口腔癌及癌前病变中FHIT与cyclinD1／CDK4表达的相关性研究

OBJECTIVE: To detect the expressions of fragile histidine triad (FHIT) and cyclin D1/CDK4 in oral squamous cell carcinoma (OSCC) and oral precancerous lesions and investigate the relationship between the expressions and the histopathological changes. METHODS: Immunohistochemical staining by SP methods was utilized to detect the expression of FHIT and cyclin D1/CDK4 in 64 cases of OSCC, 39 oral precancerous lesions and 12 normal oral mucosa specimens. RESULTS: The rate of the negative or low FHIT expression in OSCC was 17% (11/64), which was remarkably lower than that in normal oral membrane and oral precancerous lesions (P<0.01). Significantly higher levels of cyclin D1/CDK4 expressed in OSCC than in normal oral membrane and precancerous lesions (P<0.01). There was no significant correlation between FHIT and cyclin D1/CDK4, and positive correlation between cyclin D1 and CDK4 was observed. CONCLUSION: FHIT, cyclin D1 and CDK4 may play a role in the pathogenesis of OSCC, and FHIT can down-regulate the expression of cyclin D1.     

食管鳞癌组织中p16、cyclinD1、CDK4的表达

目的：探讨p16、cyclinD1、CDK4蛋白在食管鳞癌发生中的意义及其相互间的作用。方法：采用LSAB免疫组化染色法,对43例食管癌手术标本的p16、cyclinD1、CDK4蛋白进行标记。结果：在鳞癌组织中,3种抗体的阳性物质存在于细胞核中和／或胞浆中,且从正常鳞状上皮→癌旁不典型增生→鳞癌组织,p16的阳性率逐渐下降,而p16、cyclinD1、CDK4的阳性率却逐渐上升。正常皮皮与癌组织之间的阳性率差异均有显著性（P＜0．05）;随着癌分化程度下降,p16阳性率呈下降趋势,Ⅲ级与Ⅰ级鳞癌之间阳性率差异有显著性（P＜0．05）,但未检出cyclinD1、CDK4与癌分化程度的关系。结论：p16、cyclinD1、CDK4蛋白表达的变化是食管癌发生中的早期事件,三者构成的调节通路障碍可能参与了癌的发生。     

P16、CDK4、cyclinD1在乳腺癌中的表达及临床意义

[目的]探讨P16、CDK4、cyclinD1蛋白在乳腺癌组织中的表达情况及临床意义。[方法]用免疫组织化学方法,检测32例乳腺癌组织石蜡切片P16、CDK4及cyclinD1蛋白的表达情况,并分析其与临床病理学指标之间的关系。[结果]P16、CDK4在Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅲ级中的表达差异有显著性意义(P<0.05)。P16、CDK4蛋白的阳性表达与患者的年龄、肿瘤的大小、淋巴结转移及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达均无显著相关性。cyclinD1在Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅲ级中的表达差异没有显著性意义(P>0.05),随着乳腺癌分化程度的降低,阳性表达呈现升高趋势。cyclinD1蛋白的阳性表达与患者的年龄、肿瘤的大小、淋巴结转移及ER、PR表达均无明显相关性。[结论]P16蛋白的失表达和CDK4、cyclinD1蛋白的过表达可能参与了乳腺癌的发生和发展。     

Stat3?Bcl-2及cyclinD1在口腔黏膜癌前病变癌变中表达的相关性研究

目的:研究口腔黏膜癌前病变癌变过程中Stat3?Bcl-2及cyclinD1的表达及其相关性?方法:采用免疫组化的方法分别检测正常口腔黏膜?单纯性增生黏膜?异常增生黏膜与口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中Stat3?Bcl-2及cyclinD1的表达?结果:正常口腔黏膜?单纯性增生黏膜?异常增生黏膜和OSCC中Stat3和Bcl-2?cyclinD1的积分光密度值(intergrated optical density,IOD)均逐步升高;Stat3?Bcl-2?cyclinD1三者的IOD值除单纯性增生黏膜与口腔正常黏膜无统计学意义外,其余各组间均有统计学意义?Stat3与Bcl-2 IOD值呈线形正相关;Stat3与cyclinD1 IOD值呈线形正相关;Bcl-2与cyclinD1 IOD值无相关性?结论:Stat3?Bcl-2及cyclinD1在口腔黏膜癌前病变癌变中表达的相关性提示,口腔黏膜癌前病变癌变是由多种基因共同参与的过程?     

p16、cyclinD1在胃癌及癌前病变中表达与胃癌的关系

目的本研究通过检测p16、cyclinD1蛋白在正常胃粘膜、慢性萎缩性胃炎、胃粘膜不典型增生及胃癌中的表达,探讨p16、cyclinD1表达与胃癌发生发展的关系及作用机制。方法应用免疫组化S-P法检测慢性萎缩性胃炎、胃粘膜不典型增生及胃癌组织中p16、cyclinD1蛋白的表达情况。结果①p16蛋白检测结果:p16蛋白在慢性萎缩性胃炎组中阳性表达率(87.5%)显著高于不典型增生组(53.8%)(P<0.05),不典型增生组与胃癌组(44.4%)之间无显著性差异(P>0.05)。②cyclinD1蛋白检测结果:cyclinD1蛋白在慢性萎缩性胃炎组(29.2%)与不典型增生组(30.8%)之间无显著性差异(P>0.05),胃癌组中阳性表达率(52.7%)显著高于不典型增生组(30.8%)(P<0.05),p16与cyclinD1蛋白表达呈负相关系(r=-0.610,P<0.001)。结论胃癌发生机制涉及p16与cyclinD1基因的异常,随着病变进展,p16蛋白表达逐渐降低,cyclinD1蛋白表达逐渐升高,提示p16、cyclinD1可能是胃癌发生过程中的早期分子事件。     

抑癌基因PTEN和FHIT在口腔鳞癌中的表达及其与cyclin D1的相关性

目的检测抑癌基因PTEN、FHIT在正常口腔粘膜上皮和口腔鳞癌(OSCC)中的表达情况，并探讨其与cyclin D1的关系。方法采用免疫组化SP法检测62例OSCC中FHIT、PTEN、cyclin D1蛋白表达的情况．以12例正常口腔粘膜作对照。结果在正常口腔粘膜中PTEN均为强阳性表达(12／12)，在OSCC中24．2％(15／62)表现为PTEN蛋白表达的缺乏或减少；而FHIT在正常口腔粘膜中也均为强阳性表达(12／12)．在OSCC中17．7％(11／62)表现为FHIT蛋白表达缺乏或减少；cyclin D1在正常口腔粘膜中91．7％(11／12)表现为阴性或弱阳性表达．在OSCC中53．2％(33／62)表现为阳性或强阳性表达；PTEN与FHIT均为阳性或强阳性表达时，37．8％(28／74)cyclin D1表现为阴性或弱阳性．其中11例为正常口腔粘膜(占正常组的91．7％)。结论PTEN、FHIT在OSCC的发生过程中起着一定的作用；PTEN／FHIT的表达与cyclin D1有关，提示PTEN、FHIT能够下调cvclin D1的表达。     

胃癌及癌前病变中P16，cyclinD1蛋白的表达及其意义

目的：探讨胃癌及癌前病变中P16,cyclinD1蛋白的表达,相互关系及其意义。方P应用免疫组化SP法检测胃癌,不典型增生,慢性浅表性胃炎及正常胃组织中P16,cyclinD1蛋白的表达情况。结果：胃癌中P16蛋白表达率为52．7％,显著低于正常胃组织,慢性浅表性胃炎和不典型增生（P＜0．01）,胃癌和中－重度不典型增生组织中cyclinD1蛋白表达率分别为47．3％和57．1％,均明显高于正常胃组织,慢性浅表性胃炎和轻度不典型增生,差异有显著性（P＜0．05）,但胃癌和中－重度不典型增生组织中cyclinD1蛋白表达率之间差异无显著性（P＞0．05）,胃癌中P16与cyclinD1蛋白表达呈负相关关系（P＜0．05）。结论：胃癌发生机制涉及细胞周期调节通路中P16,cyclinD1基因的异常,且与胃癌Lauren分型,浸润深度,淋巴结转移有关。cyclinD1蛋白高表达可能是胃癌发生过程中的早期分子事件。     

人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定

【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。     

抑癌基因PTEN和FHIT在口腔鳞癌中的表达及其与cyclin D1的相关性

目的 检测抑癌基因PTEN、FHIT在正常口腔粘膜上皮和口腔鳞癌(OSCC)中的表达情况,并探讨其与cyclinD1的关系。方法 采用免疫组化SP法检测62例OSCC中FHIT、PTEN、cyclinD1蛋白表达的情况,以12例正常口腔粘膜作对照。结果 在正常口腔粘膜中PTEN均为强阳性表达(12/12),在OSCC中24.2%(15/62)表现为PTEN蛋白表达的缺乏或减少;而FHIT在正常口腔粘膜中也均为强阳性表达(12/12),在OSCC中17.7%(11/62)表现为FHIT蛋白表达缺乏或减少;cyclinD1在正常口腔粘膜中91.7%(11/12)表现为阴性或弱阳性表达,在OSCC中53.2%(33/62)表现为阳性或强阳性表达;PTEN与FHIT均为阳性或强阳性表达时,37.8%(28/74)cyclinD1表现为阴性或弱阳性,其中11例为正常口腔粘膜(占正常组的91.7%)。结论 PTEN、FHIT在OSCC的发生过程中起着一定的作用;PTEN/FHIT的表达与cyclinD1有关,提示PTEN、FHIT能够下调cyclinD1的表达。     

Cyclin D1在视黄酸诱导胸腺细胞分化中的作用研究

目的：探讨视黄酸类化合物促胸腺细胞分化的分子机制。方法：选择幼年小鼠胸腺细胞为研究对象,采用免疫组化染色、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、流式细胞分析等实验方法,观察全反式视黄酸（ＡＴＲＡ）或视黄醇（Ｒｅｔｉｎｏｌ）灌胃给药后对胸腺细胞分化成熟的影响,同时检测周期调控蛋白ｃｙｃｌｉｎＤ１及相应基因表达变化情况。结果：ＡＴＲＡ和Ｒｅｔｉｎｏｌ均可抑制胸腺细胞增殖活性,使胸腺组织中成熟功能Ｔ细胞比例增大;胸     

CDK4表达变化在口腔癌预后中的意义

目的探讨CDK4在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达变化与预后的关系。方法病理标本包括48例OSCC。所有病例均行外科手术治疗并分为两组：新辅助化疗24例及单纯手术24例。来源于诊断活检及外科手术的诊断用组织标本行CDK4蛋白免疫组化染色。标记指数（LI）为阳性细胞率,检测了活检与外科手术之间CDK4 LI变化与生存之间的关系。结果在单纯手术组,CDK4 LI的降低与良好的预后生存显著相关（P〈0．005）。结论CDK4在OSCC中的表达变化可能具有预后意义。     

口腔鳞状细胞癌组织中Bax 和 CDK4 的表达

目的研究Bax和CDK4蛋白在不同分级的口腔鳞状细胞癌组织中的表达,及其在口腔鳞癌发生发展过程中的作用及临床意义.方法利用免疫组织化学技术,检测Bax和CDK4蛋白在10例口腔正常黏膜和30例口腔鳞状细胞癌(Ⅰ级10例,Ⅱ级10例,Ⅲ级10例)组织中的表达.结果在口腔鳞状细胞癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组织中Bax蛋白阳性表达率分别为90.00%(9/10)、20.00%(2/10)和10.00%(1/10), 其在口腔鳞状细胞癌组织中阳性表达强度呈递减的趋势,差异有统计学意义(H=24.78,P<0.05);在口腔正常黏膜、口腔鳞状细胞癌组织中 CDK4蛋白阳性表达率分别为60.00%(6/10)和93.33%(28/30),差异有统计学意义(H=6.36,P<0.05);在鳞癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组织中,阳性表达率分别为90.00%(9/10)、90.00%(9/10)和100%(10/10),3组之间差异无统计学意义(P>0.05); Bax与CDK4在口腔鳞状细胞癌组织中的表达呈明显的负相关关系(r=-0.600 0,P<0.05).结论Bax蛋白在口腔鳞癌表达的减少提示恶性程度增高预后较差; CDK4蛋白在口腔鳞癌发生发展中起着重要作用且与Bax蛋白在口腔鳞癌组织中表达呈负相关.     

胃黏膜癌变过程中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1 及CDK4的表达及其意义

目的研究胃黏膜癌变过程中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1及CDK4的表达及其意义.方法采用免疫组化方法对50例胃癌,18例癌旁肠化生,7例癌旁轻中度不典型增生及9例重度不典型增生组织中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1 及CDK4的表达情况进行检测和比较.结果 Rb基因的过度表达在不典型增生及胃癌中检测到,在胃癌组织中的表达强度明显大于重度不典型增生病变(P<0.05),Cyclin D1 及CDK4的表达仅发现在胃癌组织中,胃癌组织中Cyclin D1表达阳性的13例病例中有5例同时表达Rb,2例同时表达CDK4;Rb阳性的17例胃癌组织中有3例同时表达CDK4.结论 Rb,cyclin D1和CDK4的过度表达可能参与胃癌的发生,Rb的过度表达出现在胃黏膜癌变过程的较早期阶段,Cyclin D1和CDK4的过度表达属于胃癌变过程中的较晚期的基因事件.     

X射线对小鼠脾细胞内P16、cyclin D1和CDK4表达的影响

目的:探讨X射线对小鼠脾细胞内P16、cyclin D1和CDK4表达的影响.方法:采用细胞间接荧光标记法、FACScan流式细胞仪检测不同剂量X射线全身照射后小鼠脾细胞内P16、cyclin D1和CDK4三种蛋白表达的时程变化和量效关系.结果:2.0 Gy X射线照后24 h小鼠脾细胞P16表达明显高于假照组;CDK4表达水平在照后8 h明显降低,持续至照后72 h仍低于正常水平.周期蛋白cyclin D1表达轻度下调.不同剂量照射后P16蛋白表达呈剂量依赖性增加,1.0～4.0 Gy组与假照射组相比显著增多(P＜0.05,P＜0.01);cyclin D1蛋白表达随剂量升高有降低趋势;CDK4亦呈剂量依赖性降低,0.5～6.0 Gy组与假照组比较差异具有显著性(P＜0.05,P＜0.01).结论:P16/cyclin D1/CDK4/pRb通路在电离辐射诱导脾细胞G1期阻滞中可能起十分重要作用.     

卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1和CDK1的表达

目的:探讨卵巢上皮性癌组织中细胞周期素B1(CyclinB1)和细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)的表达及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、40例卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的表达。结果:①卵巢上皮性癌组织中CyclinB1和CDK1蛋白的阳性表达率分别为77.5%和90.0%,良性卵巢上皮肿瘤组织分别为25.0%和35.0%,正常卵巢组织分别为5.0%和10.0%,3者相比差异有统计学意义(χ2=33.036,39.568;P<0.001)。②CyclinB1蛋白的表达与卵巢上皮性癌FIGO分期、组织分化和淋巴结转移有关(P<0.05),CDK1蛋白的表达与卵巢上皮性癌临床病理特征无关。结论:CyclinB1和CDK1蛋白在卵巢上皮性癌组织中存在异常高表达,可能在卵巢上皮性癌的早期恶变过程中发挥重要作用。