显变化（P〉0．05）；Th1及Th2细胞百分率明显下降（P〈0．05），Tc1及Tc2细胞百分率无明显变化（P〉0．05），Th1／Th2及Tc1／Tc2比例明显升高（P〈0.05）。结论：ITP患儿外周血可能存在细胞免疫功能低下及T细胞亚群漂移，Th1及Tc1细胞比例升高，呈明显Th1类细胞优势，此结果说明T细亚群分化异常在ITP发病过程中起着重要作用。     

哮喘患儿外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞检测及其意义

目的:探讨哮喘患儿急性发作期及缓解期Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞亚群平衡的变化情况。方法:采用荧光标记抗体,应用三色荧光流式细胞仪技术,从单细胞水平对急性发作期哮喘患儿(20例)、缓解期哮喘患儿(18例)及同龄正常健康儿(对照组20例)外周血CD4+、CD8+细胞内分泌IFN-γ、IL-4进行检测。结果:哮喘患儿外周血细胞内分泌IL-4(+)的CD4+(Th2)、CD8+(Tc2)百分率较正常对照组升高,且哮喘急性发作期高于缓解期;分泌IFN-γ(+)的CD4+(Th1)、CD8+(Tc1)百分率较正常对照组降低,且哮喘急性发作期低于缓解期。结论:哮喘患儿外周血Th2、Tc2百分率升高,Th1、Tc1百分率降低,Th1/Th2、Tc1/Tc2比值降低,且哮喘急性发作期低于缓解期。     

多发性硬化患者造血干细胞移植后Th、Tc细胞亚型的变化

目的观察多发性硬化(MS)患者自体造血干细胞移植(AHSCT)前后外周血中辅助性T细胞(Th)、细胞毒性T细胞(Tc)亚型的变化,及其在AHSCT后诱导MS缓解中的作用。方法用流式细胞仪(FCM)检测患者移植前1周及移植后1月外周血中Th、Tc细胞亚型,及其分别占CD3+T淋巴细胞的百分比。结果MS患者外周血Th1和Tc1细胞百分比高于健康对照组(P<0.01及P<0.05),移植后Th1和Tc1显著低于移植前及对照组(P<0.01)。移植前MS患者Th2细胞与健康对照组差异无显著性(P>0.05),Tc2细胞低于对照组(P<0.05)。移植前后相比,移植前组Th2细胞下降(P<0.05),而Tc2差异无显著性(P>0.05)。结论MS患者体内存在高水平的Th1和Tc1。AHSCT可使其逆转,从而有利于MS病情的缓解。     

中医疗法对过敏性紫癜患者免疫功能的调节作用

目的探讨以疏风清热、活血化瘀立法治疗过敏性紫癜(HSP)前后,外周血白细胞总数、淋巴细胞数、淋巴细胞亚群、辅助性T细胞(Th)1/Th2及调节性T细胞的变化。方法使用血细胞分析仪检测36例住院患者血常规,统计其中的白细胞总数及淋巴细胞数。使用流式细胞仪检测36例住院患者外周血淋巴细胞亚群、Th1/Th2及调节性T细胞。结果 HSP患者治疗后(恢复期)与治疗前(急性期)相比较,白细胞数、淋巴细胞数、CD3~+、CD4~+、CD19~+降低(P0.05),CD8~+、CD16~+CD56~+、Th1/Th2、CD4~+CD25~+升高(P0.05);HSP患者治疗前与对照组相比较,白细胞数、淋巴细胞数、CD3~+、CD4~+、CD19~+明显升高(P0.05),CD8~+、CD16~+CD56~+、Th1/Th2、CD4~+CD25~+降低(P0.05);HSP患者治疗后与对照组相比较,白细胞数、淋巴细胞数、CD19~+升高(P0.05);CD16~+降低(P0.05);CD3~+、CD4~+、CD8~+、Th1/Th2、CD4~+CD25~+无差异(P0.05)。结论以疏风清热、活血化瘀立法治疗HSP,能明显干预患者的外周血白细胞总数、淋巴细胞数、淋巴细胞亚群、Th1/Th2及调节性T细胞,对患者的免疫功能的调节作用明确,临床效果显著,极大地提高了临床诊疗能力。     

乙型肝炎外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2表达失衡的临床意义

目的探讨Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞因子在乙型肝炎中的表达及临床意义。方法采用流式细胞术分析乙型肝炎患者外周血不同T淋巴细胞亚群中细胞因子(IFN-γ、IL-4)的表达,分别比较急慢性乙型肝炎以及慢性轻、中、重度肝炎IFN-γ、IL-4表达水平的变化。结果慢性肝炎Th2、Tc2细胞高于急性肝炎(P<0.01;P<0.05);相对于轻度组,中度Th1、Tc1以及重度组Th1、Tc1均有升高(P<0.01),相对于中度组,重度组Th1、Tc1亦有增高(P<0.05;P<0.01)。结论乙型肝炎外周血Th2、Tc2与炎症慢性化有关;随着慢性乙型肝炎活动程度的加剧Th1、Tc1细胞逐渐增多。     

循环毒毒蛇咬伤患者外周血Th1/Th2细胞因子的表达及意义

目的分析外周血Th1/Th2细胞因子在循环毒毒蛇咬患者中的表达,探讨其在病情评估中的意义。方法收集2016年3月至2017年10月循环毒毒蛇咬伤患者108例,根据国际蛇伤诊断标准分为轻度蛇咬伤组82例与重度蛇咬伤组26例,另外选择同期体检健康者30例为对照组。通过流式细胞术检测并比较分析各组患者T淋巴细胞亚群的分布情况及外周血Th1/Th2细胞因子的表达。结果与对照组比较,重度蛇咬伤组CD3^+、CD4^+T淋巴细胞水平偏低(P<0.01);细胞因子IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α表达水平升高(P<0.05)。蛇咬伤组两两比较,重度蛇咬伤组CD3^+、CD4^+T淋巴细胞水平低于轻度蛇咬伤组(P<0.05),IL-4、IL-6、TNF-α表达水平均高于轻度蛇咬伤组(P<0.05)。结论循环毒毒蛇咬伤患者中存在有明显的T淋巴细胞数量的改变和Th1/Th2细胞因子表达紊乱,且与病情严重程度相关。     

干扰素α-1b、白介素-2联合沙利度胺方案治疗急性髓系白血病免疫调节作用的协同机制研究

目的:探讨干扰素α-1b、白介素-2联合沙利度胺(简称"干白沙"方案)治疗急性髓系白血病(AML)的免疫调节的协同作用机制.方法:对2016年3月至2019年5月郑州大学附属肿瘤医院等11家医疗单位收治的初治或复发/难治性或行维持治疗的且自愿接受"干白沙"方案治疗的68例AML患者,采集患者用药前1天及规范用药3个月后...     

52例儿童特发性再生障碍性贫血的淋巴细胞免疫异常分析

本研究评价儿童特发性再生障碍性贫血（IAA）发病时淋巴细胞免疫异常的特点，以探讨儿童特发性再生障碍性贫血的免疫发病机制。应用流式细胞术检测患者发病时外周血中淋巴细胞表型、Th1／Th2和Tc1／Tc2水平，以及CD25^＋及CD4^＋CD25^＋T细胞的水平，并与正常儿童对照组的比较。结果表明：重型再生障碍性贫血（SAA）组40例，轻型再生障碍性贫血（MAA）组12例。SAA组和MAA组患者的CD3^＋CD8^＋水平较正常对照组显著增高（P〈0．05）；MAA组CD3^＋和CD3^＋CD4^＋T细胞水平均明显低于SAA组（P〈0．05）．与正常对照组比较无显著差异．SAA组和MAA组CD3^-CD19^＋水平与正常对照组比较无明显差异。SAA组和MAA组CD3^-CD56^＋水平明显低于正常对照组（P〈0．05）：与正常对照组比较SAA组和MAA组Th1和Tc1水平明显增高（P〈0．05），Th1／Th2和Tc1／Tc2比值也明显增高（P〈0．05）；SAA组伴Th2增高；SAA组Th1和Tc1水平、Th1／Th2和Tc1／Tc2比值明显高于MAA组（P〈0．05）．SAA组、MAA组CD25^＋T细胞表达较正常对照组均显著增高（P〈0．05）。SAA组、MAA组CD4^＋CD25^＋T细胞表达水平和CD4^＋CD25^＋／CD4^＋比值均无明显差异。结论：儿童特发性再生障碍性贫血发病时淋巴细胞免疫异常，Th1／Th2、Tc1／Tc2极化平衡向Th1、Tc1偏移，并且与疾病严重程度相关，以及CD25^＋T细胞表达增高，均提示淋巴细胞免疫异常在儿童特发性再生障碍性贫血患者的发病中起着重要的作用．     

rhG-CSF对供者骨髓和外周血采集物中Th17细胞的影响

本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）供者体内应用对骨髓采集物（GBM）和外周血采集物（GPB）中Th17细胞的影响。对25名亲缘供者皮下注射rhG-CSF5μg/（kg.d）,连用5天,于第4、5天分别采集骨髓和外周血,注射前留取部分供者稳态骨髓（steady state bone mavrow,SSBM）和稳态外周血（steady state peripheral blood,SSPB）。采用流式细胞术测定动员前后供者骨髓和外周血中T细胞分泌IL-17的变化。结果显示：rhG-CSF体内应用后供者骨髓中CD4＋T细胞和CD8＋T细胞分泌Il-17的能力较稳态骨髓明显下降（GBM vs SSBM Th17/CD4＋T,0.74%±0.27%vs1.78%±1.19%,p〈0.05;Tc17/CD8＋T,0.19%±0.16% vs 0.36%±0.37%,p〈0.05）,外周血中的变化与骨髓相同（GPBvsSSPBTh17/CD4＋ T,1.82%±0.91%vs3.26%±1.89%,p〈0.01;Tc17/CD8＋T,0.21%±0.17%vs0.44%±0.28%,p〈0.01）。25例供者GBM与GPB相比,GPB中Th17/CD4＋ T和Tc17/CD8＋ T的比值均高于GBM（p〈0.05,p〈0.01）。结论：体内应用rhG-CSF能够抑制供者骨髓及外周血采集物中Th17细胞的产生,它可能是GPB和/或GBM混合移植对GVHD的发生率没有增加的部分原因。