HER-2 0表达与HER-2低表达早期乳腺癌的长期预后与分子特征比较

背景与目的 新型抗人表皮生长因子受体2（HER-2）抗体偶联药物（ADC）为包括HER-2低表达在内的乳腺癌患者开辟了新的治疗选择。然而,目前HER-2低表达和HER-2 0表达乳腺癌之间的临床病理特征、分子特征及预后差异尚不明确。因此,本研究主要比较HER-2低表达和HER-2 0表达乳腺癌患者的生存预后、临床病理特征以及分子特征之间的差异,旨在进一步揭示HER-2低表达乳腺癌的分子特征及更精准地选择ADC药物获益人群。方法 回顾性分析中南大学湘雅医院2011年1月—2015年12月1 245例经手术治疗的Ⅰ~Ⅲ期早期原发性浸润性乳腺癌患者资料。比较不同HER-2表达水平（0表达、低表达、过表达）患者临床病理特征的差异,分析患者的总生存（OS）和无病生存（DFS）的差异,筛选预后的独立影响因素。通过TCGA数据库分析比较HER-2低表达和HER-2 0表达乳腺癌患者的分子特征及免疫微环境差异。结果 1 245例患者中,HER-2 0表达395例（31.73%）、HER-2低表达562例（45.14%）,HER-2过表达288例（23.13%）。与HER-2 0表达患者相比,HER-2低表达患者淋巴结分期更高、激素受体（HR）阳性比例更高、腋窝淋巴结转移更多,Ki-67水平较低（均P<0.05）。生存分析显示,HER-2过表达患者的OS与DFS均明显低于HER-2 0表达患者与HER-2低表达患者（均P<0.05）;HER-2 0表达和HER-2低表达患者的OS和DFS无论在整体上还是不同淋巴结状态或不同HR状态分层患者中均无明显差异（均P>0.05）。多因素Cox风险模型结果提示,年龄、腋窝淋巴结转移是乳腺癌患者OS的独立危险因素;年龄、ER状态、HER-2表达水平、腋窝淋巴结转移是乳腺癌患者DFS的独立危险因素（均P<0.05）。分子特征方面,HER-2低表达和HER-2 0表达在分子突变负荷方面无明显差异,但在免疫浸润方面有一定差异,HER-2 0表达乳腺癌的抗肿瘤免疫反应更为活跃。结论 HER-2低表达和HER-2 0表达乳腺癌的病理特征存在一定差异,但HER-2低表达和HER-2 0表达乳腺癌的预后结局相似;HER-2低表达乳腺癌的分子特征具有异质性,但与HER-2 0表达乳腺癌的分子特征不具有显著特异性。因此,本研究结果尚不支持将HER-2低表达作为新的乳腺癌分子分型。     

不同HER-2表达水平乳腺癌患者新辅助化疗疗效与生存分析

背景与目的 新辅助化疗是早期高危或局部晚期乳腺癌降期保乳和提高整体治愈率重要的治疗策略,新辅助化疗人群的选择和方案的制订依赖于分子分型。然而目前尚缺乏不同人表皮生长因子受体2（HER-2）表达水平的乳腺癌新辅助化疗疗效及生存预后差异的研究。本研究通过比较不同HER-2表达水平的乳腺癌患者新辅助化疗疗效及生存预后的差异,旨在明确其新辅助化疗疗效及生存预后的影响因素,为临床新辅助化疗人群选择和方案制订提供参考。方法 回顾性分析2018年1月—2022年5月于中南大学湘雅医院乳腺外科接受新辅助化疗且行根治性手术的乳腺癌患者资料。比较不同HER-2表达水平（0表达、低表达、过表达）患者临床病理特征的差异,用Logistic回归分析筛选病理完全缓解（pCR）的独立影响因素,用Kaplan-Meier方法估计患者的生存曲线,用Log-rank检验比较生存率的差异,通过Cox回归分析筛选预后的独立影响因素。结果 共纳入601例患者,其中HER-2 0表达231例（38.4%）、HER-2低表达137例（22.8%）、HER-2过表达233例（38.8%）。与HER-2 0表达患者和HER-2过表达患者比较,HER-2低表达患者具有更高的BMI,合并肿瘤家族史更少见,组织学分级更低,激素受体（HR）阳性比例更高;HER-2过表达患者的肿瘤纤维化程度明显低于HER-2 0表达和HER-2低表达患者（均P<0.05）。HER-2低表达患者中,HR阴性亚组患者较HR阳性亚组患者肿块更大,组织学分级更高,Ki-67水平更高（均P<0.05）。全组患者中,HER-2表达水平、pCR、临床淋巴结分期（cN）是患者无病生存（DFS）的独立影响因素（均P<0.05）。HER-2过表达患者的新辅助化疗pCR率及DFS率明显高于HER-2低表达和HER-2 0表达患者（均P<0.05）,但HER-2低表达和HER-2 0表达患者的新辅助化疗pCR率及DFS率无明显差异（均P>0.05）。肿瘤纤维化程度和雌激素受体（ER）状态是HER-2 0表达乳腺癌pCR的独立影响因素,间质肿瘤浸润淋巴细胞（sTILs）水平是HER-2低表达乳腺癌pCR的独立影响因素,肿瘤纤维化程度和ER状态是HER-2过表达乳腺癌pCR的独立影响因素（均P<0.05）。结论 新辅助化疗对HER-2过表达乳腺癌患者的疗效优于HER-2 0表达和HER-2低表达乳腺癌患者。ER状态和纤维化程度、sTILs水平分别是HER-2 0表达与低表达患者pCR的独立影响因素,而ER状态与纤维化程度是HER-2过表达患者pCR的独立影响因素。     

富亮氨酸α2糖蛋白1在乳腺癌中的表达及其功能的生物信息学分析

背景与目的 富亮氨酸α2糖蛋白1（LRG1）是富亮氨酸重复序列（LRR）家族蛋白成员,近些年研究显示LRG1在恶性肿瘤的发生、上皮间质转化、侵袭转移、异常血管生成、预后预测中发挥重要作用。然而LRG1在乳腺癌中的表达、预后、功能和潜在机制方面尚待阐明。本研究旨在通过生物信息学方法系统分析LRG1在乳腺癌中的表达及意义。方法 使用TCGA、Breast Cancer Gene-Expression Miner、UALCAN、Kaplan-Meier Plotter、GeneMANIA、DAVID等多个数据库对LRG1在乳腺癌中的表达与临床病理特征关系、预后价值、相互蛋白作用网络及功能富集进行综合分析。结果 TCGA数据库分析显示,LRG1 mRNA在乳腺浸润癌中的表达量明显高于正常组织（23.461 vs. 8.357,P<0.001）。在不同分子亚型中,luminal型乳腺癌中LRG1 mRNA表达量为37.462（9.930~74.197）,高于HER-2阳性型乳腺癌和三阴性乳腺癌（TNBC）（均P<0.01）;I、II、III期乳腺癌中LRG1 mRNA的表达水平均高于正常乳腺组织（均P<0.05）。Breast Cancer Gene-Expression Miner数据库分析显示,雌激素受体（ER）和（或）孕激素受体（PR）阳性乳腺癌中LRG1 mRNA的表达水平高于ER和（或）PR阴性乳腺癌,HER-2阴性乳腺癌中LRG1 mRNA表达高于HER-2阳性型乳腺癌（均P<0.05）;淋巴结阳性乳腺癌LRG1 mRNA表达量高于淋巴结阴性乳腺癌（P<0.000 1）。用GEPIA在线平台对TCGA数据库中乳腺癌数据进行生存分析发现,LRG1高表达患者总生存率（OS）及无复发生存率（RFS）均低于低表达患者,但差异无统计学意义（HR=0.81,P=0.200;HR=0.70,P=0.064）;用Kaplan-Meier plotter对TCGA中乳腺癌数据进行生存分析发现,LRG1的表达与luminal A型、luminal B型、HER-2阳性型乳腺癌的OS无明显关系（均P>0.05）,但在basal-like亚型中,LRG1低表达患者OS明显优于LRG1高表达患者（HR=3.12,95% CI=1.54~6.29,P<0.001）。使用GeneMANIA数据库进行分析,共筛选出20个与LRG1相互作用蛋白质,GO富集分析显示,LRG1及与其共表达相关的20个蛋白富集于细胞胞外区,外泌体,血液微粒,受体复合物等结构中,参与细胞的血管生成调控、上皮间充质的转化、缺氧反应等相关生物学过程。结论 LRG1在乳腺癌组织中表达上调,并可预测部分不良乳腺癌亚型的预后,LRG1可能为乳腺癌治疗提供新的靶点。     

核转运蛋白α2通过ERK信号通路调控乳腺癌细胞生物学行为的研究

背景与目的 核转运蛋白α2（KPNA2）异常表达能增强乳腺癌细胞迁移和侵袭能力,导致肺转移风险,并与乳腺癌患者不良预后相关。本研究进一步分析KPNA2在乳腺癌细胞中的表达情况,并探讨其对乳腺癌细胞生物学行为影响的相关机制。方法 用免疫组化检测62例乳腺癌患者癌组织与癌旁组织标本中KPNA2的表达。将两种人乳腺癌细胞株（MDA-MB-453、MCF-7）分为阴性对照组（转染空白质粒）、KPNA2敲低组（转染KPNA2 siRNA）、ERK抑制剂组（ERK抑制剂U0126处理）、联合组（转染KPNA2 siRNA联合U0126处理）。各组细胞处理48 h后,分别用qRT-PCR与Western blot检测KPNA2 mRNA与蛋白表达,并分别用MTT法、流式细胞术、Transwell实验、Western blot检测细胞增殖、凋亡、侵袭能力,以及ERK1/2通路与凋亡相关蛋白表达的变化。结果 免疫组化结果显示,KPNA2蛋白在乳腺癌组织中表达水平高于癌旁组织（2.48±0.39 vs. 1.28±0.22,P<0.05）。qRT-PCR与Western blot结果显示,两种乳腺癌细胞株的阴性对照组和ERK抑制剂组的KPNA2 mRNA及蛋白表达水平均无明显差异（均P>0.05）,而KPNA2敲低组和联合组KPNA2 mRNA和蛋白表达下调（均P<0.05）。功能实验结果显示,与各自的阴性对照组比较,ERK抑制剂组、KPNA2敲低组和联合组的细胞增殖率降低、凋亡率升高、细胞侵袭能力减弱,其中联合组各项变化最为明显（均P<0.05）。Western blot结果显示,与各自的阴性对照组比较,ERK抑制剂组、KPNA2敲低组和联合组磷酸化ERK1/2、裂解的胱天蛋白酶3蛋白表达均下调,且联合组两者的下调程度最为明显（均P<0.05）。结论 乳腺癌组织中KPNA2表达水平升高,其增强乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的作用可能与活化ERK信号通路有关,KPNA2有望作为乳腺癌药物开发的新靶点。     

DCE-MRI定量参数与乳腺癌生物因子的相关性

目的 探讨动态增强MRI （DCE-MRI）参数[容量转移（K_trans）、速率常数（K_ep）]与乳腺癌雌激素受（ER）、孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体2（HER-2）、细胞核相关抗阳（Ki-67）的相关性。方法 回顾性分析100例经病理证实的乳腺癌患者血流动力学参数及免疫组织化学染色结果,比较不同ER、PR、HER-2、Ki-67表达强度间定量参数K_trans、K_ep值的差异及其相关性。结果 乳腺癌患者不同ER表达强度间K_trans、K_ep值差异无统计学意义（P>0.05）;且K_trans、K_ep值与ER表达强度无明显相关性（P均>0.05）。乳腺癌不同PR、HER-2、Ki-67表达强度间K_trans、K_ep差异均有统计学意义（P<0.05）,且K_trans、K_ep值与PR、Ki-67表达水平呈正相关（P<0.05）。结论 K_trans、K_ep与PR、Ki-67表达水平相关,可为诊断乳腺癌提供有价值的组织学信息。     

腔镜与开放保乳手术治疗早期乳腺癌的近期疗效比较

背景与目的 乳腺癌发病率高，目前以手术治疗为主，保乳手术（BCS）是早期乳腺癌常用的手术方式，但我国保乳率低，传统开放保乳术后切口疤痕仍明显。目前，具有术后美容效果好、患者满意度高的腔镜微创技术已应用于乳腺外科BCS治疗，但因其手术操作难度大、术中定位难等，导致其在国内开展少，研究数据有限。因此，本研究通过比较腔镜BCS与开放BCS治疗早期乳腺癌的近期疗效，探讨腔镜BCS的临床应用价值。方法 回顾性收集中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院乳腺甲状腺外科2019年1月—2022年12月681例0~Ⅱ期单侧乳腺癌并接受BCS的患者临床资料，其中79例接受腔镜BCS（腔镜组），602例接受传统开放BCS（开放组）。对两组患者基线资料进行1∶1倾向性评分匹配（PSM）后，比较两组患者的相关临床指标。结果 PSM前，两组间基线资料存在明显差异（部分P<0.05）；PSM后，两组各79例，均衡组间差异后，组间各项基线资料均衡可比（均P>0.05）。与开放组比较，腔镜组手术时间延长（Z=-5.415，P<0.001），住院费用增加（Z=-6.042，P<0.001）。两组在术中出血量、淋巴结清扫数目、引流量和住院时间方面差异均无统计学意义（P>0.05）。在术后30 d并发症中，两组在术中副损伤、出血、感染、皮瓣坏死、皮下积液发生率差异均无统计学意义（均P>0.05），但总并发症发生率腔镜组少于开放组（P=0.043）。Breast-Q量表评分结果显示，腔镜组患者在对术后乳房外形的满意度以及身体健康、性健康方面均优于开放组（均P<0.05）。结论 腔镜技术应用于早期乳腺癌BCS具有术后并发症少、患者满意度高，还可改善患者术后生活质量，是一种可行的手术方式。     

RUNX3在结直肠癌中的表达与作用及其与TGF-β/SMAD4信号通路的关系

背景与目的 转化生长因子β（TGF-β）/SMAD4信号传导通路在结直肠癌发生与发展中起了重要作用。runt相关转录因子3（RUNX3）在结直肠癌组织中的表达水平显著降低,且可能发挥抑癌作用。但RUNX3的作用与TGF-β/SMAD4通路的关系尚未见报道。因此,本研究旨在探讨RUNX3与SMAD4在结肠癌中的表达及作用,以及两者的关系。方法 收集98例结直肠癌组织和癌旁正常组织标本,分别用Western blot检测RUNX3和SMAD4蛋白的水平,qRT-PCR检测SMAD4 mRNA的水平,并分析两者表达的相关性。将人结直肠癌细胞SW480分别转染RUNX3过表达载体（RUNX3组）、SMAD4过表达载体（SMAD4组）、RUNX3+SMAD4过表达载体（RUNX3+SMAD4组）,以转染阴性对照质粒的SW480细胞为对照组,分别用Western blot与qRT-PCR检测各组细胞RUNX3与SMAD4表达的变化;用CCK-8实验与Transwell实验分析各组细胞的增殖与侵袭能力的差异。结果 结直肠癌组织中的RUNX3蛋白表达量明显低于癌旁正常组织,而SMAD4的mRNA与蛋白表达水平均明显高于癌旁正常组织（均P<0.05）;结直肠癌组织中RUNX3蛋白表达与SMAD4 mRNA和蛋白表达均呈负相关（r=0.511,P=0.004;r=0.487,P=0.009）。与对照组比较,RUNX3组的RUNX3蛋白水平均明显升高,但SMAD4 mRNA和蛋白水平明显降低（均P<0.05）;SMAD4组的RUNX3蛋白水平无明显变化（P>0.05）,但SMAD4 mRNA和蛋白的表达水平明显升高（均P<0.05）;RUNX3+SMAD4组的RUNX3蛋白水平均明显升高（P<0.05）,SMAD4 mRNA和蛋白水平变化不明显（均P>0.05）。RUNX3组细胞增殖与侵袭能力均明显低于对照组（均P<0.05）,SMAD4组的细胞增殖和侵袭能力均明显高于对照组（均P<0.05）,RUNX3+SMAD4组的细胞增殖和侵袭能力介于RUNX3组与SMAD4组之间,与对照组比较,差异无统计学意义（均P>0.05）。结论 RUNX3在结肠癌组织中表达降低,上调RUNX3的表达对结肠癌细胞的恶性生物学行为有抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β/SMAD4通路的活性有关。     

lncRNA MIR31HG和miR-101在分化型甲状腺癌组织中的表达及临床意义

背景与目的 研究表明长链非编码RNA（lncRNA）与微小RNA（miRNA）的表达异常以及两者的相互作用在恶性肿瘤的发生与发展中起了重要作用。本研究探讨分化型甲状腺癌患者癌组织lncRNA MIR31HG与miR-101的表达特点,以及两者表达与患者临床病理特征及预后的关系。方法 用qRT-PCR检测92例分化型甲状腺癌患者的癌组织及癌旁组织手术标本中lncRNA MIR31HG和miR-101表达水平,收集患者的临床资料与随访资料,分析两者表达与患者临床病理因素的关系,用Kaplan-Meier法分析患者生存率,采用Cox比例风险回归模型分析患者预后不良的影响因素。结果 分化型甲状腺癌组织中lncRNA MIR31HG相对表达量明显高于癌旁组织,而miR-101相对表达量明显低于癌旁组织（均P<0.01）。lncRNA MIR31HG和miR-101相对表达量均与患者的临床分期、分化程度、淋巴结转移明显有关（均P<0.05）。lncRNA MIR31HG高表达患者的累积生存率低于lncRNA MIR31HG低表达患者（84.7% vs. 94.6%,χ²=7.032,P=0.016）,miR-101低表达患者累积生存率低于miR-101高表达患者（78.3% vs. 95.6%,χ²=8.482,P=0.004）。临床分期Ⅲ~Ⅳ、分化程度高、癌组织lncRNA MIR31HG相对表达量>1.5和miR-101相对表达量<0.5是分化型甲状腺癌预后不良的危险因素（均P<0.05）。结论 分化型甲状腺癌组织中lncRNA MIR31HG表达上调与miR-101表达下调,是分化型甲状腺癌预后不良危险因素,两者可能成为分化型甲状腺癌预后不良标志物。     

ε和δ亚型微管蛋白复合物2在肝细胞癌中的表达及其与患者预后的关系

背景与目的 肝癌（肝细胞癌占75%~85%）每年的新发病例数及死亡例数在我国所有癌症类型中高居第五和第二位,肝癌生长、转移、免疫逃逸及治疗抵抗的分子机制复杂,是目前研究的热点及难点。研究发现ε和δ亚型微管蛋白复合物2（TEDC2）在多种恶性肿瘤中表达上调,且与预后相关,但目前肝癌中的临床意义尚未见报道,因此,本研究探讨TEDC2在肝癌中的表达及其与患者预后的关系。方法 从TCGA和ICGC数据库中下载肝癌患者的转录组数据及临床病理资料,通过GEPIA2网站对TEDC2行泛癌分析,用Kaplan-Meier法分析TEDC2表达与患者预后的关系,用单因素和多因素Cox回归模型分析患者的预后因素,用基因富集分析探索TEDC2表达相关的生物学功能。结果 泛癌分析发现TEDC2是肾上腺皮质癌（ACC）、肾透明细胞癌（KIRC）、肾乳头状细胞癌（KIRP）、急性髓细胞样白血病（LAML）、肝癌（LIHC）和肺腺癌（LUAD）这6种癌症的风险预后因子。TCGA和ICGC数据分析均表明肝癌组织中的TEDC2表达水平高于正常组织（均P<0.05）。TEDC2的表达水平与TNM分期、T分期、组织学分级有关（均P<0.05）,与性别、年龄无关（均P>0.05）。生存分析显示,TEDC2高表达的患者总生存期和无病生存期短于TEDC2低表达的患者（均P<0.05）。单因素和多因素Cox回归分析发现,TNM分期、T分期、TEDC2表达是肝癌预后的风险因素,而仅TEDC2表达在TCGA和ICGC患者中均是肝癌的独立预后因子（均P<0.05）。基因富集分析发现在TEDC2高表达样本中富集细胞增殖相关的通路。结论 TEDC2在肝癌组织中高表达,并且是肝癌的独立预后因子,其高表达与患者的不良预后密切相关,而且,机制可能与细胞增殖活性增加有关。     

胚系BRCA突变年轻乳腺癌术式选择对预后影响的Meta分析

背景与目的 携带胚系BReast CAncer基因（gBRCA）突变的年轻乳腺癌患者同时具有年轻与基因突变带来的双重风险。目前对于gBRCA突变早期乳腺癌患者是否可行保乳治疗目前尚无一致结论。本研究通过Meta分析探讨不同手术方式对gBRCA突变的年轻乳腺癌患者预后的影响，以及该影响是否有人种差异。方法 检索多个国外数据库，收集比较gBRCA突变早期乳腺癌患者行保乳手术与全乳切除术预后差异的临床研究，对无复发生存（RFS）、无转移生存（MFS）、乳腺癌特异性生存（BCSS）、总生存（OS）等指标进行Meta分析。结果 最终纳入6篇研究（中国2篇，欧美4篇），共2 140例gBRCA突变患者，中位年龄38~47岁。Meta分析结果显示，总体人群中，gBRCA突变患者行保乳手术较全乳切除术复发风险增高（RFS：HR=1.91，95% CI=1.03~3.54，P<0.05），但两种术式的MFS、BCSS、OS差异均无统计学意义（均P>0.05）；中国人群中，gBRCA突变患者行保乳手术较全乳切除术复发风险增高（RFS：HR=1.63，95% CI=1.10~2.41，P<0.05），两种术式的其余指标差异均无统计学意义（均P>0.05），欧美人群中，两种术式的上述指标差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 对于欧美人群，保乳手术不是gBRCA突变早期年轻乳腺癌术后预后的风险因素；但在中国人群中，gBRCA突变早期年轻乳腺癌患者行保乳手术可能具有更高的复发风险，需在术式选择的医疗决策时充分告知。     

转铁蛋白受体在IgA肾病肾组织中的表达

目的阐明转铁蛋白受体（cD71、TfR）在IgA肾病（IgAN）肾组织中表达的分布特点及其与IgA表达的关系,探讨其在IgAN免疫发病机制中的作用。方法120例肾活检患者根据临床表现和肾活检病理诊断分为原发性IgAN组（原发组）44例、非IgAN性IgA沉积组（继发组）38例、无IgA沉积肾病组（肾病组）38例。用免疫荧光双套色法标记的抗体,在激光共聚焦荧光显微镜下观察四甲基罗丹明（TRITC）标记的CD71和异硫氰荧光素（FITC）标记的IgA在肾组织上的表达。结果CD71的表达强度与IgA的沉积程度相一致。CD71与IgA在原发组肾小球上高表达;在继发组低表达;在对照组微弱表达或不表达。激光共聚焦荧光显微镜下观察到CD71表达与IgA表达呈现共位现象。结论CD71在IgAN患者肾小球呈现高表达,其表达与IgA分子呈现共位状态,提示CD71可能参与了IgAN免疫发病过程。     

稳定表达重组成人型和胎儿型乙酰胆碱受体细胞株的构建

目的 稳定表达重组成人型乙酰胆碱受体(ε-nAChR)和胎儿型乙酰胆碱受体(γ-nAChR)细胞株的构建.方法 通过亚克隆技术将含有乙酰胆碱受体亚基基因的原核细胞表达质粒pSP65a、pSP65β、pSP64γ、pSP65δ和pBssKε分别连接到真核细胞表达质粒pcDNA3.1构建阳性重组子pcDNA3.1α、pcDNA3.1β、pcDAN3.1γ、pcDNA3.Iδ及pcDNA3.1ε,并将含有α、β、δ、ε或α、β、δ、γ亚基基因的重组子按摩尔比2:1:1:1(质粒总量<1.5μg)转染HEK293细胞.采用G418筛选出有ε或γ亚基基因表达的阳性细胞株,再采用免疫荧光法筛选出表达ε-nAChR或γ-nAChR的细胞株,进一步采用全细胞膜片钳技术选出乙酰胆碱诱发ε-nAChR或γ-nAChR产生内向电流的细胞株.结果 酶切鉴定结果显示pSP65α、pSP65β、pSP64γ、pSP65δ和pBssKε均正确定向插入pcDNK3.1.未传代、连续传10代及冻存并复苏的表达ε-nAChR和γ-nAChR的细胞株均可呈现稳定的免疫荧光,荧光主要分布在细胞膜表面.乙酰胆碱刺激后,6株转染ε-nAChR的细胞上记录到100～400 pA内向电流,3株转染γ-nAChR的细胞上记录到200～600 pA内向电流.结论 成功构建出稳定表达ε-nAChR和γ-nAChR的细胞株.     

大鼠星形胶质瘤细胞系C6细胞μ受体的表达

目的 鉴定大鼠星形胶质瘤细胞系C6细胞μ受体的表达.方法 星形胶质瘤细胞系C6细胞培养、消化、传代后,接种于50 ml培养瓶中,待细胞生长至融合率达80%～90%时,采用RT-PCR法测定μ受体mRNA的表达,免疫组化SP法测定μ受体蛋白的表达.将C6细胞接种于无菌的盖玻片上,待细胞生长至融合率达40%～50%时,孵育、去脂后,随机分为5组:A组加入PBS 20μl;B组加入μ受体选择性激动剂DAMGO 1 μmol/L 20 μl;C组加入吗啡1 μmol/L20μl;D组先加入κ受体选择性抑制剂nor-Binaltorphimine 1 μmol/L 20μl,10 min后再加入吗啡1 μmol/L 20μl;E组先加入纳洛酮lμmol/L 20μl,10 min后再加入吗啡1 μmol/L 20μl.采用FV500型激光扫描共聚焦显微镜测定给予激动剂前、后细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]j).结果 C6细胞存在μ受体mRNA,且μ受体主要分布于细胞膜及细胞浆;A组、B组和E组[Ca2+]i无变化(P>0.05),C组和D组[ca2+]i呈一过性升高(P<0.05).结论 标准条件下培养的大鼠星形胶质细胞系C6细胞膜表面可能存在μ3型受体.     

神经内分泌分化对前列腺癌细胞生长及雄激素受体表达影响的实验研究

目的探讨神经内分泌分化对前列腺癌细胞生长的作用及对雄激素受体表达的影响。方法建立神经内分泌分化的前列腺癌细胞模型PC3MNE和LNCaPNE;采用甲基噻唑基四唑(MTT)试验观察其调节前列腺癌细胞生长的作用[以吸光度值(A)表示];采用逆转录聚合酶链反应和Western杂交方法检测LNCaPNE对LNCaP细胞雄激素受体表达的影响。结果PC3MNE的培养上清液可促进PC3M细胞的生长(A值在培养24h为034±018与050±009,48h为038±016与057±009,72h为038±015与055±005,P均<005);在有雄激素时,LNCaPNE的培养上清液不促进LNCaP细胞的生长,对其雄激素受体的表达也没有显著影响;去除雄激素后,LNCaPNE的培养上清液可促进LNCaP细胞的生长,并能下调其雄激素受体的表达(P均<005)。结论在雄激素阻断后,神经内分泌分化的前列腺癌细胞能以旁分泌的方式支持其他前列腺癌细胞生长,降低其雄激素受体的表达。     

人胆管癌组织中CD44v6蛋白的表达与胆管癌的关系

目的　探讨胆管癌组织中CD44v6表达与肿瘤转移及预后的关系。方法　对 46例胆管癌石蜡组织标本重新切片 ,采用CD44v6鼠单克隆抗体进行免疫组化染色 (S P法 )。结果　CD44v6在胆管癌组织中阳性表达率为 6 3% ,其与肿瘤的大小、部位、病理类型、肿瘤的分化程度无关 ,而与肿瘤TNM分期、淋巴结转移、中位生存期相关。Ⅳb期CD44v6阳性表达率 (83% )较Ⅳa期(6 8% )、Ⅰ、Ⅱ期 (33% )高 (P =0 0 31) ;有淋巴结转移者CD44v6阳性表达率 (85 % )较无淋巴结转移者(5 3% )高 (P =0 0 35 ) ;Ⅰ、Ⅱ期、Ⅳa期、Ⅳb期患者的中位生存期分别为 2 4、14、6个月 ,有淋巴结转移、无淋巴结转移病人的中位生存期分别为 8、2 3个月。结论　CD44v6在胆管癌的转移中具有一定的作用 ,可作为临床预测胆管癌转移潜能及预后的生物学指标。     

上皮生长因子及其受体在胰腺癌中表达的临床病理学意义

目的　研究上皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ＥＧＦ） 及其受体（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ ＥＧＦＲ） 在胰腺癌中表达的临床病理学意义。 方法　采用链亲合素生物素免疫组织化学法测定胰腺癌标本５７ 例。 结果　ＥＧＦ和ＥＧＦＲ 的表达率分别为７４％ （４２／５７） 和５３％ （３０／５７），两者比较差异有显著意义（Ｐ＜０．０５） 。二者共同表达率为５３％ （３０／５７），均未表达率为２６％ （１５／５７） 。ＥＧＦ在Ⅲ期及３ 级胰腺癌患者中的表达率均明显高于ＥＧＦＲ 的表达。Ⅲ期中二者表达率分别为７３％ （３０／４１） 和５１％ （２１／４１），两者比较差异有显著意义（ Ｐ＜ ０ ．０５） ；３ 级中二者表达率分别为８７％ （１３／１５） 和６０％ （９／１５），两者比较差异有显著意义（ Ｐ＜ ０．０５）。ＥＧＦ及ＥＧＦＲ的表达与患者的年龄、性别、癌灶部位、分期、分级等无明显相关性。二者共同表达与不良预后有显著相关性。 结论　ＥＧＦ和ＥＧＦＲ在胰腺癌免疫组织化学中表达常为阳性，它们可能是评价胰腺癌预后的有利指标     

自体移植脾巨噬细胞C_(3b)、Fc受体及蛋白质表达的实验研究

目的　探讨自体脾组织移植后的功能状况。方法　采用小鼠进行自体脾组织网膜内移植 ,术后 6个月切取移植脾组织 ,检测巨噬细胞的Fc、C3b受体及蛋白表达。结果　自体移植脾巨噬细胞Fc受体的含量与原位脾相近 ,C3b受体的功能正常 ;蛋白质的表达与原位脾相同。结论　大网膜内自体移植脾组织的功能在细胞水平是正常的 ,移植脾组织具有原位脾的功能。     

诱发性肝癌雄性激素受体的动态变化及氟他胺对受体表达和成癌的影响

目的 探讨肝癌癌变过程中雄性激素受体的动态变化及氟他胺（ｆｌｕｔａｍｉｄｅ）对受体和成癌的影响。方法 将９５只ＳＤ大鼠分３组构建诱癌模型。Ａ组：单纯二甲氧基偶氮苯诱癌。Ｂ组：诱癌加氟他胺治疗。Ｃ组：空白对照。第１－５个月各组取３－５只鼠称体重,肝重,取肝组织,癌灶及癌周组织作病理学检查并以放射配基结合法检测雄性激素受体。结果 （１）Ｂ组肝体比值上升比Ａ组延迟１个月,癌分化程度较高。（２）Ａ组雄性激     

胆囊黏膜G蛋白偶联胆汁酸受体1表达与胆囊结石致石胆汁关系的研究

目的 研究胆囊结石患者胆囊黏膜G蛋白偶联胆汁酸受体1 (GPBAR1)表达与致石胆汁形成的关系.方法 收集34例胆囊结石病和15例无胆石对照患者的胆囊黏膜、囊壁、胆汁、静脉血.HE常规染色病理检查胆囊壁,免疫组化染色法检测胆囊壁GPBAR1、黏蛋白1(MUC1)和黏蛋白5AC(MUC5AC)的表达水平;RT-PCR反应检测胆囊黏膜GPBAR1、MUC1和MUC5AC的基因表达水平;检测术前血清和胆囊胆汁的主要脂质成分等.结果 胆囊结石组胆囊HE染色均呈慢性炎症表现;胆囊结石组GPBAR1、MUC5AC的蛋白和mRNA表达均较对照组明显升高(61.34±8.06比43.05±7.83,P＜0.01; 52.11±9.62比45.05±9.27,P＜0.05;0.87±0.07比0.80±0.09,P＜0.05;1.04±0.22比0.8±0.17,P＜0.01).胆囊结石组血清总胆固醇水平和胆汁总胆固醇浓度、总胆固醇摩尔百分比、胆固醇饱和指数、黏蛋白浓度均较对照组明显升高(5.07±1.64比3.62±1.42,P＜0.01;17.23±3.67比12.47±2.31,P＜0.01;7.47±0.65比5.05±0.24,P＜0.01;1.03±0.58比0.69±0.38,P＜0.01;92.02±20.89比76.36±19.71,P＜0.05);而胆汁总胆汁酸浓度、胆汁酸摩尔百分比较对照组明显降低(162.68±20.19比180.21±26.05,P＜0.05; 71.28±1.84比73.29±0.96,P＜0.01).胆囊结石组胆囊GPBAR1 mRNA表达与胆汁总胆汁酸水平负相关(γ=-0.341,P＜0.05),GPBAR1表达与胆汁总胆汁酸水平和总脂质水平均负相关(γ=-0.365,P＜0.05;γ=-0.403,P＜0.05).结论 GPBAR1在胆囊结石患者胆囊黏膜表达增强,介导胆汁酸吸收,可能与致石胆汁形成有关.