HLA-DRB1、HLA-DQB1基因多态性与云南汉族人群耐多药肺结核病的关联研究

摘要：目的:探讨云南地区汉族人群HLA-DRB1、HLA-DQB1基因多态性与耐多药肺结核病发生的关系。方法:收集2017～2018年在我院就诊的云南省汉族耐多药肺结核（MDR-PTB）患者300例作为观察组;门诊体检健康人群300例作为对照组。应用聚合酶链式反应-直接测序基因分型法（PCR-SBT）,检测两组人群HLA-DRB1、HLA-DQB1等位基因分布频率。结果:共检测到25个HLA-DRB1等位基因,17个HLA-DQB1等位基因。其中观察组的HLA-DRB1*07:01等位基因频率显著性高于对照组[18.7%vs.13.5%,P=0.007,OR=1.471,95%CI（1.077,2.008）],观察组的HLA-DQB1*03:01等位基因频率显著性高于对照组[27.8%vs.20.3%,P=0.002,OR=1.511,95%CI（1.157,1.974）],其余等位基因两组间无明显差异（P>0.05）。结论:HLA-DRB1*07:01和HLA-DQB1*03:01等位基因可能是云南汉族人群耐多药肺结核的易感基因。     

丙型肝炎与HLA-DRB1* 1301/1302等位基因相关性研究

目的 探讨某地区汉族人群慢性丙型肝炎遗传易感性与人类白细胞抗原DRB1等位基因多态性的关系，为寻找慢性丙型肝炎的易感基因和抵抗基因提供线索。方法应用聚合酶链反应-序列特异性引物技术，对74例某地汉族慢性丙型肝炎患者与62例健康对照者进行HLA-DRB1 1301／1302等位基因检测，对两组实验结果进行统计学分析。结果 慢性丙型肝炎组与健康组相比较，HLA-DRB1＊1301／1302等位基因频率分别为6．75、3．38，8.06、4．03，两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 HLA-DRB1＊1301／1302等位基因与某地区汉族人群感染丙肝病毒后形成慢性丙型肝炎无相关性。     

HLA-DRB1基因多态性与HBV宫内感染的相关性

目的 探讨HLA-DRBl等位基因多态性与HBV宫内感染的关系.方法 选择HBsAg阳性孕妇分娩的新生儿中发生HBV宫内感染的母亲21例(A组),而未发生宫内感染的母亲46例(B组)以及正常母亲42例(C组),采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术扩增HLA-DRB1四对等位基因,计算各刑别出现频率.结果 (1)HLA-DRB1*11在A组的等位基因频率明显高于B组(38.1% vs 13.0%)(P<0.05);(2)HLA-DRB1*13、HLA-DRB1*03在A、B两组的等位基因频率明显低于C组(4.5% vs 33.3%,9.0%vs 28.6 0A)(P<0.01):(3)HLA-DRB1*07等位基因频率在A、B、C三组间差异无显著性.结论 HLA-DRB1*11与HBV宫内感染有关;HLA-DRB1*03、13可能与HBV清除有关.     

人类白细胞抗原-DRB1基因启动子区序列多态性与肺结核的相关性分析

目的探讨中国北方地区人群人类白细胞抗原（HLA）-DRB1基因启动子区序列多态性与肺结核的相关性。方法北方汉族肺结核患者97例为肺结核组，北方汉族健康人62例为对照组，采用PCR-SSP法对2组的HLA-DRB1基因启动子区进行PCR扩增，启动子区扩增产物直接测序。结果肺结核组和对照组的HLA-DRB1基因启动子区序列完全一致；对照组启动子区序列与数据库检索的序列比较有3个突变点：-26位的T被C替代，-49位的C被G替代，-78位的C被G替代。结论中国北方地区人群HLA-DRB1基因启动子区序列具有多态性，但此多态性与肺结核的发病没有相关性。     

谷胱甘肽转移酶T1基因型与苯中毒遗传易感性

目的　探讨谷胱甘肽转移酶T1(GSTT1)基因多态与苯中毒遗传易感性的关系。方法　应用聚合酶链式反应 (PCR)方法对 3 5例苯中毒病例、44例苯作业工人及 2 6例正常对照组的GSTT1的基因型进行了检测。结果　苯中毒患者组GSTT1缺失基因型频率为 60 % ,明显高于正常对照组的 46 15 %和苯作业工人组的 40 91% ,但未出现统计学意义(P >0 0 5 )。结论　GSTT1基因多态与苯中毒遗传易感性无关。但由于例数不多 ,这一结果有待于进一步研究证实     

白细胞介素-1β+3953位点基因多态性与肺结核疾病易感性关系的Meta分析

目的探讨白细胞介素(IL)-1β+3953位点基因多态性与肺结核疾病易感性的关系。方法计算机检索数据库,收集有关IL-1β+3953位点基因多态性与肺结核疾病易感性关系的病例对照研究,提取纳入文献的相关数据进行Meta分析,以病例组和对照组IL-1β+3953位点各种基因模型的比值比(OR)为效应指标,漏斗图检测发表偏倚。结果共8篇研究符合纳入标准,累计病例数1 160例,对照组1 216例。Meta分析表明IL-1β+3953位点基因多态性与肺结核疾病易感性无明显关联性。结论 IL-1β+3953位点基因多态性与肺结核疾病易感性无明显关联性。     

用核酸序列测定法对1型糖尿病HLA-DPB1、DQB1基因分析

目的　研究山东地区汉族人 1型糖尿病与HLA -DPB1和HLA -DQB1等位基因的相关性。方法　采用基于核酸序列测定的基因分型技术对 5 2例 1型糖尿病患者及 3 8名正常对照者进行了DPB1和DQB1基因分析。结果　DPB1 2 2 0 1(P <0 .0 1)和DQB1 0 2 0 1(P <0 .0 1)、 0 3 0 3 (P <0 .0 5 )及 0 60 4 (P <0 .0 5 )等位基因频率在糖尿病患者组显著高于对照组 ,而DPB1 0 4 0 2 (P <0 .0 1)和DQB1 0 3 0 1(P <0 .0 1)等位基因在糖尿病患者组显著低于对照组。结论　DPB1 2 2 0 1和DQB1 0 2 0 1、 0 3 0 3及 0 60 4等位基因可能是山东地区汉族人 1型糖尿病的易感性等位基因 ,而DPB1 0 4 0 2和DQB1 0 3 0 1等位基因可能是山东地区汉族人 1型糖尿病的保护性等位基因     

抗结核药过敏反应与人类白细胞抗原-DRB基因多态性的相关性

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)DRB基因多态性与中国汉族人群服用抗结核药出现过敏反应的相关性。方法用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法,对35例使用抗结核药物后出现过敏反应患者和42例未出现过敏反应的患者血样进行HLA-DRB等位基因分析。结果发生过敏组和未发生过敏反应组的DR7基因频率分别为10.0%和1.2%,差异有统计学意义(RR=10.25,P<0.05)。结论 DR7可能为抗结核药过敏反应的易感基因。     

献血员血小板抗原基因分型的研究

目的：鉴定采献血员血小板抗原（HPA）全部等位基因，方法：采用聚合酶链技术（PCR）对27例机采献血员血小板抗原的等位基因进行分型研究，结果：根据PCR产物片断大小来指定血小板抗原等位基因，其中全部检出者无一例，检出9个抗原、4个抗原、2个抗原者各1例，检出8个抗原，7个抗原、6个抗原、5个抗原则分别为8、7、4、5例。结论：血小板抗原基因分型在研究血小板抗原多态性中有十分重要作用。     

河北汉族HLA-A基因多态性及其分布特征

目的 了解河北省汉族人群人类白细胞抗原HLA-A等位基因多态性及分布特征.方法 采用序列特异性寡核苷酸探针聚合酶链反应(PCR-Sequence Specific Oligonucleotide Probing,PCR-SSOP)方法,对5 908名河北汉族捐献造血干细胞健康志愿者的HLA-A等位基因作低分辨基因分型检测,采用方根法计算HLA-A基因频率,并进行群体比较.结果 河北汉族人群中共检出18个HLA-A基因,呈现较高的基因多态性,包括过去很少被检测到的HLA-A25,A74,其中A座位最常见基因依次为:A* 02、A*11、A*24、A*01、A*30、A*03、A*33.结论 河北汉族人群HLA-A基因分布有自己的特点,各等位基因频率介于南北汉族之间,但更接近于中国北方汉族人群,符合地域分布特征.     

聚合酶链反应检测结核杆菌DNA的临床研究

目的 研究荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测临床标本中结核分枝杆菌核酸DNA的应用价值.方法 应用荧光定量PCR技术对80例活动性肺结核患者痰、40例结核性胸膜炎患者的胸水进行结核杆菌DNA检测,同时涂片镜检与培养,并对3种方法检测的阳性率进行比较.结果 80例活动性肺结核患者痰、40例结核性胸膜炎患者的胸水荧光定量PCR阳性率分别为56.2％、27.5％;涂片镜检阳性率分别为16.2％、0.0％;结核培养法阳性率分别为37.5％、2.5％.结论 荧光定量PCR技术较传统方法具有较高的敏感性与特异性,尤其对涂片染色与结核培养阴性的结核病具有更大的诊断价值.     

结核分支杆菌耐药基因检测结果分析

目的 分析肺结核患者结核分支杆菌获得性耐药情况,比较两种耐药性检测方法的检测效果.方法 用药敏试验(绝对浓度法)检测结核分支杆菌株对利福平(RFP)、异烟肼(INH)、链霉素(SM)、吡嗪酰胺(PZA)和乙胺丁醇(EMB)的耐药情况,采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测结核分支杆菌耐药rpoB、katG、rpsL、pncA和embB基因突变.结果:400例肺结核耐药患者常规药敏试验耐药316例(79.8%);耐药基因检测耐药株288株,突变率72.0%.RFP耐药例数和耐药率明显高于SM、PZA和EMB(耐药例数:F=2.45,2.56,2.69,P＜0.05;耐药率:F=2.55,2.66,2.79,P＜0.05),rpoB突变株和突变率明显高于katG、rpsL、pncA和embB(突变株:F=2.28,2.46,3.19,3.33,P＜0.05～0.01;突变率:F=2.36,2.61,3.25,3.45,P＜0.05～0.01),高浓度药物耐药菌株的突变株和突变率显著高于低浓度药物耐药菌株,随着不规律用药时间的延长,耐药率和突变率均逐渐上升(耐药率:F=2.77,2.88,P＜0.05;突变率:F=2.72,2.85,P＜0.05).结论 PCR-SSCP是一种快速检测结核杆菌rpoB、katG、rpsL、pncA和embB基因突变敏感、特异的方法.     

安徽省1990～1999年肺结核新发涂阳病例队列分析

目的 对1990－1999年全省新发涂阳患满1年队列分析,了解传染源控制情况,探讨防治工作重点。方法 根据安徽省1990－1999年卫统表－1、表－2,列表分析10年来全省登记的活动性肺结核痰涂片阳性病例的化疗及转归情况。结果 10年共登记新发涂阳患15442例,其中治愈10275例,治愈率66．54％,“仍旧性”及“失访”病例数偏高,分别达到15．25％和14．45％。结论 结核病归口管理工作不落实,化疗管理工作不力是困扰我省结核病控制的主要因素。今后工作应加强归口管理,提高患的治愈率和发现率。     

重型乙型肝炎血清HBV DNA水平与肝功能及免疫指标的关系研究

目的 探讨重型乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝损害程度以及血清免疫指标之间的关系.方法 应用荧光定量聚合酶链反应法和酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测197例乙肝患者血清HBVDNA水平与乙型肝炎病毒血清标志物（HBVM）.结果 重型乙型肝炎患者血清HBV DNA水平显著低于慢乙肝重度,慢乙肝轻、中度及急性乙肝（P＜0.01）;重型乙型肝炎患者HBeAg阴性率最高（P＜0.05）;重型乙肝患者血清HBV DNA水平与ALT、TBil无相关性,与C3、C4呈显著正相关（P＜0.01）,与PT、IgG、IgA、IgM呈显著负相关（P＜0.05～0.01）;重型乙型肝炎死亡患者血清HBV DNA水平显著低于存活者（P＜0.05）.结论 重型乙型肝炎血清HBV DNA复制水平低,HBeAg阴性率高,与病毒变异有关;重型乙型肝炎血清HBV DNA水平与肝功能及免疫指标有良好相关性;定量检测重型乙型肝炎患者血清HBV DNA对判断病情危重程度、指导抗病毒治疗和估计预后有重要意义.     

结核病临床分离株及痰标本中embB基因型的快速测定

目的建立快速测定结核病耐乙胺丁醇(EMB)分离株和痰标本中结核分枝杆菌EMB耐药基因型的方法，以期为患者提供及时、有效地化验结果。方法应用16S rDNA聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)和PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)对11株耐EMB分离株和46例结核病痰标本进行分子菌种鉴定和embB基因突变的部位与性质分析。结果以结核分枝杆菌H37Rv标准株为对照，11株耐EMB分离株和46例临床痰标本经16S rDNA PCR-SSCP分析电泳图谱均与结核分枝杆菌标准株相同；限制性内切酶NlaⅢ消化embB基因扩增产物显示，11株耐EMB分离株中4株(36．4％)不被NlaⅡ消化；46例结核病痰标本中10例(21．7％)不被NlaⅡ消化。结论部分结核分枝杆菌耐EMB是由于embB基因突变所致。采用PCR-SSCP和PCR-RFLP方法可直接快速测定结核病耐EMB分离株和痰标本中结核分枝杆菌耐EMB基因型。     

小切口开胸病灶清除术治疗空洞型肺结核和肺结核球

目的 探讨空洞型肺结核和肺结核球采用小切口开胸病灶清除术治疗的临床疗效.方法 58例空洞型肺结核和肺结核球患者按数字表法随机分为观察组（29例,常规抗痨基础上加以小切口开胸病灶清除术）和对照组（29例,常规抗痨药治疗）,观察两组痰液细菌培养转阴情况、X线观察空洞闭合情况及临床症状的变化情况.结果 痰菌培养情况：观察组有27例痰培养转阴（93.10%）,对照组有18例痰培养转阴（62.07%）;空洞闭合情况：观察组有19例空洞闭合（65.52%）,对照组有8例空洞闭合（27.59%）;临床症状改善情况：观察组有效28例（96.55%）,对照组有效20例（68.97%）;观察组痰菌阴转情况、空洞闭合情况及临床症状改善情况均优于常规抗痨组（χ^2=7.213、12.324、13.311,均P〈0.05）.结论 小切口开胸病灶清除术,创伤小,可较好地改善临床症状,提高空洞型肺结核和肺结核球治疗效果.     

Lunx mRNA MMP-7 mRNA hTERT mRNA的表达对非小细胞肺癌微转移诊断的价值

目的应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术联合检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中肺特异性X蛋白基因(Lunx)mRNA、基质金属蛋白酶(MMP)-7 mRNA、端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达情况,探讨其作为分子标记物对于微转移的诊断价值。方法应用RT-PCR技术,检测151例NSCLC患者、24例肺良性病变和30名健康志愿者外周血Lunx mRNA、MMP-7 mRNA、hTERT mRNA水平。结果 NSCLC患者外周血Lunx mRNA、MMP-7 mRNA和hTERT mRNA的表达阳性率分别为41.7%(63/151)、34.4%(52/151)和54.3%(82/151),均明显高于肺良性患者和健康人(P<0.01)。Lunx mRNA和hTERT mRNA的表达与临床分期和淋巴结转移相关。MMP-7 mRNA的表达与临床分期相关。联合3项检测灵敏度达74.2%,准确性达77.3%。结论Lunx mRNA、MMP-7 mRNA和hTERT mRNA可作为检测NSCLC患者外周血微转移的分子标记物。     

中国汉族女性人群成纤维细胞生长因子受体2基因多态性与乳腺癌易感性的研究

目的探讨中国汉族女性成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)基因多态性与乳腺癌易感性的关系。方法通过检索PubMed,EMBASE和CNKI数据库中有关FGFR2基因与乳腺癌易感性相关的文献,收集、整理中国汉族女性乳腺癌病例和正常对照的基因型数据,进行Meta分析和关联研究。结果 FGFR2的4个多态位点(rs2981582、rs1219648、rs2420946和rs2981579)的Meta分析结果显示优势比(OR)(95%CI区间)分别为1.25(1.15～1.36)、1.13(0.96～1.34)、1.12(1.02～1.23)和0.99(0.82～1.20);基因型的关联研究相应的概率P值分别是0.000002、0.0002、0.006和0.998。结论 FGFR2基因的rs2981582、rs2420946多态性增加了中国汉族女性人群患乳腺癌的危险,rs2981579位点与乳腺癌易感性无关联,需要进一步证明rs1219648位点与乳腺癌易感性的关相程度。     

国内外结核菌聚合酶链反应试剂盒的临床检测结果比较

目的用相同标本比较国内外结核菌聚合酶链反应诊断试剂盒的临床检测效果,并初步探讨结核菌聚合酶链反应荧光诊断试剂盒在临床应用中定量检测结核菌数量的可行性。方法用聚合酶链反应技术,荧光探针杂交技术、酶联免疫反应技术以及常规细菌学方法检测并经双盲编号的84份临床痰标本和8份含痰结核菌标准品。结果在59例结核病患者痰标本中,国产PCR-酶联免疫检测试剂盒与PCR荧光试剂盒分别检出26例阳性和24例阳性,国外试剂盒检出24例阳性;在25例非结核病患者痰标本中,国产PCR-酶联免疫检测试剂盒与PCR荧光试剂盒分别检出21例真阴性和24例真阴性,国外试剂盒检出23例真阴性;细菌学各级别检查结果与PCR荧光检测CT值不呈递减关系。结论国内外结核菌聚合酶链反应诊断试剂盒对临床标本的检测结果无显著性差异;结核菌聚合酶链反应荧光诊断试剂盒尚不能定量检测痰标本中的结核菌数量,有待更多的临床数据加以证实。