乙酰肝素酶2蛋白的表达与胰腺癌浸润、转移的关系及其意义

为探讨乙酰肝素酶2（Hpa2）蛋白与胰腺癌浸润、转移的关系及其临床病理意义，笔者应用免疫组织化学染色法检测26例胰腺癌组织中Hpa2蛋白的表达和微血管密度（MVD）。结果示Hpa2蛋白在正常胰腺组织中不表达，而在胰腺癌组织中的阳性率为69.23%（18/26），在癌旁组织中阳性率为33.33%（7/21），两者差异有显著性（P<0.05）。癌组织MVD为19.47±5.14，癌旁组织MVD为14.17±5.84，差异亦有显著性（P<0.05）。胰腺癌组织中Hpa2蛋白的表达和MVD分别与患者的年龄、性别、肿瘤直径无关（P>0.05），但与肿瘤的临床分期、包膜是否完整、是否有淋巴结转移有关（P<0.05）。Hpa2表达阳性组的MVD［（20.84±4.99）/HP］高于Hpa2表达阴性组MVD［（16.39±4.26）/HP］（P<0.05）。提示Hpa2蛋白可能参与胰腺癌的发生和发展过程，对判断胰腺癌的浸润、转移有一定的参考价值。     

血管内皮生长因子在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)表达与人胰腺癌的血管生成及其生物学特性的关系.方法应用免疫组织化学方法测定了55例人胰腺癌组织中VEGF的蛋白表达和微血管密度(MVD),与临床病理学特征对照分析.结果胰腺癌的微血管密度平均为54.8±18.6;VEGF表达阳性率70.9%,在低分化、有淋巴结转移和Ⅱ-Ⅳ期的病人,VEGF阳性表达率显著高于中、高分化,无淋巴结转移和Ⅰ期的病人(P＜0.05).随访结果证明,VEGF高表达病人术后生存时间比VEGF低表达病人明显缩短(P＜0.01).结论VEGF表达水平能反映胰腺癌细胞的恶性程度,可作为胰腺癌分化、转移与预后分析的指标.     

5 LOXmRNA和VEGFmRNA在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的研究5脂氧合酶（5-LOX）在胰腺癌中的表达及其与血管内皮生长因子（VEGF）的关系.方法用RT-PCR检测5-LOXmRNA和VEGFmRNA在35例胰腺癌新鲜组织中的表达.结果5-LOX mRNA和VEGF mRNA在胰腺癌组织中的表达率分别为74.3%及60%,均与胰腺癌的临床分期有关;VEGF还与胰腺癌的分化程度有关.5-LOX mRNA和VEGF有协同作用（P＜0.05）,呈密切正相关（r=0.5 35,P＜0.01）.Ⅲ～Ⅳ期5-LOX mRNA表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期（P＜0.05）.结论5-LOXmRNA和VEGFmRNA在胰腺癌中表达增高,与临床分期有关.5-LOXmRNA和VEGFmRNA表达呈正相关.     

结缔组织生长因子在肝细胞癌中的表达及意义

目的 探讨结缔组织生长因子（CTGF）在肝细胞癌（HCC）中的表达，分析其临床意义。方法 回顾性分析2011年6月至2018年1月145例肝细胞癌患者作为观察对象。采用免疫组化法检测CTGF表达，分析癌组织、癌旁正常组织CTGF的阳性表达率，比较不同临床特征和病理特征患者CTGF阳性表达率，探讨CTGF表达对患者预后的影响。结果 CTGF在癌组织中的阳性表达率为58.62%，高于癌旁正常组织的24.14%(P<0.05)。TNM分期为Ⅲ期～Ⅳ期、血管浸润、肿瘤分化程度为低分化患者CTGF阳性率高于TNM分期为Ⅰ期～Ⅱ期、无血管浸润、肿瘤分化程度为高分化的患者（P<0.05）。肿瘤内CTGF表达水平越高，患者无病生存率和总生存率则较低（P<0.05）。多因素Cox分析显示，TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、CTGF阳性表达、血管浸润和肿瘤分化程度低是总生存期预后的独立影响因素（P<0.05）;TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、CTGF阳性表达和肿瘤分化程度低是DFS预后的独立影响因素（P<0.05）。结论 CTGF在HCC的浸润转移过程中起着重要作用，CTGF阳性表达预示HCC的不良预...     

碳酸酐酶Ⅱ在结直肠癌中的表达及其意义

目的：探讨碳酸酐酶Ⅱ(CAⅡ)的表达与结直肠癌(CRC)的发生、发展,以及临床病理特征的关系。 方法：Western Blot法检测CAⅡ在12对新鲜配对的CRC和远癌黏膜中的表达。再以免疫组织化学法检测CAⅡ在配对的64对远癌结直肠黏膜和CRC,20个转移淋巴结及27个息肉中的表达,比较各组间表达的差异。分析CAⅡ表达与CRC的部位、分化及临床病理分期间的关系。 结果：Western Blot检测显示远癌黏膜CAⅡ/tubulin灰度比为2.48±1.68,癌组织为1.33±1.28,两者差异有统计学意义（P=0.027）。免疫组化显示CAⅡ的表达评分远癌黏膜为(2.81±0.48)分,息肉（包括增生性息肉和腺瘤）为(2.56±0.51)分,CRC为(1.30±0.89)分;按上述3种组织的顺序评分逐步显著降低（P＜0.05）。在转移淋巴结中为(1.35±0.67)分,表达与配对原发灶相似（P＞005）。CAⅡ的表达在不同部位和分化程度的CRC间差异无统计学意义（P＞0.05）,Ⅲ,Ⅳ期表达与Ⅰ,Ⅱ期无统计学差异（P＞0.05）。 结论：CAⅡ在CRC中表达的下调,是CRC发生中的早期事件,与分化、分期和转移无关。     

胰腺癌中TFPI-2基因的表达及其意义

目的 探讨人胰腺癌中TFPI-2基因表达及其意义.方法 采用RT-PCR及Westernblot技术,检测TFPI-2基因在50例胰腺癌、35例转移灶、8例正常胰腺组织中的表达,同时用Boy-den小室及裸鼠皮下种植瘤模型检测胰腺癌细胞系Panc-1体内、体外侵袭及转移能力.结果 胰腺癌组织及转移灶中TFPI-2 mRNA及相应蛋白表达水平均低于正常胰腺组织(P<0.05).TFPI-2的表达水平与性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级无关,而与临床分期、尤其是有无远处转移及神经侵犯有关.Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织中TFPI-2表达水平低于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);无远处转移、无神经侵犯的胰腺癌组织中TFPI-2表达水平高于有远处转移、有神经侵犯的胰腺癌组织(P<0.05).转染基因胰腺癌细胞系Pane-1-TFPI-2体外侵袭能力下降,无明显肌层浸润及肝、肺转移现象.结论 TFPI-2基因表达的降低与胰腺癌侵袭和转移有关,可能参与胰腺癌的侵袭和转移调控.     

Fibulin-1基因表达与肾细胞癌的关系研究

目的 检测肾细胞癌组织中Fibulin-1基因表达的改变,探讨其相关的临床意义.方法 选取2014年1月至2016年5月本院收治的肾细胞癌患者手术切除种癌组织83例,以及相应的癌旁正常非瘤肾脏组织.SYBR Green 荧光定量-PCR检测癌组织和非癌组织Fibulin-1基因表达量.结果 肾细胞癌肿瘤组织中Fibulin-1基因表达量为(0.176±0.028),显著低于对照非肿瘤肾组织的(0.384±0.052,P<0.01).肾细胞癌肿瘤组织中Fibulin-1基因表达量在不同性别、不同年龄和组织病理类型间差异无统计学意义(P>0.05).有淋巴结转移肿瘤组织Fibulin-1基因表达量为(0.152±0.022),显著低于无淋巴结转移肿瘤组织(0.204±0.035,P<0.05).中、低分化肿瘤组织Fibulin-1基因表达量为(0.160±0.021),显著低于高分化肿瘤组织(0.207±0.036,P<0.05).Ⅲ、Ⅳ期肿瘤组织中的Fibulin-1基因表达量为(0.148±0.019),显著低于Ⅰ、Ⅱ期肿瘤组织(0.199±0.034,P<0.05).结论 肾细胞癌患者fibulin-1基因表达下调,fibulin-1基因表达下调与肾细胞癌有无淋巴结转移、分化程度以及临床分期密切相关.     

全阴囊Ⅲ度烧伤不同方式重建阴囊对生精功能的晚期影响的实验研究

目的:探讨全阴囊Ⅲ度烧伤不同方式重建阴囊对睾丸生精细胞凋亡及bcl-2蛋白表达的影响。方法:以2月龄贵州小型猪为实验动物,雄性40只,雌性24只。雄性随机分正常对照组(Ⅰ),自然愈合组(Ⅱ),植皮组(Ⅲ),皮瓣组(Ⅳ),每组10只。建模10月末雄性对照组及实验组每组6只与同期饲养的雌猪一一配对饲养,配对3周后雌猪继续喂养4个月观察生育情况,雄猪1年末取各组双侧睾丸标本,原位末端标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡指数(AI),免疫组化(SABC法)检测bcl-2蛋白表达。对数据行单因素方差分析。结果:细胞凋亡结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的AI值(x±s)%分别为:7.07±3.50、40.34±4.85、15.14±1.36、39.29±5.73,Ⅰ与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅱ与Ⅳ相比差异无显著性(P>0.05),Ⅲ与Ⅱ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05)。bcl-2蛋白表达结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的bcl-2蛋白表达(x±s)%分别为:75.07±3.74、54.93±4.03、66.85±3.06、53.33±5.22,Ⅰ与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅱ与Ⅳ相比差异无显著性(P>0.05),Ⅲ与Ⅱ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05)。配对喂养结果:Ⅱ、Ⅳ组配种没有成功,Ⅰ组全部配对成功,生育幼猪(10.0±1.18)头,Ⅲ组4头配种成功,生育(9.92±1.31)头,Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅲ组与Ⅱ、Ⅳ组相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅱ与Ⅳ组相比差异无显著性(P>0.05)。结论:全阴囊Ⅲ度烧伤不同方式重建阴囊1年后对生精功能均有抑制作用,导致生精细胞凋亡增加,bcl-2蛋白表达降低,其中植皮重建阴囊对睾丸生精功能影响最小,建议阴囊Ⅲ度烧伤创面采用植皮修复。     

抑癌基因RASSF1A在胰腺癌组织中表达的研究

目的：探讨抑癌基因RASSF1A在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌发生、发展的关系。方法：采用免疫印迹方法检测48例胰腺癌组织及其癌旁（正常）组织RASSF1A基因蛋白的表达水平。结果：癌旁组织RASSF1A蛋白的表达量高于高分化腺癌组织的表达量（P<0.05);高分化腺癌组织RASSF1A蛋白的表达量高于中、低分化腺癌组织（P<0.05)。TNM分期Ⅲ期RASSF1A蛋白的表达量低于Ⅰ,Ⅱ期(P<0.05)。RASSF1A基因蛋白表达与性别、年龄,肿瘤发生部位无明显关系(P>0.05)。结论：RASSF1A表达缺失或低下在胰腺癌的发生、发展中起重要作用。     

胰腺癌微血管密度及血管内皮生长因子表达

目的　探讨胰腺癌组织中微血管密度 (MVD)和血管内皮生长因子 (VEGF)表达及其与淋巴结转移的关系。方法　采用免疫组织化学法及形态半定量方法对 31例胰腺癌和 7例正常胰腺组织进行MVD记数和VEGF表达检测。结果　胰腺癌组织中MVD记数、VEGF表达率分别为 11.0 5± 4.6 2、83% ,明显高于癌旁组织 5 .40± 1.71、2 0 %和正常胰腺组 6 .19± 1.5 6、14% (P <0 .0 1) ;淋巴结转移组MVD记数 ,VEGF表达分别为 13.0 0± 4.45、2 .0 0± 0 .95 ,明显高于无转移组 9.46±4.15、1.0 5± 0 .17和正常胰腺组 6 .19± 1.5 6、0 .14± 0 .38(P <0 .0 1)。MVD与VEGF表达呈正相关 (r =0 .418,P >0 .0 5 )。结论　MVD、VEGF表达高低可作为判断胰腺癌淋巴结转移、预后的指标。     

肝细胞癌的MSCT征象、病理与血管生成的相关性

目的探讨肝细胞癌（HCC）的MSCT征象、病理与血管生成的关系。方法用免疫组化SP法检测48例经病理证实的HCC患者MVD和血管内皮生长因子（VEGF）的表达,分析HCC的MSCT征象（包括肿瘤直径、包膜、瘤内坏死液化、侵袭转移）、病理分级与MVD、VEGF阳性表达率的关系。结果VEGF阳性表达者的MVD高于VEGF阴性表达者（P〈0．01）。HCCⅠ级的MVD、VEGF阳性表达率低于Ⅲ、Ⅳ级,Ⅱ级低于Ⅳ级（P均〈O．05）。包膜不完整、瘤内有坏死液化及有侵袭转移的HCC的MVD及VEGF阳性表达率分别高于包膜完整、瘤内无坏死液化及无侵袭转移者（P均〈0．05）。结论HCC包膜是否完整、瘤内有无坏死液化、有无侵袭转移等MSCT征象与MVD、VEGF表达密切相关,新生血管在HCC的生长、浸润转移中起着重要作用。     

大肠癌临床分期相关蛋白的蛋白质组学研究

目的：筛选与大肠癌临床分期相关的蛋白，为大肠癌分子分期和预后预测提供依据。方法：将不同临床分期大肠癌组织蛋白进行二维凝胶电泳，选择部分差异表达蛋白进行MALDI-TOF质谱分析和生物信息学分析以鉴定差异表达蛋白;免疫组织化学方法验证筛选结果。结果： 建立了不同临床分期大肠癌组织的二维凝胶电泳图谱，其中Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ大肠癌组织平均蛋白质点数分别为970±41,980±32,1010±43,1240±34;以Ⅰ期大肠癌为参照，Ⅱ期大肠癌差异表达蛋白有52.00±12，Ⅲ期大肠癌差异表达蛋白42.00±11，Ⅳ期大肠癌差异表达蛋白72.00±15，通过进行质谱分析和生物信息学查询，鉴定30个显著差异表达的蛋白点，其中Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ均上调的有3种蛋白：AnnexinⅡ,AnnexinⅣ,热休克蛋白27(HSP27)。而仅在Ⅳ期中上调蛋白有1种蛋白,即肝脂肪酸结合蛋白（LFABP)。AnnexinⅡ和肝型脂肪酸结合蛋白表达的免疫组化检测结果与蛋白质筛选结果基本一致。结论：不同临床分期的大肠癌中存在着差异表达蛋白，这些蛋白可能作为大肠癌分子分期和预后的标志物。     

血清透明质酸和层黏蛋白等对肾脏纤维化早期诊断的研究

目的 探讨慢性肾脏病不同分期时血清透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1的变化,初步评价其对肾脏纤维化的早期诊断意义.方法 收集健康对照组以及慢性肾脏病不同分期患者的血清标本,采用放射免疫及酶联免疫吸附法测定各组患者的血清肌酐、尿素氮、肌酐清除率、血清胱抑素C、β2微球蛋白指标水平,同时测定血清透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1指标的变化,分析各组患者血清中透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1与血清肌酐、尿素氮、肌酐清除率、血清胱抑索C、β2微球蛋白血生化等指标的相关性,比较各组患者血清中透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1指标在慢性肾脏病Ⅰ、Ⅱ期中的变化.结果 慢性肾脏病Ⅰ期患者透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1与健康对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).多元相关分析表明,透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1与β2微球蛋白和血清胱抑素C相关(r分别=0.664、0.458、0.566、0.369、0.408,P均＜0.05).结论 随着慢性肾脏病的发展,血清透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、组织基质金属蛋白酶抑制剂1水平逐渐升高,特别是在慢性肾脏病早期(Ⅰ、Ⅱ期)其水平已经升高,可以作为评价慢性肾脏病早期纤维化的标志物.     

Cyr61在结肠癌血管生成中的作用及临床意义

目的研究Cyr61蛋白在人结肠癌血管生成中的作用及临床意义。方法采用免疫组织化学染色法检测人结肠癌肿瘤组织中Cyr61、VEGF和VEGFR2的表达情况,用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞。并计算肿瘤微血管密度（MVD）,用SPSS10．0软件分析Cyr61与VEGF、VEGFR2及肿瘤MVD的相关性。结果（1）Cyr61、VEGF及VEGFR2在50例人结肠癌肿瘤组织中阳性表达率分别为90．0％、70．0％和60．0％,明显高于正常结肠组织（P=0．002,P=O．000,P=0．001）;（2）Cyr61、VEGFR和VEGFR2蛋白阳性表达组微血管密度较阴性表达组高（P〈0．05）;（3）与临床Ⅰ～Ⅱ期或无淋巴结转移病例比较,临床Ⅲ-Ⅳ期和有淋巴结转移的病例Cyr61、VEGF和VEGFR2蛋白表达率较高（P〈0．05）,Cyr61表达与临床分期和淋巴结转移呈正相关（r=0．333,r=0．308,P=O．018,P=0．030）;（4）Cyr61蛋白表达与VEGF和VEGFR2的表达呈正相关（r=0．364,r=0．408,P=0．009,P=0．003）。结论Cyr61可促进结肠癌肿瘤血管生成,其作用机制可能与VEGF／VEGFR2通路有关。     

脑膜瘤复发与微血管密度、血管内皮生长因子表达的关系

目的 探讨脑膜瘤复发与微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达与其复发的相关性.方法 采用免疫组织化学MaxVisionTM法,分别检测复发组脑膜瘤33例和非复发组脑膜瘤26例的MVD和VEGF的表达,分析肿瘤复发与两者的关系.结果 非复发组与复发组脑膜瘤的MVD平均值分别为34.2923±17.2422、71.410±39.475,复发组明显高于非复发组(P<0.05);其中复发组脑膜瘤I级与Ⅱ、Ⅲ级的MVD平均值分别为54.7304±25.3080、109.780±39.642,Ⅱ、Ⅲ级的MVD平均值明显高于I级者(P<0.05).VEGF蛋白表达在复发组脑膜瘤I级的阳性率39.13%(9/23)高于非复发组的阳性率11.54%(3/26)(P<0.05).38例VEGF蛋白表达阴性的脑膜瘤中MVD平均值为37.9263±15.2300,21例VEGF蛋白表达阳性的脑膜瘤中MVD平均值为86.0286±28.7464,VEGF蛋白的表达与MVD平均值呈正相关(r=0.7888,P<0.05). 结论 VEGF和MVD联合检测可作为反映脑膜瘤临床病理特征的指标之一,两者高水平的表达提示复发的可能性较大.     

解偶联蛋白2参与人类精子抗氧化损伤的研究

目的:人类精子对氧化应激非常敏感,解偶联蛋白2(UCP2)存在于多种组织内,通过控制细胞内活性氧(ROS)水平,参与细胞抗氧化应激损伤。本研究通过观察精子UCP2表达对精子膜脂类过氧化物水平和活力的影响,探讨精子的抗氧化机制。方法:应用计算机辅助精液分析对97份精液参数检测,根据a+b级精子百分率分为4组,Ⅰ组25例:a+b级精子>50%;Ⅱ组24例:a+b级精子25%～50%;Ⅲ组24例:a+b级精子10%～25%;Ⅳ组24例:a+b级精子<10%。应用RT-PCR检测精子UCP2mRNA的表达;同时测定精子悬液中膜脂类过氧化反应产物丙二醛(MDA)含量。结果:4组精子UCP2mRNA表达水平分别为1.51±0.24、1.28±0.15、1.17±0.20、0.69±0.18,MDA含量分别为(14.66±2.55)、(16.00±2.09)、(17.44±1.40)、(21.20±3.50)nmol/108精子。UCP2mRNA表达与MDA含量呈负相关(r=-0.633,P<0.01),精子活力较低组UCP2表达显著下降(P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.05)。结论:精子内存在UCP2-ROS调节系统,UCP2参与精子氧化还原调节,在精子抗氧化应激中起重要作用。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测食管癌患者循环肿瘤细胞及其意义

目的 探讨实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(fqRT-PCR)技术评价食管癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)的临床价值.方法 以43例病理确诊的食管鳞癌及10例胸部良性疾病患者为研究对象,将癌胚抗原(CEA)作为检测标志物,应用fqRT-PCR方法定量检测其外周血CEA mRNA表达及拷贝数,评价食管鳞癌患者CTCs状况.结果 食管鳞癌患者外周血CEA mRNA阳性表达率为46.51%(20/43),胸部良性病变患者外周血未见阳性表达;其阳性率随肿瘤TNM分期增高;Ⅲ、Ⅳ期患者CEA mRNA阳性率显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P＜0.05),但Ⅰ、Ⅱ期患者之间及Ⅲ、Ⅳ期患者之间差异无统计学意义(P＞0.05);外周血CEA mRNA拷贝数在Ⅳ期患者明显高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者(P＜0.01);但在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者间其拷贝数差异无统计学意义(P＞0.05).CEA mRNA表达与癌细胞分化程度无明显相关.随访结果:外周血CEA mRNA阳性表达者其转移预测特异性为81.25%(13/16).结论 fqRT-PCR检测食管癌患者外周血CEA mRNA有较高的敏感性和特异性,是监测食管癌CTCs较为可靠的一种方法.