四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯对百草枯致大鼠肺损伤的干预研究

[目的]探讨四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对抗百草枯(paraquat,PQ)致肺损伤的作用。[方法]54只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(生理盐水)、单纯染毒组(4组)和干预组(4组)。PQ经口给药,剂量40 mg/kg,干预组给予PQ后立即腹腔注射,PDTC 120 mg／kg。在染毒后第3、7、14、2l天各取一组动物进行检查,检测血浆和支气管-肺泡灌洗液(BALF)中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、肺组织匀浆中羟辅氨酸(HYP)含量,并观察肺组织病理改变。[结果]PQ 40mg/kg染毒后血浆和BALF中MDA含量增加,GSH-Px、SOD活力减弱,与对照组相比,相应时点差异有统计学意义(P<0．01);给予PDTC 120 mg／kg干预以后,使GSH-Px与SOD活力升高,MDA含量减少,相应时点差异有统计学意义(P<0．05或P<0．01)。血浆中与BALF中的GSH-Px,SOD活力及MDA含量存在正相关(P<0．05)。同时,单纯染毒组第7、14、21天的HYP含量比对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0．01),但干预组HYP含量较单纯染毒组低。病理观察可见干预组肺组织水肿、出血及炎性细胞浸润程度减轻。[结论]PDTC干预后可以升高SOD、GSH-Px活力,减少MDA的产生和胶原聚集,提示PDTC可能改善PQ中毒所引起的肺损害。     

氧化应激及核因子-κB在百草枯致大鼠肺损伤中的变化

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠氧化应激及肺组织核因子-κB(NF-κB)的变化,探讨四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的治疗机制.方法 SD大鼠144只随机分为对照组6只、PDTC对照组36只、pQ染毒组56只、PDTC治疗组46只.染毒组和治疗组予生理盐水稀释PQ 80mg/kg一次性灌胃后2 h,治疗组给予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射,染毒组予等量生理盐水腹腔注射;对照组和PDTC对照组于生理盐水1 ml/kg灌胃后2 h,PDTC对照组予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射,对照组予等量生理盐水腹腔注射.不同处理后1、3、7、14、25、56 d观察大鼠肺组织病理改变;测定血清中丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、髓过氧化物酶(MPO)活力;测定肺组织中羟脯氨酸(Hyp)含量及NF-κB p65的表达.结果 与对照组比较,染毒组血清中MDA含量和MPO活力升高,GSH-Px、CAT、SOD活力降低,相应时点差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);肺组织NF-κB活性在1、3、7、14 d明显升高,肺组织Hyp含量在14、28、56d明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01).PDTC治疗组血清中MDA含量降低,GSH-Px、CAT、SOD活力升高,与染毒组比较,相应时点差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),在14 dMPO活力为(119.56±21.23)U/L,明显低于染毒组,差异有统计学意义(P<0.05);与染毒组比较,治疗组在1、3、7 d肺组织中NF-κB活性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);治疗组肺组织中Hyp含量在28、56d分别为(0.89±0.05)、(0.93±0.13)μg/mg,明显低于染毒组,差异有统计学意义(P<0.01);病理检查结果显示,治疗组肺组织炎症及纤维化程度均较轻.结论 氧化应激及NF-κB活化是参与PQ致肺损伤的重要机制;PDTC能纠正氧化还原失衡,抑制NF-κB活化,减轻PQ中毒大鼠的肺损伤.     

阿托伐他汀对百草枯中毒损伤肺组织MMP-9及TIMP-1表达的调控

目的 研究阿托伐他汀对大鼠百草枯中毒所致肺损伤的保护作用及其对基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂(TIMPs)的影响。 方法 取45只雄性Wister大鼠,随机数字表法分为对照组、染毒组、治疗组,每组各15只。染毒组及治疗组均以百草枯50 mg/kg灌胃建立大鼠肺纤维化模型;治疗组每日给予阿托伐他汀20 mg/kg。分组后分别于灌胃7、14、28 d后观察大鼠一般情况并解剖,取肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,光镜观察。用免疫组化、RT-PCR、Western-blot等方法检测肺组织中MMP-9及TIMP-1水平。用RT-PCR法检测肺组织成纤维细胞中MMP-9及TIMP-1水平。用ELISA法检测血清中MMP-9及TIMP-1水平。 结果 HE染色结果显示,染毒组有明显的肺损伤,治疗组肺损伤较染毒组减轻。治疗组肺组织中MMP-9、TIMP-1表达量高于正常对照组,但低于染毒组。染毒组动物血清中的MMP-9的浓度在肺泡炎症阶段(7 d)最高,14 d、28 d后呈下降趋势,但均高于治疗组。治疗组血清中的MMP-9的浓度低于染毒组,但差异无统计学意义(P>0.05),相同时段三组TIMP-1浓度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。各组动物肺组织成纤维细胞中,治疗组表达量低于染毒组,高于对照组。 结论 阿托伐他汀具有抑制百草枯中毒大鼠肺内MMP-9、TIMP-1的表达上调的作用。阿托伐他汀对血液中系统分泌的MMP-9、TIMP-1的浓度无显著影响。     

急性百草枯中毒大鼠肺组织中MMP-2和 MMP-9表达的变化研究

[目的]观察急性百草枯（PQ）中毒大鼠肺组织中基质金属蛋白酶（MMP-2和MMP-9）的表达变化,探讨其在百草枯中毒致肺纤维化中的表达及意义。[方法]SD大鼠50只,随机分为染毒组和对照组,染毒组用PQ按50mg/kg灌胃染毒,对照组代以等剂量生理盐水灌胃。灌胃后1,3,7,14和28d分离和提取肺间质成纤维细胞,应用免疫细胞化学和逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）方法,观察其MMP-2,MMP-9蛋白及其 mRNA的动态变化。[结果]①PQ灌胃后1d成纤维细胞MMP-2表达增高,7d达高峰,为对照组的3.187倍（t=23.667,P﹤0.001）;MMP-9在PQ灌胃作用后1d表达增高,7d达对照组的3.503倍（t=11.399,P﹤0.001）;②MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的转录从PQ灌胃后1d就开始升高。[结论]PQ灌胃后,肺间质成纤维细胞上调MMP-2和MMP-9的表达,损伤肺泡基底膜,启动肺纤维化的发生。     

大剂量氨溴索对百草枯中毒所致大鼠急性肺损伤的影响

目的探讨大剂量氨溴索对百草枯（PQ）中毒所致大鼠急性肺损伤的影响及其可能机制。方法136只大鼠随机分为对照组（24只）、氨溴索治疗组（治疗组，56只）和PQ染毒组（PQ组，56只）。对照组腹腔注射生理盐水1、25ml／kg，PQ组和治疗组均予腹腔注射体积分数为2％的PQ溶液25mg／kg，治疗组在PQ染毒后即刻腹腔注人含盐酸氨溴索（35mg／kg）的生理盐水溶液（1．25ml／kg），每日注射1次，分别在不同处理后第1、3、5和7天时处死大鼠。观察血液及肺泡灌洗液（BALF）中白细胞总数和中性粒细胞百分比的变化、BALF中蛋白含量、血浆和BALF中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）活力，并进行肺组织病理学检查及超微结构观察。结果PQ组血液及BALF中白细胞总数、蛋白含量明显高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）；7d时PQ组血浆中MDA含量为（8．12±1．12）nmol／ml，明显高于对照组，GSH-Px活力为（1256．8±133．2）U／ml，明显低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01）。治疗组血液及BALF中白细胞总数、蛋白含量明显低于PQ组，差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈O．01）；7d时治疗组血浆中MDA含量为（4．86±0．75）nmol／ml，明显低于PQ组，GSH—Px活力[（1509．5±183．0）U／ml]及SOD活力[（3903．2±374、7）U／ml]，明显高于PQ组，差异均有统计学意义（P〈0．01）。光学显微镜及电子显微镜观察，应用大剂量氨溴索后肺组织损伤程度减轻。结论大剂量氨溴索可减轻PQ中毒所致大鼠急性肺损伤，在一定程度上能影响PQ中毒所致急性肺损伤的发生和发展。     

地塞米松预处理对大鼠光气吸入性肺损伤基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 探讨地塞米松对大鼠光气吸入性急性肺损伤(ALI)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响.方法 将SD大鼠随机分为3组:正常对照组(吸入与光气染毒组同等流量的空气)、光气染毒组(吸入8.33 mg/L的光气)、地塞米松预处理组(尾静脉注入2.5 mg/kg地塞米松1 h后,吸入8.33 mg/L的光气).染毒2 h后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)测定中性粒细胞细胞数、蛋白含量和肺湿/干重比(W/D).用放射免疫法测定各组血清和BALF中MMP-9水平.进行肺组织的病理学检查,用免疫组化法和实时定量聚合酶链反应(PCR)测定MMP-9表达的变化.结果 与染毒组比较,预处理组大鼠肺W/D、BALF中中性粒细胞数和蛋白含量明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).与染毒组[血清:(9.439±0.100)μg/L、BALF:(20.640±0.446)μg/L]比较,预处理组MMP-9含量[血清(4.799±0.043)μg/L、BALF:(15.052±0.029)μg/L]明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).与染毒组(2.789±0.282)比较,预处理组MMP-9mRNA的表达量(1.183±0.260)明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).染毒组肺泡壁明显充血、增厚,肺泡壁和肺间质内可见较多白细胞浸润以及肺泡结构破坏;预处理组肺泡结构较为清晰,肺泡壁稍增厚,伴少量炎性细胞浸润.正常对照组大鼠肺、支气管组织中MMP-9蛋白表达呈弱阳性,染毒组MMP-9蛋白表达呈强阳性,预处理组肺、支气管组织中MMP-9蛋白表达明显减弱.结论 地塞米松能有效地保护大鼠光气吸入性ALT,可能通过抑制MMP-9表达而达到肺保护作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of dexamethasone on expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in rats with acute lung injury induced by phosgene. Methods The rats were randomly divided into 3 groups: normal control group that consists of the rats with air exposure, phosgene group that consists of the rats with phosgene exposure and dexamethasone group that consists of the rats with phosgene exposure after 2.5 mg/kg dexamethasone being injected. Wet and dry ratio of the lung (W/D) was calculated, and leukocyte count and total protein content of bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were recorded at 2 h after exposure. The concentrations of MMP-9 in the serum and BALF were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. The pathologic changes of lung tissues were observed under light microscopy. The immunohistochemistry and the RT-PCR were used to detect the contents of MMP-9 in the lung tissue. Results Compared with phosgene group, the lung W/D, protein content and WBC count in of BALF dexamethasone group was significantly decreased (P＜0.01). MMP-9 levels of the serum and BALF in dexamethasone group were (4.799±0.043) μg/L and (15.052±0.029) μg/L, respectively, which were significantly lower than those [(9.439±0.100) and (20.640±0.446) μg/L] in phosgene group (P＜0.01). Compared with phosgene group (2.789±0.282), the expression level(1.183±0.260) of lung M MP-9 mRNA in dexamethasone group was significantly lower than that in phosgene group (P＜0.01).Histological experimental results showed the marked hyperemia and thickening of alveolar wallsand stroma cells infiltrating and more visible alveolar structure damage of alveolar walls in phosgene group while the alveolar structure and the alveolar walls were clear and slightly thickened with inflammatory cells in dexamethasone group. Immunohistochemical results showed that MMP-9 protein expression levels of lung and brochus tissues in normal control group and dexamethasone group were weakly positive, which in phosgene group were strongly positive. Conclusion Dexamethasone has a beneficial effects on acute lung injury induced by phosgene in rats due to the inhibiting MMP-9.     

地塞米松预处理对大鼠光气吸入性肺损伤基质金属蛋白酶-9表达的影响

Objective To investigate the effects of dexamethasone on expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in rats with acute lung injury induced by phosgene. Methods The rats were randomly divided into 3 groups: normal control group that consists of the rats with air exposure, phosgene group that consists of the rats with phosgene exposure and dexamethasone group that consists of the rats with phosgene exposure after 2.5 mg/kg dexamethasone being injected. Wet and dry ratio of the lung (W/D) was calculated, and leukocyte count and total protein content of bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were recorded at 2 h after exposure. The concentrations of MMP-9 in the serum and BALF were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. The pathologic changes of lung tissues were observed under light microscopy. The immunohistochemistry and the RT-PCR were used to detect the contents of MMP-9 in the lung tissue. Results Compared with phosgene group, the lung W/D, protein content and WBC count in of BALF dexamethasone group was significantly decreased (P＜0.01). MMP-9 levels of the serum and BALF in dexamethasone group were (4.799±0.043) μg/L and (15.052±0.029) μg/L, respectively, which were significantly lower than those [(9.439±0.100) and (20.640±0.446) μg/L] in phosgene group (P＜0.01). Compared with phosgene group (2.789±0.282), the expression level(1.183±0.260) of lung M MP-9 mRNA in dexamethasone group was significantly lower than that in phosgene group (P＜0.01).Histological experimental results showed the marked hyperemia and thickening of alveolar wallsand stroma cells infiltrating and more visible alveolar structure damage of alveolar walls in phosgene group while the alveolar structure and the alveolar walls were clear and slightly thickened with inflammatory cells in dexamethasone group. Immunohistochemical results showed that MMP-9 protein expression levels of lung and brochus tissues in normal control group and dexamethasone group were weakly positive, which in phosgene group were strongly positive. Conclusion Dexamethasone has a beneficial effects on acute lung injury induced by phosgene in rats due to the inhibiting MMP-9.     

阿托伐他汀钙对百草枯致肺纤维化大鼠MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的 探讨阿托伐他汀钙对百草枯致肺纤维化大鼠MMP-9及TIMP-1表达的影响。方法 45只SPF级雄性Wister大鼠,随机分为3组,正常对照组、百草枯组(模型组)、阿托伐他汀干预组(治疗组),每组15只。百草枯组和阿托伐他汀干预组均以百草枯50 mg/kg灌胃染毒建立大鼠肺纤维化模型。阿托伐他汀干预组给予阿伐他汀钙的生理盐水悬混液20 mg/kg灌胃给药,给药体积为200 uL。分别于中毒后第7、14、28天随机处理各组中5只大鼠进行实验观察。分离右肺组织(1 cm×1 cm×0.3 cm),96 h后行石蜡包埋切片。RT-PCR检测肺组织MMP-9、TIMP-1mRNA的表达,Western-blot检测肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白的表达。结果 MMP-9 mRNA表达结果阿托伐他汀钙治疗组高于对照组,但低于模型组。TIMP-1 mRNA表达结果正常对照组稍低,其余两组差别不大。肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白的表达,百草枯中毒大鼠肺组织内MMP-9及TIMP-1的表达明显高于对照组及治疗组,治疗组两个细胞因子表达高于对照组,但显著低于模型组。结论 阿托伐他汀可以抑制百草枯中毒大鼠肺内MMP-9/TIMP-1的表达,拮抗百草枯所致的肺纤维化。     

百草枯致大鼠急性肺损伤时肺组织c-Jun氨基末端激酶和c-Jun的变化

目的 探讨百草枯(paraquat,PQ)致大鼠急性肺损伤时肺组织中c-Jun氨基末端激酶(JNK)和c-Jun的变化.方法 将46只大鼠随机分为对照组(10只)、PQ组、PQ+锌原卟啉(ZnPP)组和PQ+氯血红素(Hm)组(每组各12只).PQ组大鼠腹腔注入PQ(25 mg/ks)制造PQ中毒模型;对照组大鼠腹腔注入等量生理盐水;PQ+ZnPP组大鼠在注入PQ前10min注入ZnPP(10mg/kg,10ms/ml);PQ+Hm组大鼠在注入PQ前10min注入Hm(10mg/kg,10mg/ml).不同处理后3 d,取肺组织常规HE染色和取血测定血浆中丙二醛(MDA)含量;检测肺组织中CO含量;反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织血红素氧合酶.1(HO-1)mRNA的表达;Western免疫印迹分析肺组织JNK和c-Jan磷酸化的情况.结果 PQ组、PQ+ZnPP组和PQ+Hm组血浆中MDA含量、肺组织中CO含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),与PQ+ZnPP组比较,PQ+Hm组MDA含量降低,而肺组织中CO含量明显升高,差异均有统计学意义(P0＜.01). PQ组、PQ+ZnPP组和PQ+Hm组的肺组织HO-1mRNA表达、JNK(55.24±9.34、38.15±10.71、128.55±19.43)及c-Jun(23.16±4.85、15.49±3.13、44.89±10.37)磷酸化相对水平较对照组均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01),PQ+Hm组肺组织的HO-1mRNA表达明显高于PQ组,PQ+Hm组JNK及c-Jun磷酸化水平高于PQ组和PQ+ZnPP组,而PQ+ZnPP组JNK及c-Jun磷酸化水平与PQ组相比又有所降低,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论 在PQ致大鼠急性肺损伤时,内源性CO产生增加.肺组织中JNK和c-Jan的磷酸化水平明显升高.     

MMP-2及TIMP-1、TIMP-2在自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）和金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在早孕自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达及意义。方法采用S-P免疫组织化学染色的方法,对31例自然流产者（实验组）及36例人工流产者（对照组）绒毛及蜕膜组织中MMP-2和TIMP-2的表达进行分析;采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对绒毛组织中MMP-2及TIMP-1的mRNA表达量进行分析。结果无论是绒毛组织还是蜕膜组织中MMP-2的表达两组之间均无统计学差异;但实验组两种组织中的TIMP-2强阳性（Ⅲ级）表达率均显著低于对照组（P〈0.01）;实验组TIMP-1 mRNA的表达量显著低于对照组（P〈0.05）。结论自然流产绒毛和蜕膜组织中MMP-2的正常表达及TIMP-1、TIMP-2的低表达导致MMP-2与TIMP-1及TIMP-2的比值升高,该比值失调可能与自然流产发生有关。     

MMP-9及TIMP-1在妊娠高血压综合征患者母胎界面的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶(m atrix m etalloprote inases,MMP)-9及其组织抑制物(tissue inh ib itor of m etallo-prote inases,TIMP)-1在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织的表达情况及其与妊高征发病的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测48例妊高征(轻度10例、中重度38例)胎盘组织中MMP-9及TIMP-1的表达情况;同时做HE染色观察妊高征时胎盘的病理改变。结果:MMP-9、TIMP-1主要表达于滋养细胞、绒毛间质血管壁及蜕膜组织中。轻度妊高征MMP-9呈阳性表达,TIMP-1蛋白呈强阳性表达;中、重度妊高征MMP-9和TIMP-1蛋白均呈弱阳性表达,分别与正常妊娠和轻度妊高征相比表达均减弱,差异有极显著性(P<0.01)。中重度妊高征时胎盘组织绒毛数及间质血管数减少,出现典型的纤维素样坏死。结论:母胎界面MMP-9/TIMP-1表达异常与妊高征发病及胎盘病理改变的发生发展有关。     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1表达的影响

[目的]观察厄贝沙坦对糖尿病(DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。[方法]建立STZ诱导的糖尿病SD大鼠模型,随机分成3组:正常对照组、DM模型组、厄贝沙坦治疗组。各组大鼠采用相应的干预措施处理12周。常规方法检测各组大鼠肾重/体重、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率(UAER),免疫组化法检测肾组织MMP-9、TIMP-1表达,透射电镜观察肾脏超微结构。[结果]DM模型组大鼠肾组织MMP-9的表达较正常对照组明显下调(P﹤0.O1),经厄贝沙坦治疗后的厄贝沙坦治疗组表达明显上调(P﹤0.01),但仍低于正常对照组(P﹤0.01);DM模型组大鼠肾组织TIMP-1的表达较正常对照组明显上调(P﹤0.01),经厄贝沙坦治疗后的厄贝沙坦治疗组表达明显下调(P﹤0.01),但仍高于正常对照组(P﹤0.01)。血糖、UAER、尿素氮、血肌酐、肾重/体重等厄贝沙坦治疗组指标值较DM模型组有所下降(P﹤0.01)。[结论]MMP-9、TIMP-l的表达变化与肾小球细胞外基质(ECM)降解减少相关,可能促进了糖尿病肾病的发生,厄贝沙坦可能通过干预这种表达变化减缓糖尿病肾病的发生和发展。     

MMP-2/TIMP-2在胎膜早破中的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制因子-2(TIMP-2)的表达与胎膜早破发病的关系。方法:通过免疫组织化学方法检测胎膜早破组和正常对照组胎膜中MMP-2及TIMP-2的表达情况。结果:基质金属蛋白酶-2在胎膜早破组胎膜中的表达水平为(137.1333±17.83010),在正常对照组胎膜中的表达水平为(179.3667±16.07200),差异有统计学意义(P<0.01);基质金属蛋白酶抑制因子2在胎膜早破组胎膜中的表达水平为(166.7667±16.86597),在正常对照组胎膜中的表达水平为(173.9000±13.73229),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胎膜中基质金属蛋白酶-2蛋白的高表达可能是胎膜早破的病因之一。     

华蟾素对卵巢癌3AO细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响和意义

目的探讨华蟾素对卵巢癌3AO细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响及临床意义.方法体外培养卵巢癌3AO细胞,不同浓度的华蟾素干预后,应用SABC免疫组化法检测MMP-2和TIMP-2的表达.结果体外培养的卵巢癌3AO细胞可表达MMP-2和TIMP-2;0.25mg/ml华蟾素对卵巢癌3AO细胞MMP-2和TIMP-2的表达无显著影响(P＞0.05);2.5mg/ml华蟾素干预后,卵巢癌3AO细胞MMP-2的表达显著下降,TIMP-2的表达显著升高(P＜0.05);25mg/ml华蟾素与2.5mg/ml华蟾素对卵巢癌3AO细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响无统计学差异(P＞0.05).结论2.5mg/ml华蟾素可显著降调卵巢癌3AO细胞MMP-2的表达,升调TIMP-2的表达,MMP-2和TIMP-2表达的失衡可抑制卵巢癌3AO细胞的侵蚀性生长.     

2型糖尿病大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的变化与糖尿病心肌病变关系

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）大鼠心脏基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制物1（TIMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制物2（TIMP-2）的变化及其在糖尿病心肌病变（Diabetic Cardiomyopathy,DC）发病中的意义.方法 高脂食物喂养、小剂量链脲菌素诱导2型糖尿病大鼠模型.正糖高胰岛素嵌铗技术（EICT）检测两组大鼠胰岛素抵抗情况,葡萄糖输注速率（GIR）表示胰岛素抵抗;测定大鼠体重（BW）、心脏重量（HW）和计算HW /BW;RT-PCR测定两组大鼠MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的mRNA水平,免疫组化法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白水平.结果 糖尿病大鼠GIR明显低于正常对照组（P〈0.01） .糖尿病大鼠心脏：HW和HW /BW明显高于正常对照组（P〈0.05）,Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多（P〈0.01）,MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达增加（P〈0.01）, MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的蛋白含量增加（MMP-2、TIMP-1：P 〈0.05;TIMP-2：P〈0.01）;MMP-2、MMP-9与TIMP-1蛋白水平比值及MMP-2与TIMP-2蛋白水平比值均显著降低.结论 T2DM大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2增加,MMPs/TIMPs比值降低,心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多;心脏MMPs/TIMPs表达改变与心脏间质纤维化有关.     

SiO2刺激矽肺肺泡巨噬细胞对MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的 探讨SiO2对矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1表达的影响.方法 收集矽肺患者肺泡AM,体外经SiO2刺激3、6、12、18、24、36 h,分别用明胶酶谱法和免疫细胞化学方法检测AM中TIMP-1、MMP-9蛋白表达和MMP-9活力.结果 实验组AM中6、12、18、24 h MMP-9的蛋白表达增强,在18 h时最高(积分吸光度值为0.386±0.037),与同期对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组12、18、24、36h AM中MMP-9活力的表达增强,在24 h最强(吸光度值3.061±0.153),与同期对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组与对照组各时间点TIMP-1蛋白表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 体外SiO2刺激矽肺肺泡AM可影响MMP-9蛋白及其活力的表达.     

TGF-β1、MMP-3、TIMP-3在PFD患者阴道壁组织中的表达

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-3(TIMP-3)在女性盆底功能障碍性疾病(PFD)患者阴道壁中的表达及三者与PFD发病的关系.方法 研究组(PFD组)为28例患者阴道壁结缔组织标本,分别为绝经前PFD组17例,绝经后PFD组11例;对照组为22例无压力性尿失禁和盆腔器官脱垂者,分别为绝经前对照组12例,绝经后对照组10例,采用RT-PCR方法测定各组阴道壁组织中TGF-β1、MMP-3、TIMP-3 mRNA的表达.结果 PFD组患者MMP-3的表达较对照组显著升高,两组之间差异有统计学意义(P=0.000<0.01),TIMP-3及TGF-β1的表达较对照组显著下降,两组之间差异有统计学意义(P值分别为绝经前0.035,0.024;绝经后0.016,0.017;均P<0.05).结论 MMP-3高表达,TIMP-3作为MMP-3的抑制剂的低表达以及TGF-β1的低表达,使盆底胶原的降解增加,从而使弹性纤维减少,导致PFD的发生.     

SiO2刺激矽肺肺泡巨噬细胞对MMP-9和TIMP-1表达的影响

Objective To investigate the effect of SiO2 on the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9)and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1)in human silicofic alveolar macrophages (AM).Methods Human alveolar macrophages were collected from a silicotic patient by bronchoalveolar lavage and exposed to silicon dioxide for 3h,6h,12h,18h,24h and 36h.The expression of the MMP-9 in the AM were detected with zymography and immunological method and the expression of the TIMP-1 in the AM with immunological method.Results The expressions of MMP-9 in the AM increased clearly along with the time,reached peak at 24 h when detected with zymography (average optical density:3.061±0.153 vs 2.851±0.164,P＜0.05);and reached peak at 18h when detected with immunological method (average optical density:0.386±0.037 vs 0.322±0.034,P＜0.05).The expression of the TIMP-1 in the AM did not vary when detected with immunological method (P＞0.05).Conclusion SiO2 may affect the expression of MMP-9 and MMP-9 activity in the cultured AM.     

SiO2刺激矽肺肺泡巨噬细胞对MMP-9和TIMP-1表达的影响

Objective To investigate the effect of SiO2 on the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9)and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1)in human silicofic alveolar macrophages (AM).Methods Human alveolar macrophages were collected from a silicotic patient by bronchoalveolar lavage and exposed to silicon dioxide for 3h,6h,12h,18h,24h and 36h.The expression of the MMP-9 in the AM were detected with zymography and immunological method and the expression of the TIMP-1 in the AM with immunological method.Results The expressions of MMP-9 in the AM increased clearly along with the time,reached peak at 24 h when detected with zymography (average optical density:3.061±0.153 vs 2.851±0.164,P＜0.05);and reached peak at 18h when detected with immunological method (average optical density:0.386±0.037 vs 0.322±0.034,P＜0.05).The expression of the TIMP-1 in the AM did not vary when detected with immunological method (P＞0.05).Conclusion SiO2 may affect the expression of MMP-9 and MMP-9 activity in the cultured AM.     

p38MAPK及核因子-κB在百草枯致大鼠肺损伤中的变化

目的观察急性百草枯（PQ）中毒大鼠肺组织中p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）及核因子．κB（NF-κB）的变化，探讨褪黑素（MT）的治疗效果。方法将128只SD大鼠随机分为染毒组60只、治疗组60只和对照组8只，对染毒组以生理盐水稀释PQ50mg／kg，一次性灌胃；治疗组PQ灌胃后的大鼠以MT10mg／kg腹腔注射，每日1次；对照组生理盐水一次性灌胃。于不同处理后1、3、7及14d时分别测定大鼠血清中丙二醛（MDA）含量；电泳迁移率改变分析法（EMSA）检测大鼠肺组织中NF—κB活性；Westernblot检测磷酸化p38MAPK蛋白水平，同时观察大鼠肺组织病理变化。结果染毒组大鼠血清MDA浓度在1、3及7d分别为（4．45±1．23）、（3．77±1．12）及（2．84±0．96）nmol／ml，较对照组明显升高，差异有统计学意义（P〈0．01）；治疗组MDA浓度1、3及7d分别为（2．68±0．85）、（1．97±0．74）和（1．53±0．62）nmol／ml，较染毒组明显降低，差异有统计学意义（P=0.05）。染毒组大鼠肺组织磷酸化p38MAPK蛋白水平及NF-κB活性在各时间点均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。经MT治疗后磷酸化p38MAPK蛋白水平及NF—κB活性均明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组大鼠肺组织病理改变较染毒组明显减轻。结论磷酸化p38MAPK及NF—κB活性在百草枯所致大鼠肺组织中明显增高；MT能降低磷酸化p38MAPK蛋白水平，抑制NF—κB的活化，减轻染毒大鼠肺组织损伤。