严重急性呼吸综合征患者血清中SARS相关抗体的特异性研究

目的：检测严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中SARS相关抗体的抗原特异性。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IgG抗体，并采用抗原抗体的预孵育，吸附血清中抗原特异性抗体，检测其抗原特异性。结果：SARS患者血清与SARS患者肺组织以及非SARS患者肺组织均有相似的反应性。阳性血清与非SARS患者肺组织孵育后，其中抗SARS患者肺组织抗体被吸收，吸收率为100％。结论：本组SARS患者血清中存在抗肺组织抗体，其对SARS致病机制的意义值得进一步研究。     

严重急性呼吸综合征患者肺组织包被抗原的特异性研究

目的：探讨严重急性呼吸综合征(SARS)肺组织包被抗原在不同个体以及猪、羊、大鼠中的种属特异性。方法：匀浆SARS患者尸检肺组织、非SARS患者肺组织以及猪、羊、大鼠肺组织后分别包被，利用酶联免疫吸附试验(ELISA)，同时检测SARS患者及正常献血员血清中的IgG。结果：SARS患者及正常献血员血清用SARS尸检患者与非SARS患者肺组织包被抗原检测，两种组织包被抗原检测的阳性率间无统计学差异；而用非SARS患者肺组织包被抗原检测的阳性率和用羊、猪、大鼠肺组织包被抗原检测的阳性率均具有统计学差异。结论：SARS患者肺组织及非SARS患者肺组织中存在相同的抗原；其他动物中可能也存在该抗原，但可能因为其他抗原干扰而不适于用该方法检测。     

SARS相关抗肺自身抗体产生机制的初步研究

目的:检测严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中抗SARS病毒抗体与肺组织的反应性.方法:采用酶联免疫吸附法检测SARS患者恢复期血清中抗SARS病毒抗体,并采用肺组织与抗体共同孵育的方法,吸附抗SARS病毒抗体中同肺组织反应的SARS相关抗体.结果:与肺组织共同孵育后,抗SARS病毒抗体被部分中和,中和率为13.6％～32.2％.结论:部分抗SARS病毒抗体可以与肺组织反应,SARS病毒抗原同肺组织抗原有部分同源性.机体对SARS病毒抗原和肺组织的交叉免疫性可能是SARS相关抗肺自身抗体产生的原因.     

传染性非典型肺炎患者体液免疫特征初步研究

目的：探讨传染性非典型肺炎(severe acute respiratory syndrome，SARS)患者特异性体液免疫特征。方法：采用ELISA技术检测SARS患者血清中特异性IgG和IgM水平。结果：SARS患者住院期间血清特异性IgG水平持续升高，阳性检出率为77．3％；特异性IgM抗体水平住院3周内持续升高，第3周达到最高值，阳性检出率达60．O％，第4周则迅速下降。SARS患者血清IgM阳性出现时间早于IgG 1周。结论：SARS患者血清中均存在特异性IgG抗体，而特异性IgM只存在70％～80％患者血清中。SARS特异性抗体产生的时间和变化特点相似于其它传染性疾病。     

SARS患者病原学诊断及病毒传播规律研究

目的探讨血清抗SARS—CoV特异性LgG、IgM；外周血单核细胞、漱口液以及粪便SARS—CoV特异性套式RT-PCR检测SARS—COV RNA在SARS确诊中的意义，并通过研究其系列标本，进一步探讨SARS—CoV特异性IgG、IgM出现规律及病毒传播规律。方法临床诊断SARS患者28例，1周采集2次血清、大便及漱口液系列标本。ELISA测定血清抗SARS—CoV特异性IgG、IsM，套式RT—PCR检测外周血单核细胞、漱口液以及粪便SARS—CoV RNA。结果血清SARS—COV—IgM阳性率为50％(14／28)；SARS—COV—IgG阳性率为78．6％(22／2s)。早期(-10天)IgG可出现；4周阳性率最高；IgG出现晚(11天-)，2—3周阳性率最高；持续时间短(11天-)，4周后大部分患者阴转。PBMC SARS—COVRNA阳性率为32．1％(9／28)，病程10—14天阳性率最高；漱口液SARS—COVRNA阳性率为57．1％(16／28)，大便SARS—COVRNA阳性率为60．7％(17／28)；病程2—3周阳性率最高。85．7％(24／2．8)可确诊SARS；14．3％不能确诊SARS。结论SARS诊断必须加入病原学诊断标准，而且必须结合特异性抗体、外周血单核细胞、漱口液以及大便SARS—CoVRNA检测，综合判断。由于SARS患者特异性抗体出现晚等特点。因此，SARS特异性抗体不能作为早期诊断。SARS患者病程2—3周传染性可能最强，而早期(10天内)传染性可能弱。     

胃肠道腺癌患者血清抗癌胚抗原抗体的检测

目的：探讨胃肠道腺癌患者血清中IgG和IgM抗癌胚抗原(CEA)抗体的情况，评价CEA及IgG和IgM抗CEA抗体的联合检测在胃肠道腺癌诊断中的意义。方法：用放免法检测血清中CEA含量，酶联免疫吸附法(EuSA)检测血清中IgG和IgM抗CEA抗体，用竞争抑制法检测抗体的特异性。结果：胃肠道腺癌患者血清CEA含量升高者(≥15ng／ml)占30．9％(21／68)，IgG抗CEA抗体阳性者占35．3％(2，4／68)，IgM抗CEA抗体阳性者占26．5％(18／68)，CEA及抗CEA抗体的联合检测可使胃肠道腺癌的阳性率提高到60．3％(41／68)；健康对照组血清CEA升高者为0，IgG和IgM抗CEA抗体阳性者占3.3%，(1／30)。结论：胃肠道腺癌患者血清中IgG和IgM抗CEA抗体的检出率较高，这些抗体与血清CEA水平的联合检测可提高胃肠道腺癌的诊断率。     

传染性非典型肺炎患者泪液和血液中特异性抗体检测的对比研究

目的：通过传染性非典型肺炎(SARS)患者泪液病毒特异性抗体的检测，寻找SARS病毒是否通过泪液或眼结膜传播的理论依据，了解泪液和血液中SARS病毒特异性抗体检测结果的一致性程度。方法：用酶联免疫吸附法(ELISA)检测18例不同病程的SARS患者泪波及血清SARS病毒特异性抗体。结果：18例SARS患者泪液中的特异性IgM类和IgG类抗体均为阴性，而同组患者有13例其血液中的特异性IgM类和IgG类抗体呈阳性。结论：SARS病毒可能不通过泪液或结膜传播。     

SARS-CoV抗体实验诊断中的假阳性原因分析

目的：探讨严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)抗体在SARS病原学诊断中的假阳性问题。方法：应用酶联免疫吸附试验(EUSA)和荧光定量RT-PCR技术检测了16l例非SARS患者SARS-Cov抗体的阳性率。结果：59例正常对照中，IgG抗体的阳性率为3．4％(2／59)；40例肿瘤患者中，IgG抗体阳性率为17．5％(7／40)；3l例自身免疫病患者中，IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为6．5％(2／31)和22．6％(7／31)，IgG抗体和IgM抗体同时阳性为6．5％(2／31)；3l例系统性红斑狼疮(SI正)患者中，IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为29．0％(9／31)和58．1％(18／31)，IgG抗体和IgM抗体同时阳性为22．6％(7／31)。IgM和IgG抗体诊断SARS的假阳性率分别为6．8％和21．1％，两种抗体同时诊断SARS的假阳性率为5．6％。经RT—PCR证实上述阳性均为假阳性。结论：两种抗体同时测定可降低诊断的假阳性率，提高诊断的特异性。出现假阳性的原因可能与包被的抗原有关。     

血清学方法检测SARS病毒抗体的效果比较

目的比较血清学方法(间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法)对严重急性呼吸综合征(SARS)患者特异性抗体的检出情况。方法采用间接法和双抗原夹心法分别检测健康人、肺炎患者、肺结核患者、SARS密切接触医务人员和不同时期的SARS患者血清中的特异性抗体水平。结果双抗原夹心法的阳性检出率为64．4％。间接法的阳性检出率为57．5％。双抗原夹心法检测92例健康人有4例阳性，38例SARS密切接触医务人员有2例阳性，而间接法检测健康人和SARS密切接触医务人员均为阴性。结论两种方法检测抗SARS病毒特异性抗体具有较高的一致性。间接法检测SARS特异性抗体的特异性好于双抗原夹心法。     

广州市散发SARS患者及其接触者早期IgG抗体变化规律观察

目的：对广州市再次散发的临床诊断为严重急性呼吸道综合征(SARS)患者早期IgG抗体变化规律及其接触者有无隐性感染作初步研究。方法：采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA),在SARS散发流行期间采集发热待查的患者117例、接触者88例、正常人群血清进行SARS病毒特异性IgG抗体检测。结果：SARS患者在发病5-15天出现血清特异性IgG,血清滴度随发病天数增加而升高,15—20天后,抗体的滴度达到高峰并维持在1：160-1：320。发热人群组,SARS接触者组和正常对照组的抗体阳性率分别为3．4％,2．3％,0．57％。结论：广州市本次散发SARS患者IgG抗体变化与去年的基本一致,用ELISA法测定SARS病毒IgG抗体水平变化,可适用于SARS患者的早期血清学诊断和流行病学调查研究。本实验提示SARS可能存在隐性感染性。     

严重急性呼吸综合征病毒基因检测和特异性抗体检测的诊断意义分析

目的探讨严重急性呼吸综合征病毒基因检测和特异性抗体检测的诊断意义和价值。方法采用巢式反转录PCR和ELISA法分别检测健康人、普通发热患者、SARS密切接触医务人员及不同时期SARS患者痰标本中SARS病毒核酸和血清标本中特异性抗体IgG和IgM。结果SARS患者住院1～58d期间,采用巢式RT-PCR检测痰SARS病毒基因,52例患者中33例阳性,阳性率63.5%;而采用间接ELISA检测血清抗SARS病毒抗体,52例患者中30例阳性,阳性率为57.7%。2种方法均阳性的有15例,均阴性的有6例。2种病原学诊断方法检测20例正常人、15例发热非SARS患者和20例SARS密切接触医务人员,结果均为阴性。住院1～13d组(92.9%)巢式RT-PCR基因阳性率明显高于ELISA特异性抗体阳性率(7.1%);住院37～58d组巢式RT-PCR基因阳性率(47.4%)则明显低于ELISA特异性抗体阳性率(94.7%)(P<0.01)。结论痰中SARS病毒基因检测可用于SARS的早期诊断,这对于提前确诊和治疗SARS患者,尽早排除疑似病例具有非常关键和现实的意义。血清特异性抗体检测可用于流行病学调查,但对SARS早期诊断和鉴别没有意义。     

SARS病毒基因和特异性抗体检测效果评估

目的 :评估严重急性呼吸综合征 (SARS)病毒基因检测和特异性抗体检测效果。方法 :采用巢式反转录PCR检测健康人、普通发热患者、不同时期 SARS患者痰标本中的 SARS病毒核酸即 RNA;采用酶联免疫吸附试验(EL ISA)法检测上述几组血清标本中的特异性抗体 Ig G和 Ig M。结果 :SARS患者住院 6 d～ 5 7d期间 ,采用巢式 RT-PCR检测痰 SARS病毒基因 ,5 6例患者中 34例阳性 ,阳性率 6 0 .7% ;而采用间接 EL ISA检测血清抗 SARS病毒抗体 ,5 6例患者中 32例阳性 ,阳性率为 5 7.1%。两种方法均阳性的有 15例 ,均阴性的有 6例。2种病原学诊断方法检测2 0例正常人和 15例发热非 SARS患者 ,结果均为阴性。住院 6 d～ 13d组 (92 .3% )巢式 RT- PCR基因阳性率明显高于 EL ISA特异性抗体阳性率 (7.7% ) ;住院 >35 d组巢式 RT- PCR基因阳性率 (36 .8% )则明显低于 EL ISA特异性抗体阳性率 (94 .7% ) (P<0 .0 1)。结论 :痰中 SARS病毒基因检测可用于 SARS的早期诊断 ,这对于提前确诊和治疗SARS患者 ,以及尽早排除疑似病例具有非常关键和现实的意义。血清特异性抗体检测可用于流行病学调查 ,但对SARS早期诊断和鉴别没有意义。     

SARS患者血清特异性抗体的检测及临床诊断意义

目的 :评估临床诊断SARS患者血清特异性抗体产生规律对疾病诊断的意义。方法 :随机选取不同病程临床诊断为SARS的患者 15 6例 ,通过酶联免疫吸附的方法分别检测患者血清中特异性IgG型和IgM型抗体水平 ,分析SARS特异性抗体的产生与疾病病程的关系及对临床诊断的意义。结果 :血清IgG型抗体阳性 118例 ,阳性率为 75 .6 %。IgM型抗体阳性 6 5例 ,阳性率为 4 1.7%。IgG、IgM均为阴性 37例 ,占 2 3.7%。IgG型抗体产生阳性率随病程延长而逐渐增高 ,病程为 5 0～ 6 0d组阳性率最高达到了 94 .5 %。IgM型抗体阳性率也随病程延长而逐渐增高 ,但在病程 4 0～ 5 0d抗体阳性率即达最高 ,随后迅速下降。IgG与IgM抗体阳性率在其各自不同病程差异均十分显著 (P <0 .0 1)结论 :SARS患者血清特异性抗体检测可以作为SARS临床诊断的重要参考指标 ,但目前尚不宜作为诊断的金标准 ,SARS特异性IgG、IgM抗体同为阴性不能完全排除SARS诊断     

儿科患者与医务人员血清冠状病毒(变异株)抗体检测

目的本次严重急性呼吸综合征(SARS)流行中,儿童发病率低、症状轻,推测儿童可能存在保护性抗体.对儿科非SARS患者及医务人员进行血清冠状病毒(变异株)抗体检测,试剂盒为北京华大吉比爱生物技术有限公司冠状病毒(变异株)IgG抗体检测试剂盒(国药试字2003004批号20030501).方法用酶联免疫吸附法(ELISA),检测2001及2003年的168例非SARS患儿的血清标本,及与这些患儿有密切接触的171份医务人员血清标本,以86份成人非感染非医务人员血清标本做对照.结果非SARS患儿2001年77份血清标本阳性32例(41.56%),2003年91份阳性36例(39.56 %),医务人员抗体阳性2例(1.17%),成人对照为0%.儿童冠状病毒(变异株)抗体阳性率有随年龄增长逐渐下降的趋势.抗体滴度中位数在2003年患儿(0.200)、2001年患儿(0.170)、医务人员(0.019)及非感染成人(0.054)间存在极显著性差异.结论在非SARS患儿中冠状病毒(变异株)抗体阳性率高达40%,显著高于成人,与其密切接触的医务人员抗体阳性的检出率与对照组无明显差异,抗体滴度无升高.     

ELISA法检测SARS病毒特异性抗体

目的:研究SARS患者特异性抗体IgG、IgM动态变化规律,评价应用酶联免疫吸附试验(ELISA)在SARS诊断中的可靠性,为科学地防治SARS提供理论依据。方法:采用ELISA方法检测不同发病时间的临床确诊SARS病人234例420份血清,疑似病例127例和其他人群200例的血清SARS病毒抗体,并对45例SARS病人进行了长达1.5a的追踪。结果:在发病10d内抗体的阳性率较低,10d后阳性率较高;IgM的灵敏度是52.80%,特异性是99.40%,符合率78.82%。IgG的灵敏度是73.23%,特异性是98.10%,符合率87.15%。IFA法与ELISA法检测血清抗体的比较,IgM的符合率是68.60%,IgG的符合率是76.74%。对45例SARS患者追踪1.5a,SARS-IgG抗体的滴度仍维持较高的水平。结论:ELISA法适合于SARS发病10d后作为实验室辅助诊断方法。但对弱weak阳性的患者要注意追踪,排除假阳性。     

SARS病人SARS冠状病毒核壳抗原抗体的变化规律

OBJECTIVE: To assess serum antibody responses of patients with severe acute respiratory syndrome (SARS) to nucleocapsid (N) antigen of SARS-associated coronavirus. METHODS: The serum levels of IgM and IgG antibodies to N antigen were measured in 200 healthy blood donors and 13 SARS patients at different time points of acute and convalescent phases using indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with N fusion proteins of SARS-associated coronaviruses. RESULTS: The IgM positive critical value of 0.233 and IgG of 0.239 were selected as the threshold value for positive results that equals the product of 2.1 and the mean IgM and IgG levels of 200 healthy blood donors. In 13 patients with SARS, the antibody responses to N antigen were not detectable in the first week after the onset of symptoms. The IgM and IgG seroprotection rates were 83.3% and 66.7% respectively in the second week, both reaching 100% at the third week. IgM seroprotection rates was 61.5% in the second month, and 38.5% at third month. The IgG peaked one month after the onset and remained at high levels in the following 2 months. CONCLUSION: The antibody responses suggest that N protein of SARS is immunodominant and plays an important role in viral pathogenesis. This ELISA-based test for detecting anti- N antigen may be of significant value for SARS diagnosis.     

Evaluation by indirect immunofluorescent assay and enzyme linked immunosorbent assay of the dynamic changes of serum antibody responses against severe acute respiratory syndrome coronavirus

Background Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) is a newly emerging virus that gives rise to SARS patients with high rates of infectivity and fatality. To study the humoral immune responses to SARSCoV, the authors evaluated lgG and IgM specific antibodies in patients‘ sera.Methods Two methods, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescent assay (IFA) , were used to detect specific serum IgG and IgM against SARS-CoV in 98 SARS patients and 250 controls consisting of patients with pneumonia, heahh-care professionals and healthy subjects. The serum antibody profiles were investigated at different times over one and a half years in 18 of the SARS patients.Results The sensitivity and specificity of ELISA for detecting IgG against SARS-CoV were 100.0% and 97.2% and for IgM 89. 8% and 97.6% respectively; the figures using IFA for IgG were 100.0% and 100.0% and for IgM 81.8% and 100.0% respectively. During the first seven days of the antibodies trace test, no IgG and IgM were detected, but on day 15, IgG response increased dramatically, reaching a peak on day 60,remaining high up to day 180 and decreasing gradually until day 540. On day 15,IgM was detected, rapidly reached a peak, then declined gradually until day 180 when IgM was undetectable.Conclusion The detection of antibodies against SARS virus is helpful in the clinical diagnosis of SARS.     

血清癌胚抗原与溶血磷脂酸联合检测在非小细胞肺癌病人中的应用

目的:探讨血清癌胚抗原（CEA）与溶血磷脂酸（LPA）在非小细胞肺癌病人中的应用价值。方法:选取84例非小细胞肺癌病人（非小细胞肺癌组）、84例肺炎病人（肺炎组）和84名健康体检者（对照组）,分别测定和比较3组人群的血清CEA和LPA水平。分析血清CEA和LPA联合检测对非小细胞肺癌的诊断价值。结果:非小细胞肺癌病人血清CEA和LPA水平显著高于肺炎病人和健康体检者（P<0.01）;腺癌组病人血清CEA阳性率（62.5%）显著高于鳞状细胞癌组和组织未分型组病人（P<0.05）,另外LPA在3组非小细胞肺癌病人血清中的阳性率相当（45.00%～54.55%）,3组间差异无统计学意义（P>0.05）;CEA与LPA在诊断非小细胞肺癌中的效能结果显示,血清CEA单独检测阳性率为31.35%,LPA单独检测阳性率为30.16%,两者联合检测阳性率为38.89%。血清CEA准确度为67.86%,特异度为74.60%,灵敏度为50.40%; LPA准确度为64.68%,特异度为72.62%,灵敏度为42.86%;两者联合检测准确度提高到69.44%,灵敏度提高到60.71%,特异度也达到了70.24%。结论:血清CEA和LPA联合检测有利于提高非小细胞肺癌诊断的灵敏度和准确度,值得临床推广。