rhG—CSF对Ara—C杀伤急性髓性白血病细胞影响的实验研究

探讨ｒｈＧ－ＣＳＦ对２１例急性骨性白血病细胞体外对阿糖胞苷敏感性的影响。方法采用ＭＴＴ法检测Ａｒａ－Ｃ的细胞毒作用。结果ｒｈＧ－ＣＳＦ可显著增强Ａｒａ－Ｃ对耐药ＡＭＬ细胞的毒性,与对照照相组相比Ｐ〈０．０５;     

IL-3、G-CSF和GM-CSF在体外对阿糖胞苷细胞毒性影响

目的证实基因重组造血生长因子（ｒｈＨＧＦ）与化疗药物联合应用于急性髓性白血病（ＡＭＬ）的治疗是一种新的策略,可能有助于提高化疗药物对ＡＭＬ细胞的杀伤。方法采用对磺硝基四唑（ＩＮＴ）比色法,研究了１７例ＡＭＬ病人和８例正常人的骨髓细胞在体外对阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）的敏感性,分别观察了Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３３种细胞因子对其敏感性的影响。结果ＡＭＬ细胞分别对Ａｒａ－Ｃ敏感性存在着较大差异;Ｇ－ＣＳＦ,ＧＭ－ＣＳＦ,ＩＬ－３３种因子均能增加Ａｒａ－Ｃ对ＡＭＬ细胞的杀伤作用。结论３种细胞因子的作用有很大的异质性,３种ｒｈＨＧＦ均不能增加Ａｒａ－Ｃ对正常骨髓细胞的细胞毒性。     

重组人粒系集落刺激因子对白血病细胞的作用

作者观察了重组人粒系集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）对ＨＬ－６０细胞和原代培养的急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞的作用，结果显示，ｒｈＧ－ＣＳＦ可刺激白血病细胞生长，并诱导部分ＡＭＬ细胞向粒系分化。提示ｒｈＧ－ＣＳＦ对白血病细胞存在着增殖与分化的双重作用，这种作用对改进白血病治疗可能产生重要影响。     

IL—3,G—CSF和GM—CSF在体外对阿糖胞苷细胞毒性影响

目的 证实基因重组造血生长因子（ｒｈＨＧＦ）与化疗药物联合应用于急性髓性白血病（ＡＭＬ）的治疗是一种新的策略，可能有画于提高化疗药物对ＡＭＬ细胞的杀伤。方法 采秀对磺硝基四唑（ＩＮＴ）比色法，研究了１７例ＡＭＬ病人和８例正常人的骨髓细胞在体外对阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）的敏感性，分别观察了Ｇ－ＣＳＦ，ＧＭ－ＣＳＦ，ＩＬ－３３种细胞因子对其敏感性的影响。方法 ＡＭＬ细胞分别对ＡｒａＣ敏感性存在着较大差异     

重组人干细胞因子对人类急性髓系白血病干／祖细胞自我更新作用的实验研究

应用无血清液体一半固体二次培养法，观察了重组人干细胞因子（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｓｔｅｍｃｅｌｌｆａｃｔｏｒ，ｒｈＳＣＦ）对人类急性髓系白血病干／祖细胞（ＡＭＬ－ＣＦＵ）自我更新的影响。认为ｒｈＳＣＦ是一作用阶段早于白介素３（ＩＬ－３）和粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的造血生长因子（ＨＧＦ）。无论单一，还是与其它ＨＧＦ联合，ｒｈＳＣＦ对绝大部分ＡＭＬ患者，均有强大的维持其ＡＭＬ－ＣＦＵ自我更新的作用。但不同ＦＡＢ亚型及ＦＡＢ亚型相同的患者之间，这种维持作用差异较为显著。提示ＳＣＦ在ＡＭＬ病理过程中起重要作用。     

评分法研究复发急性白血病再生耐药现象

目的：建立评价急性髓性白血病（ＡＭＬ）再生耐药的方法。材料和方法：用白血病祖细胞培养（ＣＦＵ－Ｌ）,ＭＴＴ药物敏感试验,细胞周期中Ｓ期 细胞百分比（Ｓ％）,细胞内柔红霉素（ＤＮＲ）测定其荧光指数（ＦＩ）和耐药指数（ＤＲＩ）,ＡＰＡＡＰ法测Ｐ－１７０糖蛋白表达以及半定量ＲＴ－ＰＧＲ检测Ｂcl-ＸＬmＲ表达丰度,评价ＡＭＬ细胞的药物敏感度和增殖情况。首先选取初治ＡＭＬ病例研究评分指标与细胞耐药和细胞生长的     

小剂量粒细胞集落刺激因子治疗急性白血病化疗所致白细胞减少的疗效观察

目的研究小剂量ｒｈＧ－ＣＳＦ对急性白血病（ＡＬ）联合化疗后白细胞减少的治疗作用。方法对ＡＬ化疗后外周血白细胞显著减少,中性分叶核绝对值＜０．５×１０９／Ｌ,且伴有发热和感染者,给予ｒｈＧ－ＣＳＦ７５μｇ／ｄ,皮下注射,共３ｄ～７ｄ。同时给予抗感染治疗。结果小剂量ｒｈＧ－ＣＳＦ治疗后,白细胞在短期内升高,有效率达８７．３％,显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。且ｒｈＧ－ＣＳＦ组感染的持续时间较对照组短（Ｐ＜０．０１）。结论小剂量ｒｈＧ－ＣＳＦ能有效地促进ＡＬ化疗后外周血白细胞的恢复,有利于及时控制感染,值得临床推荐使用     

短程大剂量格拉诺赛特动员APBSC移植(附1例报告)

目的：报导短程大剂量格拉诺赛特（ｒｈＧ－ＣＳＦ）动员外周血造血干细胞,进行自体外周血造血干细胞移植（ＡＰＢＳＣＴ）治疗急性白血病。方法：ｒｈＧ－ＣＳＦ,５００μｇ／ｄ皮下注射４天,第５、６天单采外周血单个核细胞（ＭＮＣ）,行ＣＦＵ－ＧＭ培养,ＣＤ３４＾＋细胞由流式细胞仪检测。于ＭＡＣ方案处理,回输自体外周围血造血干细胞（ＡＰＢＳＣ）。结果：动员后ＣＦＵ－ＧＭ明显增高,ＣＤ３４＾＋细胞增多,骨髓造血     

中剂量阿糖胞苷治疗急性髓细胞性白血病46例疗效观察

目的探讨中剂量阿糖胞苷（ＩＤ－Ａｒａ－Ｃ）对急性髓细胞性白血病（ＡＭＬ）的治疗效果。方法用ＩＤ－Ａｒａ－Ｃ方案对４６例ＡＭＬ患者进行化疗,其中用于完全缓解（ＣＲ）后强化治疗３６例,用于难治、复发ＡＭＬ诱导缓解治疗１０例。结果强化治疗组中位ＣＲ期为１６（３～５６）个月;预期３ａ和４ａ无病生存率（ＤＦＳ）分别为４９．７％及３３．１％。２例（２０％）难治、复发ＡＭＬ病人取得ＣＲ。结论ＩＤ－Ａｒａ－Ｃ用于ＡＭＬ的强化治疗能延长病人的ＤＦＳ,降低复发率;用于难治、复发ＡＭＬ的治疗也有一定效果。     

重组人睫状神经营养因子对肿瘤细胞系体外生长的影响

观察了重组人睫状神经营养因子（ｒｈＣＮＴＦ）对５个肿瘤细胞系（大鼠胶质瘤Ｃ６系，人多形性胶质母细胞瘤ＳＨＧ－４４系，小鼠黑色素瘤Ｂ１６系，人胃粘液腺癌ＭＧＣ－８０３系和人肝细胞癌ＳＭＭＣ－７７２１系）体外增殖的影响。发现ｒｈＣＮＴＦ（２０ｎｇ／ｍｌ～２０００ｎｇ／ｍｌ）可抑制Ｃ６和ＳＨＧ－４４细胞增殖，对Ｂ１６细胞有刺激增殖作用，但对ＭＧＣ－８０３和ＳＭＭＣ－７７２１细胞的增殖无明显影响。结果表明，ｒｈＣＮＴＦ对肿瘤细胞生长的影响是非常复杂的，可能与其参与瘤细胞的生长调节有关     

重组人粒细胞刺激因子在乳癌治疗中不良反应的分析

目的：分析在乳腺癌治疗中重组人粒细胞刺激因子注射液致药物不良反应（ADR）发生的特点。方法：收集并分析2006年1月至2009年11月我科蘑组人粒细胞刺激因子注射液致不良反应病例。结果：重组人粒细胞刺激因子注射液致不良反应,临床表现多数为过敏反应,反应较轻,尚有罕见严重的不良反应。结论：临床应蚕视重组人粒细胞刺激阕子注射液使用的安全性问题。     

Susceptibility of acute myeloid leukemia (AML) cells from clinically resistant and sensitive patients to daunomycin (DNR): assessment in vitro after stimulation with colony stimulating factors (CSFs)

Chemosensitivity of purified AML blasts to daunomycin was examined under conditions of CSF stimulation and compared with clinical outcome of DNR combination chemotherapy. AML blasts from 16 patients were purified, incubated serum-free in the presence of optimal concentrations of a complete cocktail of IL-3, GM-CSF and G-CSF to provoke cell proliferation maximally, and DNR drug sensitivity in vitro was assessed by inhibition of DNA synthesis in response to titrated DNR concentrations. The sensitivity of proliferating AML cells to DNR did not correlate with the clinical response of the patients as identical dose-response curves were obtained for complete responders (n = 6), partial responders (n = 5) and resistant cases (n = 5). As a major part of the AML population was induced to enter DNA synthesis in vitro, these data suggest that the manoeuvre of cell cycle stimulation has abrogated cellular resistance to daunomycin and rendered in vivo, apparently refractory cells susceptible to the anthracycline.     

直肠癌患者白细胞和癌细胞体外抗癌药物敏感相关性探讨

目的：探讨直肠癌患者白细胞和癌细胞体外抗癌药敏相关性。方法：用 Ｍ Ｔ Ｔ 法体外测定直肠癌（１３ 例） 患者白细胞和癌细胞抗癌药物敏感性。结果：患者白细胞、癌细胞对 Ａ Ｄ Ｍ、 Ｃ Ｔ Ｘ、 Ａｒａ Ｃ、 Ｖ Ｃ Ｒ、 Ｍ Ｔ Ｘ 的敏感率没有显著差异,对５ Ｆ Ｕ、 Ｍ Ｍ Ｃ、 Ｄ Ｄ Ｐ 白细胞药敏率显著低于癌细胞（ Ｐ＜ ０００１） 。结论：白细胞、癌细胞体外抗癌药敏感性测定,对于直肠癌病人化疗用药和预防骨髓抑制有一定的临床意义。     

EXPRESSION OF cDNA FOR RECOMBINANT HUMAN GRANULOCYTE COLONY-STIMULATING FACTOR IN ESCHERICHIA COLI AND CHARACTERIZATION OF THE PROTEIN

Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ（ｒｈＧＣＳＦ）ｈａｄｂｅｅｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓａｆａｃｔｏｒｔｈａｔｒｅｇｕｌａｔｅｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｃｅｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔ...     

rhG-CSF对正常供者淋巴细胞亚群及其活化的影响

 目的　研究人重组粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)对供者淋巴细胞亚群及其表面活化标志的影响。方法　应用流式细胞术检测 2 2例异基因造血干细胞供者rhG CSF动员前、中、后外周淋巴细胞亚群的比例及T淋巴细胞活化指标的变化。结果　rhG CSF动员第 4天 ,淋巴细胞数、B淋巴细胞、CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 细胞绝对值均明显升高 ;CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 细胞的比例及CD4 /CD8值动员前、中、后无明显变化。除CD4 + CD2 5 + 、CD4 + CD4 5RO+ 表达动员后降低外 (且于动员停止后第 7天恢复至动员前水平 ) ,其余活化标志的表达无明显变化。结论　rhG CSF可暂时性升高正常供者的淋巴细胞数及降低T淋巴细胞活化水平 ,但于停止动员后 1周恢复至动员前水平     

G-CSP基因治疗对大剂量化疗后结肠癌小鼠中性粒细胞数量和功能的影响

中性粒细胞作为一种重要效应细胞在机体抗肿瘤过程中发挥重要的作用。为了探讨G-CSF基因治疗及大剂量化疗后对荷瘤小鼠中性粒细胞的影响以及G-CSF基因治疗后中性粒细胞在抗肿瘤中所起的作用,我们对G-CSF基因治疗后荷瘤小鼠中性粒细胞的数量和功能进行了研究。结果发现,G-CSF基因治疗与重组G-CSF(rhG-CSF)注射疗法相比,能更明显地提高结肠癌小鼠中性粒细胞的数量、中性粒细胞的吞噬功能、杀伤C-26细胞的活性以及分泌IL-1、TNF、NO水平。对大剂量化疗后的结肠癌小鼠,仍能明显提高中性粒细胞数量、吞噬功能、杀伤C-26结肠癌细胞的活性以及分泌IL-1、TNF、NO水平。表明G-CSF基因治疗比rhG-CSF注射疗法更有效地纠正并提高由于大剂量化疗后引起的外周血中性粒细胞的降低,增强中性粒细胞的杀伤活性,促进中性粒细胞分泌IL-1等细胞因子,发挥直接或间接的抗肿瘤作用。     

Haemopoietic Growth Factors, The Cell Cycle of Acute Myeloblastic Leukaemia Progenitors and Sensitivity to Cytosine Arabinoside

We describe an 'in vitro' model which permits assessment of acute myeloblastic leukaemia (AML) progenitor cells' response to Ara-C alone and in conjunction with recombinant human (rh) cytokines by evaluating cell cycle characteristics of purified AML blast progenitors and their chemosensitivity in clonogenic culture before and after cytokine priming. Parallel investigation of Ara-C/cytokine treatment on normal CFU-GM progenitors was included as these cells are important for post-therapeutic reconstitution of haemopoiesis.

Kinetic and clonogenic findings for AML marrows were extremely variable with G+GM-CSF or IL-3 priming. However, inclusion of rhSCF and resultant synergism with the other cytokines, introduced a pronounced element of consistency in AML results. Normal CFU-GM responded to rhG+GM-CSF or IL-3 with increased kinetic activity and sensitivity to Ara-C. rhSCF synergised strongly with the other factors, causing increased cell cycling and attainment of maximal chemosensitivity 'in vitro'. No correlation was evident between 'in vitro' findings for AML samples, patient FAB types or clinical outcome. This study highlights the fact that both normal and AML cells can be targeted by rh cytokines, particularly when rhSCF is included in priming cocktails.     

Bcl-2反义寡核苷酸增强阿糖胞苷诱导原代白血病细胞凋亡的研究

背景与目的:有研究证实,针对bcl-2mRNA翻译起始区和蛋白编码区的2个有效反义作用靶点的反义寡核苷酸能增强HL-60和K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)、柔红霉素、足叶乙甙的敏感性。本研究观察这两个新靶点的反义寡核苷酸对Ara-C诱导原代培养的急性白血病(AL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞凋亡的影响。方法:用细胞记数法观察细胞的生存情况;免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测细胞Bcl-2蛋白水平;用姬姆萨染色法观察并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:靶向bcl-2mRNA翻译起始区与靶向蛋白编码区的两个反义寡核苷酸分别与Ara-C联合作用AL、CLL细胞48h,细胞的活性受到明显的抑制,分别同无关寡核苷酸(NS-ODN)联合Ara-C组、单用Ara-C组进行比较,差异有显著性(P<0.05)。这两个不同靶点的反义寡核苷酸分别与Ara-C联用均能明显下调AL、CLL细胞Bcl-2蛋白的表达,并且联合作用AL、CLL细胞48h的凋亡细胞百分率分别与NS-ODN联合Ara-C组、单用Ara-C组进行比较,差异有显著性(P<0.05)。与靶向bcl-2mRNA翻译起始区的反义寡核苷酸比较,靶向蛋白编码区的反义寡核苷酸提高AL细胞对Ara-C的敏感性作用要强些(P<0.05)。结论:针对bcl-2mRNA翻译起始区和蛋白编码区两个靶点的反义寡核苷酸能增强Ara-C诱导AL、CLL细胞的凋亡。     

Quantitation of chemosensitivity in acute myelocytic leukaemia

A system for the prediction of clinical response in acute myelocytic leukaemia (AML), based on inhibition of growth of colony forming cells (CFC) was studied. If the product of initial drug concentration and time of exposure (C X T) was constant, the response to adriamycin (Adr) was constant, at T values less than 48 h. No constancy of response to the phase-specific agents cytosine arabinoside (Ara-C) and 6-thioguanine (6TG) was demonstrated with constant C X T (T value range 0.25-48 h). Hence in the predictive test, a 1 h incubation with Adr was employed whilst a continuous exposure to Ara-C and 6TG, with these drugs incorporated in the agar medium, was used. The in vitro sensitivity to Adr, Ara-C and 6TG of 19 AML patients and the predictive value of several parameters of sensitivity were evaluated. 6TG sensitivity was not useful for prediction of remission. Adr sensitivity in vitro made a greater contribution to prediction of remission than did Ara-C sensitivity. Seventy-nine percent of patients were correctly classified if Adr data alone were considered. A multivariate function including Adr and Ara-C results was obtained which resulted in 84% of patients correctly classified as sensitive or resistant to the agents received in remission-induction therapy.     

化疗药物诱导急性白血病原代细胞凋亡的研究

目的：探讨化疗药物诱导急性白血病（AL）原代细胞凋亡的时间,剂量,效应,关系,方法：以成人AL原代细胞为研究,采用高,中、低3种浓度梯度,模拟人体应用HHar,Ara-C和ACR后的最大血液浓度,应用一系列经典方法检测细胞凋亡,并分析得出相应的时间,剂量,效应关系。结果：HHar,Ara-C具有时间－效应及剂量－效应线性趋势,而CR低剂量组诱导细胞凋亡的能力大于高剂量组,并且有时间－效应线趋势;高剂量组HHar,Ara-C诱导细胞凋亡的能力大于高剂量组ACR,而低剂量组ACR诱导细胞凋亡的能力大于低剂量组HHar及Aar-C,3种花物对AML原代细胞诱导凋亡的效果优于对ALL原代细胞,结论：AL原代细胞对细胞凋亡的敏感性也是决定化疗效果的关键因素。