西安地区手足口病与肠道病毒71型的关系

目的 获得2008年西安地区肠道病毒71型(EV71)流行株,探寻快速高效的检测技术,分析所获西安地区流行株与安徽阜阳流行株的区别.方法 采集手足口病患儿的疱液、咽部分泌物进行病毒分离和RT-PCR检测;利用免疫荧光技术进行病毒鉴定.结果 56份咽部分泌物接种RD细胞和HEp-2细胞,病毒分离阳性率分别为5.4%(3/56)、1.8%(1/56);56份疱液标本接种RD细胞和HEp-2细胞,病毒分离阳性率分别为12.5%(7/56)、5.4%(3/56);RD细胞和HEp-2细胞分别于7 d和10 d出现细胞病变.检测了56例患儿的咽部分泌物和疱液标本,咽部分泌物RT-PCR结果阳性率为21.4%(12/56),疱液标本RT-PCR结果阳性率为33.9%(19/56).14份出现细胞病变的细胞株通过免疫荧光鉴定9份为EV71感染.获得了2008年西安地区EV71流行株,将核苷酸序列提交NCBI Genbank,获得核苷酸登录号EU812461.结论 本流行株可能嗜上皮细胞性弱、与2008年提交的安徽阜阳病毒株EU703812、EU703813、EU703814同源性达97%～98%;RT-PCR技术有快速、高效的优势,是EV71快速诊断的重要手段.     

2007年北京儿童中流行的手足口病病原学及临床特点

目的 对北京地区2007年4-9月儿童手足口病流行期间的临床特点及病原学进行研究.方法 对首诊手足口病者进行表格式记录并采集其中61例患儿的88份标本(咽拭子48例,疱疹液40例)进行病毒分离,并分别用EV71和CA16的VP1基因的特异性引物进行RT-PCR鉴定.结果 其中44例患儿的62份标本中分离到病毒,阳性率70.45%.所分离的病毒经RT-PCR检测,42例为CA16,占95.45%;2例为EV71,占4.55%,两者之比为21:1.两种病毒感染的临床表现、发病特点及流行特征差异无统计学意义(P>0.05).结论 2007年北京手足口病患儿中的主要病原是CA16和EV71;CAl6与EV71所致的手足口病临床上很难区别.     

实时荧光定量RT-PCR法检测手足口病患儿大便标本中肠道病毒71型

目的 了解2008年手足口病流行期间住院手足口病患儿是否存在EV71病毒感染,并探讨实时荧光定量RT-PCR法对手足口病患儿大便标本中EV71病毒载最进行定量检测的可行性.方法 采用RT-PCR荧光探针体外扩增法对47例住院的手足口病患儿大便标本中抽提的RNA进行抽样检测.结果 22例(46.81%)手足口病患儿大便标本中EV71的病毒载量大于103 copies/ml,最高者达1.03 × 107copies/ml.实时荧光定量RT-PCR法其标准曲线显示,Ct值与病毒拷贝数的对数(log10)之间的相关系数为1.000,相关性较好.结论 2008年手足口病流行期间入住儿科医院的手足口病患儿近半数为EV71病毒感染.实时荧光定量RT-PCR法对大便标本中的EV71 RNA定量检测较方便快捷,结果直观,为进一步研究病毒载量与临床表现之间的关系打下了基础.     

2002年上海儿童手足口病病例中肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型的调查

目的对上海地区2002年4—6月儿童手足口病流行期间的手足口病患儿进行病原学调查。方法采集手足口病患儿的疱疹液、粪便、咽拭子进行病毒分离;分别用肠道病毒组合血清、肠道病毒71型（EV71）单价血清和柯萨奇病毒A组16型（CA16）单价血清对分离到的病毒进行中和试验定型;对不能定型的病毒株再分别用EV71和CA16的VP1基因的特异性引物进行RT-PCR鉴定。结果从72例患儿共采集102份标本,由其中67例患儿的91份标本分离到病毒;所有分离到的病毒株均不能用血清学方法进行定型;进一步经RT—PCR检测,58例为CA16,9例为EV71,二者之比为6．4：1;其中2例的EV71病毒株经中国疾病预防控制中心进行序列分析,认为属新的C4基因亚型;在EV71阳性病例中1例并发脑炎,出现抽搐、休克、昏迷、呼吸衰竭。结论从该组手足口病患儿检测到的主要病原是CA16和EV71;在上海地区首次报道与EV71感染相关的手足口病合并重症脑炎病例。     

广州地区健康儿童肠道病毒71型抗体水平调查

目的 调查广州地区健康儿童肠道病毒71型抗体IgG（EV71-IgG）的水平,分析与EV71所致手足口病(HFMD)发病的关系。方法 以来源于广州市妇女儿童医疗中心（我院）中心实验室分离到的EV71 C4亚型标本,制备EV71诊断抗原,建立EV71-IgG抗体诊断试剂盒方法,并进行实验室评价。收集2010年1～3月在我院儿保科抽血进行常规保健检测的标本,筛选出无发热、无HFMD症状的健康儿童血清标本,检测EV71-IgG抗体。选取我院2010年全年门诊及住院HFMD患儿的咽拭子标本进行EV71特异性核酸检测。结果 ①本研究建立的试剂盒EV71-IgG抗体检测临界值为0.148;与细胞中和实验方法阳性符合率为100%,阴性符合率为92%,与柯萨奇 A16病毒抗体无交叉反应。②819名健康儿童血清标本中,男481名,女338名。<1岁组（60%,60/100名）和~2岁组（39.3%,72/183名）EV71-IgG抗体阳性率显著高于其他各年龄组［~3岁、~4岁、~5岁和~14岁组分别为12.9%（15/116名）、27.1%（38/140名）、14.2%（16/113名）和22.8%（38/167名）］。EV71-IgG抗体阳性率无显著性别差异。③4 780例EV71阳性HFMD患儿中,男3 070例,女1 718例。<1岁310例（6.5%）,~2岁1 157例（24.2%）,~3岁1 337例（28.0%）,~4岁1 094例（22.9%）,~5岁450例（9.4%）,~14岁432例（9.0%）。④各年龄组EV71-IgG抗体阳性率与EV71阳性年龄构成比呈相反趋势,<1岁组EV71-IgG抗体阳性率最高,EV71阳性年龄构成比最低;~3岁组EV71-IgG抗体阳性率最低,EV71阳性年龄构成比最高。结论 <1岁健康儿童EV71-IgG阳性率最高,EV71阳性年龄构成比与EV71-IgG阳性率呈相关现象。     

2011年昆明市手足口病病原检测及临床特征分析

目的了解手足口病患儿不同标本中病原检出情况,为手足口病的综合防治和肠道病毒的动态监测提供依据。方法 2011年4月-8月,收集昆明地区73例手足口病患儿的咽拭子标本73份,疱疹液标本10份。采用实时荧光定量PCR方法进行CoxA16和EV71病毒核酸的定性和定量检测;并随机抽取3份EV71阳性标本进行VP1基因节段的双向扩增,测定和分析核苷酸序列,并与GenBank中的EV71参考毒株进行比较,依据VP1片段构建基因亲缘性关系树;同时收集患儿的临床流行病学资料,进行临床特征分析。结果 73份咽拭子标本中检出阳性标本59份(80.82%),10份疱疹液标本中检出阳性标本10份(100%),差异有统计学意义(χ2=6.997,P<0.01);咽拭子标本的病毒载量拷贝数为(1.42±2.71)×104,疱疹液标本为(1.24±1.57)×104,差异无统计学意义。CoxA16阳性59例(80.82%),EV71阳性15例(20.55%);CoxA16和EV71均为阳性9例,混合感染率12.33%。3株EV71病毒株的VP1节段核苷酸序列与C基因型中的C4亚型代表株的核苷酸同源性高达94.0%～98.4%;与C4亚型的第11株毒株同属一个分支。73例HFMD患儿中,普通病例50例(68.49%),其中40例(80%)为CoxA16感染,1例为EV71和CoxA16混合感染,其余9例患儿未检测出EV71和CoxA16病毒;重症病例23例(31.51%),其中9例(39.13%)CoxA16感染,5例(21.74%)EV71感染,9例(39.13%)EV71和CoxA16混合感染。结论 CoxA16和EV71是2011年昆明地区手足口病的重要致病病原;疱疹液标本的病毒检出率高。     

手足口病患儿176例病原检测及肠道病毒71型基因特征分析

目的研究手足口病(HFMD)病原构成,对引起HFMD的肠道病毒71型(EV71)进行基因特征分析。方法采集2013年6月至8月天津市儿童医院176例临床诊断HFMD患儿的咽拭子标本,应用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测标本中的肠道病毒。选取EV71阳性标本扩增基因的VP1区,测序并比对,构建进化树分析。结果 176例标本中肠道病毒总阳性率为68.8%,其中EV71为32.4%,柯萨奇病毒A组16型(CVA16)为4.0%,EV71和CVA16双阳性为1.7%,其他肠道病毒(EV)28.4%。EV71 VP1区与C4a基因型代表株核苷酸同源性为96.6%~98.9%,氨基酸同源性为98.8%~100%,亲缘进化分析显示本地区EV71与C4a基因型代表株处于同一分支。结论 EV71是2013年天津市儿童医院手足口病住院患儿主要病原,且属于C4a基因亚型。     

长春市小儿手足口病临床特点及病原学分析

目的 了解长春市儿童医院2009至2010年住院的手足口病(hand foot and mouth disease,HFMD)患儿的临床表现及病原情况.方法 采集2009年5月至2010年11月在长春市儿童医院就诊的HFMD患儿1 862例的临床资料及患儿粪便和咽拭子标本,用RT-PCR方法对1 514份粪便标本进行肠道病毒71犁(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(Coxsackie virus A16,CoxA16)扩增,用人横纹肌肉瘤细胞对530份咽拭子标本进行病毒分离.结果 HFMD住院数2009年687人次,2010年1 175人次;其中重患率2009年6.26％( 43/687),2010年为16.51％( 194/1 175).季节分布:2009年6月及2010年6、7、8月为发病高峰月份.性别分布男1 241例,女621例.发病平均年龄(28.32±15.22)个月.城乡分布为1∶1.05.临床表现:100％出现皮疹;就诊时首发症状发热55.69％(1 037/1 862)、神经系统症状6.07％ (113/1 862)、呕吐1.41％ (26/1 862).病程中出现心肌损伤547例(29.41％),神经系统并发症548例(29.43％),呼吸系统并发症82例(4.39％).病毒分离阳性166例,阳性率31.32％.2009年EV71检出率9.62％,CoxA16检出率10.57％:2010年EV71检出率32.52％,CoxA 16检出率39.53％.结论 小儿HFMD发病数2010年较2009年增多,重患率亦增高;在夏秋季对发热患儿应注意HFMD;HFMD可引起消化系统、呼吸系统、循环系统、神经系统等多器官损害,重症患儿以神经系统损害为主;HFMD病原呈现多样性,以EV71和CoxA16为主,重患多数为EV71感染.     

从北京地区急性呼吸道感染患儿的标本中分离到人偏肺病毒

目的 从北京患急性呼吸道感染患儿的临床标本中分离人偏肺病毒(HMPV),推动对该病毒的深入研究.方法 2008年5月至2009年4月收集门诊和病房因急性呼吸道感染患儿的标本,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测核酸和直接免疫荧光法检测抗原筛选到HMPV阳性标本后接种传代的恒河猴肾细胞(LLC-MK2),经37 ℃和33 ℃孵育后用直接免疫荧光法检测细胞内的HMPV抗原,得到阳性结果后经RT-PCR进一步确定基因型.结果 从1092例病房和门诊收集的急性呼吸道患儿标本中用RT-PCR技术检测到81例为HMPV阳性,总阳性率为7.4%(81/1092).取其中33例接种到LLC-MK2细胞进行HMPV分离,有5份标本的接种细胞中可检测到HMPV抗原,并经RT-PCR检测进一步证实,分离株与常见的呼吸道病毒抗体无交叉反应.24 h内新鲜接种的标本更易分离到病毒.分离到的毒株有4株为A基因型,1株为B基因型.结论 从北京急性呼吸道感染患儿的标本中分离到两种基因型的HMPV,将进一步推动对该病毒的研究.     

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目的初步了解肠道病毒(EV)在小儿急性呼吸道感染(ARI)中的流行概况。方法2003-09—2005-04,于首都儿科研究所就诊的815例ARI患儿,取其鼻咽深部分泌物,用病毒分离及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测EV,用病毒分离和间接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒(RSV)等7种呼吸道病毒。取144例患儿双份血清,用酶联免疫吸附试验检测EV抗体。结果病毒总检出率50.9%,RSV阳性率最高(24.9%),其次为EV(16.9%)。EV在不同月份阳性率为0~34.2%,冬季阳性率最低。RT-PCR、双份血抗体检测和病毒分离3种检测EV方法的阳性率分别为16.2%、7.6%和1.0%。332例急性喘息患儿中,EV阳性率20.8%,仅次于RSV(42.5%);3岁以上喘息患儿中,EV阳性率最高(33.9%),而3岁以下患儿中,RSV阳性率最高(48.7%)。结论在住院ARI患儿中,EV是仅次于RSV的常见病原,也是引起小儿急性喘息性疾病的主要病原之一。EV在年长儿中阳性率相对较高,冬季阳性率较低。RT-PCR法检测EV,快速、敏感、特异,可用于小儿EV感染的诊断。     

Role of nutrients in the regulation of in vivo protein metabolism in humans

Nutrients regulate protein metabolism both in an acute fashion and on a long-term basis. The ingestion of meals is associated with a dramatic switch from an overall catabolic state to a state of net protein anabolism. The acute response of protein metabolism to meal ingestion is mediated, in part, by an increase in insulin secretion, itself a consequence of glucose absorption. Whereas insulin may primarily suppress rates of proteolysis, amino acids are responsible for the stimulation of protein synthesis that follows food intake. In the long run, the effects of nutrition on protein metabolism depend on the energy supply, the source of the energy (carbohydrate versus fat) and dietary protein intake. Finally, specific amino acids, such as glutamine, may play an additional role as protein anabolic agents.     

Role of nutrients in the regulation of in vivo protein metabolism in humans

Nutrients regulate protein metabolism both in an acute fashion and on a long-term basis. The ingestion of meals is associated with a dramatic switch from an overall catabolic state to a state of net protein anabolism. The acute response of protein metabolism to meal ingestion is mediated, in part, by an increase in insulin secretion, itself a consequence of glucose absorption. Whereas insulin may primarily suppress rates of proteolysis, amino acids are responsible for the stimulation of protein synthesis that follows food intake. In the long run, the effects of nutrition on protein metabolism depend on the energy supply, the source of the energy (carbohydrate versus fat) and dietary protein intake. Finally, specific amino acids, such as glutamine, may play an additional role as protein anabolic agents.     

他汀类药物在儿童家族性高胆固醇血症治疗中的研究进展

家族性高胆固醇血症(FH)是一种常染色体显性遗传的脂质代谢障碍疾病,由于FH早期就可引起动脉粥样硬化病变,增加患者严重心血管疾病的患病风险和死亡风险,因此目前越来越强调患者自儿童期就使用他汀类药物进行治疗,以改善远期预后。文章综述他汀类药物治疗儿童FH的必要性、有效性和安全性,同时也提出目前存在的一些问题和思考。     

皮质激素在癫痫治疗中的应用

皮质激素在癫痫中的应用已有近50a的历史，现已证明其对某些癫痫综合征如婴儿痉挛症、Landau—Kleffner综合征、Rassmussen综合征、具有睡眠中癫痫性电持续状态的癫痫综合征等具有肯定的治疗作用，其确切的作用机制尚不清楚。在皮质激素应用过程中应注意其不良反应。     

皮质激素在癫(癎)治疗中的应用

皮质激素在癫(癎)中的应用已有近50 a的历史,现已证明其对某些癫(癎)综合征如婴儿痉挛症、landau-Kleffner综合征、Rassmussen综合征、具有睡眠中癫(癎)性电持续状态的癫(癎)综合征等具有肯定的治疗作用,其确切的作用机制尚不清楚.在皮质激素应用过程中应注意其不良反应.     

神经营养因子在支气管哮喘发病机制中作用的研究进展

神经营养因子（NT）是主要分布于神经系统的一类因子，近来发现它们也参与呼吸系统疾病的发生，如支气管哮喘（简称哮喘）的发病。该文通过回顾NT在哮喘发病机制中作用的研究，着重阐述NT在调节哮喘的气道炎性反应及气道高反应性中的作用，探讨哮喘的发病机制，有望开辟哮喘新的诊断以及治疗方法。     

氨磷汀在儿童肿瘤化疗中的应用

目的研究氨磷汀在儿童肿瘤化疗中的作用及不良反应。方法随机选择肿瘤32例患儿,采用自身对照,观察患儿在同一化疗方案中使用氨磷汀辅助治疗后黏膜损伤、骨髓抑制时间、发热持续时间、抗生素及刺激因子应用时间及氨磷汀的不良反应。结果氨磷汀辅助治疗组发生黏膜溃疡4例,明显低于对照组9例;中性粒细胞<0.5×109/L持续时间缩短,血小板<5×109/L持续时间缩短;发热持续时间、抗生素和刺激因子应用时间缩短。两组化疗过程中均未出现低体温、皮疹、低血压等情况,化疗后肾功能、心电图均正常;对肝功能影响程度相似;氨磷汀组低钙血症尤其是低钙性抽搐发生率高。结论氨磷汀能够有效保护正常组织细胞,不良反应较低,可在儿童肿瘤患者化疗中应用。