大鼠肝缺血再灌注损伤NF-kB与ICAM-1在脑组织的表达及意义

目的：观察大鼠在肝脏缺血再灌注（IR）过程中肝脏炎性细胞因子TNF-α、IL-1βmRNA表达与脑组织NF-kB、ICAM-1表达之间的关系，探讨肝脏IR是否可导致脑组织损伤及其可能的机制。方法：选健康雄性Wister大鼠48只，随机分为对照组、缺血30min组（I组）、缺血30min再灌注组（IR组）、缺血30min再灌注后1h组（IR1h组）、缺血30min再灌注后2h组（IR2h组）、缺血30min再灌注后4h组（IR4h组），每组8只。应用免疫组化法分别检测各组大鼠肝脏TNF-α及脑皮质、海马和下丘脑区NF-kB、ICAM-1的表达情况，应用原位杂交的方法检测肝脏IL-1βmRNA表达情况。结果：肝脏IR导致肝脏明显的损伤，表现为血清GPT、AKP、γ-GT升高（P〈0．01），肝组织中TNF-α、IL-1βmRNA表达显著增N（P〈0．01），肝细胞水肿，炎性细胞浸润，甚至细胞坏死。随着再灌注时间的延长，脑组织HE染色可见脑细胞水肿，甚至个别脑细胞坏死。与对照组比较，I组和IR组大鼠脑皮质、海马和下丘脑中NF-kB、ICAM-1表达的差异无统计学意义（P〉0．05），IR1h组、IR2h组和IR4h组的差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。IR1h、IR2h、IR4h组与对照组、I组、IR组比较，各部位脑组织NF-kB、ICAM-1的表达显著增N（P〈0．05或P〈0．01）。各组大鼠不同部位脑组织间NF-kB、ICAM-1表达无统计学意义（P〉0．05）。结论：肝脏IR对脑组织可产生损伤性影响，NF-kB、ICAM-1介导的炎性细胞反应，参与了脑组织损伤的发生机制。     

七氟醚预处理对大鼠缺血-再灌注肝脏NF-κB及ICAM-1表达的影响

目的 探讨核因子-κB(NF-κB)和细胞问粘附分子-1(ICAM-1)在七氟醚保护大鼠肝脏缺血-再灌注损伤机制中的作用.方法 将40只SD成年雌性大鼠,随机均分为四组:假手术组(N组),缺血-再灌注组(IR组),七氟醚组(S组),七氟醚缺血-再灌注组(SIR组),每组10只.肝脏缺血1 h、再灌注2 h后取循环血和肝脏,N组、S组作为对照;IR组和SIR组阻断支配大鼠肝脏左叶和中叶的门静脉造成约70%肝脏缺血-再灌注模型,缺血1 h、冉灌注2 h后取材.测定大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)作为肝损害的标志被检测,光镜观察组织学病理改变,电镜下观察肝细胞的超微结构,采用免疫组织化学法检测肝组织NF-κB活性和ICAM-1水平.结果 SIR组肝ALT、AST酶升高受到显著抑制(P＜0.05),电镜显示SIR组细胞拟伤程度小于IR组,SIR组NF-κB和ICAM-1表达低于IR组(P＜0.05).结论 七氟醚能抑制肝缺血-再灌注细胞的NF-κB和ICAM-1表达;NF-κB可能通过调控ICAM-1的表达在缺血-再灌注损伤中发挥作用.     

瑞芬太尼预处理对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤中NF-κB和ICAM-1表达的影响

目的观察瑞芬太尼预处理对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤中核因子-κB(NF-κB)和细胞间粘附因子-1(ICAM-1)表达的影响。方法用SD大鼠制作肝脏缺血-再灌注模型,随机分为假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)和瑞芬太尼预处理组(R组)。S组经股静脉给予与R组相同的速率及容积的生理盐水输注15min,停药10min,然后行剖腹和关腹,但不进行缺血-再灌注;IR组同S组一样给予生理盐水的输注,然后进行缺血45min和再灌注2h;R组股静脉用微量泵给予瑞芬太尼1μg·kg-1·min-1预处理,持续给药15min,停药10min,然后进行缺血-再灌注。光镜下观察三组组织学病理改变,检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,Western blotting检测NF-κB和ICAM-1相对灰度值。结果光镜显示R组的损伤程度小于IR组。与S组比较,IR组和R组血清ALT、AST水平、肝组织NF-κB和ICAM-1相对灰度值明显升高(P0.05);与IR组比较,R组血清中ALT、AST水平、肝组织NF-κB和ICAM-1相对灰度值明显降低(P0.05)。结论瑞芬太尼预处理能够减轻肝脏缺血-再灌注时损伤的程度,可能与抑制NF-κB的活性,从而减少ICAM-1的表达有关。     

缺血预处理对大鼠肝脏移植物再灌注早期NF-κB活性的影响及意义

目的 观察缺血预处理对大鼠肝脏移植后再灌注早期核转录因子-κB(NF-κB)活性和TNF-α、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨缺血预处理的保护机理.方法 建立大鼠肝脏移植模型,供肝在林格液中保存2 h,实验分假手术组、对照组和缺血预处理组(IP组)3组,IP组于供肝切取前夹闭第一肝门10 min,然后开放10 min.分别于移植再灌注后1、2、4及6 h抽血进行肝酶学检查,切取肝脏作NF-κB活性、TNF-α和ICAM-1表达的测定.结果 IP组肝功能得到有效改善.与假手术组比较,对照组及IP组再灌注后移植物的NF-κB活性明显增强,且在1、2 h达高峰,4 h后减弱,TNF-α和ICAM-1表达也随之增加;同对照组相比,IP组的NF-κB活性降低,并且在1、2 h差异具有统计学意义(P＜0.05),TNF-α和ICAM-1表达亦降低.结论 缺血预处理对于供肝的保护作用可能是通过抑制再灌注早期NF-κB的活性,减少了TNF-α和ICAM-1炎症介质的释放,从而减轻了移植物再灌注早期的炎症反应实现的.     

抑制核因子-κB表达对大鼠供肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂氟美松对大鼠供肺缺血-再灌注损伤的保护作用。方法24只大鼠随机分为两组,实验组采用含氟美松的低钾右旋糖酐(LPD)液灌洗和保存供肺,对照组以LPD液灌洗和保存供肺,16h后建立离体肺再灌注模型,循环灌注1h。再灌注期间,每隔15min测定供肺氧合后动脉血氧分压(PaO2)和气道峰压(PawP);再灌注结束后测定肺组织湿重与干重比(W/D)以及肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性、细胞间粘附分子(ICAM-1)和NF-κB的表达。结果再灌注15min后,两个组的PaO2逐渐降低、PawP逐渐升高,但实验组PaO2的降低程度和PawP的升高程度明显低于对照组(P<0.01);再灌注后,实验组的W/D和MPO明显低于对照组(P<0.01),其肺组织中ICAM-1、ICAM-1mRNA、NF-κB及NF-κBmRNA的表达量也明显低于对照组(P<0.01)。结论应用氟美松抑制NF-κB的表达对大鼠供肺缺血-再灌注损伤具有保护作用。     

还原型谷胱甘肽对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后炎性细胞因子表达的影响

目的 探讨经门静脉注射还原型谷胱甘肽(GSH)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后TNF-α、IL-1β和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)表达的影响及意义.方法 72只雄性SD大鼠平均分为假手术组(SO组)、生理盐水预处理组(IR组)和GSH预处理组(GPC组).建立肝脏缺血再灌注损伤模型,检测再灌注30、60和180 min血清TNF-α、IL-1β含量,以及肝组织中TNF-α mRNA、IL-1β mRNA和MIP-2mRNA表达水平.两独立样本采用t检验,多组比较采用方差分析.结果 GPC组血清TNF-α含量于缺血再灌注180 min后显著低于IR组(t=2.512,P<0.05).而肝组织TNF-αmRNA表达水平于缺血再灌注30 min后即显著低于IR组(t=2.427,P<0.05).GPC组血清中IL-1β含量和肝组织中IL-1βmRNA表达水平于缺血再灌注后各时相点均显著低于IR组(t=2.731,3.825,4.372,3.371,3.972,4.685,P<0.05).GPC组MIP-2 mRNA表达于缺血再灌注60 min和180 min显著低于IR组(t=2.593,5.429,P<0.05).结论 TNF-α、IL-1β和MIP-2等炎性因子在肝脏缺血再灌注损伤中发挥重要作用.GSH能够抑制炎性细胞因子如TNF-α、IL-1β和MIP-2的生成,并发挥抗肝脏缺血再灌注损伤的作用.     

丙泊酚对大鼠移植肝NF-κB活化、ICAM-1、IL-1β和TNF-α表达的影响

目的 探讨丙泊酚对供肝保护的机理.方法 24只健康雄性SD大鼠,采用Kamada袖套法建立大鼠原位肝移植动物模型,随机均分为三组.移植肝再灌注前30 min,P100组和P50组分别腹腔注射丙泊酚100 mg/kg和50 mg/kg;C组腹腔注射生理盐水15 ml/kg作为对照.于肝脏再灌注6 h抽取下腔静脉血,测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,ELISA法测定肝组织核因子(NF)-κB p65转录因子,免疫组织化学染色检测肝组织细胞间黏附分子(ICAM)-1、白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达.结果 再灌注6 h后,P100组、P50组大鼠血浆ALT、AST活性较C组明显降低(P<0.01);P50组ALT、AST活性较P100组增高(P<0.01).与C组相比,P100组和P50组在再灌注6 h大鼠肝组织NF-κB p65转录因子活化水平、TNF-α、IL-1β、ICAM-1 mRNA明显降低(P<0.01).P100组大鼠在再灌注6 h肝组织NF-κB p65转录因子活化水平、TNF-α、IL-1β、ICAM-1 mRNA表达明显低于P50组(P<0.01).结论 丙泊酚能抑制大鼠局灶性肝缺血-再灌注时NF-κB的活化,进而抑制炎症反应.这可能是其肝保护作用的机制之一.     

丙泊酚对大鼠肢体缺血-再灌注损伤脑组织TNF-α、NF-κB表达的影响

目的 研究丙泊酚对大鼠肢体缺血-再灌注损伤脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和核因子-κ B(NF-κB)表达的影响.方法 24只SD雄性大鼠随机均分为肢体缺血-再灌注组(A组),丙泊酚组(B组)和对照组(C组).制备A组和B组的大鼠模型,采用免疫组织化学方法检测TNF-α和NF-κB的表达,并行图像分析予以半定量.结果 A、B组大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的表达明显增高,A组明显高于B组(P＜0.01).结论 丙泊酚对肢体缺血-再灌注引起的脑损伤有一定程度的保护作用,其机制可能与下调大鼠肢体缺血-再灌注损伤脑组织TNF-α、NF-κB的过度表达有关.     

辛伐他汀预先给药对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响

目的 评价辛伐他汀预先给药对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠96只,体重220～280 g,随机分为3组(n=32):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和辛伐他汀预先给药组(Si组).IR组和Si组采用夹闭腹主动脉45 min后开放的方法制备脊髓缺血再灌注模型,Si组制备模型前3 d开始以辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃,连续3 d.分别于再灌注6、12、24 h时取8只大鼠,进行后肢运动功能评分.分别于再灌注2、6、12、24 h时取8只大鼠,采集静脉血样,测定血清脑型肌酸激酶同工酶(CK-BB)活性.取完血样后取大鼠脊髓组织,测定Toll样受体4(TLR4)mRNA表达、NF-κB活性、TNF-α含量和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)含量,光镜下观察脊髓的病理学结果.结果 与S组比较,IR组和Si组后肢运动功能评分降低,血清CK-BB活性、脊髓TLR4mRNA表达、NF-κB活性、TNF-α和ICAM-1含量升高(P＜0.05或0.01).与IR组比较,Si组后肢运动功能评分升高,血清CK-BB活性、脊髓TLR4 mRNA表达、NF-κB活性、TNF-α和ICAM-1含量降低(P＜0.05或0.01).Si组脊髓病理学损伤程度轻于IR组.结论 辛伐他汀预先给药可减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤,其机制与下调TLR4表达、抑制NF-κB激活,从而减轻炎性反应有关.     

NF-κB与肝脏缺血再灌注损伤的研究进展

核因子kappaB（NF-κB）是近年发现的重要的转录因子。研究表明,肝脏缺血再灌注时,NF-κB能够转录调节诸多编码炎症介质的基因。肝脏的缺血再灌注损伤是临床肝移植术后最常见的病理生理过程之一,许多细胞因子参与了这一过程,如TNF-α、IL-1、ICAM-1、INOS等,近来许多研究表明这些细胞因子都受NF-κB的基因调控。目前较为一致的看法是肝缺血再灌注损伤过程中氧自由基等产物激活NF-κB,促使TNF-α、ICAM-1和INOS mRNA表达增强,导致肝缺血再灌注损伤。就NF-κB和肝脏缺血再灌注损伤之间的联系和作用作一综述。     

异丙酚对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织细胞间粘附分子-1及核转录因子-κB表达的影响

目的观察异丙酚对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马组织细胞问粘附分子-1(ICAM-1)及核转录因子-κB(NF-κB)基因表达的影响,探讨异丙酚脑保护作用的机制。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注对照组(B组)和缺血再灌注异丙酚预处理组(C组),按异丙酚用量又分为50mg·kg-1、100mg·kg-1和150mg·kg-1三个亚组,缺血前10min腹腔注射。全脑缺血10min再灌注24h时,断头处死大鼠。用逆转录-聚合酶链反应技术检测海马组织ICAM-1与NF-κBmRNA的表达,用免疫组织化学方法检测海马组织ICAM-1及NF-κB蛋白的表达,用电镜检测海马组织超微结构的改变。结果脑缺血再灌注后海马组织ICAM-1与NF-κBmRNA的表达水平增高,异丙酚可下调ICAM-1与NF-κBmRNA的表达;缺血再灌注亦可明显诱导ICAM-1与NF-κB蛋白在海马的表达,异丙酚预处理可显著抑制ICAM-1与NF-κB蛋自在海马的表达;缺血再灌注后海马线粒体超微结构发生明显损害,异丙酚可减轻海马线粒体的损伤程度。结论异丙酚可能通过抑制:ICAM-1与NF-κB基因的表达而对脑缺血再灌注损伤起一定的保护作用。     

缺血后处理对大鼠肝缺血再灌注损伤早期的保护作用

目的 探讨缺血后处理（IPC）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤早期的保护作用机理。方法 建立大鼠肝脏缺血再灌注模型，54只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（SO组）、对照组（IR组）和缺血后处理组（IPC组）。后处理组于完全再灌注前，给予多次短暂复灌复停作为缺血后处理。分别于再灌注后1h、3h及6h抽血进行血清ALT、AST活性及TNF-α表达测定，免疫组化测定肝脏NF-kB活性及ICAM-1的表达。结果 与SO组比较，IR组及IPC组再灌注后大鼠血清ALT、AST活性明显增高，肝脏NF-kB活性明显增强，TNF-α和ICAM-1表达也随之增加；同IR组相比，IPC组的血清ALT、AST活性明显降低，NF-kB活性及TNF-α和ICAM-1表达亦明显降低，差异均具有统计学意义（P〈0．01）。结论 缺血后处理能够减轻肝脏缺血再灌注损伤。其保护作用可能与通过抑制再灌注早期NF-kB的活性，降低了TNF-α和ICAM-1等炎性细胞因子水平有关。     

cAMP-PKA信号转导通路在缺血预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨cAMP-PKA信号转导通路在缺血预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用.方法 成年SD大鼠50只,体重300-350g,采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型后随机分为5组(n=10):缺血再灌注组(IR组)、缺血预处理组(IPC组)、H89组、脯氨酸二硫氨基甲酸组(PDTC组)和双丁酰环磷酸腺苷组(db-cAMP组).K-H液平衡灌注10 min后,R组K-H液继续灌注30 min后停灌1 h,再灌注30 min;IPC组停灌5 min,再灌注5 min.反复3次,停灌1 h再灌注30 min;PDTC和H89组停灌5 min,分别用含有PDTC 100μmol/L和含有H89 10 μmol/L的K-H液再灌注5 min,反复3次,余同IPC组;db-cAMP组用含db-cAMP 200 μmollL的K-H液灌注30 min,停灌1 h再灌注30 min.于平衡灌注10 min、再灌注10、20和30 min时记录左心室压力最大变化速率(±dp/dtmax)和左心室发展压(LVDP).于平衡灌注10 min和再灌注30 min时记录冠脉流出量(CF);测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)活性.于再灌注30 min时取心肌组织,采用EMSA法检测NF-κB-DNA结合活性,采用RT-PCR法检测TNF-α mRNA表达,采用Western blot法检测磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白(p-CREB)(Serl33)表达.结果 与IR组比较,IPC组和db-cAMP组NF-κB-DNA结合活性和TNF-α-mRNA表达降低,±dp/dt和CF升高,CK和LDH活性降低,WC组、PDTC组和db-cAMP组p-CREB(Ser133)表达升高(P<0.05或0.01);与IPC组比较,H89组和PDTC组NF-κB-DNA结合活性和TNF-αmRNA表达升高,±dp/dt、LVDP和CF降低,CK和LDH活性升高.H89组p-CREB(Serl33)表达降低(P<0.05或0.01).结论 缺血预处理通过激活cAMP-PKA信号转导通路抑制NF-κB-DNA结合活性,减少炎性因子的基因转录.从而减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤.     

氟比洛芬酯预先给药对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨氟比洛芬酯预先给药对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠84只,体重200～350 g,随机分为4组(n=21):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、氟比洛芬酯5 mg/kg组(F_1组)和氟比洛芬酯10 mg/kg组(F_2组).采用夹闭双侧颈总动脉联合低血压法建立全脑缺血再灌注模型.F_(1,2)组分别于缺血前15 min静脉注射氟比洛芬酯5、10 mg/kg.于再灌注6 h(T_1)、24 h(T_2)、72 h(T_3)时随机取7只大鼠行神经功能缺陷评分(NDS),采用放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的浓度,RT-PCR法测定海马组织核因子-κB(NF-κB)mRNA及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达水平,并观察海马CA1区病理学结果 .结果 与S组比较,其余3组T_(1～3)时NDS升高,海马组织ICAM-1 mRNA、NF-κB mRNA表达上调,T_(1,2)时血清TNF-α浓度升高,T_(1～3)时血清IL-1β浓度升高 (P<0.05或0.01);与IR组比较,F_(1,2)组T_(1～3)时NDS降低,海马ICAM-1 mRNA、NF-κB mRNA表达下调,T_(1,2)时血清TNF-α冉档停琓_(1～3)时血清IL-1β浓度降低(P<0.05或0.01);与F_1组比较,F_2组T_(2,3)时海马ICAM-1 mRNA表达下调,T_2时血清IL-1β浓度降低(P<0.05或0.01).IR组、F_1组及F_2组海马组织病理学损伤程度依次减轻.结论 氟比洛芬酯预先给药可减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤,且呈剂量依赖性,其机制可能与抑制海马组织炎性反应有关.     

盐酸右美托咪定对缺血-再灌注损伤大鼠心肌Toll样受体4/核因子-κB信号通路的作用

目的研究盐酸右美托咪定对心肌缺血-再灌注损伤大鼠心肌组织中Toll样受体(toll-like receptor,TLR)-4mRNA、核因子(nuclear factor,NF)-κB mRNA的表达,探讨盐酸右美托咪定对心肌缺血-再灌注损伤大鼠心肌TLR-4/NF-κB信号通路的影响。方法健康3个月龄SD雄性大鼠21只,体重250~300g,随机均分为三组:假手术组(sham组)、缺血-再灌注组(IR组)、缺血-再灌注+盐酸右美托咪定组(DEX组)。采用结扎左冠状动脉前降支的方法制备大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型,sham组左冠状动脉穿线不结扎。Sham组和IR组在结扎前30min经腹腔注射生理盐水100μg/kg,DEX组在结扎前30min经腹腔注射盐酸右美托咪定注射液100μg/kg(4μg/ml)。实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测TLR-4mRNA和NF-κB mRNA的表达。结果sham、IR和DEX组的TRL-4mRNA分别为(2.21±0.11)、(7.83±0.35)和(3.91±0.21),sham、IR和DEX组的NF-κB mRNA分别为(0.013±0.166)、(0.051±0.016)和(0.015±0.004),IR、DEX组的TRL-4mRNA和NF-κB mRNA的表达明显高于sham组,且DEX组TRL-4mRNA和NF-κB mRNA的表达明显低于IR组(P0.05)。结论盐酸右美托咪定可降低缺血-再灌注损伤大鼠心肌组织TLR-4mRNA和NF-κBmRNA的表达,盐酸右美托咪定可以调控TLR/NF-κB信号通路的转导,抑制炎症反应,减轻心肌缺血-再灌注损伤,保护心肌。     

蛋白酶体抑制剂MG132减轻大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的作用

目的 研究蛋白酶体抑制剂MG132减轻大鼠移植胰腺缺血再灌注(IR)损伤的作用及其机制.方法 采用随机数字表法将SD大鼠分为假手术组、IR组和MG132组,IR组和MG132组建立同系大鼠胰腺十二指肠移植模型.分别于再灌注后1、3、6h,检测受鼠血清淀粉酶含量,光镜下观察胰腺组织病理变化,采用蛋白质印迹法测定胰腺组织中核因子-κB(NF-κB) P65蛋白的水平,采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应法分别检测胰腺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和细胞间黏附因子-1(ICAM-1)的表达情况.结果 与假手术组比较,IR组再灌注后相同时点的组织病理损伤明显较重,血清淀粉酶含量、胰腺组织中P65蛋白水平以及TNF-α和ICAM-1水平均明显上升;与IR组比较,MG132组相同时点的组织损伤减轻,血清淀粉酶含量、胰腺组织中P65蛋白水平及TNF-α和ICAM-1水平均明显降低.结论 MG132能够减轻大鼠移植胰腺的IR损伤,其机制可能是通过抑制NF-κB的活化,从而下调TNF-α和ICAM-1的表达.     

乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时炎性反应的影响

目的 评价乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时炎性反应的影响.方法 健康SD大鼠40只,体重250～280 g,雌雄各半,采用随机数字表法,将大鼠随机分为假手术组(S组)、心肌缺血再灌注损伤组(IR组)、脂肪乳组(Ⅰ组)和乳化异氟醚组(EI组),每组10只.采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注180 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.S组、IR组、Ⅰ组和EI组于尾静脉分别输注0.9％生理盐水、0.9％生理盐水、30％脂肪乳和乳化异氟醚2 ml/kg(液态异氟醚体积比为8％),给药时间30 min,停止给药后30 min制备模型.于再灌注180 min时抽取心脏血后处死大鼠取心脏,采用TTC染色法测定心肌梗死面积,放射免疫法测定血浆肿瘤细胞坏死因子a(TNF-a)浓度,免疫组化法检测缺血心肌细胞核因子-κB p65(NF-κB p65)和细胞黏附分子-1(ICAM-1)的表达.结果 与S组比较,其余3组心肌梗死面积增加,血浆TNF-α浓度升高,心肌NF-kB p65和ICAM-1表达上调(P＜0.05);与IR组和I组比较,EI组心肌梗死面积减少,血浆TNF-a浓度降低,心肌NF-κB p65和ICAM-1表达下调(P＜0.05).结论 乳化异氟醚预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制心肌细胞NF-kB和ICAM-1表达,减轻炎性反应有关.     

重组人骨形态发生蛋白-7对大鼠心肌缺血再灌注时NF-κB活性的影响

目的 探讨重组人骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)对大鼠心肌缺血再灌注时NF-κB活性的影响.方法 健康Wistar大鼠40只,体重250～300 g,雌雄不拘,随机分为3组:假手术组(S组,n=8)、缺血再灌注组(IR组,n=16)和rhBMP-7组(B组,n=16).采用结扎左冠状动脉前降支后30 min再灌注的方法 建立大鼠心肌缺血再灌注模型.S组左冠状动脉穿线后不结扎;B组于再灌注前即刻经股静脉注射rhBMP-7 250μg/kg,IR组和S组注射等容量生理盐水.B组和IR组分别于再灌注4 h(T1)和24 h(T2)时随机取8只大鼠测定血清乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CPK)活性、心肌组织MDA含量、SOD活性;TUNEL法检测心肌凋亡细胞,并计算心肌细胞凋亡率;Western blot法测定心肌细胞核NF-κB的表达,以表示心肌细胞NF-κB的活性;S组仅于T1时测定以上指标.结果 与S组比较,IR组和B组再灌注时血清LDH、CPK活性和心肌MDA含量升高,心肌SOD活性降低,心肌细胞凋亡率和NF-κB活性升高(P<0.05或0.01);与IR组比较.B组再灌注时血清LDH、CPK活性和心肌MDA含量降低,心肌SOD活性升高,心肌细胞凋亡率和NF-κB活性降低(P<0.05或0.01).结论 rhBMP-7可能通过抑制大鼠心肌细胞NF-κB的活性,从而减轻心肌缺血再灌注损伤.     

缺血后处理减轻肠缺血再灌注引起的肝损伤的机制研究

目的：探讨缺血后处理减轻肠缺血再灌注引起的肝损伤的作用机制,为外科防治缺血再灌注损伤提供策略。方法将36只SD大鼠随机分为假手术组（SO组,仅手术显露肠系膜上动脉）、缺血再灌注组（IR组,阻断肠系膜上动脉60min,再灌注120min）、缺血后处理组（IP组,阻断肠系膜上动脉60min后行3个循环的灌注30s/阻断30s,再持续灌注117min）,每组12只。建立模型2h后采集各组大鼠动、静脉血及部分小肠、肝组织,检测血肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素10（IL-10）、丙氨酸氨基转氨酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平,测定血清及肝组织内丙二醛（MDA）、髓过氧化酶（MPO）水平,光学显微镜下观察小肠及肝脏病理学改变,免疫组织化学法检测肝脏组织中核因子κBp65（NF-κBp65）和缺氧诱导因子1α（HIF-1α）的表达变化。结果与SO组比较,IR组小肠、肝脏病理损伤加重,肝组织NF-κBp65和HIF-1α的表达显著升高,血清和肝组织中MDA、MPO水平及血清TNF-α、IL-10、ALT和AST水平升高;与IR组比较,IP组小肠、肝脏损伤减轻,肝组织NF-κBp65表达下降而HIF-1α的表达显著升高,血清和肝组织中MDA、MPO水平及血清TNF-α、ALT和AST水平均显著下降,血清IL-10水平增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论缺血后处理可以促进抗炎因子的激活,抑制NF-κB信号通路调控的炎症级联反应,上调HIF-1α的表达,减轻小肠缺血再灌注引起的肝损伤。     

核因子-κB在白细胞介导大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨核因子(NF)-κB在大鼠移植胰腺再灌注损伤中的作用及其可能机制.方法 应用同系大鼠异位全胰十二指肠移植模型,大鼠移植术前和术后5 min静脉注射NF-κB抑制剂脯氨酸二硫代氨基甲酸酯(ProDTC)(15 mg/kg),移植术后24 h经腹主动脉取血测定大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2浓度酶联免疫吸附试验(ELISA)、血糖、淀粉酶、脂肪酶水平.测定胰腺组织NF-κB p65蛋白含量(Western blot)、TNF-α mRNA、MIP-2 mRNA、细胞间黏附分子(ICAM)-1 mRNA表达逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、髓过氧化物酶(MPO)活性.并进行组织学观察.结果 移植后24 h ProDTC组和对照组血清中TNF-α、MIP-2水平、胰腺组织中NF-κB p65蛋白含量、TNF-α mRNA、MIP-2 mRNA、ICAM-1 mRNA表达、MPO活性均升高,而ProDTC组水平明显低于对照组(P<0.05).移植后24 h血糖、脂肪酶水平在PmDTC组[(9.1±2.8)mmoL/L,(192±26)U/L]明显低于对照组[(13.0±3.1)mmol/L,(297±31)U/L,P<0.05].ProDTC组胰小叶间质水肿和胰小叶内中性粒细胞浸润较轻.结论 移植胰腺缺血再灌注后,NF-κB活化上调了TNF-α、MIP-2、ICAM-1表达从而增加中性粒细胞浸润,外源性应用NF-κB抑制剂ProDTC可以减轻移植胰腺缺血再灌注损伤.