非病毒介导的基因转移

基因转移是研究基因功能和实现基因治疗的一个关键.基因转移必须安全、有效、稳定、特异、可控、经济、简便易行并可携带不同长度的DNA.目前,基因转移主要有病毒和非病毒介导的两种方式.本文结合心血管系统的基因治疗,介绍几种我们实验室创建的一些非病毒介导的基因转移方法.1. 基因缝线 基因缝线是将外源性DNA直接涂粘或通过Poylysine耦联到手术缝合线上,进行血管、肌肉和组织的缝合而实现基因转移的方式.应用pcDNA3/lacZ基因缝线,缝合血管、骨骼肌、心肌等器官可以实现高效基因转移,其表达量可较直接注射法高5～10倍,并可持续3个月以上.并且肌肉再生、组织缺血损伤可以促进外源性基因的表达.应用这种方法转移MTHFR基因,可以产生DNA抗体;应用基因缝线,携带尿激酶原的基因,给微小动脉进行血管缝合,可以防止吻合口的血栓形成和再狭窄.携带VEGF基因,给血管梗塞的大鼠、狗和猴进行血管外基因转移,可以促进血管内皮的生长、新生血管的形成和侧枝循环的建立,治疗梗塞性血管病.携带心钠素基因,可以使血中心钠素水平升高一倍以上,产生明显利钠、利尿和降低血压的作用,防治和延缓高血压的发生.应用这种方法,进行肌肉介导的基因转移,其外源基因仅在局部表达,而不累及远隔的组织和器官.     

基因多态性与胃肠道肿瘤遗传易感性研究进展

近年来基因多态性与疾病遗传易感性的关系,特别是一些功能基因多态与肿瘤的关系日益受到人们的关注.现结合近年来基因多态性与胃肠肿瘤研究的有关文献,介绍代谢酶基因、癌基因、抑癌基因、错配修复基因、细胞周期蛋白基因、免疫相关基因等基因的多态性与胃肠肿瘤遗传易感性的研究进展情况.     

肿瘤易感人群中P53基因突变的意义

越来越多的证据表明,几乎所有类型肿瘤都具有一定的家族聚集性.这种现象除与接触环境致突变物质有关外,另外一个更为重要的因素是体内存在肿瘤易感基因.近年来,通过分子基因技术已经对一些肿瘤易感基因进行了染色体定位.这些基因包括视网膜母细胞瘤基因(Rb基因)、神经纤维瘤基因(WT_1基因)、家族性多发性结肠息肉APC基因及Li-Fraumeni综合征P53基因.利用染色体及基因技术研究遗传疾病,已经积累了大量的经验.然而,到目前为止,对于肿瘤易感基因遗传突变理论的研究还是很有     

胃癌相关易感基因单核苷酸多态性研究进展

胃癌具有一定程度的遗传易感性,可能与人群中存在基因多态性有关.近来,胃癌易感性与基因单核苷酸多态性的相关性研究逐渐增加并取得长足进展,目前研究的基因包括细胞增殖基因、酶基因、癌基因与抑癌基因等.     

残留白血病检测基因标志的研究进展

残留白血病检测的基因标志可大致分为融合基因、变异基因和一些白血病中行表达增高的基因.这些基因标志在形成机制、临床作用等方面各不相同.本文总结其中大部分基因标志的研究进展,在全面的基础上重点阐述几种新的检测基因标志,如NPM1、PRAME、STC-1等,同时总结了研究较成熟的WT1、FLT3基因最新的应用进展,以期为临床实验室建立检测方法时提供初步参考.     

肿瘤的精准化疗

根据化疗相关基因选择合适的化疗方案从而实现精准化疗是未来肿瘤化疗的方向.化疗相关基因包括DNA修复基因、药物代谢酶、药物转运蛋白、凋亡相关基因和肿瘤相关基因,这些基因可预测抗肿瘤药物的疗效和毒性,并能判定临床预后的情况.     

KiSS-1基因及其与肿瘤转移的关系

KiSS-1基因是近年发现的肿瘤转移抑制基因.研究表明,KiSS-1基因与黑色素瘤、乳腺癌、胃癌、胰腺癌等数种肿瘤的转移密切相关,可望成为某些肿瘤抗转移的治疗靶点.现综述KiSS-1基因的结构、抗肿瘤转移相关机制及KiSS-1基因与人类肿瘤转移的相关性研究进展.     

KiSS-1基因及其与肿瘤转移的关系

KiSS-1基因是近年发现的肿瘤转移抑制基因.研究表明,KiSS-1基因与黑色素瘤、乳腺癌、胃癌、胰腺癌等数种肿瘤的转移密切相关,可望成为某些肿瘤抗转移的治疗靶点.现综述KiSS-1基因的结构、抗肿瘤转移相关机制及KiSS-1基因与人类肿瘤转移的相关性研究进展.     

乳腺癌中c-MYC调节的剪接基因鉴定及其临床意义分析

目的 鉴定c-MYC调节的剪接相关基因,分析其基因组水平的改变,并评价其潜在的预后价值.方法 采用癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库分析乳腺癌中与c-MYC共表达的基因;功能富集分析剪接相关基因;采用String蛋白数据库绘制剪接基因互作网络图;采用TCGA数据库分析剪接基因在基因组水平的改变,包括突变、扩增和缺失等,对比淋巴瘤剪接基因研究确定候选基因;采用Kaplan-Meier plotter数据库分析候选基因与乳腺癌患者生存的关系.结果 乳腺癌中与c-MYC共表达的基因中剪接基因共有16个,主要为剪接体复合物、U12-型剪接体复合物和剪接体snSNP复合物.这16个剪接基因在乳腺癌中均有不同比例的拷贝数扩增.本研究分析的乳腺癌数据中与c-MYC共表达的基因与已知的淋巴瘤中的基因存在多个重叠基因,即WDR77、GEMIN4和SNRPD1,这3个基因的表达与乳腺癌患者的总生存期和无复发生存期均有关.结论 在乳腺癌中鉴定了16个c-MYC调节的剪接基因,这些基因在乳腺癌中大多存在拷贝数扩增,其中WDR77、GEM-IN4和SNRPD1可作为乳腺癌预后的标志分子.     

MLL2基因与肿瘤

组蛋白甲基转移酶通过影响组蛋白和DNA结合的紧密程度,影响异染色质形成、基因印记和基因转录调控.MLL基因作为组蛋白甲基转移酶编码基因,与肿瘤存在密切的关系.MLL基因家族中的MLL2在乳腺癌、大肠癌、淋巴瘤等恶性肿瘤中均异常高表达.肿瘤发生发展的过程中是否有MLL2的参与、参与的时间点及其发挥的作用均有待于进一步研究.     

肿瘤特异性启动子及其在肿瘤基因靶向治疗中的应用

肿瘤特异性启动子可驱动目的 基因在肿瘤细胞中高效特异性表达,目前常用的有甲胎蛋白启动子、癌胚抗原启动子、前列腺特异性抗原启动子、人端粒酶逆转录酶启动子和多药耐药基因启动子等.利用双启动子、增强子、调控元件或其他物化因素对启动子进行修饰或改造,可增强目的 基因在肿瘤细胞中的表达和定位.肿瘤特异性启动子可耦联自杀基因、抑癌基因、反义核酸、细胞凋亡基因和BNA干扰等,在肿瘤基因靶向治疗中发挥重要作用.     

胃肠道及肝脏疾病的分子生物学与基因治疗

分子研究已经成为生物和临床医学研究不可缺少的部分,对疾病的分子和遗传机制研究的深化促进了对疾病发生机制的认识,并为疾病的诊断、治疗及预防提供了新的启示.人类疾病按分子机制可分为单基因性、复合基因性及获得性基因疾病.基因治疗据此可分为4种:基因替代、基因增强、基因阻断和基因疫苗.目前基因治疗在多方面取得了显著进展,但其靶向性和安全性在用于临床治疗前尚待进一步研究.胃肠道和肝脏疾病的分子诊断将来会成为处理病人的一部分,并完善现有诊断、治疗及预防策略.     

抗肿瘤基因疫苗

肿瘤基因疫苗的发展逐渐趋于成熟,常见基因疫苗主要有细胞因子类基因疫苗、多基因联合疫苗,转染基因的树突状细胞疫苗等.近些年肿瘤基因疫苗的发展逐渐趋向于寻找基凶疫苗佐剂或探索不同基凶的联合从而达到更加有效地治疗目的.     

人胃腺癌BGC823细胞Midkine高表达前后基因表达谱芯片分析

目的:用基因芯片技术分析、筛选Midkine高表达前后胃腺癌相关基因谱的差异表达.方法:建立Midkine高表达BGC823胃腺癌细胞系,提取细胞总RNA,逆转录Cy3、Cy5 标记cDNA 探针,应用晶芯表达谱芯片,分析差异表达的基因.结果:发现Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞有显著性表达差异的基因共有550个,其中上调基因407个,下调基因143个.对550条差异表达基因进行初步功能分类分析,结果表明这些基因与Midkine促进胃腺癌发病机制存在相关性.结论: Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞部分功能基因存在显著的表达差异,多数差异表达的基因参与细胞黏附、细胞骨架形成、细胞周期以及细胞代谢等过程.     

胃蛋白酶原C基因插入-缺失多态和幽门螺杆菌感染的交互作用与胃癌发病风险

目的 探讨胃癌发生发展过程中,胃蛋白酶原C(PGC)基因插入-缺失多态与幽门螺杆菌(Hp)及其不同基因亚型菌株感染的交互作用.方法 1:1频数配伍,选择基本正常(NOR)、胃糜烂溃疡(GU)、萎缩性胃炎(AG)和胃癌(Gc)各141例,分析PGE基因多态和Hp感染的交互作用.同时选择177例Hp感染阳性者,分析PGC基因多态与不同基因亚型Hp感染的交互作用.以聚合酶链反应(MR)检测PGC基因多态型及Hp基因亚型.以酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清Hp-IgG抗体.结果 PGG基因多态与Hp感染两因素交互作用,PGC等位基因1纯合型、Hp-IgG阳性者罹患GU、AG和GC的OR值分别为8.69、11.16和10.61(P值分别为0.049、0.02和0.03),交互作用指数分别为5.40、6.48和4.34,归因比分别为0.721、0.770和0.697.P02基因多态与不同基因亚型Hp感染对于AG和GC患病均无交互作用.结论 GC发生发展过程中,PGC基因多态与Hp感染存在正交互作用,而与不同基因亚型Hp菌株感染无交互作用.     

同源异型盒A7基因在肿瘤发生发展中的调控机制

同源异型盒(HOX)基因是首先在果蝇体内发现的一组基因,具有调控正常胚胎发育和成体组织细胞增殖和分化的功能.近年来研究表明,HOX基因家族中的HOXA7基因可以通过基因融合、基因沉默等方式在肿瘤中过高或过低表达,调控肿瘤细胞的发生和发展.研究其在肿瘤中的表达及调控规律有助于指导肿瘤的诊断、治疗及预后.     

KAI1基因与肺癌转移和预后的关系

肿瘤侵袭、转移是一个极其复杂的多基因调控和多步骤发展过程.它涉及到肿瘤细胞、机体、靶组织的相互影响和作用,还涉及到一系列肿瘤侵袭转移相关基因的结构或/和功能的异常.一些基因被激活,一些基因受抑制,而另一些基因则表现为缺失或功能失活,或者相互拮抗,从而影响其抗侵袭转移功能的正常发挥.KAI基因是最近发现的一个新的肿瘤转移抑制基因,它的转移抑制作用已在前列腺癌中得到证实,KAI基因低表达可导致人前列腺癌转移的发生.有关KAI基因表达与肺癌转移、预后关系的研究文献报道较少,本文就此方面的最新进展作一综述.     

MAL基因与肿瘤

MAL基因是一个在T细胞分化中晚期表达的基因.许多研究表明MAL基因在食管癌、胃癌、结肠癌、头颈部鳞癌等多种肿瘤组织中表达下调或缺失,与肿瘤的发生发展过程有关.MAL基因要作为临床诊断、判断预后及指导治疗的指标而得到应用,还需要进一步研究.     

DNA损伤修复基因XRCC和hOGG1多态性与肺癌易感性的关系

DNA损伤修复基因的多态性能够改变DNA修复功能和效率,影响肿瘤易感性.许多研究报道DNA损伤修复基因多态性可能与肿瘤易感性有关,其突变在多种肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用.另外,DNA损伤修复基因可能与其他基因相互作用,共同影响肿瘤的发生、发展.肺癌是目前在这方面被研究得最多的肿瘤.文章就DNA损伤修复基因XRCC和hOGG1多态性的生物学特点以及这些基因单核苷酸多态性与肿瘤易感性等方面进行了综述,为该基因用于肿瘤的预防、诊治提供理论借鉴.     

抑癌基因PTEN与食管癌关系的研究进展

目的:总结抑癌基因PTEN在食管癌组织中遗传学及表观遗传学研究的历史、现状及面临的问题.方法:应用PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,以“PTEN基因、食管癌、遗传学和表现遗传学”等为关键词,检索2000-01-2012-06的相关文献.纳入标准:1)PTEN基因在食管癌组织的表达;2)PTEN基因在食管癌中遗传学及表观遗传学改变;3)PTEN基因在食管癌发生和发展的机制;4)PTEN基因表达对食管癌的治疗及预后分析的意义.根据纳入标准符合分析文献36篇.结果:抑癌基因PTEN在食管癌中表达水平显著下调,并与食管癌TNM分期及预后存在相关性.PTEN基因点突变与食管癌的临床进展关系不明确.食管癌存在PTEN基因杂合性缺失及微卫星不稳定,但与食管癌的临床病理特征无关.PTEN基因多态性与PTEN蛋白质表达水平及食管癌危险因素的关系尚无定论.PTEN基因表观遗传学改变研究较少,对PTEN蛋白功能的影响及在食管癌的进展过程中的意义尚不明确.PTEN基因在食管癌低表达的确切机制有待进一步研究.结论:PTEN基因参与食管癌细胞生长、分化、凋亡及细胞信号传导,与食管癌的发生、发展、治疗及预后密切相关.