感染根管内产黑色素类杆菌的定植

目的:了解感染根管内产黑色素类杆菌(BPB)的定植情况.方法:采用16S rDNA PCR技术检测5种BPB在牙髓炎、慢性根尖周炎患牙根管内的定植情况.统计学分析5种BPB在感染根管内检出率的差异及菌种间相互关系.结果:BPB在感染根管内总检出率为60%,其中牙髓卟啉单胞菌(Pe)、变黑普氏菌(Pn)、牙龈卟啉单胞菌(Pg)、产黑普氏菌(Pm)、中间普氏菌(Pi)检出率分别为38%、32%、30%、18%、14%.Pe、Pn检出率明显高于Pm、Pi(P<0.05).Pe在慢性根尖周炎组检出率(50%)明显高于牙髓炎组检出率(20%)(P<0.05).Pn、Pg、Pi和Pm在慢性根尖周炎组检出率(43.33%、36.67%、16.67%、16.67%)与牙髓炎组检出率(20%、20%、10%、15%)无明显差异(P>0.05).Pg/Pe、Pg/Pn、Pe/Pn之间存在正相关.结论:BPB是感染根管内的优势菌群,是牙髓炎和慢性根尖周炎共有的致病菌.Pg/Pe、Pg/Pn、Pe/Pn常定植于同一根管.     

感染根管中齿垢密螺旋体PCR检测及其与临床症状的关系

目的 了解感染根管中齿垢密螺旋体的定植情况及其与临床症状的关系.方法 采用16S rDNA PCR方法,检测53例慢性根尖周炎患者的感染根管内标本中齿垢密螺旋体.结果 齿垢密螺旋体的检出率为24.53%(13/53),其中有症状组18.18%(6/33),无症状组35.00%(7/20);经Fisher确切概率检验,P＝0.200,两组间齿垢密螺旋体检出率差异无统计学意义.结论 齿垢密螺旋体可能是根尖周炎的病原体之一,但与临床症状关系尚未确定.     

基因芯片技术分析慢性根尖周炎患牙产黑色素菌

目的：利用基因芯片技术分析慢性根尖周炎患牙根管中牙髓卟啉单胞菌（Porphyromonas endodontalis,Pg）、牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,聊和中间普氏菌（Irevotella intermedia,Pi）三种产黑色素菌（blackpigmented bacteria,BPB）。方法：收集76例慢性根尖周炎患牙根管细菌学样本,经DNA抽提,PCR荧光标记后,与点样有忍、段和只三种菌特异寡核苷酸探针的基因芯片进行杂交,用激光共聚焦扫描仪分析杂交结果,最后进行统计分析。结果：慢性根尖周炎患牙中Pe、Pg和Pi三种菌的检出率分别为48．68％,32．89％,42．11％。Pe和Pg两菌同时被检出具有统计学意义（P〈0．05）。Pe和Pg与瘘管显著相关（p〈0．01）,Pe和Pg同时感染与瘘管、脓肿显著相关如〈0．01）。结论：产黑色素菌与慢性根尖周炎关系密切,Pe、Pg和瘘管、脓肿显著相关。用基因芯片技术分析慢性根尖周炎患牙中细菌具有快速、灵敏、高效的特点,而且可以通过增加基因芯片上探针数目扩展被检出菌的种类。     

慢性根尖周炎感染根管内粪肠球菌和白色念珠菌的检测

目的检测未经治疗和根管再治疗的慢性根尖周炎感染根管内粪肠球菌和白色念珠菌,探讨粪肠球菌和白色念珠菌与慢性根尖周炎发病的关系。方法选取未经根管治疗和需根管再治疗的慢性根尖周炎病例各30例,采集根管内细菌样本,提取DNA,分别设计粪肠球菌和白色念珠菌的引物进行PCR检测。结果所有根管内均可检测到细菌。粪肠球菌在慢性根尖周炎根管再治疗病例中检出率为53.3%(16/30),慢性根尖周炎未经根管治疗病例的根管为10%(3/30)。白色念珠菌仅检出2例,均在慢性根尖周炎根管再治疗病例中检出(6.67%),而未经根管治疗病例的检出率为0。结论粪肠球菌和白色念珠菌在原发的慢性根尖周炎感染根管中检出率较低,在再治疗根管中检出率增高,可能与根管治疗时再感染有关。     

慢性根尖周炎感染根管内牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌的定植

目的：研究慢性根尖周炎患牙感染根管内牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌的定植情况,探讨两者间的定植关系.方法：采集31例慢性根尖周炎患者的38颗患牙根管内标本,加热裂解法获得细菌DNA,菌种特异引物16SrDNA PCR法检测标本的牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌,四格表确切概率检验福赛斯拟杆菌在有、无牙龈卟啉单胞菌定植根管内的检出率,比数比（odds ratio,OR）单因素分析两者间的定植关系.结果：牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌的检出率分别为39.5%、26.3%,其中前者单独检出7颗患牙,后者2颗患牙,两者同时检出8颗患牙.福赛斯拟杆菌在有、无牙龈卟啉单胞菌定植根管内的检出率分别为53.33%、8.70%（P=0.0036）,相关分析两菌间在慢性根尖周炎根管中的OR＞2（OR=12）,呈正相关关系（P＜0.05）.结论：牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌为慢性根尖周炎感染根管的定植菌,两者呈正相关定植.     

成人牙面色素沉积与口腔产黑菌关系的研究

目的:对口腔常见4类产黑菌进行检测,研究口腔产黑菌与口腔色素沉积的关系。方法:分别采集18～40岁牙面有色素沉积(非食用含色素食物和吸烟)和无色素沉积各30名受试者的牙菌斑样本,通过DNA抽提和二步PCR扩增方法,对口腔常见4类产黑菌:牙龈卟啉单胞菌(porphyromonas gingivalis,Pg)、牙髓卟啉单胞菌(porphyromonas endodontalis,Pe)、中间普氏菌(porphyromonas intermedius,Pi)、变黑普氏菌(Pre-votella nigrescens,Pn)进行检测。结果:所有样本均检测到目标细菌,30例无色素沉积者的标本中Pg、Pe、Pi、Pn的检出率分别为27%、40%、30%、87%;30例有色素沉积标本中的检出率分别为60%、80%、73.3%、80%。有色素沉积者的Pg、Pe、Pi的检出率明显高于无色素沉积者,差异有统计学意义(P<0.05);Pn二组无统计学差异(P﹥0.05)。结论:牙面有色素沉积者口腔产黑色素杆菌检出率高。     

微小小单胞菌与慢性根尖周炎临床症状的相关性研究

目的：研究慢性根尖周炎感染根管中微小小单胞菌( Parvimonas micra,Pm)的检出情况以及与慢性根尖周炎临床症状、体征的关系。方法采集104名慢性根尖周炎患者的120颗患牙根管内标本,其中包括初次治疗组(A组)和再次治疗组(B组)各60颗患牙。利用16S rDNA聚合酶链反应技术检测标本中的微小小单胞菌16S rDNA的表达;用比值比( OR值)的方法,分析Pm检出率与慢性根尖周炎临床症状及体征的关系。结果慢性根尖周炎初次治疗组检出Pm 24例,再次治疗组检出Pm 3例。2组结果通过比值比分析发现,随检出Pm几率增加,慢性根尖周炎根管内出现恶臭(A组OR=3．35,B组OR=14．29)或根尖出现大于5mm的根尖病变(A组OR=2.75, B组OR=6.70)的几率随之增加,95%可信区间下限>1,结果有显著性差异(P<0．05)。结论无论在初次治疗或再次治疗的慢性根尖周炎感染根管中均有Pm 检出。 Pm 可能在该疾病的发生发展过程中发挥一定作用。     

慢性根尖周炎感染根管内中间普氏菌基因多态性研究

目的:研究慢性根尖周炎感染根管内中间普氏菌是否存在基因多态性。方法:选择13例慢性根尖周炎患者,分别取其感染根管内样本,分离培养,经中间普氏菌特异引物PCR鉴定的克隆,再利用随机引物PCR(AP-PCR)检测其基因多态性。结果:13例慢性根尖周炎样本中3例分离出中间普氏菌,共95株,并检测出3种基因型,其中A、B、C样本各检出一种基因型。结论:慢性根尖周炎患者感染根管内中间普氏菌存在基因多态性。     

维吾尔族慢性牙周炎中牙龈卟啉单胞菌菌毛fimA毒力基因型的分布

目的:分析维吾尔族慢性牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌菌毛fimA毒力基因型的分布情况.方法:收集52例维吾尔族慢性牙周炎患者的龈下菌斑,采用16S rRNA PCR法检测牙龈卟啉单胞菌,并根据菌毛fimA毒力基因型的特异引物,用聚合酶链反应(PCR)检测Ⅱ型fimA和Ⅳ型fimA菌株的分布.结果:16S rRNA PCR法检测牙龈卟啉单胞菌在龈下菌斑中阳性检出率是76.9%.牙周袋PPD＞6 mm位点龈下菌斑标本的P.gingivalis检出率高于4＜PPD≤6 mm采样的位点,2组差异有统计学意义(P＜0.05).牙龈卟啉单胞菌菌毛fimA毒力基因型在牙龈卟啉单胞菌感染者的检出率分别是:ⅡfimA型为37.5%,ⅣfimA型为22.5%.结论:维吾尔族慢性牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌有较高的检出率.牙龈卟啉单胞菌存在fimA毒力基因多态性.     

应用16 S rDNA基因芯片检测4种产黑色素感染根管可疑致病菌

目的:研制快速检测牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,Pe)、中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi)和变黑普氏菌(Prevotella nigrescens,Pn)的芯片系统.方法:利用Genebank中细菌16 S rDNA保守区序列,设计一对通用引物;通过已知Pg、Pe、Pi和Pn的16 S rDNA可变区序列,设计合成对应的特异性寡核苷酸探针.先用通用引物PCR扩增所有标准菌株的DNA并作荧光标记,PCR产物和已点样有Pg、Pe、Pi和Pn4种探针的芯片杂交,并用荧光扫描仪进行分析.结果:芯片上的Pg、Pe、Pi和Pn 4种探针只与相对应的Pg、Pe、Pi和Pn的PCR产物反应,而与其他标准菌株的PCR产物无反应.结论:应用16S rDNA基因芯片可以准确检测Pg、Pe、Pi和Pn,快速、灵敏、特异性高,有望在临床上得到应用.