瑞芬太尼预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的观察瑞芬太尼预处理对大鼠心肌缺血再灌损伤的影响。方法建立50只大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。随机分为对照组(CON组)、缺血预处理(IPC)组和瑞芬太尼预处理(RPC) 组,RPC组根据瑞芬太尼不同给药剂量又分为RPC1、RPC2、RPC3、RPC4、RPC5组,分别以0.2、0.6、2、6 和20μg·kg-1·min-1速率静脉泵注5 min,停止5 min,重复进行3次。于缺血前30 min、缺血30 min、再灌注120 min时记录心电图、收缩压、平均动脉压(MAP)、HR,计算收缩压与HR乘积(RPP)。再灌注120min时取出大鼠心脏,称心脏湿重,并制作心肌病理切片,计算左心室(LV)、右心室(RV)、缺血危险区(AAR)和梗死区(IS)的面积及体积,计算LV与RV体积之和、IS面积与AAR面积之比(IS/AAR)。结果与CON组比较,RPC2、RPC3、RPC4和RPC5组缺血30 min时MAP降低(P<0.05)。IPC、RPC1、RPC2、RPC3、RPC4、RPC5组IS和IS/AAR降低(P<0.05或0.01),心脏湿重、LV与RV体积之和、AAR 体积差异无统计学意义(P>0.05)。各组HR、RPP比较差异无统计学意义(P>0.05)。瑞芬太尼剂量-效应关系Sigmoidal方程为:Y=15.18+17.76/[1+10(-2.75-X)],ED50为2.689μg·kg-1·min-1。结论瑞芬太尼可模拟心脏缺血预处理作用,对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

异氟醚预处理和异丙酚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 评价异氟醚预处理和异丙酚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性Wistar大鼠36只,体重250～300 g,随机分为4组(n=9):缺血再灌注组(I/R组)、异氟醚预处理组(Ⅰ组)、异丙酚预处理组(P组)和异氟醚预处理联合异丙酚预处理组(I+P组).Ⅰ组异氟醚预处理方法:吸入1.6%异氟醚10 min,停止吸入5 min,共重复2次;P组异丙酚预处理方法:静脉输注异丙酚37.5 mg·kg~(-1)·h~(-1) 10 min,停止输注5 min,共重复2次;I+P组同时进行异氟醚预处理和异丙酚预处理.预处理后立即结扎左冠状动脉前降支60 min,随后松开进行再灌注,I/R组只进行缺血再灌注.再灌注120 min时每组取1只大鼠,取心肌组织,透射电镜下观察心肌细胞超微结构;各组其余大鼠处死后,取左心室,采用TUNEL法测定心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数,并测定心肌细胞线粒体活性氧(ROS)水平.结果 各组均可见凋亡小体,I组、P组和I+P组心肌损伤程度轻于I/R组.与I/R组比较,I组、P组和I+P组心肌细胞凋亡指数和ROS水平降低(P＜0.05),而I组、P组和I+P组间上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚预处理或异丙酚预处理及两种方法联合应用时减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的效应相似.     

烟碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

Objective To investigate the effects of nicotine on myocardial iscbemia-reperfusion (IR) injury in rats. Methods Seventy-four male SD rats weighing 200-250 g were randomly divided into 5 groups: group Ⅰ sham operation (group S, n=10), group Ⅱ IR (n = 16), group Ⅲ nicotine 400 μg/kg (group N1,n = 16), group Ⅳ nicotine 40 μg/kg (group N2, n = 16) and group Ⅴ nicotine 400 μg/kg + a-bungarotoxin(group a-BGT, n = 16). Myocardial ischemia was induced by occlusion of left anterior descending branch (LAD) of coronary artery for 30 min followed by 60 min of reperfusiou. LAD was exposed, but not occluded in group S. Nicotine 400 and 40 μg/kg were injected iv via the right jugular vein in group N1 and N2 respectively, and a-bungarotoxin 1.0 μg/kg and nicotion 400 μg/kg were injected iv via the fight jugular vein in group a-BGT at 30 min before myocardial ischemia. Equal volume of normal saline was injected instead in group S and IR. Six animals in each group were killed at 60 min of reperfusion and the hearts removed to measure the left ventricular area (LVA), area at risk (MR) and infarct area (IA) in group IR, N1,N2 and α-BGT. AAP/LVA and IA/LVA were calculated. The blood samples from right carotid artery were obtained for determination of plasma concentrations of TNF-α and IL-1β and activities of CK-MB and LDH. The animals were then killed and the hearts removed to observe the myocardial ultrastrueture and determine the activity of MPO. Results Compared with group S, plasma concentrations of TNF-α and IL-1β and activities of CK-MB and LDH, and myocardial MPO activity were significantly increased in group IR, N1, N2 and a-BGT (P<0.05). Compared with group IB, IA/LVA,plasma concentrations of TNF-α and IL-1β and activities of CK-MB and LDH, and myocardial MPO activity were significantly decreased in group N1 (P < 0.05), but there was no significant difference in the indices mentioned above between group N2 and IB and between group α-BGT and IB (P > 0.05). Compared with group N1,IA/LVA, plasma concentrations of TNF-α and IL-1βand activities of CK-MB and LDH, and myocardial MPO activity were significantly increased in group N2 and α-BGT (P < 0.05). The injury to myocardial uhrastructure was attenuated in group N1 as compared with group IR, while aggravated in group N2 and α-BGT as compared with group N1. Conclusion Nicotine can ameliorate the myocardial IR in rats. The mechanism may be related to the activation of the cholinergic anti-inflanunatory pathway and inhibition of the inflammatory response.     

烟碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨烟碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠74只,体重200～250 g,随机分为5组:假手术组(S组,n=10)、缺血再灌注组(IR组,n=16)、烟碱400 μg/kg组(N1组,n=16)、烟碱40 μg/kg组(N2组,n=16)和α-银环蛇毒素组(α-BGT组,n=16).S组只穿线,不结扎左冠状动脉前降支;余各组采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注60 min的方法 制备大鼠心肌缺血再灌注模型.缺血前30 min时,N1组和N2组经右颈静脉分别注射烟碱400和40 μg/kg,α-BGT组右颈静脉注射N型胆碱能受体α-7亚单位特异性阻断剂α-银环蛇毒素1.0 μg/kg+烟碱400 μg/kg,S组和IR组右颈静脉注射等量生理盐水.再灌注60 min时,IR组、N1组、N2组和α-BGT组各取6只大鼠,测定左心室面积(LVA)、缺血危险区面积(AAR)和梗死区面积(IA),计算AAR/LVA和IA/LVA.再灌注60 min时,各组取10只大鼠,采集右颈动脉血样,测定血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的浓度和肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性;然后处死动物,取心肌组织,观察心肌超微结构,测定心肌髓过氧化物酶(MPO)活性.结果 与S组比较,IR组、N1组、N2组、α-BGT组血浆 TNF-α、IL-1β的浓度和CK-MB、LDH的活性升高,心肌MFO活性升高(P<0.05);与IR组比较,N1组IA/LVA、血浆TNF-α、IL-1β的浓度和CK-MB、LDH的活性、心肌MPO活性降低(P<0.05),心肌细胞超微结构损伤减轻,N2组和α-BGT组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与N1组比较,N2组和α-BGT组IA/LVA、血浆TNF-α、IL-1β的浓度和CK-MB、LDH的活性、心肌MPO活性升高(P<0.05),心肌细胞超微结构损伤加重.结论 烟碱可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与激活胆碱能抗炎通路,抑制炎性反应有关.     

加兰他敏对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 评价加兰他敏对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠50只,体重225 ～ 275 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组,每组10只.假手术组(SH组)仅穿线不结扎;缺血再灌注组(IR组)采用结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注模型.SH组和IR组于缺血前30 min股静脉缓慢注射生理盐水2 ml/kg;加兰他敏组(GAL组)于缺血前30 min股静脉缓慢注射加兰他敏4 mg/kg,余处理同IR组;加兰他敏复合M受体拮抗剂阿托品组(AT组)缺血前45 min给予阿托品4 mg/kg,余处理同GAL组.加兰他敏联合迷走神经切断组(VGT组)缺血前45 min切断双侧颈迷走神经,余处理同GAL组.于再灌注120 min时处死大鼠取心脏,采用TTC法测定心肌梗死范围,计算心肌梗死区质量百分比,检测心肌组织髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.结果 与SH组比较,其余组心肌梗死区质量百分比、MPO活性及MD含量升高,SOD活性降低(P＜0.05);与IR组比较,GAL组心肌梗死区重量百分比、MPO活性及MDA含量降低,心肌SOD活性升高(P＜0.05);与GAL组比较,AT组和VGT组心肌梗死区重量百分比升高,心肌MPO活性及MDA含量升高,SOD活性降低(P＜0.05).结论 加兰他敏预处理可减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与调节外周迷走神经活性有关.     

高温预处理防止大鼠心肌缺血再灌注损伤的研究

近年来 ,研究发现应激预处理能诱导细胞合成应激蛋白 (ｓｔｒｅｓｓｐｒｏｔｅｉｎ ,ＳＰ) ,亦称热休克蛋白 (ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏ ｔｅｉｎ,ＨＳＰ) ,可提高细胞的抗损伤能力[1 ] 。我们在大鼠心脏缺血再灌注损伤模型上 ,观察了高温预处理对心功能、心律失常及心肌抗脂质过氧化能力等的影响 ,以期为临床防治心肌缺血再灌注损伤提供依据。一、材料与方法1 .实验动物 :健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,雌雄不拘 ,4个月鼠龄 ,体重 2 50～ 30 0 ｇ ,由本校实验动物中心提供。2 .实验材料 :上海医疗器械仪器厂生产的ＳＪ 42型多道生理记录仪 ;浙江医…     

二氮嗪预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察二氮嗪预处理对在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护效果,并对其作用机制进行初步的探讨。方法健康SD大鼠14只,采用随机数余数分组法分为两组,对照组和二氮嗪预处理组,每组7只。二氮嗪预处理组按12.5mg/kg的剂量静脉注射二氮嗪溶液,对照组在心肌缺血前静脉注射等量溶媒溶液,结扎冠状动脉前降支致缺血2h,再灌注2h后取心脏,检测缺血心肌组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、心肌梗死面积,观察缺血区凋亡心肌细胞和心肌细胞超微结构的改变。结果二氮嗪预处理组缺血心肌组织MDA含量、心肌梗死区占缺血区的重量百分比和心肌细胞凋亡率明显低于对照组(P<0.05,0.01),心肌超微结构损伤明显轻于对照组。结论二氮嗪预处理对在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤具有较好的保护作用。     

臭氧氧化预处理减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤

目的探讨臭氧氧化预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的作用及可能机制。方法将36只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和臭氧预处理组,每组12只。模型组和臭氧预处理组采用夹闭右肾动脉上腹主动脉的方法构建大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型,臭氧预处理大鼠于建模前7 d开始以1 mg/(kg·d)腹腔注射臭氧(50 mg/L)-氧气混合气体至建模。分别于恢复灌流后6、12、24和48 h时,对各组大鼠后肢神经运动功能进行评分。末次评分后取脊髓标本,行HE染色观察组织病理学变化,行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测缺血面积,用试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。结果与假手术组相比,模型组和臭氧预处理组大鼠恢复灌流后6、12、24、48 h神经运动功能评分均降低,差异均有统计学意义(P 0.05);与模型组相比,臭氧预处理组大鼠恢复灌流后6、12、24、48 h神经运动功能评分升高,差异有统计学意义(P 0.05)。与假手术组相比,模型组和臭氧预处理组大鼠脊髓组织缺血面积增大,差异均有统计学意义(P 0.05);与模型组相比,臭氧预处理组大鼠脊髓缺血面积减小,差异有统计学意义(P 0.05)。与假手术组相比,模型组和臭氧预处理组大鼠脊髓组织中MDA水平升高,而SOD和GSH-Px水平降低,差异均有统计学意义(P 0.05);与模型组相比,臭氧预处理组大鼠脊髓组织中MDA水平降低,而SOD和GSH-Px水平升高,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论臭氧预处理可有效减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制脊髓组织氧化应激反应有关。     

烟碱预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨烟碱预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用及其可能机制.方法 30只健康雄性Sprague-Dawlay大鼠,体重200～250g,随机均分为缺血-再灌组(I-R组)、烟碱预处理组(N组)、假手术组(Sham组).测定三组血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、丙二醛(MDA)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活性,心肌组织中髓过氧化物酶(MPO)活性,电镜下观察缺血区心肌超微结构变化.结果 与Sham组比较,I-R组血浆CK-MB活性、MDA含量及心肌组织MPO活性均升高、血浆SOD活性降低(P<0.05或P<0.01);与I-R组比较,N组血浆CK-MB活性、MDA含量及心肌组织MPO活性均降低,血浆SOD活性升高(P<0.05或P<0.01),心肌病理学损伤减轻.结论 烟碱预处理可减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制可能与减少氧自由基生成、增强心肌抗氧化能力有关.     

七氟烷预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响

目的 探讨七氟烷预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响.方法 成年雄性SD大鼠64只,体重270～350 g,随机分为4组(n=16):假手术组(S组)仅穿线不结扎,心肌缺血再灌注组(I/R组)阻断左冠状动脉前降支缺血30 min,恢复灌注2 h制备心肌缺血再灌注损伤模型,七氟烷组(Sevo组)吸入2.5%七氟烷30 min,七氟烷预处理+心肌缺血再灌注组(SR组)吸入2.5%七氟烷30 min,15 min后制备模型.于再灌注2 h时随机取4只大鼠处死取左心室,采用氯化三苯四唑染色法测定心肌梗死范围,随机取4只大鼠处死取左心室,采用TUNEL法检测凋亡心肌细胞,计算凋亡指数,于缺血前即刻和再灌注2 h时分别随机取4只大鼠处死取左心室,采用Western blot法测定Bcl-2及caspase-3的蛋白表达水平.结果 与S组相比,再灌注2 h时I/R组和SR组心肌梗死范围增大,心肌细胞凋亡指数升高,caspase-3蛋白表达上调,Sevo组Bcl-2蛋白表达上调,I/R组Bcl-2蛋白表达下调,Sevo组和SR组缺血前即刻Bcl-2蛋白表达上凋(P＜0.05);与I/R组相比,再灌注2 h时SR组心肌梗死范围缩小、心肌细胞凋亡指数降低,Sevo组和SR组Bcl-2蛋白表达上调,SR组caspase-3蛋白表达下调(P＜0.05);与缺血前即刻相比,I/R组和SR组再灌注2 h时Bcl-2蛋白表达下调,caspase-3蛋白表达上调(P＜0.05).结论 七氟烷预处理可通过抑制细胞凋亡减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

不同剂量左旋甲状腺素钠预处理对幼龄大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 评价不同剂量左旋甲状腺素钠预处理对幼龄大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雌性 Wistar大鼠48只,日龄35 d,体重120～140 g,采用随机数字表法,将其随机分为6组(n=8):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和不同剂量左旋甲状腺素钠预处理组(LS1-4组).C组和I/R组大鼠采用普通饲料喂养7 d;LS1-4组大鼠除了采用普通饲料喂养之外,每天胃内灌注左旋甲状腺素钠10、20、40和80 μg/100 g.第8天时,抽取外周静脉血样,测定血清甲状腺激素水平.采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型.C组K-H液持续灌注80 min;其余各组K-H液平衡灌注30 min,然后全心缺血20 min,恢复灌注30 min.于平衡灌注20 min和再灌注30 min时,记录HR、SP、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax),计算再灌注30min时HR、SP、+dp/dtmax和-dp/dtmax的恢复率.于平衡灌注10 min和再灌注15 min时,收集冠状动脉流出液2 ml,测定CK-MB的活性.再灌注30 min时,取心室肌组织,采用Western blot法检测心肌热休克蛋白70(HSPT0)的表达,采用RT-PCR法测定甲状腺激素受体(TR)亚型(TRα1、TRα2和TRβ1)mRNA以及肌球蛋白重链α和β(MHCα和MHCβ)mRNA的表达.结果 与C组相比,I/R组HR、SP和±dp/dtmax的恢复率降低,冠脉流出液CK-MB活性升高,心肌MHCα mRNA表达下调,LS1-4组SP和±dp/dtmax的恢复率降低,冠脉流出液CK-MB活性升高,心肌HSP70和MHCα mRNA表达上调,LS2-4组血清甲状腺激素水平升高,心肌TRα1 mRNA表达上调(P＜0.05).与I/R组相比,LS1-4组HR和±dp/dtmax的恢复率升高,心肌HSP70表达上调,MHCa mRNA表达上调,MHCβ mRNA表达下调,LS1-3组冠脉流出液CK-MB活性降低,LS2-4组血清甲状腺激素水平升高,心肌TRα1 mRNA表达上调(P＜0.05).LS1组、LS2组、LS3组和LS4组的甲状腺激素血清水平随左旋甲状腺素钠剂量的增加逐渐升高(P＜0.05).与LS1组和LS2组相比,LS3组和LS4组冠脉流出液CK-MB活性升高,心肌HSP70表达下调(P＜0.05).结论 10 μg/100 g左旋甲状腺素钠胃内灌注预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,且不会导致甲状腺激素水平升高,其机制可能与心肌HSP70和MHCα mRNA表达上调有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of preconditioning with different doses of levothyroxine sodium on myocardial ischemia-reperfusion (I/R) injury in immature rats. Methods Forty-eight female immature Wistar rats, aged 35 days, weighing 120-140 g, were randomly allocated into 6 groups ( n = 8 each): control group (group C), I/R group, and preconditioning with levothyroxine sodium 10, 20, 40 and 80 μg/100 g groups (groups LS1-4 ) . The rats received levothyroxine sodium 10, 20, 40 and 80 μg/100 g through a gastric tube every day for 7 days in groups LS1-4 , respectively. Venous blood samples were taken on 8th day for determination of serum thyroid hormone levels. The hearts were removed from the animals and perfused in a Langendorff apparatus with K-H solution saturated with 95% O2-5% CO2 at 37 ℃. The hearts were continuously perfused for 80 min in group C. After 30 min of equilibration, the isolated hearts were subjected to 20 min of ischemia followed by 30 min of reperfusion in I/R and LS1-4 groups. HR, SP and ± dp/dtmax were recorded at 20 min of perfusion and 30 min of reperfusion. The recovery rates of HR, SP and ± dp/dtmax were calculated at 30 min of reperfusion. The coronary effluent was collected at 10 min of perfusion and 15 min of reperfusion for determination of creatine kinase (CKMB) activity. The samples of ventricular myocardial tissues were taken at 30 min of reperfusion to detect the expression of heat shock protein 70 (HSP70), thyroid hormone receptor (TR) mRNA (TRa, , TRoj and TRft ) and myosin heavy chain (MHC) mRNA. Results Compared with group C, the recovery rates of HR, SP and. ± dp/dtmax were significantly decreased, the CK-MB activity was significantly increased, and MHCα mRNA expression was down-regulated in group I/R, the recovery rates of SP and ± dp/dtmax were significantly decreased, the CK-MB activity was significantly increased, and the expression of HSP70 and MHCα mRNA was up-regulated in groups LS1-4, and the serum thyroid hormone level was significantly increased and the expression of TRa, mRNA was up-regulated in groups LS2-4 ( P ＜ 0.05) . Compared with group I/R, the recovery rates of HR and ± dp/dtmax were significantly increased, the pression of HSP70 and MHCa mRNA was up-regulated, and the MHCJ3 mRNA expression was down-regulated in groups LS1-4 the CK-MB activity was significantly decreased in groups LS1-3, and the serum thyroid hormone level was significantly increased and the expression of TRα1, mRNA was up-regulated in groups LS2-4 ( P ＜ 0.05) . The serum thyroid hormone level increased gradually with the increase in the dose of levothyroxine sodium in groups LS1-4 ( P ＜ 0.05) . The CK-MB activity was significantly higher, while the HSP70 expression lower in groups LS3-4 than in groups LS1-2 (P ＜ 0.05). Conclusion Preconditioning with levothyroxine sodium 10 μg/100 g can alleviate the myocardial I/R injury in immature rats and does not lead to the increase in the level of thyroid hormone, and the up-regulation of HSP70 and MHCa mRNA expression may be involved in the mechanism.     

臭氧氧化预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤致细胞凋亡的影响

目的 观察臭氧氧化预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤导致的细胞凋亡的影响.方法 分为3组进行实验:(1)假手术组:切除大鼠右肾,缝合腹壁;(2)缺血再灌注组:切除大鼠右肾后,夹闭左肾动、静脉45 min,然后开放;(3)臭氧氧化预处理组:手术步骤与缺血再灌注组相同,在术前15d开始经直肠吹入氧气和臭氧的混合气体5～5.5 ml(臭氧浓度为50 mg/L,1 mg·kg-1 ·d-1),应用至术前1d.全自动生化分析仪检测3组大鼠血清尿素氮和肌酐,比色法测定血清脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD).免疫组织化学法检测大鼠肾细胞胞浆细胞色素C(CytC)的表达,蛋白质印迹法检测CytC的含量.逆转录聚合酶链反应法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6 (IL-6) mRNA的表达.结果 缺血再灌注和臭氧氧化预处理组血清尿素氮、肌酐和MDA均高于假手术组,而缺血再灌注组的尿素氮、肌酐和MDA又高于臭氧氧化预处理组.缺血再灌注组血清SOD低于假手术组和臭氧氧化预处理组(P＜0.05).臭氧氧化预处理组的肾组织病理学改变较缺血再灌注组轻.假手术组、缺血再灌注组和臭氧氧化预处理组的CytC表达灰度值分别为101.50±18.02、181.00±20.85和156.71±16.82,两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).臭氧氧化预处理组肾细胞胞浆和线粒体中CytC含量较缺血再灌注组有所下降(P＜0.05).结论 臭氧氧化预处理可以减轻肾脏脂质过氧化反应,减少炎症因子的合成,抑制CytC的释放,减轻肾缺血再灌注损伤.     

丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤心肌细胞膜ATP酶活性的影响

目的 研究丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤心肌细胞膜ATP酶活性及心肌组织形态学的影响.方法 40只雄性SD大鼠随机分成五组,每组8只:对照组(C组),缺血-再灌注组(IR组),丙泊酚1组(P1组),丙泊酚2组(P2组),丙泊酚3组(P3组).各组于再灌注60 min后立即取左室心尖部心肌,检测心肌匀浆中心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性;光镜下观察心肌组织形态学变化.结果 IR时心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性与C组相比明显下降(P<0.01);O1、P2、P3组心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性与IR组相比明显升高,但仍低于C组(P<0.05).结论 丙泊酚可以减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制可能与恢复心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性有关.     

乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时炎性反应的影响

目的 评价乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时炎性反应的影响.方法 健康SD大鼠40只,体重250～280 g,雌雄各半,采用随机数字表法,将大鼠随机分为假手术组(S组)、心肌缺血再灌注损伤组(IR组)、脂肪乳组(Ⅰ组)和乳化异氟醚组(EI组),每组10只.采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注180 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.S组、IR组、Ⅰ组和EI组于尾静脉分别输注0.9％生理盐水、0.9％生理盐水、30％脂肪乳和乳化异氟醚2 ml/kg(液态异氟醚体积比为8％),给药时间30 min,停止给药后30 min制备模型.于再灌注180 min时抽取心脏血后处死大鼠取心脏,采用TTC染色法测定心肌梗死面积,放射免疫法测定血浆肿瘤细胞坏死因子a(TNF-a)浓度,免疫组化法检测缺血心肌细胞核因子-κB p65(NF-κB p65)和细胞黏附分子-1(ICAM-1)的表达.结果 与S组比较,其余3组心肌梗死面积增加,血浆TNF-α浓度升高,心肌NF-kB p65和ICAM-1表达上调(P＜0.05);与IR组和I组比较,EI组心肌梗死面积减少,血浆TNF-a浓度降低,心肌NF-κB p65和ICAM-1表达下调(P＜0.05).结论 乳化异氟醚预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制心肌细胞NF-kB和ICAM-1表达,减轻炎性反应有关.     

长托宁预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤后肠系膜微循环的影响

目的评价长托宁预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤后肠系膜微循环的影响。方法 45只SD雄性大鼠,体质量220～280 g,12～14周。随机数字表法分为3组,各15例。I/R组(缺血再灌注组):异氟烷吸入麻醉后打开大鼠胸腔,暴露冠状动脉左前降支并结扎30 min。再灌注60 min建立心肌缺血再灌注损伤模型。I/R+PH组(缺血再灌注长托宁组):结扎左前降支前腹腔注射长托宁0.2 mg/kg,然后制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。S组(假手术组):打开胸腔暴露冠状动脉左前降支并不结扎,腹腔注射同等剂量生理盐水后关胸。在结扎左前降支心肌缺血前15 min(T_0)、缺血30 min(T_1)和缺血再灌注60 min(T_2),收集大鼠动脉血样进行血气分析,记录pH值和乳酸浓度;并由旁流暗视野成像仪收集肠系膜微循环图像,记录大鼠肠系膜总血管密度(TVD)、灌注血管密度(PVD)、灌注血管比率(PPV)和微血管流量指数(MFI)。结果 (1)与S组比较,I/R组T_(1～2)时间点的pH值降低、乳酸浓度升高,差异均有统计学意义(P0.05);I/R+PH组T_(1～2)时间点pH值降低,乳酸浓度升高,但差异均无统计学意义(P0.05)。(2)与I/R组比较,I/R+PH组T_2时间点pH值升高,乳酸浓度降低,差异有统计学意义(P0.05)。(3)与S组比较,I/R组灌注血管比例和微血管血流指数在T_(1～2)时间点下降,差异有统计学意义(P0.05);I/R+PH组T_(1～2)时间点灌注血管与微血管血流指数的比值下降,但差异无统计学意义(P0.05)。(4)与I/R组比较,I/R+PH组灌注血管比例在T_(1～2)时间点升高,微血管血流指数在T_2升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论长托宁预先处理有助于改善大鼠心肌缺血再灌注损伤对肠系膜微循环的影响。     

七氟醚预处理对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠认知功能的影响

目的 探讨七氟醚预处理对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠认知功能的影响.方法 健康SD大鼠60只,雌雄各半,体重300～350 g,随机分为4组:正常对照组(C组,n=6),假手术组(S组,n=18)仅挂线不结扎左冠状动脉;急性心肌缺血再灌注组(IR组,n=18)结扎左冠状动脉30 min后恢复再灌注;七氟醚预处理组(SP组,n=18)吸入七氟醚1.0 MAC 60 min,停止吸入七氟醚后60 min结扎左冠状动脉,缺血30 min后恢复再灌注.分别于左冠状动脉结扎前(T1)、缺血30 min(T2)及再灌注120 min(T3)时抽取股动脉血1 ml,测定血浆丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性.C组随机取3只大鼠,其余各组于再灌注1、3、7 d各随机取3只大鼠测定海马长时程增强(LTP),C组取另外3只大鼠,其余各组于上述时点随机取3只大鼠,测定海马肿瘤坏死因子α(TNF-α)、TNF-α mRNA、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-1β mRNA、血红素氧合酶(HO)-1的表达水平.结果 与C组和S组比较,IR组和SP组LTP降低;与IR组比较,SP组LTP升高(P＜0.05).与C组比较,IR组和SP组HO-1、IL-1β mRNA、IL-1β、TNF-α mRNA表达上调;与S组比较,IR组和SP组IL-1β mRNA及IL-1β表达上调;与IR组比较,SP组TNF-α mRNA、HO-1、IL-1β mRNA及IL-1β表达下调,血浆MDA浓度降低,SOD活性升高(P＜0.05).结论 七氟醚预处理可改善急性心肌缺血再灌注损伤大鼠认知功能,其机制可能与下调TNF-α、IL-1β表达有关.     

七氟醚预处理联合后处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的 探讨七氟醚预处理联合后处理对大鼠缺血-再灌注损伤心肌的保护作用及其相关机制.方法 清洁级成年雄性SD大鼠40只,体重230～270 g,采用随机数字表法,将其均分为五组:假手术组(S组)、心肌缺血-再灌注组(IR组)、七氟醚预处理组(SP1组)、七氟醚后处理组(SP2组)、七氟醚预处理联合后处理组(SS组).除S组外均采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血-再灌注模型,S组只穿线,不结扎;SP1和SP2组分别于缺血前30min、再灌注前10 min吸入2.5％七氟醚15 min,洗脱15 min;SS组于缺血前30 min和再灌注前10min均吸入2.5％七氟醚15 min,洗脱15 min.于缺血前30 min、缺血30 min、再灌注120 min时记录HR和MAP,计算RPP(SBP×HR).于再灌注120 min时取心脏制病理切片,光镜下观察各组心肌病理学变化,测定凋亡指数(AI),检测心肌组织SOD和MDA含量,免疫组化法检测心肌组织TNF-α和caspase-3的表达.结果 与S组比较,其余四组再灌注120 min时MAP和RPP明显降低,AI明显升高,心肌组织SOD含量明显降低,MDA含量明显升高,TNF-α和caspase-3表达明显增高(P＜0.05);与IR组比较,SP1组、SP2组和SS组AI明显降低,心肌组织SOD含量明显升高,MDA含量明显降低,TNF-α和caspase-3表达明显降低(P＜0.05);与SP1组和SP2组比较,SS组AI明显降低,心肌组织SOD含量明显升高,MDA含量明显降低,TNF-α和caspase-3表达明显降低(P＜0.05).结论 与单纯七氟醚预处理或后处理比较,两种方法联合应用可使心肌组织AI降低,SOD含量升高,MDA含量降低,TNF-α和caspase-3的表达降低,从而进一步减轻了大鼠心肌缺血-再灌注损伤.     

丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤中自噬潮的影响

目的 研究丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)期间自噬潮的影响及其机制. 方法 采用大鼠在体心肌I/R损伤模型,将90只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为5组(每组18只):①假手术组(Sham组),只穿线不结扎;②I/R组;③丙泊酚预处理组(P+I/R组);④Ⅰ型磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)抑制剂A66预处理组(A+I/R组);⑤丙泊酚+A66预处理组(P+A+I/R组).采用结扎冠状动脉左前降支的方法制备心肌I/R模型.除Sham组外,其余各组均缺血30 min,再灌注120 min.缺血前15 min,P+I/R组通过股静脉输注丙泊酚15 mg·kg1·h1;A+I/R组缺血前1h腹腔注射A66溶液10 mg/kg;P+A+I/R组在缺血前1h腹腔注射A66溶液10 mg/kg,缺血前15 min再通过股静脉输注丙泊酚15 mg·kg1·h-1.模型制备后取心肌,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyhetrazolium chloride,TTC)法染色并计算梗死面积百分比,酶标法测定乳酸脱氢酶(lactate dehydwgenase,LDH)活性,Western bolt法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)-Ⅱ、P62蛋白的表达量,电子显微镜定性观察自噬体、自噬溶酶体的数量.结果 与I/R组比较,P+I/R组与P+A+I/R组梗死面积[(50.1±-3.9)％比(26.5±1.3)％、(42.6±1.9)％]显著减小(P＜0.05),血清LDH活性降低,LC3-Ⅱ表达水平降低,P62表达水平升高(P＜0.05),自噬体、自噬溶酶体明显减少.与P+I/R组比较,P+A+I/R组梗死面积[(26.5±1.3)％比(42.6±1.9)％]显著增加(P＜0.05),血清LDH活性升高,LC3-Ⅱ表达水平升高,P62表达水平降低(P＜0.05),自噬体、自噬溶酶体增加. 结论 丙泊酚预处理激活PI3K/蛋白激酶B(pmtein kinase B,Akt)通路,抑制I/R心肌中自噬潮进行,对大鼠心肌I/R损伤产生保护作用.     

臭氧预处理对家兔全心缺血-再灌注损伤的影响

目的研究臭氧预处理对家兔离体心脏全心缺血-再灌注损伤的影响,并探讨其作用机制。方法健康成年家兔24只,雌雄不拘,体重2.25~2.5 kg。随机分为正常对照组(C组)、缺血-再灌注组(IR组)、氧气预处理组(O2P组)和臭氧预处理组(O3P组),每组6只。所有动物常规饲养,C组和IR组不做术前处理;于术前5 d O2P组给予O210 ml,O3P组给予40μg/ml O3 10 ml腹腔内注射,固定时间注射,每日一次。制备离体心脏缺血-再灌注损伤模型,IR组、O2P组和O3P组平衡20 min,停灌30 min,再灌注60 min。C组单纯灌注110 min。于平衡20 min(T0)、再灌注5 min(T1)、再灌注60 min(T2)时记录左室发展压(LVDP),并取冠脉流出液,采用ELISA法测定肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、肌钙蛋白T(cTnT)、IL-6、IL-10浓度。于再灌注60 min末,取心肌组织,用TTC染色法测定心肌梗死面积,HE染色观察病理学结果。结果与C组比较,T1-T2时IR组、O2P组和O3P组HR明显减慢(P<0.05),LVDP明显降低(P<0.05),CK-MB、cTnT、IL-6浓度明显升高(P<0.05),心肌梗死面积百分比明显增大(P<0.05),心肌细胞损伤加重。与IR组比较,T1-T2时O3P组HR明显增快(P<0.05),LVDP明显升高(P<0.05),CK-MB、cTnT、IL-6浓度明显降低(P<0.05),IL-10浓度明显升高(P<0.05),心肌梗死面积明显减小(P<0.05),心肌细胞损伤减轻。IR组和O2P组HR,LVDP,CK-MB,IL-6,IL-10浓度和心肌梗死面积差异均无统计学意义。结论臭氧预处理减轻家兔离体心脏缺血-再灌注损伤,其保护机制可能与抑制促炎因子释放和促进抗炎因子表达有关。     

乳化异氟烷预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 评价乳化异氟烷预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性新西兰白兔32只,体重2.5～3.0 kg,随机分为4组(n=8):缺血再灌注组(IR组)、异氟烷预处理组(I组)、乳化异氟烷预处理组(EI组)和脂肪乳组(INT组).采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注180 min的方法建立兔心肌缺血再灌注模型.各组稳定30 min后,I组吸入3%异氟烷,维持呼气末浓度2.20%30 min,洗脱15 min;EI组先以1 ml/s的速率静脉注射8%乳化异氟烷8～10 ml,然后静脉输注6～8 ml·kg-1·h-1,维持呼气末浓度1.28%30 min,洗脱15 min;INT组先以1 ml/s的速率静脉注射30%脂肪乳9 ml,然后静脉输注7 ml·kg-1·h-1持续30 min.于稳定30 min(T0)、缺血前(T1)、缺血即刻(T2)、缺血30 min(T3)、再灌注60 min(T4)、120 min(T5)和180 min(T6)时,记录HR、SP和MAP,计算HR和SP的乘积(RPP).于T6时抽取动脉血样3 ml,测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性和IL-6、IL-10的浓度,并测定心肌梗死范围.结果 与T0时比较,T2-6时各组HR、MAP和RPP呈进行性下降(P<0.05);四组间HR、MAP和RPP比较差异无统计学意义(P>0.05).与IR组比较,I组和EI组心肌梗死范围减小,血清CK、LDH的活性和IL-6浓度降低,L-10浓度升高(P0.05).结论 乳化异氟烷预处理可减轻兔心肌缺血再灌注损伤,机制可能与其抑制炎性反应有关.