FHIT基因mRNA在良、恶性胸腔积液中的表达

目的:检测FHIT基因mRNA在良、恶性胸腔积液中的表达水平。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对40例良、恶性胸腔积液进行FHIT基因mRNA表达的检测。随机抽取3例FHIT基因的RT-PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定。结果:22例恶性胸腔积液标本中FHIT基因缺失或异常转录的表达率为68.2%(15/22)。18例良性胸腔积液中FHIT基因均正常表达。FHIT基因mRNA在良、恶性胸腔积液中的表达差异显著(P<0.01)。测序结果表明RT-PCR产物确为FHIT基因。结论:胸腔积液中FHIT基因mRNA的检测有望成为鉴别诊断良、恶性胸腔积液的重要方法。     

P16基因甲基化检测对恶性胸腔积液的诊断价值

目的 检测胸腔积液中沉渣细胞p16基因启动子的甲基化状态,探讨p16基因甲基化检测在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的意义.方法 利用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测66例原因不明的胸腔积液患者胸水沉渣细胞p16基因的甲基化状态.结果 66例胸腔积液患者中36例确诊为恶性胸腔积液,30例为良性胸腔积液.恶性胸腔积液沉渣细胞p16基因启动子甲基化阳性率为69.4%(25/36);在良性胸腔积液中为13.3%(4/30);经统计学检验良、恶性胸腔积液组胸水沉渣细胞的p16基因甲基化阳性率差异有统计学意义(x2=20.915,P<0.01).恶性胸腔积液组沉渣细胞的p16基因异常甲基化阳性率明显高于良性胸腔积液组.恶性胸腔积液组沉渣细胞p16基因甲基化检测的敏感性为69.4%,特异性为86.7%,准确性为77.3%.恶性胸腔积液沉渣细胞p16基因甲基化阳性表达与肿瘤的组织细胞类型及细胞分化程度无关(P均>0.05).结论 MSP检测胸腔积液中沉渣细胞p16基因启动子的甲基化状态,是一种有潜力的鉴别胸腔积液良、恶性的辅助诊断方法.     

端粒酶活性的测定在鉴别良、恶性胸腔积液中的价值

目的研究端粒酶在良、恶性胸腔积液中的表达,评价端粒酶在鉴别良、恶性胸腔积液中的价值。方法用端粒重复序列扩增法(TRAP)检测20例恶性胸腔积液和19例良性胸腔积液中端粒酶的表达,分析良、恶性胸腔积液端粒酶表达的差异。结果20例恶性胸水脱落细胞中端粒酶活性检测阳性者9例,阴性11例,端粒酶活性阳性表达率为45%;19例良性胸水脱落细胞中4例端粒酶活性阳性表达,15例阴性,端粒酶活性阳性表达率为21.1%;4例TRAP检测阳性患者中肺结核患者2例,另外2例为肺炎旁胸腔积液;经统计学分析良、恶性胸腔积液患者间端粒酶活性表达无显著性差异。结论本研究结果尚不足以证明端粒酶可作为鉴别诊断良、恶性胸腔积液的生物学标志物。     

PTEN,LKB1基因缺失、突变检测对良恶性胸腔积液鉴别的意义

[目的]探讨检测PTEN,LKB1基因缺失、突变对鉴别良恶性胸腔积液的价值.[方法]提取漏出液组43例、良性胸腔积液组44例、恶性胸腔积液组47例患者胸腔积液中的DNA,采用PCR-SSCP法检测PTEN第5~8外显子、LKB1第1~9外显子缺失、突变情况.[结果]与漏出液组比较,良性胸腔积液组未发现PTEN,LKB1基因缺失或突变;恶性胸腔积液组PTEN基因总改变率为46.8%,LKB1基因总改变率为42.6%,联合检测PTEN,LKB1诊断恶性胸腔积液的灵敏度为78.7%,显著高于胸腔积液细胞学检查的53.2%(P<0.05).[结论]PCR-SSCP技术检测PTEN,LKB1基因缺失、突变可作为鉴别良恶性胸腔积液的辅助方法.     

GAGE基因表达在胸腔积液的鉴别诊断中的意义

目的探讨胸腔积液G-抗原（GAGE）基因表达情况及其在鉴别诊断良、恶性中的意义。方法收集胸腔积液97例,分为A、B、C和D四组,其中A组为结核性胸腔积液组,共41例;B组为其它病因组共10例;C组为恶性胸腔液细胞学检查阳性组,共40例;D组为恶性胸腔液细胞学检查阴性组,共6例。A组与B组合并为良性胸腔积液组．C组与D组合并为恶性胸腔积液组,采用通用引物巢式逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测各组标本GAGE基因表达。结果GAGE基因在良、恶性胸腔积液阳性率分别为3．9％（2／51）、60．9％（28／46）,表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论GAGE基因在鉴别良、恶性胸腔积液中体现出较高的敏感性和特异性,有望成为鉴别良、恶性胸腔积液有效的检测方法之一。     

MN/CA9和Ep-cam基因检测在良恶性胸腔积液鉴别中的价值

目的 探讨MN/CA9和Ep-cam 基因检测对良、恶性胸腔积液鉴别诊断的价值.方法 选择35例恶性胸腔积液(MPE)和30例良性胸腔积液(BPE),采用SYBR Green I FQ RT-PCR检测胸水沉淀细胞中MN/CA9 mRNA、Ep-cam mRNA的表达,胸水找脱落细胞,免疫化学发光法检测胸水CEA水平.结果 MN/CA9和Ep-cam基因在良、恶性胸腔积液中的表达均有明显差异(均P＜0.01).对MPE的诊断,用FQ RT-PCR方法检测MN/CA9 mRNA和Ep-cam mRNA的敏感性(SN)均高于其它两项检查,差异均有统计学意义(均P＜0.05),而特异性(SP)无统计学差异(均P ＞0.05).细胞学阴性的MPE,MN/CA9诊断的SN为55.6%,SP为100%;Ep-cam诊断的SN为61.5%,SP为100%;两者联合检测的细胞学阴性MPE的SN为76.9%,SP为100%.结论 SYBR Green I FQ RT-PCR检测MN/CA9和Ep-cam 基因有助于鉴别良、恶性胸腔积液;联合检测MN/CA9和Ep-cam 基因的表达有助于提高细胞学阴性MPE诊断的敏感性.     

铁蛋白和癌胚抗原联合检测在恶性胸腔积液中的诊断价值

目的:探讨铁蛋白(SF)、癌胚抗原(CEA)联合检测在恶性胸腔积液中的诊断价值。方法:铁蛋白、CEA采用放免法,共检测20例良性胸腔积液和14例恶性胸腔积液,同时行细胞学检查。结果:铁蛋白、CEA单项检测的诊断准确性分别为80%、82%,二项联合检测同时阳性的诊断准确性为90%。结论:胸水中铁蛋白、CEA联合检测可提高良恶性胸水鉴别诊断的准确性。     

胰岛素样生长因子-1及癌胚抗原在良恶性胸腔积液中表达的意义

目的　研究胰岛素样生长因子 1(IGF 1)在良恶性胸腔积液表达的水平及临床意义。方法　对 33例良性胸腔积液患者和 32例恶性胸腔积液患者采用双抗体夹心法检测胸腔积液IGF 1,并与胸液癌胚抗原 (CEA)的含量测定对比。结果　恶性胸腔积液组IGF 1水平 ( 110 .2 0nmol/L± 2 0 .5 9nmol/L)显著高于良性组 ( 76 .70nmol/L± 18.95nmol/L) ,P <0 .0 0 1。胸腔积液IGF 1含量测定对恶性胸腔积液的诊断效能略差于CEA。结论　胸腔积液IGF 1的检测在良恶性胸腔积液的鉴别诊断中有一定的临床意义。CEA、IGF 1的联合检测有助于临床诊断     

miR-21、miR-29c和miR-182鉴别诊断良恶性胸腔积液

目的: 评价miR-21、miR-29c和miR-182在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用价值。方法: 应用荧光定量PCR检测65例恶性胸腔积液患者及61例良性胸腔积液患者胸腔积液标本中miR-21、miR-29c和miR-182的表达水平,并比较三者在良、恶性胸腔积液中的表达差异。构建ROC曲线,获取曲线下面积(AUC),确定诊断恶性胸腔积液的临界值,计算敏感度、特异度等指标,并与癌胚抗原进行比较。结果： 恶性胸腔积液中miR 21和miR 182的表达水平均明显高于良性胸腔积液(P<0.05),而miR-29c的表达水平则显著低于良性胸腔积液(P<0.05)。ROC曲线显示miR-21、miR 29c和miR 182的AUC值分别为0.873(95％CI：0.808～0.939)、0.856(95％CI：0.790～0.920)和0.841(95％CI：0.772～0.911),高于癌胚抗原(0.822,95％CI：0.703～0.873)。miR 21、miR 29c和miR 182诊断恶性胸腔积液的敏感度分别为83.1％、78.5％、83.1％,特异度分别为85.2％、81.5％、73.4％,亦高于癌胚抗原诊断恶性胸腔积液的敏感度及特异度(75.4%和71.2%)。联合检测胸腔积液中miR-21、miR-29c、miR-182和癌胚抗原可提高诊断的敏感度(93.8%)和特异度(90.2%)。 结论： miR 21、miR-29c和miR-182有可能成为临床鉴别诊断良恶性胸腔积液的标志物。     

脱落细胞端粒酶活性检测在肿瘤鉴别的价值

目的检测胸腹水、脑脊液（CSF）脱落细胞端粒酶活性，探讨端粒酶对良、恶性肿瘤鉴别诊断的应用价值。方法以TRAP—PCR法对胸腹水和脑脊液脱落细胞进行端粒酶活性的检测。结果肝硬化、结核性腹膜炎胸腹水及脑积水脑脊液脱落细胞一般不能检出端粒酶活性，而癌性胸腹水或恶性脑膜瘸端粒酶阳性率为86．9％，显著高于细胞学检查的阳性率（69．5％）。细胞学阳性的标本端粒酶活性均为阳性。结论端粒酶活性的检测敏感性较高，对体液良、恶性肿瘤有重要的鉴别诊断价值。     

联合检测端粒酶活性、CEA、ADA对诊断与鉴别良恶性胸水的价值

目的 探讨端粒酶活性、CEA、ADA检测对诊断与鉴别良恶性胸水的价值.方法 51例胸水患者经胸水常规细胞学检查,同时用TRAP-PCR-ELISA法对胸水中脱落细胞进行端粒酶活性检测,电化学发光免疫法和氨试剂法测定胸水CEA、ADA.结果 51例胸水患者中12例肺癌胸膜转移,2例乳腺癌胸膜转移,1例脓胸,1例结核性胸膜炎端粒酶活性表达阳性.20例恶性胸水的端粒酶活性水平平均A值、CEA、ADA分别为( 0.980±0.333)、( 45.3±13.3)ng/mL和(11.8±4.0) IU/L,31例良性胸水的端粒酶活性水平平均A值、CEA、A-DA分别为(0.110±0.081)、(3.6±1.2 )ng/mL和(49.8±10.5 )IU/L(P ＜0.001).20例恶性胸水细胞学阳性率45％(9/20),端粒酶活性阳性率70％( 14/20)、特异性93.5％,胸水端粒酶活性、CEA、ADA三项联合检测敏感性和特异性,可分别达95.0％和100％.结论 端粒酶的激活可作为肿瘤的一种生物学特性,在诊断与鉴别良恶性胸水中具有重要的价值,但存在假阴性和假阳性,若与胸水CEA、ADA联合检测对良恶性胸水鉴别诊断意义更大.     

原发性肺癌组织端粒酶hTERT基因表达检测的研究

目的通过检测原发性肺癌组织端粒酶hTERT基因表达水平,探讨其在肺癌中的诊断价值.方法采用相对定量RT-PCR法检测29例肺癌组织,29例癌旁组织,13例非癌性肺疾病组织中端粒酶hTERT基因的表达水平.结果端粒酶hTERT基因在肺癌组织、癌旁组织的表达水平高于非癌性肺疾病组(P＜0.05),在肺癌组织中的表达高于癌旁组织(P＜0.05).结论端粒酶hTERT基因参与了原发性肺癌的病理生理过程.采用RT-PCR法检测组织中端粒酶hTERT基因表达水平有助于临床上肺癌的诊断.     

脱落细胞涂片、DNA图像倍体分析和细胞块及其联合试验对恶性胸腔积液的诊断价值

目的：研究脱落细胞涂片、DNA图像倍体分析、细胞块及其联合检测对恶性胸腔积液的诊断价值,为恶性胸腔积液的诊断及后续治疗提供依据。方法：对300例胸腔积液标本进行DNA图像倍体分析判定胸腔积液的良恶性,离心细胞沉淀进行涂片,并制作细胞块,采用免疫组织化学法判定恶性胸水的来源部位,比较3种方法单独和联合应用诊断胸腔积液的敏感度和特异度。结果：脱落细胞涂片、DNA图像倍体分析和细胞块诊断恶性胸腔积液的敏感度分别为83.13%、84.44%和79.52%,特异度分别为82.95%、86.64%和83.87%;采用平行试验诊断恶性胸腔积液的敏感度为98.79%;系列试验诊断恶性胸腔积液的特异度为99.54%。结论：3种方法联合应用较单独应用可以明显提高恶性胸腔积液的临床诊断效果。     

瘦素与端粒酶对良恶性胸腔积液的诊断价值

目的探讨胸腔积液瘦素浓度、端粒酶活性对良恶性胸腔积液的诊断价值。方法检测29例恶性胸腔积液患者胸液中的瘦素浓度和端粒酶活性,以28例良性胸腔积液作对照。结果恶性胸腔积液中的瘦素浓度较良性者增高,差异有统计学意义(P<0.05);瘦素的敏感性82.76%,特异性92.86%,准确率87.72%;端粒酶的敏感性89.66%,特异性82.14%,准确率85.96%。结论瘦素与端粒酶对恶性胸腔积液的诊断与鉴别诊断有一定的临床价值,联合检测瘦素与端粒酶对恶性胸腔积液诊断具有较高的诊断价值。     

胸水端粒酶和CEA检测对良恶性胸腔积液诊断中的鉴别效果研究（附78例报告）

[目的]研究端粒酶和CEA测定对鉴别良、恶性胸腔积液诊断的辅助效果。[方法]采用酶免疫分析法（enzymeimmunoassay,EIA）和端粒重复序列扩增酶联免疫吸附实验法（TRAP-PCR-ELISA）,分别测定良性胸腔积液38例（简称良性组）和恶性胸腔积液40例（简称恶性组）中的端粒酶活性和CEA水平。[结果]恶性组端粒酶活性和CEA的阳性率分别为80.00%（32/40）和85.00%（34/40）;良性组端粒酶活性和CEA的阳性率分别为7.89%（3/38）和0.00%（0/38）,恶性组端粒酶和CEA的阳性率均比良性组显高,差异有统计学意义（χ2=40.96、57.26,P＜0.001）。端粒酶活性测定对恶性胸腔积液诊断的灵敏度与CEA相当,差异无显著意义（χ2=0.35、P＞0.05）。联合检测（恶性胸腔积液的诊断标准以其中1项阳性为参照）两项肿瘤标记物,则联合检测的灵敏度得97.50%（39/40）,明显高于CEA和端粒酶单项检测的灵敏度85.00%和80.00%,差异均有统计学意义（χ2=6.13、3.91,P＜0.01）。[结论]端粒酶和CEA测定对鉴别良恶性胸腔积液均有一定的价值,两者联合测定可提高诊断准确率。     

胸水细胞端粒酶活性检测对良恶性胸腔积液的鉴别诊断价值

目的：探讨胸水细胞端粒酶活性对良、恶性胸腔积液的鉴别诊断价值。方法：用改良的PCR-ELISA法检测37例恶性、32例良性胸水细胞端粒酶活性,并与胸水细胞学、癌胚抗原（CEA）诊断结果进行比较。结果：37例恶性胸腔积液中有26例端粒酶活性阳性（26/37）,阳性率为70.27%,高于良性胸腔积液中端粒酶海性表达（2/32,P＜0.01);端粒酶活性检测诊断恶性胸水敏感性为70.27%,特异性为93.75%,与胸水细胞学诊断符合率为54.05%;其敏感性高于胸水CEA诊断结果（敏感性为51.35%)。结论：胸水细胞端粒酶活性检测作为细胞学检查的辅助手段能提高恶性胸水的诊断率,有助于良、恶性胸腔积液的鉴别诊断。