柴胡皂苷防治原发性肝癌机制研究进展

通过回顾分析近年来国内外柴胡皂苷防治肝癌的相关文献,从预防肝癌细胞形成、抑制肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡与分化、抑制肝癌细胞浸润与转移、增强机体抗肿瘤免疫、逆转肿瘤细胞多药耐药性等六个方面综述了目前对于柴胡皂苷预防与治疗原发性肝癌分子机制的研究进展。柴胡皂苷通过多途径、多靶点防治肝癌,展现出了良好的临床应用前景。     

Report of a pilot study of intra-arterial injection of I-131 lipiodol for the treatment of hepatoma

This pilot study in 10 hepatoma patients investigated the feasibility of using selective targeting of radioisotope (I-131) lipiodol in the treatment of hepatoma patients. Lipiodol is a contrast medium that selectively goes to hepatoma and remains there for a long period as compared with that in normal liver and other tissues. Lipiodol was labelled with I-131 and infused into the hepatoma via the hepatic artery. Selective targeting of I-131 to hepatoma was demonstrated with a radiation dose ratio (hepatoma to normal liver) of up to 25 to 1. The biodistribution data of I-131-lipiodol in this study also confirmed the selective targeting of the radioisotope (I-131) to the hepatoma. Tumor radiation dose up to 26,000 rads can be delivered by this method. The treatment results were encouraging. About 70% of hepatoma patients had response to the treatment with reduction of alpha-fetoprotein and decrease of hepatoma sizes. The overall median survival was 9 months (range 2-17 months). This treatment was simple, safe, effective, non-expensive and well tolerated by all patients without major side effects. The optimal dose, schedule, duration of this treatment are still under investigation.     

东亚钳蝎毒生物提取物对人肝癌细胞体外增殖及凋亡的影响

目的：探讨东亚钳蝎毒生物提取物（PBMK）对人肝癌细胞的体外增殖及凋亡影响。方法：用MTT法测定PBMK对人肝癌细胞的体外增殖，用Tunel法测定其对人肝癌细胞的凋亡影响。结果：PBMK对人肝癌细胞体外生长有明显抑制作用，可高度诱导肝癌细胞的凋亡。经PBMK作用的癌细胞在相差显微镜下表现为细胞稀疏、收缩，胞质拉长。倒置显微镜下可见明显的细胞内空泡和细胞出泡现象。结论：PBMK可作为一种有效的癌细胞毒药物，具有开发应用前景。     

人肝癌细胞株VEGF/VEGFR的检测及意义探讨

目的：筛选血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）高表达肝癌细胞株，为进一步研究VEGF在肝癌治疗中的作用提供理论依据。并探讨VEGF受体在肝癌细胞株的表达及意义。方法：ELISA法及Western blot法分别检测人肝癌细胞株培养上清及细胞内VEGF蛋白的表达。免疫细胞化学方法检测VEGFR在人肝癌细胞中的表达。结果：5株肝癌细胞株均见VEGF蛋白表达，其中SMMC-7721的VEGF表达量最高，VEGF特异性受体Fit-1在HepG2、HHCC、SMMC-7721、Bcl-7402见阳性表达，KDR在HepG2、HHCC、Bel-7402、QGY-7701见阳性表达。结论：肝癌细胞株中VEGF表达量不尽一致，VEGF在肝癌发生发展中可能存在自分泌作用方式。     

人BNIP3真核表达载体和shRNA表达载体的构建及其对肝癌细胞自噬的影响

目的利用人BNIP3的真核表达载体和靶向BNIP3的shRNA表达载体,研究BNIP3过表达和封闭时对肝癌细胞自噬的影响。方法从人肝癌细胞系中,通过RT-PCR扩增人BNIP3基因编码区序列,酶切后插入pcDNA3.1-His-C载体,以此构建重组pcDNA3.1-BNIP3真核表达载体。同时构建靶向人BNIP3基因的shRNA表达载体pSilencer-BNIP3。分别经测序、酶切、RT-PCR和Western blot等方法对重组载体是否构建成功进行验证。并通过采用Western blot检测自噬标志物LC3蛋白的剪切,研究BNIP3过表达和抑制时对肝癌细胞自噬的影响。结果pcDNA3.1-BNIP3和pSilencer-BNIP3分别过表达BNIP3和抑制BNIP3的表达。BNIP3过表达能够显著增加肝癌细胞的自噬;BNIP3表达受到抑制时,肝癌细胞的自噬明显减少。结论成功构建了人BNIP3的真核表达载体pcDNA3.1-BNIP3和shRNA表达载体pSilencer-BNIP3,并在人肝癌细胞系中证实BNIP3对肝癌细胞自噬的促进作用。     

原发性肝细胞癌胞核及核内包涵体的超微结构研究

55例肝癌标本来自本校附属医院外科手术切除标本。每一例均作常规石蜡切片和常规超薄片,分别进行光镜和电镜观察。光镜下,肝癌胞核普遍增大,核膜增厚,染色质沿核膜分布,有的胞核呈空泡状,核仁明显。在55例肝癌中,Ⅰ级7例(12.7％),Ⅱ级癌38例(69.1％),Ⅲ级癌10例(18.2％)。     

携带白细胞介素12基因逆转录病毒载体包装细胞株体内直接注射治疗肝癌的实验研究

目的研究体内直接注射携带白细胞介素12（mIL-12）逆转录病毒载体包装细胞株对体内肝癌细胞生长抑制作用,探索基因治疗新途径。方法构建携带mIL-12的逆转录病毒载体,将载体转染包装细胞株,用该细胞株分别在大鼠腹腔内与肝癌细胞株混合接种,在肝癌局部及脾内直接注射,观察对肝癌细胞生长抑制作用及其对大鼠毒性反应、免疫功能变化。结果应用该细胞株与肝癌细胞株在腹腔进行混合接种,1：10以下治疗组可使大鼠长生存,而大于1：10治疗组则只能延长生存期。肝癌局部和脾内治疗组中第1天、第3天治疗能使大鼠长期生存,第5天、第7天治疗组则生存期明显延长,二者疗效无明显差别,但脾内治疗组副作用明显减少。免疫学分析与对照组相比,治疗组肝癌组织中浸润的淋巴细胞明显增多,以NK细胞及细胞毒T细胞为主。病理学结果治疗组肿瘤组织血管壁明显增厚,管腔狭窄。结论体内直接注射携带白细胞介素12的逆转录病毒包装细胞株可抑制肝癌细胞生长,早期治疗优于晚期治疗,脾内直接注射治疗是一条安全且有效的肝癌基因治疗的新途径。     

携带白细胞介素12基因逆转录病毒载体包装细胞株体内直接注？…

目的 研究体内直接注身携带白细胞介素１２（ｍＩＬ－１２）逆转录病毒载体包装细胞株对体内肝癌细胞生长抑制作用,探索基因治疗新途径。方法 构建携带ｍＩＬ－１２的逆转录病毒载体,将载体转染包装细胞株,用该细胞株分别在大鼠腹腔内与肝癌细胞株混合接种,在肝癌局部及脾内直接注射,观察对肝癌生长抑制作用及其对大鼠毒性反应、免设功能变化。结果 应用该细胞株与肝癌细胞株在腹腔进行混合接种,１：１０以下治疗组可使大鼠     

大鼠肝癌模型CBRH-3的复制及应用

目的：探讨大鼠肝移植性肿瘤ＣＢＲＨ－３模型的复制及应用。方法：选择断奶５天的雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠应用开腹肝癌组织埋藏植入法复制ＣＢＲＨ－３肝癌大鼠模型。：５０只大鼠中移植成功４６只（９２％）。无１例手术死亡。结论：ＣＢＲＨ－３肝癌模型有良好,适用于多指标动态观察,是肝癌病理基础研究,药物筛选及实验治疗等研究中有价值的模型。     

肝癌细胞中XAGE-1b的表达和意义

目的研究XAGE-1b在肝癌细胞中的表达情况,探讨其对肝癌细胞的生物行为影响。方法运用实时荧光定量PCR方法检测38例肝癌病理组织以及42例癌旁组织的XAGE-1b的基因表达水平。结果 XAGE-1b在肝癌组织中表达值为(9.139±0.768),在癌旁组织中表达值为(2.078±0.646),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 XAGE-1b在肝癌发生、发展过程中可能起重要作用,有望成为反映肝癌肿瘤恶性程度及预后判断的标记物,并成为分子靶向药物治疗的靶点。     

人肝癌胞浆蛋白质双向电泳的研究

用高分辨率的蛋白质双向电泳对人肝癌及正常肝组织的胞浆蛋白质进行检测。结果表明肝细胞癌变后,胞浆蛋白质双向电泳图谱发生了显著改变,总点数增加,蛋白质点的分布向低分子量低等电点偏移,出现了一些新的蛋白质点,有些蛋白质点密度增加,有些蛋白质点密度减少或消失。     

~(125)Ⅰ标记铁传递蛋白作移植性人肝癌LTNR_1裸大鼠的扫描

以移植性人肝癌LTNR_1裸大鼠为模型,观察肝癌组织对碘标记铁传递蛋白(~(125)I-t_f)的摄取。结果表明从尾静脉注射~(125)I-T_f后48～72h,肝癌组织对~(125)I-T_f的摄取比同一动物肝脏及其他各组织显著增高。肝癌/肝放射强度比平均为3.58,肝癌/血放射强度比为1.80。肝癌与其他各组织的放射强度比,除甲状腺、肺、脊椎较低外,均在3以上。注射~(125)I-T_f后,自24h起,每隔24h对癌鼠作全身γ-闪烁显象,阳性显象以72h最清晰。     

蓖麻毒素及其修饰物在肝癌细胞膜上的分布

目的：探讨３－（α－吡啶二硫基）丙酸Ｎ－羟基琥珀酰亚胺基酯（ＳＰＤＰ）修饰的蓖麻毒素毒癌活性及其机制。方法：用流式细胞仪分析蓖麻毒素及其修饰物在肝癌细胞膜上的分布变化。结果：修饰的蓖麻毒素在肝癌细胞上的分布比未修饰的蓖麻毒素明显增多,结论：ＳＰＤＰ修饰后的蓖麻毒素对肝癌细胞的亲和力增加,提示蓖麻毒素用ＳＰＤＰ修饰可能是改进其抗癌作用的一个有价值的途径。     

Effect of Calmodulin and Voltage-dependent Ca~(2+) Channel on the Proliferation of Heptoma Cells Induced by Epidermal Growth Factor

Epidermal growth factor(EGF) has been impli-cated as a hepatotrophic factor during liver regenera-tion.EGF plays a role in the proliferation of hep-atoma cells.In general,EGF induces tumor cells di-vision and proliferation through a series of signaltransduction by binding with EGF receptor(EGFR)and activate its thyrosine protein kinase and therebyinducing phosphoration of itself and its protein sub-strate[1] .This postreceptorsingnal transduction isas-sociated with phosphoylinositolpathw…     

CIK细胞体外杀伤人肝癌细胞免疫学机制的实验研究

目的 探讨CIK(cytokine induced killer)细胞体外杀伤人肝癌细胞的机制。方法 取健康志愿者的成分血,用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞(PBMC),采取本室常规方法培养诱导成CIK细胞。体外诱导CIK杀伤人肝癌细胞,电镜下观察肝癌细胞的形态特征改变;用TUNEL法检测肝癌细胞的凋亡;免疫细胞化学法检测并比较FasL在单个核细胞和CIK细胞表面的表达;用MTT法检测抗FasL单克隆抗体对CIK细胞杀伤肝癌细胞活性的影响。结果 电镜观察CIK细胞能促进细胞凋亡超微结构的改变,表现为细胞固缩、微绒毛脱失、核染色体边集、核固缩;TUNEL LI的分析显示：CIK作用后肝癌细胞凋亡指数明显增高;FasL在CIK细胞表达增加;抗Fas单抗可抑制CIK杀伤肝癌细胞的活性。结论 免疫活性细胞CIK能诱导肝癌细胞的凋亡,Fas／FasL途径在其中起一定的作用。     

肝癌细胞核蛋白对白蛋白增强子／启动子序列的体外转录调控作用

目的：研究肝癌细胞核蛋白调控白蛋白＂持家基因＂转录调控序列对目的基因转录的作用。方法：分别从小鼠肝癌细胞、肝细胞和黑色素瘤细胞中提取核蛋白组分,用于体外启动白蛋白增强子／启动子的转录作用。结果：发现某些肝癌细胞和肝细胞核蛋白组分具有明显的转录作用,而细胞浆蛋白和其他肿瘤核蛋白组分没有转录作用,将同一肝癌细胞某些核蛋白组分合并可使转录活性增强。结论：本研究在基因转录调控水平部分解释了应用白蛋白增强子／启动子调控目的基因于肝癌细胞中特异表达的机理。     

ErbB-3结合蛋白Ebp1 mRNA在肝癌细胞系中的差异表达及其意义

[目的]观察ErBb-3结合蛋白Ebp1mRNA在人肝癌细胞系中的表达.[方法]培养人肝癌细胞系Hep 3B,Hep G2,Huh7和正常人张氏肝细胞,提取总RNA,以P32标记的Ebp1为探针,18S为内参照,采用Northern Blot法检测Ebp1mRNA的表达水平.[结果]Northern Blot法检测结果示,Ebp1mRNA在人肝癌细胞系中的表达水平明显高于正常肝细胞（P〈0.01）.[结论]人肝癌细胞系中Ebp1mRNA呈高表达.     

树舌多糖GF对肝癌细胞系HepA抑制作用研究

目的在体外研究树舌多糖GF组分对HepA细胞的抑制作用,进一步阐明多糖抗肿瘤的分子机制。方法用MTT法、流式细胞仪分析树舌多糖GF对体外培养的腹腔积液型肝癌细胞系HepA生长、细胞周期及细胞凋亡的影响。结果树舌多糖GF组分作用48h后,抑制率、S期数、凋亡率与空白对照组比较有明显差异（P〈0．05）。结论树舌多糖GF组分对腹腔积液型肝癌细胞系HepA增生有显著的抑制作用,可以引起HepA细胞S期阻滞,诱导HepA细胞的凋亡。     

血管活性肠肽对培养大鼠肝癌细胞作用的细胞化学观察

研究血管活性肠肽（ＶＩＰ）对大鼠肝癌细胞碱性磷酸酶（ＡＬＰ）和琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）的影响。方法：采用细胞化学方法对大鼠肝癌细胞ＶＩＰ和ＡＬＰ进行染郄定位。应用显微分光光度计对肝癌细胞ＡＬＰ进行定量分析，并用图像分析技术对细胞ＡＤＨ进行定量分析，并用图像分析技术对细胞ＳＤＨ进行定量。结果：培养的大鼠肝癌细胞有明显的ＡＬＰ阳性反，反应产物遍布于整个细胞，胞浆着色较为显著。与对照相比，ＶＩＰ处理后，细     

Inhibitory Effect of Recombinant Endostatin on Angiogenesis and Tumor Growth of Hepatoma

LivercancerisoneofthemostcommontumorsinChina ,themortalityofwhichranksthesecondplaceofallmalignanttumors[1] Thetreatmentoftencomestofailurebecauseofthehighresistancetochemotherapyorradiationandthesevereside effectsinduced Atpresenttheonlycurativeoptionsarepar tialhepatectomyortotalhepatectomywithlivertransplantation Butthechanceforsurgeryisverylimited Someothertreatmentssuchasintratumoralinjectionofethanoloraceticacid ,transarterialcatheterembolization ,andthermaldestructionormi crowavecoagu…