呼吸性酸碱失衡对家兔肾脏内髓集合管细胞碳酸酐酶活性 …

目的 探讨呼吸性酸碱失衡对家兔内髓集合管（ＩＭＣＤ）细胞碳酸酐酶（ＣＡ）活性及其ｍＲＮＡ表达的影响。方法 采用咪唑－Ｔｒｉｓ技术测定呼吸性酸碱失衡ＩＭＣＤ细胞的ＣＡ活性;分别用原位杂交和ＲＴ－ＰＣＲ检测这些细胞ＣＡ Ⅳ ｍＲＮＡ的表达变化。结果 呼酸组的ＣＡ的Ｔ１／２明显缩短,而呼碱组显著延长。原位杂交和ＲＴ－ＰＣＲ结果均显示呼酸显著上调ＣＡ Ⅳ ｍＲＮＡ表达;呼碱下调ＣＡ Ⅳ ｍＲＮＡ表达,但与     

呼吸性酸碱失衡家兔肾脏内髓集合管细胞Cl-/HCO3-交换及阴离子交换蛋白2 mRNA表达的研究

目的研究肾脏内髓集合管(IMCD)细胞Cl-/HCO3-交换在呼吸性酸碱失衡时的代偿调节作用.方法分别以3%CO2和10%CO2模拟慢性呼吸性碱中毒(呼碱,ALG组)和慢性呼吸性酸中毒(呼酸,ACG组)建立家兔肾脏IMCD细胞培养模型,对照组(CG组)为5%CO2+空气平衡,采用荧光探针法测定IMCD细胞Xl-/HCO3-交换,用原位杂交和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IMCD细胞肾脏阴离子交换蛋白2(KAE2)mRNA表达.结果ACG组Cl-/HCO3-交换[(0.132±0.015)pHi/min]显著高于CG组[(0.117±0.016)pHi/min,P＜0.05];CG组与ALG组[(0.111±0.015)pHi/min]无显著差别(P＞0.05).ACG组KAE2 mRNA原位杂交积分光密度(325.48±90.84)显著高于CG组(68.54±20.28,P＜0.01);CG组与ALG组(50.56±16.08)无显著差别(P＞0.05).ACG组KAE2 mRNA的RT-PCR积分光密度比值(2.24±0.36)显著高于CG组(0.43±0.05,P＜0.01);CG组与ALG组(0.37±0.05)无显著差别(P＞0.05).结论慢性呼酸显著增加IMCD细胞Cl-/HCO3交换和KAE2 mRNA表达,慢性呼碱略降低IMCD细胞Cl-/HCO3-交换和KAE2 mRNA表达.     

荧光探针法测定原代培养家兔肾脏内髓集合管细胞内pH

目的 建立稳定的原代培养肾脏内髓集合管（Ｉｎｎｅｒ ｍｅｄｕｌｌａｒｙ ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｄｕｃｔ,ＩＭＣＤ）细胞的ｐＨｉ测定方法,为进一步研究ＩＭＣＤ细胞功能奠定基础。方法 将家兔肾脏ＩＭＣＤ细胞用盖玻片培养成细胞单层,制备ＩＭＣＤ细胞ｐＨｉ标准曲线,然后测定ＩＭＣＤ细胞的ＢＣＥＣＦ／ＡＭ的荧光强度比值（ＦＩＲ）,进而将ＦＩＲ转换为ＩＭＣＤ细胞的ｐＨｉ。结果：本实验观察到ＩＭＣＤ细胞的ＦＩＲ     

阿霉素对培养大鼠内髓集合管细胞生长与增殖的影响

目的 观察阿霉素对大鼠内髓集合管理细胞生长增殖的影响。 方法 对大鼠内髓集合管细胞进行原代培养并给予阿霉素刺激，测定＾３Ｈ－ＴＤＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕ的掺入。 结果 恶毒性剂量的阿霉素刺激细胞的生长，毒性剂量的阿霉素则抑制细胞的生长，且两种剂量的阿霉素均诱导细胞的肥大。 结论 在阿霉素肾病模型时的钠潴留和阿霉素诱导的肾小球硬化中，致病因子对小管细胞的直接作用可能发挥功能。     

阿霉素对培养的大鼠内髓集合管细胞Na^＋内流的影响

确定阿霉素肾病大鼠内髓集合管钠潴留的机制。方法测定培养大鼠的内髓集合管细胞正常及病理状况下的Ｎａ＋摄取。结果培养细胞经１０－１１ｍｏｌ／Ｌ的阿霉素处理后４ｄ，Ｎａ＋的摄取由对照细胞的９８００±７００ｍｍｏｌ／（ｇ蛋白·ｍｉｎ）增加到处理细胞的１２３００±１０００ｍｍｏｌ／（ｇ蛋白·ｍｉｎ）（Ｐ＜０．０５）；Ｎａ＋内流的刺激效应不再受ＥＧＦ、ＡＶＰ、氨氯吡咪及哇巴因的影响；且ＡＤＲ处理细胞Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶的活化效率与对照细胞的类似。结论ＡＤＲ刺激Ｎａ＋经管腔膜面的入胞作用，且这一作用不受上述诸效应物质的影响，这一体外研究结果可能适用于肾病时钠潴留的体内情况。     

阿霉素对培养的大鼠内髓集合管细胞ATP酶的效应

目的 查明内髓集合管细胞ＡＴＰ酶的水解活性和哇巴因的特异结合的变化，以理解阿霉素肾病钠潴留的机制。方法 对培养的大鼠内髓集合管细胞，给予阿霉素刺激，然后用生化及同位素的方法测定。结果 培养细胞经１０＾－１１ｍｏｌ／Ｌ的阿霉素处理后７ｄ，理想条件下的Ｎａ＾＋－Ｋ－ＡＴＰ酶，Ｃａ－ＭＧ－ＡＴＰ酶及Ｋ－ＡＴＰ酶的水解活性较对照显著增加，Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶与哇巴因的亲和力下降。结论阿霉素诱导内髓集合管细胞     

多粘菌素B对豚鼠内耳碳酸酐酶活性的影响

为了解多粘菌素Ｂ（ＰＢ）对内耳碳酸酐酶（ＣＡＨ）的影响，用Ｈａｎｓｓｏｎ法和Ｙｏｋｏｔａ法观察豚鼠鼓室注射生理盐水或ＰＢ１万Ｕ／ｍｌ后内耳ＣＡＨ的定位，结果发现生理盐水组豚鼠内耳ＣＡＨ分布广泛，血管纹，内外毛细胞表现为极强阳性，前庭暗细胞表现强阳性，ＰＢ组内耳ＣＡＨ活性普遍减低，电镜下外毛细胞内ＣＡＨ反应物几乎消失，并且出现细胞水肿，推测ＰＢ破坏细胞膜的通透性后影响ＣＡＨ的活性，加重对内耳的损害。     

多粘菌素B对豚鼠内耳碳酸酐酶活性的影响

为了解多粘菌素Ｂ（ＰＢ）对内耳碳酸酐酶（ＣＡＨ）的影响，用Ｈａｎｓｓｏｎ法和Ｙｏｋｏｔａ法观察豚鼠鼓室注射生理盐水或ＰＢ１万Ｕ／ｍｌ后内耳ＣＡＨ的定位。结果发现生理盐水组豚鼠内耳ＣＡＨ分布广泛，血管纹、内外毛细胞表现为极强阳性，前庭暗细胞表现为强阳性。ＰＢ组内耳ＣＡＨ活性普遍减低，电镜下外毛细胞内ＣＡＨ反应产物几乎消失，并且出现细胞水肿。推测ＰＢ破坏细胞膜的通透性后影响ＣＡＨ的活性，加重对内耳的损害     

糖尿病大鼠肾脏醛糖还原酶活性变化对TGF-β1 mRNA表达的影响

目的探讨糖尿病大鼠肾脏AR活性变化对TGF-β1 mRNA表达的影响.方法 Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(C组);糖尿病组(D组)和糖尿病+维生素C治疗组(DT组).实验第9周检测肾脏皮质AR活性,原位杂交和图像分析系统检测肾脏皮质TGF-β1 mRNA表达水平.结果与正常对照组比较,糖尿病组肾脏皮质AR活性明显升高, TGF-β1 mRNA表达显著增加(P<0.01).糖尿病+维生素C治疗组8周后肾脏皮质AR活性较糖尿病组明显降低,肾脏TGF-β1 mRNA表达显著下降.结论糖尿病时肾脏TGF-β1 mRNA表达与AR活性变化有关.     

百草枯增加小鼠黑质细胞caspase-3mRNA的表达及其酶活性

目的 探讨百草枯对C57b1／6小鼠黑质细胞caspase-3 mRNA的表达及其活性的影响。方法 应用RT-PCR技术检测C57b1／6小鼠暴露于百草枯不同时间后黑质细胞中caspase-3 mRNA表达的变化，并采用比色法测定相应时间点黑质细胞的caspase-3酶的活性。结果 C57b1／6小鼠暴露于百草枯后黑质细胞中caspmse-3 mRNA的表达明显增加，caspase-3酶的活性也相应地增加，这种增加与黑质细胞的凋亡相一致。结论 百草枯可诱导C57b1／6小鼠黑质细胞表达caspase-3 mRNA，增加caspase-3酶的活性，促进黑质细胞的凋亡。     

推拿手法对颈椎病家兔骨骼肌ATP mRNA表达的影响

目的观察推拿手法对颈椎病家兔骨骼肌肌张力变化和ATP mRNA表达的影响。方法取40只6~7月龄日本大耳白家兔随机分为正常组、模型组、药物组及推拿组各10只,并建立低头位颈椎病模型。于造模后第2 d进行干预治疗,药物组予颈复康颗粒灌胃,推拿组采用一指禅推法在大椎穴进行推拿,疗程均为10 d,对照组和模型组未进行干预。观察干预后4组表面肌电及ATP mRNA表达的变化。结果与正常组比较,模型组肌张力明显升高(P<0.01),ATP mRNA表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,药物组和推拿组干预后的肌张力明显降低(P<0.01),以推拿组变化最为显著(P<0.01),推拿组ATP mRNA表达明显提高(P<0.05)。结论推拿手法通过改善颈椎病的高张力状态和提高ATP mRNA的表达,减轻或避免肌细胞的损伤,有效治疗颈椎病。     

动脉血氧饱和度偏移度的正常值及其对酸碱失衡影响

以动脉血氧饱和度(SaO2)为纵坐标,动脉血氧分压(PaO2)为横坐标所表达的SaO2与PaO2相关的曲线称为氧离曲线,氧离曲线偏移的状况通常用P50表示,P50是SaO2为50%时的PaO2值,由于测定较为复杂,临床应用不便,故我们根据血气测定结果,计算SaO2偏移度,并提供了一种由此判断酸碱失衡患者氧离曲线偏移的状况的简便,实用的方法,报告如下。1　临床资料1.1　一般资料:研究对象为我院1997年2～12月住院的慢性阻塞性肺病(COPD)酸碱失衡患者91例,其中男58例,女33例,年龄67.2±10.2岁。COPD患者中包括慢性支气管炎(慢支)6例,慢支合并肺气肿10例,二…     

雌激素对卵巢切除大鼠肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素对卵巢切除(OVX)大鼠肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响.方法 25只成年雌性SD大鼠随机分为为假手术组、OVX组、OVX 补充雌激素组、OVX 补充孕激素组和OVX 补充雌、孕激素组(n=5).于分组处理2月后处死大鼠取肾脏组织,RT-PCR检测各组VDR mRNA的相对表达量.结果 OVX组大鼠肾脏VDRmRNA表达显著低于假手术组(P<0.05);与OVX组相比,OVX 补充雌激素组和OVX 补充雌、孕激素组大鼠肾脏VDR mRNA表达显著增加(P<0.05).结论 OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA表达减少;雌激素能促进OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA的表达.     

雌激素对卵巢切除大鼠肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素对卵巢切除(OVX)大鼠肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响.方法 25只成年雌性SD大鼠随机分为为假手术组、OVX组、OVX+补充雌激素组、OVX+补充孕激素组和OVX+补充雌、孕激素组(n=5).于分组处理2月后处死大鼠取肾脏组织,RT-PCR检测各组VDR mRNA的相对表达量.结果 OVX组大鼠肾脏VDRmRNA表达显著低于假手术组(P<0.05);与OVX组相比,OVX+补充雌激素组和OVX+补充雌、孕激素组大鼠肾脏VDR mRNA表达显著增加(P<0.05).结论 OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA表达减少;雌激素能促进OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA的表达.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ对TNFα诱导的肾脏内髓集合管上皮细胞损伤的保护作用

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ高表达对小鼠肾脏内髓集合管上皮细胞(IMCD)炎性刺激的反应.方法:实验分为4组:IMCD空白对照组,IMCD TNFα刺激组,转染PPARγ野生型质粒的转染空白组(PPARγ-IMCD组)和PPARγ-IMCD TNFα刺激组.TNFα刺激:采用TNFα 50 ng/ml作用24 h;质粒转染:将小鼠野生型PPARγ1质粒转染于IMCD细胞使PPARγ高表达.ELISA方法检测细胞上清液MCP-1、TGFβ1分泌量.结果:转染PPARγ野生型质粒的IMCD细胞PPARγ mRNA和蛋白高表达.1MCD空白对照组和PPARγ-IMCD转染空白组相比,细胞上清液MCP-1和TGFβ1含量无显著性差异;IMCD TNFα刺激组培养上清液中MCP-1和TGF-β1表达明显增加(与IMCD空白对照组相比,P＜0.005),PPARγ-IMCD TNFα刺激组培养上清液中MCP-1和TGFβ1的分泌与IMCD TNFα刺激组相比显著减少(P＜0.05和P＜0.005).结论:IMCD细胞转染PPARγ野生型质粒使得PPARγ高表达后具有抗炎和抗纤维化作用.     

慢性肺源性心脏病的酸碱失衡治疗对血凝系统的影响

目的探讨慢性肺源性心脏病的酸碱失衡治疗对血凝系统的影响。方法选取于2009年1月～10月的120例慢性肺源性心脏病酸碱失衡的患者,检测慢性肺源性心脏病的酸碱失衡患者治疗后血凝系统PT、APTT、FIB、TT以及DD的变化。结果 120例酸碱失衡的肺源性心脏病患者在酸碱平衡调理后大部分都能将血凝指标恢复到正常的状态,且指标在治疗后与治疗前相比均具有统计学差异。结论酸碱失衡与慢性肺源性心脏病患者的血凝指标的异常有关。     

人参对家兔直肠粘膜内神经胆碱酯酶活性的影响

我们曾在中西医结合治疗婴儿先天性巨结肠症中,采用针刺,穴位注射(人参),内服中药,持续扩张痉挛段肠管等措施,治疗婴儿先天性巨结肠症26例,多数病例维持正常的排便功能,扩大的肠管张力恢复,蠕     

榄香烯对HLE-B3内蛋白激酶A及其mRNA表达的影响

探讨中药单体榄香烯(Ele)对人晶状体上皮细胞系(HLE-B3)内蛋白激酶A(PKA)及mRNA表达的影响. 方法 利用碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导HLE-B3增殖,将80mg/L的Ele作用在处于增殖状态下的HLE-B3 24 h,流式细胞术检测HLE-B3内PKA的表达,RT-PCR法检测HLE-B...     

高盐对SD大鼠肾脏骨调素mRNA表达的影响

OBJECTIVE: To investigate the effect of high-salt diet on the expression of osteopontin (OPN) mRNA and its protein in Sprague-Dawley rat kidney. METHODS: Forty-eight male SD rats aged 10 weeks receiving normal salt diet were enrolled in study, and were divided into two groups and fed with high salt diet (4%NaCl) or normal salt diet (0.6%NaCl) for 12 weeks respectively, with 24 rats in each group. Tail systolic blood pressure and bodyweight were measured in all rats every week. At the end of 4th, 8th and 12th week, 6 rats in each group were sacrificed for detection of the expression of OPN mRNA and its protein in the kidney with quantitatine real-time (QRT)-PCR and immunohistochemistry, respectively. RESULTS: No significant difference was found in blood pressure, bodyweight and kidney weight/bodyweight between high-salt diet group and normal salt diet group (P>0.05). The expression of OPN mRNA (0.27+/-0.16 vs 0.15+/-0.13, P<0.05) and its protein (0.78+/-0.15 vs 0.61+/-0.11, P<0.01) in SD rat kidney with high-salt diet were up-regulated at the end of 12th week compared with the rats with normal salt diet. CONCLUSIONS: High-salt diet increase the expression of OPN mRNA and its protein in SD rat kidney. Renal injury induced by high salt intake might be independent of blood pressure change.