大鼠吗啡精神依赖时伏核和前额叶皮质中NR2A、NR2B表达的变化

目的:建立条件性位置偏爱(CPP)模型,检测吗啡精神依赖大鼠伏核和前额叶皮质N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA受体)调节亚基NR2A、NR2B表达的变化。方法:使用盐酸吗啡建立大鼠CPP。CPP形成后,每组大鼠5只灌注固定后进行免疫组织化学形态学检测,3只断头处死取伏核和前额叶皮质,并提取细胞膜蛋白进行Western blot定量检测。结果:吗啡诱导大鼠形成CPP时,前额叶皮质和伏核中NR2B有明显变化,免疫组织化学结果显示NR2B阳性细胞数明显增高(前额叶皮质P<0.05,伏核P<0.01)。Western blot结果显示NR2B蛋白表达量明显上调(前额叶皮质P<0.05,伏核P<0.01),而NR2A则无明显改变。结论:使用吗啡建立的大鼠CPP模型中,NMDA受体调节亚基NR2B在与奖赏作用密切相关脑区伏核和前额叶皮质中均有明显变化,而NR2A则无明显改变,表明NMDA受体中NR2B调节亚基在吗啡精神依赖形成中发挥着重要作用。     

鞘内应用布托啡诺对神经痛大鼠脊髓NMDAR1、MOR mRNA表达的影响

目的：观察鞘内注射布托啡诺对神经源性疼痛大鼠脊髓NMDAR1、MOR mRNA表达的影响,进而探讨布托啡诺治疗神经源性疼痛的可能机制。方法：健康雄性SD大鼠24只,体重（250±20）g,随机分为3组（n=8）,对照组（B组）、生理盐水组（C组）和布托啡诺组（T组）。B组不给予任何干预处理;C组和T组进行鞘内置管并建立大鼠神经病理性疼痛模型（CCI）,C组鞘内每天给予10μl生理盐水,T组鞘内每天输注布托啡诺12μg/10μl（生理盐水稀释）。持续7d后,断头处死大鼠,取出脊髓标本,RT—PCR测定NMDAR1和MORmRNA的表达水平。结果：NMDAR1 mRNA表达,C组与B组相比,NMDAR1 mRNA表达水平显著升高,P〈0．01,T组与C组比较表达水平降低．P〈0．05。MOR mRNA表达,B组、C组、T组各组间相比,差异无统计学意义。结论：鞘内注射布托啡诺可降低CCI模型引起的大鼠脊髓NMDAR1 mRNA表达水平上调,对MOR mRNA表达水平无影响;CCI模型后12d内MOR mRNA的表达水平恢复萨常．     

γ-羟丁酸钠对缺氧缺血后新生大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基mRNA表达的影响

目的　探讨γ羟丁酸钠(GHB Na)对缺氧缺血后脑损伤新生大鼠有无保护作用及N 甲基 D 天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)与脑损伤的关系。方法180只7日龄SD乳大鼠,随机分为5组(每组36只) ,分别为假手术(Sham)对照组、生理盐水(NS)对照组、GHB Na 5 0 ,10 0和2 0 0mg·kg- 1组。按Rice法制备缺氧缺血模型。Sham组仅分离颈总动脉,不结扎,不缺氧。GHB Na组动物于缺氧缺血后立即腹腔注射GHB Na。Sham组和NS组动物注射相同体积的生理盐水。以后每8h一次。在术后2 ,6 ,12 ,2 4h ,3和7d每组处死6只乳大鼠。应用逆转录 聚合酶链反应技术测定左侧海马组织中NR2BmRNA的表达,并进行半定量分析。结果　与Sham组相比,NS组术后2h ,NR2BmRNA的表达明显减少(约2 0 % ) ;在术后6 ,12 ,2 4h和3d ,NR2BmRNA的表达没有明显变化;术后7d ,NR2BmRNA的表达显著升高(约94 % )。与NS组相比,GHB Na 10 0mg·kg- 1组在术后6 ,12 ,2 4h ,3和7d ,NR2BmRNA的表达明显减少(分别减少约2 7% ,4 5 % ,19% ,31%和37% ) ;而GHB Na 5 0 ,2 0 0mg·kg- 1组的NR2BmRNA在这些时间点虽然也较NS组有不同程度的减少,但差异多无显著意义。结论　GHB Na能有效抑制新生大鼠缺氧缺血后海马NR2BmRNA的表达,特别是10 0mg·kg- 1组的抑制作用好于5 0和2 0 0mg·kg- 1组     

加味四逆散调控抑郁症大鼠海马BDNF、NR1表达及促进海马DG区神经再生的研究

目的研究加味四逆散对抑郁症大鼠海马BDNF、NR1表达的调控及促进海马DG区神经再生的效应及机制。方法建立慢性应激性抑郁症模型。采用荧光标记的免疫组化方法检测海马DG区NeuN、BrdU、脑源性神经营养因子(BDNF)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NR1)的表达水平。原位杂交技术检测海马DG区BDNF表达水平。结果慢性应激能抑制海马DG前体细胞的增殖(P<0.01);抑郁症大鼠海马DG区BDNF表达明显下降(P<0.01),NR1的表达明显升高(P<0.01)。JWSNS和氟西汀能明显增加抑郁症大鼠海马DG单位面积中神经元数目和新增殖细胞量(P<0.01),增强海马DG区BDNF的表达(P<0.01)和降低NR1的表达(P<0.01)。结论 JWSNS能够促进抑郁症大鼠海马DG区神经细胞的增殖,并可能通过增强BDNF的表达和降低NR1的表达,促进海马DG区的神经再生。     

Application of low-energy scanning transmission electron microscopy for the study of Pt-nanoparticle uptake in human colon carcinoma cells

High-angle annular dark-field scanning transmission electron microscopy (HAADF STEM) in a scanning electron microscope facilitates the acquisition of images with high chemical sensitivity and high resolution. HAADF STEM at low electron energies is particularly suited to image nanoparticles (NPs) in thin cell sections which are not subjected to poststaining procedures as demonstrated by comparison with bright-field TEM. High membrane contrast is achieved and distinction of NPs with different chemical composition is possible at first sight. Low-energy HAADF STEM was applied to systematically study the uptake of Pt-NPs with a broad size distribution in HT29 colon carcinoma cells as a function of incubation time and incubation temperature. The cellular dose was quantified, that is, the amount and number density of NPs taken up by the cells, as well as the particle-size distribution. The results show a strong dependence of the amount of incubated NPs on the exposure time which can be understood by considering size-dependent diffusion and gravitational settling of the NPs in the cell culture medium.