两种方法鉴定老年人ABO及RH(D)血型的比较

目的比较微柱凝胶法和试管法鉴定老年人ABO血型和RH(D)血型的可靠性。方法选取400例老年人血标本,采用试管法和微柱凝胶法进行ABO血型和RH(D)血型鉴定。结果在鉴定老年人ABO血型时,试管法正定型符合率92.0%,反定型符合率89.0%;微柱凝胶法符合率96.0%。RH(D)血型检测结果两法一致。结论微柱凝胶法检测老年人的ABO血型时优于传统试管法,在常规血型检查应推广应用。     

微柱法结合盐水凝集试管法鉴定ABO疑难血型

【目的】探讨微柱法结合盐水凝集试管法鉴定ABO疑难血型的准确性。【方法】对8例ABO疑难血型鉴定,使用微柱凝胶法鉴定血型过程中,出现正、反定型不符等情况下,通过调整抗原抗体比例、温度、时间等条件,结合盐水凝集试管法进行检测,最后在显微镜下观察红细胞的凝集状态,以准确判断AB0疑难血型。【结果】用微柱凝胶法不能鉴定的8例疑难血型中,有5例通过常规盐水凝集试管法得到正确鉴定,另外3例使用生理盐水洗涤3次后,放入37℃水浴箱或4℃冰箱孵育30min再进行试验,最终得出正确的结果。【结论】微柱凝胶法结合盐水凝集试管法,借助显微镜的帮助,能够准确及时地鉴定大部分ABO疑难血型。     

新生儿ABO血型鉴定方法的选择

目的了解新生儿血型鉴定的难点,针对新生儿血型抗原与抗体的特点,探讨新生儿常见血型鉴定方法的选择。方法采用盐水介质法(玻片法和试管法)及微柱凝胶法同时正定型检测本院住院新生儿ABO血型。结果玻片法检测新生儿ABO血型符合率为97.75%,试管法检测新生儿ABO血型符合率为99.25%,微柱凝胶法检测新生儿ABO血型符合率为100%。结论微柱凝胶法检测新生儿ABO血型敏感性和准确性高于玻片法和试管法(P0.05),具有统计学意义,为新生儿溶血病早期诊断、治疗及输血提供了安全保障,而玻片法和试管法的敏感性和准确性差,偶有错判和误判,慎用于新生儿ABO血型鉴定。     

微柱凝胶法在婴幼儿ABO血型鉴定中的应用探讨

目的：动态观察微柱凝胶法与盐水试管法检测婴幼儿ABO血型正反定型结果,以探讨微柱凝胶法在婴幼儿ABO血型鉴定中的应用。方法将婴幼儿分为Ⅰ组(0~6个月)、Ⅱ组(6个月后~1周岁)。应用微柱凝胶法分别对Ⅰ、Ⅱ组婴幼儿的ABO血型进行鉴定,正反定型不相符者,使用盐水试管法进一步鉴定。结果采用微柱凝胶法对婴幼儿ABO血型进行正反定型,Ⅰ组正反不相符率较高,为63%;Ⅱ组正反不相符率大幅降低,为17%,而用盐水试管法(4℃)离心2~3次后,正反定型基本相符。结论微柱凝胶法给ABO血型的鉴定工作带来了很大的方便,但由于婴幼儿在出生4~6个月后ABO血型抗体才基本产生,有的效价仍较弱,所以还必须结合盐水试管法加以鉴定,以确保婴幼儿ABO血型鉴定的正确,保证儿科临床输血的安全。     

微柱凝胶技术在新生儿溶血性疾病诊断中的应用

目的探讨微柱凝胶技术在ABO血型不合新生儿溶血病(HDN)相关实验中的应用。方法 81例ABO血型不合,拟诊为HDN的新生儿标本用传统试管法和微柱凝胶法进行直接抗球蛋白试验、游离试验和放散试验。结果试管法、微柱凝胶法检测结果分别为直接抗球蛋白实验结果相符27例、21例,符合率33.3%、25.9%,两法有显著性差异(P<0.05);游离试验符合50例、56例,符合率61.7%、69.1%,两法有显著性差异(P<0.05);释放试验符合57例、64例,符合率70.4%、79.0%,两法有显著性差异(P<0.05)。结论 直接抗球蛋白实验,传统试管法比微柱凝胶法灵敏度高;在游离试验及放散试验中,微柱凝胶法比传统试管法灵敏度高。微柱法操作简便、标准化,耗时短,标本用量少,结果易判定等优点,尤其表现在放散试验和游离试验中,值得临床推广应用。     

微柱凝胶法及试管法检测新生儿血型抗体的比较

目的比较微柱凝胶法(简称卡式法)及试管法在新生儿血型抗体检测中的检出率。方法选取2016年1月至2017年6月河南省人民医院新生儿监护室及产科住院出生7 d内新生儿血液标本1 482例,除去142例AB血型后,同时用微柱凝胶血型检测卡、抗人球蛋白卡、试管一次离心和多次离心法检测1 340例血型抗体,并对不同检测方法进行比较分析。结果在1 340例送检血样中,新生儿血型抗体在各个ABO血型的检出率是不一样的,B型新生儿血型抗体检出率最高。试管法一次离心对于新生儿血型抗体检测没有任何的优势。在血型检测卡检测阴性483例标本中,抗人球蛋白卡检出率为51.76%(250/483),高于试管多次离心法(37.27%,180/483)。结论在全自动血型检测卡新生儿血型鉴定时,出现血型抗体检测不出的标本,可以把血浆和反定型细胞加入抗人球蛋白卡继续试验,可提高新生儿正反定型一致率,为新生儿输血安全提供保障。     

微柱凝胶技术在婴幼儿输血中的应用

目的探讨微柱凝胶技术在婴幼儿输血中的应用。方法用微柱凝胶法对婴幼儿输血患者进行血型鉴定、交叉配血,同时用玻片法、试管法及聚凝胺法进行比较。结果589例血型对照两组完全相同,2106例聚凝胺法交叉配血全部相合标本中,微柱凝胶法6例主侧不合,7例次侧不合。结论微柱凝胶法可以取代试管法用于婴幼儿的ABO和Rh(D)血型鉴定;聚凝胺法配血可能导致抗体漏检,为了避免溶血性输血反应的发生,应尽可能同时采用微柱凝胶法配血。     

新生儿脐血AB0血型鉴定结果质量控制方法探讨

本研究探讨一种新生儿脐带血ABO血型鉴定的质量控制方法。采用血型血清学试验对脐血标本作ABO血型鉴定,对不能定出结果的疑难血型采用聚合酶链反应-序列特异性引物（Sequence Specific Primer PCR,PCR—SSP）作进一步确认。结果表明：在76120例脐血AB0血型正定型鉴定中,检出78例ABO血型弱抗原反应和难以判定血型结果的疑难标本（1％。）,经复查排除了弱凝集反应30例。检测260例脐血ABO血型反定型,相符血型148例（56．92％）,不相符血型112例（43．08％）。PCR—SSP基因分型检测58例中45例血清学表型结果与基因分型结果一致,3例表型结果与基因定型结果不相符,10例正反定型不相符标本,基因分型结果与正定型完全一致。结论：采用红细胞抗原（正定型）方法结合DNA基因分型技术检测新生儿脐带血抗原反应弱、抗体效价低的ABO血型质控效果好,是一种高效、灵敏的质量控制方法,适用于新生儿脐血AB0疑难血型的鉴定。     

微柱凝胶免疫检测ABO血型的局限性及其与盐水试管法判定血型的结合应用

目的：当ABO血型抗原减弱或抗体降低时,微柱凝胶免疫检测结果常表现为正反定型不一致,通过结合盐水试管法延长离心时间的方法,可对血型做出正确判定。方法：将疑难血型患者的血用微柱凝胶免疫检测血型,同时用生理盐水试管法,BaSo2002—2离心机,3400转15S,离心三次测定血型。结果：用微柱凝胶免疫检测血型正反定型出现不符的血型,我们通过结合经典的生理盐水试管法,增加离心次数的方法,对血型结果可以做出正确判断。结论：微柱凝胶免疫检测ABO血型结合传统盐水试管法,对测定抗原减弱或抗体降低的ABO血型,是一种高效、灵敏、简单易行的方法。     

新生儿脐血ABO血型正反定型及交叉配血实验结果分析

目的探讨婴幼儿ABO正反定型的符合情况及交叉配血试验在婴幼儿输血时的局限性。方法选2010名新生儿的脐血标本,用微柱凝胶血型卡进行正定型,用试管法和纸片法做反定型,用微柱凝胶技术选择异型血与脐血进行交叉配血。结果正定型为A型700份标本中,499份检出抗B,但有39例反应弱,201例未检出抗B,抗B检出率为71.28%(499/700)。正定型为B型的510例标本中,373例检出抗A,但有23例反应弱,137例未检出抗A,抗A检出率为73.13%(373/510)。正定型为O型的800例标本中,只有571例同时检出了抗A和抗B,检出率为71.37%(571/800),131例未检出抗A、抗B,占16.38%(131/800),另有53例仅检出抗A,45例仅检出抗B。选用反定型完全没有凝集的新生儿A、B型的血清各40例分别进行相反血型交叉配血试验,即A(B)型血清 B(A)型红细胞,在这80例的配血结果中:盐水配血法全部阴性,聚凝胺配血法有2例弱阳性,微柱凝胶技术配血法发现有8例弱阳性。结论新生儿ABO血型鉴定中大部分已正反定型相符,在新生儿常规血型检查时反定型的价值不可忽视。微柱凝胶抗人球蛋白技术能有效地发现微弱的血型抗体,是一种较为敏感、安全的方法。     

PCR-SSP技术对羊水细胞ABO血型的基因鉴定

目的通过PCR-SSP基因技术检测胎儿羊水细胞ABO血型基因型,产前诊断胎儿ABO血型。方法选取了6名孕16 W以上的孕妇,抽取羊水细胞并进行分离,提取羊水细胞DNA,运用PCR-SSP技术分析其ABO血型基因型,并通过出生后的脐带血的血型鉴定进行确认。结果 6例羊水标本均通过PCR-SSP方法检测出了ABO血型的基因型;该6名胎儿的脐带血的ABO血型与羊水细胞的血型一致。结论 PCR-SSP技术可以准确地检测胎儿羊水细胞的ABO血型。     

常见ABO抗原和稀有A2抗原同步基因分型的研究

目的建立人类ABO血型系统的同步基因分型法研究ABO血型。方法采用PCR-SSP技术,设计合成13对序列特异性引物,摸索最佳退火温度,通过调整引物浓度、Mg2+浓度等,使ABO系统等位基因在同一条件下进行同步扩增和扩增产物在同一凝胶中进行同步电泳;使用此方法,检测34例已知血清学ABO血型的与20例已知序列的A2亚型标本。结果用基因分型法检测出的ABO常见基因和A2基因,与已知血清学ABO分型结果相符合。结论该ABO基因分型方法适合中国人ABO基因常规鉴定与研究。     

A Novel Variant B Allele of the ABO Blood Group Gene Associated with Lack of B Antigen Expression

SUMMARY: BACKGROUND: The gene locus for the ABO blood group system encodes a glycosyltransferase. Alterations in the DNA sequence are associated with the blood groups and the expression levels of antigens on red blood cells. A number of ABO alleles have been described as the molecular basis of weak A or B antigens. PATIENTS AND METHODS: Here, we describe a novel variant B allele in a blood donor with discrepant results in routine forward (group A) and reverse (very weak anti-B isoagglutinins) ABO blood grouping. RESULTS: Determination of the ABO genotype using polymerase chain reaction-sequence-specific primers (PCR-SSP) indicated blood group A(2)B. Sequencing of the ABO gene exons 6 and 7 showed for 1 allele a G insertion into the GGGGGG sequence at position 811-816 of exon 7. The 816insG mutation (designated ABO*Bw20) led to a frame shift of the coding sequence and subsequent alteration of the protein sequence. The location of the mutation on a B allele was proven by PCR-SSP. Screening for the novel mutation in 211 blood donors with regular ABO phenotypes indicated that *Bw20 is a rare variant. CONCLUSIONS: The low levels of anti-B isoagglutinins associated with this novel variant indicate that residual undetectable amounts of B antigen may be present on red blood cells. The serological and molecular analysis of members of the blood donor's family further proved the phenotype-genotype correlation of the *Bw20 allele with antigen O and individually variable levels of anti-B isoagglutinins. The characterization of novel alleles associated with ABO subgroups may ensure the correct determination of blood groups in which serological methods are combined with molecular genetic approaches.     

PCR-SSP与血清学技术用于ABO血型分型的比较

目的 探讨ABO血型基因分型技术应用于临床检验的可行性.方法 随机抽样100例江西健康汉族个体,并收集20例正反定型不符的标本,采用血清学和序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)鉴定血型.结果 100例健康个体的基因分型结果与血清学分型结果一致,19例正反定型不符标本的基因分型结果准确.分型结果表明江西地区以O型为多,100例健康个体中,O型36例(36%),A型32例(32%),B型24例(24%),AB型8例(8%),基因频率:p(A)基因为0.225 3,q(B)基因为0.175 3,r(O)基因为0.599 8,且符合Hardy-Weinberg平衡.结论 基因分型技术应用于临床检验具有可行性,在鉴定疑难血型方面可以作为血清学分型的补充.     

Gene analysis of two cases with CisAB/B blood subgroup

Objective

To identify the precise ABO blood type subgroups with genotyping.

单管PCR扩增鉴定ABO血型基因型

本研究目的是建立单管PCR扩增鉴定ABO血型基因型的方法.采用盐析法抽提DNA,应用单管PCR扩增结合基因扫描技术对ABO血型的基因型进行鉴定.结果表明：用本方法鉴定出的132例样本的ABO基因型结果与其血清学结果完全符合,A、B、O基因频率分别为0.205、0.159、0.636,其中AA基因型8例（6.1%）,AO基因型31例（23.5%）,AB基因型7例（5.3%）,BB基因型6例（4.5%）,BO基因型23例（17.4%）,OO基因型57例（43.2%）.结论：单管PCR扩增结合基因扫描技术能鉴定ABO血型基因型.     

婴儿ABO血型的鉴定及应用于临床输血

为了研究6个月内婴儿ABO血型正确定型方法及影响因素，采用常规血清学法、凝胶柱法及PCR-SSP3种方法对6个月以内的婴儿进行血型鉴定。结果表明：在使用不同方法检测婴儿ABO血型结果不符的33例中，常规血清学方法32例红细胞定型与血清定型不符，1例是由细菌感染产生类B抗原所致的假相合。凝胶柱法可正确定型27例，正确率84.4%。PCR-SSP法可对所有标本做出正确定型。凝胶柱法与PCR-SSP法有显性差异。结论：对6个月以内的婴儿进行ABO血型鉴定，推荐采用凝胶柱技术。凝胶柱法红细胞定型与血清定型相符的婴儿输血采用同型输注，但若婴儿患有感染性疾病时，应考虑到类B抗原引起的假相合。凝胶柱法红细胞定型与血清定型不符的婴儿输血时使用O型洗涤红细胞等成分血，待PCR-SSP法分型结果做出后，改为同型输血。