扶正化瘀方对DMN肝纤维化模型鼠肝细胞凋亡的影响

探讨扶正化瘀方(主药:丹参、桃仁、蝙蝠蛾青霉菌、绞股蓝、松花粉、五味子)对DMN肝纤维化大鼠肝脏细胞凋亡的影响。Wistar雄性大鼠 60只,随机分造模组及正常对照组。其中 52只隔日腹腔注射 0 .5% DMN造模, 4周后随机分为模型对照组、扶正化瘀方组、秋水仙碱组,各组分别以自来水、3. 69g·100ml-1扶正化瘀方、0 .1%的秋水仙碱按 10ml·kg-1灌胃,每周 6次,共 4周;正常对照组 8只,前 4周腹腔注射生理盐水,后 4周用自来水灌胃。8周时处死动物取材,检测相关指标。结果:扶正化瘀方组大鼠死亡率、腹水发生率较模型组明显降低,肝功能好转;肝组织Hyp含量以及肝组织胶原分期下降,纤维化程度减轻;肝组织α- SMA表达明显降低,HSC凋亡增多,肝细胞凋亡减少,与模型组相比均有显著性差异。结论:促进活化HSC凋亡、抑制肝细胞凋亡是扶正化瘀治疗肝纤维化的机理之一。     

扶正化瘀中药治疗肝纤维化大鼠的实验研究

目的研究扶正化瘀中药治疗肝纤维化的作用。方法采用四氯化碳花生油皮下注射结合高脂饲料、酒水饮料复合因素诱导大鼠肝纤维化模型,以大黄虫丸为对照,观察扶正化瘀中药对肝纤维化大鼠的一般情况、肝脾质量、肝功能、肝组织病理形态学的影响。结果扶正化瘀中药可显著改善肝纤维化大鼠的一般情况,抑制肝脾增大,显著改善肝功能,明显减轻肝细胞损害、肝脏脂肪变性和胶原纤维增生的程度。结论扶正化瘀中药有较好的保护肝细胞,改善肝功能,阻止肝纤维化进展甚或逆转肝纤维化病理改变的作用。     

扶正化瘀胶囊对慢性肝炎肝纤维化指标的影响

探讨扶正化瘀胶囊对慢性肝炎的血清中ALT PCⅢCIV HA的影响。方法：应用扶正化瘀胶囊10g，一日二次，连续服用3个月，于用药前、后第4周、第8周及第12周，分别检测血清中ALT PCⅢCIV HA的含量。结果：用药后第4周，第8周ALT PCⅢCIV HA下降不明显，第12周有明显的下降，治疗组观察项目下降的幅度明显优于对照组（P〈0．05），而且与ALT下降呈正相关。结论：扶正化瘀胶囊有明显的降低血清ALT PCⅢCIV HA的作用，是治疗慢性肝炎，防止肝纤维化的有效药物，且使用方便无明显的副作用。     

扶正化瘀319方抗大鼠肝纤维化的研究

扶正化瘀３１９方可阻止肝纤维化的进展。对已形成的肝纤维化，３１９方能有效地促使其组织结构及功能的回复，与秋水仙碱、大黄虫丸比较，３１９方显示出较明显的优势。     

扶正化瘀法治疗慢性肝炎对血清肝纤维化指标的影响

目的：探讨扶正化瘀法治疗慢性肝炎对血清肝纤维化指标的影响。方法：用扶正化瘀法治疗慢性肝炎肝纤维化患者48例（治疗组），并设对照组43例，疗程4个月。治疗前后分别进行血清肝纤维化指标（透明质酸、Ⅲ型前胶原及Ⅳ型胶原）检测。结果：治疗组血清肝纤维化指标明显下降（P〈0．05），并且优于对照组。结论：扶正化瘀法治疗慢性肝炎对血清肝纤维化指标有显著影响。     

扶正化瘀方促进二甲基亚硝胺肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化逆转作用的实验研究

目的:探讨临床有效的抗肝纤维化扶正化瘀319方(下称319方)对肝纤维化、肝硬化常见病理变化肝窦毛细血管化的逆转作用。方法:采用二甲基亚硝胺(DMN)4周12次腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型。造模成型后分为模型对照组与319方治疗组,用药4周;获取血清与肝组织,作病理组织学、电镜超微结构、免疫组化、肝组织羟脯氨酸含量及肝功能观测。结果:正常组大鼠肝窦内皮细胞外周胞浆很薄,有许多小窗孔,内皮下未见基底膜。模型组大鼠肝窦扭曲、狭窄,内皮细胞胞浆窗孔减少或消失,有明显的基底膜出现;肝组织可见出血性坏死,门脉区大量的结缔组织增生,纤维间隔向小叶内伸展,肝组织Hyp含量显著增高;肝窦壁第Ⅷ因子相关抗原、α-平滑肌肌动蛋白、LM及Ⅳ型胶原阳性染色较正常大鼠均显著增强,且范围较广。与模型对照组比较,319方治疗组肝窦扭曲、狭窄程度及内皮窗孔减少和消失程度轻,基底膜较薄或不连续,部分肝窦结构接近正常;肝细胞变性坏死程度轻,肝组织内纤维间隔明显减少,Hyp含量显著降低(P<0.05);肝窦壁第Ⅷ因子相关抗原、α-平滑肌肌动蛋白、LM及Ⅳ型胶原阳性染色均显著减弱,分布面积图像分析结果均显著降低(P<0.05)。结论:扶正化瘀319方可显著促进肝纤维化、肝硬化常见病理变化肝窦毛细血管化的逆转。     

扶正化瘀方药物血清对原代培养大鼠肝细胞增殖及胶原生成率的影响

大鼠灌胃给扶正化瘀方后分离的药物血清，能显著促进正常及损伤肝细胞的增殖，有效地抑制ＣＣ１４所致损伤肝细胞培养上清液中ＡＬＴ、ＡＳＴ活性，抑制正常及损伤肝细胞的胶原生成率。     

扶正化瘀319方对二甲基亚硝胺所致大鼠肝纤维化及其白蛋白基因表达的影响

目的:观察扶正化瘀319方(简称319方)对大鼠肝纤维化及其白蛋白基因(Alb mRNA)表达的影响。方法:采用二甲基亚硝胺腹腔注射诱发的大鼠肝纤维化模型,分模型组、319方组、秋水仙碱组,分别治疗3周。进行血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和血清白蛋白(Alb)含量、肝组织蛋白、羟脯氨酸(Hyp)含量的检测及肝组织病理学观察、Alb 表达分析。结果:较之模型组,319方组肝组织蛋白含量增高.Hyp 含量显著降低,肝纤维化程度改善明显,其结果与秋水仙碱趋势一致。此外该方可显著提高肝脏 Alb mRNA 的表达。结论:319方有显著促进胶原降解和改善肝细胞功能的作用。     

扶正化瘀胶囊对慢性乙型肝炎肝纤维化的影响

目的:观察扶正化瘀胶囊治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的效果.方法:将60例患者随机分为对照组与治疗组各30例,2组均予护肝片治疗;治疗组在此基础上加服扶正化瘀胶囊.2组疗程均为6月,观察患者临床表现、生化指标、肝纤维化指标和肝脾影像学变化.结果:治疗后3、6月,治疗组透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)均明显降低,与治疗前比较,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01);与对照组治疗后同时段比较,差异亦有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01).治疗后6月,2组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)改善明显,与同组治疗前比较,差异有显著性意义(P<0.05).治疗后治疗组门脉主干内径、脾静脉内径、脾脏厚度均明显缩小,与治疗前及对照组治疗后比较,差异均有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01).结论:扶正化瘀胶囊是治疗慢性乙型肝炎肝纤维化安全、有效的药物.     

扶正化瘀法治疗慢性肝炎对血清肝纤维化指标的影响

目的:探讨扶正化瘀法治疗慢性肝炎对血清肝纤维化指标的影响。方法:用扶正化瘀法治疗慢性肝炎肝纤维化患者48例(治疗组),并设对照组43例,疗程4个月。治疗前后分别进行血清肝纤维化指标(透明质酸、III型前胶原及IV型胶原)检测。结果:治疗组血清肝纤维化指标明显下降(P<0.05),并且优于对照组。结论:扶正化瘀法治疗慢性肝炎对血清肝纤维化指标有显著影响。     

丹芍化纤胶囊对大鼠肝纤维化的预防作用及对HSCs增殖和活化的影响

目的:探讨中药复方制剂丹芍化纤胶囊对大鼠免疫性肝纤维化的预防作用及其对肝星状细胞增殖、活化的影响。方法:W istar雄性大鼠分为正常组、病理模型组、丹芍化纤胶囊低剂量组(0.3g/kg)、中剂量组(0.6g/kg)、高剂量组(0.9g/kg)及秋水仙碱组(0.15mg/kg)。除正常组外,各组均腹腔内注射猪血清(0.5mL只/,2次/周,持续12周)诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,并同时灌胃给予相应药物,持续12周。实验第8、10周检测尿羟脯氨酸排出情况。大鼠肝脏常规病理切片行M asson三色法观察纤维化程度。肝脏免疫组织化学SABC法染色结蛋白(desm in)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)观察肝星状细胞(HSCs)的增殖、活化。结果:丹芍化纤胶囊中、高剂量给药能增加大鼠尿羟脯氨酸的排出量(P<0.01),抑制HSCs的增殖(P<0.01),减少活化HSCs的数量(P<0.01),减轻肝纤维化程度。结论:丹芍化纤胶囊能减轻肝脏损伤,增加胶原降解,抑制HSCs的增殖和活化,具有预防大鼠肝纤维化的作用。     

丹芍化纤胶囊对大鼠肝纤维化的预防作用及对HSCs增殖和活化的影响

目的：探讨中药复方制剂丹芍化纤胶囊对大鼠免疫性肝纤维化的预防作用及其对肝星状细胞增殖、活化的影响。方法：Wistar雄性大鼠分为正常组、病理模型组、丹芍化纤胶囊低剂量组（0．3g／kg）、中剂量组（0．6g／kg）、高剂量组（0．9g／kg）及秋水仙碱组（0．15mg／kg）。除正常组外，各组均腹腔内注射猪血清（0．5mL／只，2次／周，持续12周）诱导大鼠免疫性肝纤维化模型，并同时灌胃给予相应药物，持续12周。实验第8、10周检测尿羟脯氨酸排出情况。大鼠肝脏常规病理切片行Masson三色法观察纤维化程度。肝脏免疫组织化学SABC法染色结蛋白（desmin）及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）观察肝星状细胞（HSCs）的增殖、活化。结果：丹芍化纤胶囊中、高剂量给药能增加大鼠尿羟脯氨酸的排出量（P〈0．01），抑制HSCs的增殖（P〈0．01）。减少活化HSCs的数量（P〈0．01），减轻肝纤维化程度。结论：丹芍化纤胶囊能减轻肝脏损伤，增加胶原降解，抑制HSCs的增殖和活化，具有预防大鼠肝纤维化的作用。     

舒肝颗粒对大鼠肝星状细胞活化增殖的抑制作用

目的:研究中药舒肝颗粒对体外培养活化大鼠肝星状细胞(HSC)活化增殖的影响,探讨舒肝颗粒抗肝纤维化的作用机制。方法:用空白对照及0.01,0.02,0.04 g.L-1的舒肝颗粒分别处理HSC细胞系HSC-T6 24 h后,MTT比色法检测细胞增殖,光镜下观察HSC形态学变化,免疫组化法测各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的变化。结果:舒肝颗粒作用HSC细胞24 h后,0.01,0.02,0.04 g.L-1终浓度肝星状细胞抑制率分别为7.02%,13.33%,20.85%,明显高于空白对照组,且与药物浓度相关。与对照组比较,随着舒肝颗粒药物浓度的增高,HSC的细胞增殖和胞体伸展受到明显抑制;空白对照组,舒肝颗粒0.01,0.02,0.04 g.L-1组α-SMA阳性表达率分别为(62.83±3.42)%,(47.31±2.74)%,(37.79±3.01)%,(25.74±2.83)%,各组与空白对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:舒肝颗粒抑制肝星状细胞活化、增殖并抑制α-SMA表达,可能是其抗纤维化的作用机制。     

化浊解毒含药血清对大鼠肝星状细胞增殖及细胞因子的影响

目的:观察化浊解毒含药血清对体外培养活化的大鼠肝星状细胞增殖及活性的影响,探讨化浊解毒方治疗肝纤维化的作用机制.方法:不同剂量(分别含有生药30,60,120 g·L-1)的化浊解毒方,按0.01 mL·g-1体重SD大鼠灌胃给药,以制备含药血清;常规培养活化的肝星状细胞( HSC-T6),用不同浓度的含药血清进行干预,用MTT,ELISA,RT-PCR法分别检测肝星状细胞增殖、细胞上清液中Ⅰ型胶原的含量以及细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA基因的表达.结果:与正常血清组比较,化浊解毒方含药血清各浓度组均呈现出抑制HSC增殖的作用(P＜0.05),且呈剂量和时间依赖性.与正常血清组比较,化浊解毒方含药血清各个浓度组在作用48 h后,细胞上清液中的Ⅰ型胶原的含量均降低(P＜0.05),均能下调细胞中TGF-β1 mRNA的表达(P＜0.05).结论:化浊解毒方之所以能有效的治疗肝纤维化可能与化浊解毒方抑制肝星状细胞的增殖和活性有关.     

加味鳖甲煎丸对白蛋白所致大鼠免疫性肝纤维化的防治作用

目的:观察加味鳖甲煎丸对白蛋白所致大鼠免疫性肝纤维化的防治作用.方法:用人血清白蛋白给大鼠皮下注射免疫4次,在大鼠明显产生抗体后分组给药,再由尾静脉注射人血清白蛋白9次,可得到肝纤维化实验动物模型,实验结束后处死大鼠,收集血清,测定血清AST、ALT、TP、ALB、TBIL、A/C和CIV、LN、HA的含量.结果:同模型组相比,加味鳖甲煎丸能显著降低肝纤维化大鼠血清AST、ALT、TBIL、CIV、LN、HA含量;能显著增加TP、ALB含量和A/G比值,能显著改善大鼠肝纤维化程度.结论:加味鳖甲煎丸对白蛋白所致大鼠免疫性肝纤维化有较好的防治作用.     

四逆散加味对肝纤维化大鼠肝功能、 肝纤维化指标及病理变化的影响

目的:探讨四逆散加味对大鼠肝纤维化的防治作用.方法:80只Wister大鼠随机分为8组:正常对照组、病理模型对照组、秋水仙碱治疗组、四逆散对照组、四逆散加味高、中、低剂量组、四逆散预防组.除正常对照组外,其余各组均采用猪血清ip诱发肝纤维化,0.5 mL/只,2次/周,连续10周,5周后即可形成肝纤维化.预防组于造模同时给药(以四逆散加味7 g·kg-1),各治疗组于造模第6周给药,四逆散组4 g·kg-1,四逆散加味高、中、低剂量组(14,7,3.5g·kg-1),连续10周.全自动分析法测定各组血清肝功能、放射免疫法测定血清肝纤维化指标,酸性水解法检测肝组织羟脯氨酸(HYP)含量,观察病理变化.结果:与模型组比较,四逆散加味中剂量组大鼠血清中丙氨酸转氨酶[ALT U·L-1(138.88±21.52),(75.20±3.80),(P＜0.05)]、天冬氨酸转氨酶[AST U·L-1,(375.25±10.95),(227.10±19.08),(P＜0.05)]、碱性磷酸酶(ALP,P＜0.05)、透明质酸[ HA,μg·L-1(258.10±32),(135.26±34.09),(P＜0.05)]、Ⅲ型胶原[μg· L-1(105.28±15.31),(85.32±9.53),(P＜0.05)]、Ⅳ型胶原[μ g·L-1(109.10±8.31),(86.48±19.17),(P＜0.05)]、层黏连蛋白(LN,P＜0.05)含量均显著下降,肝组织HYP,(P＜0.01)含量显著降低.结论:四逆散加味有明显的抗肝纤维化作用.     

酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞及肝细胞凋亡和清肝活血方调控机制研究

目的 观察酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞（HSC）、肝细胞凋亡及清肝活血方对不同细胞凋亡的影响。方法 将大鼠分为空白组,模型组,清肝活血低、中、高剂量组,易善复组,清肝活血方低剂量组[4．75g／（kg·d）]、中剂量组[14．25g／（kg·d）]、高剂量组[28．5g／（kg·d）]及易善复组[66．5mg／（kg·d）],分别予相应药物灌胃,空白组和模型组以等量生理盐水代替,给药2周。比色法检测血清ALT、AST、γ-GT,HE、Masson染色观察肝脏炎症和纤维化程度。TUNEL法检测肝细胞凋亡,TUNEL-α-SMA双标记法检测HSC凋亡。结果 清肝活血方能降低大鼠血清ALT、AST、γ-GT水平,减轻炎症及纤维化程度（P〈0．05）;诱导活化的HSC凋亡,减少肝细胞凋亡（P〈0．05）。结论 清肝活血方能有效减轻大鼠肝纤维化程度,并减少酒精引起的肝细胞凋亡,诱导活化的HSC凋亡。     

软肝丸药物血清对肝星状细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响

目的研究软肝丸药物血清对肝星状细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响。方法传代培养大鼠肝星状细胞(HSC)系HSC-76与不同剂量软肝丸(大、中、小剂量组)共同培养48小时,应用Annexin-V-碘化丙锭染色检测软肝丸对大鼠HSC凋亡的影响;免疫组化检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax水平。结果软肝丸能使大鼠HSC凋亡明显增多,同时可使凋亡抑制分子Bcl-2表达下调,使凋亡分子Bax表达增强(P0.01)。结论软肝丸可下调Bcl-2/Bax比率,促进HSC凋亡。     

解毒化瘀方对肝硬化轻微型肝性脑病患者生存质量及中医证候的影响

目的：观察解毒化瘀方对肝硬化轻微型肝性脑病（ MHE）患者生存质量及中医证候的影响。方法80例肝硬化MHE患者,随机分为对照组、解毒化瘀方组,每组40例,2组均给予低蛋白饮食及复合维生素B治疗,其中解毒化瘀方组加用解毒化瘀颗粒,10g／包,冲服,2次／日,7天为1个疗程。分别观察治疗前、后数字连接试验-A（ NCT-A）、脑电图、WHO生存质量评定量表简表（ WHO QOL-BREF）及中医证候积分的变化。结果解毒化瘀方能显著缩短肝硬化MHE病患者NCT-A完成时间,提高患者生存质量,改善其脑电图及中医证候,且疗效优于对照组（P＜0.05）。结论解毒化瘀方具有改善肝硬化MHE患者生存质量及中医证候的作用。     

3种不同中医治法对大鼠肝脏癌细胞半乳糖凝集素表达的影响

目的 观察3种不同中医治法对大鼠肝癌半乳糖凝集素(GAL-3)表达的调控差异以及GAL-3在人肝癌细胞增殖中的作用,以探讨肝癌治疗的新靶点.方法 将72只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、喃氟啶组(喃氟啶8.33 mg/100g)、清热解毒组(清热解毒方1.5 g/100g)、活血化瘀组(活血化瘀方1.27g/100g)、健脾理气组(健脾理气方1.75g/100g),每组12只,除正常组外,其余各组大鼠采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌,各组均给药6周,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)GAL-3的表达.根据人GAL-3基因编码区设计2个siRNA靶点,并构建重组质粒转染SMMC-7721人肝癌细胞株,分为空白组、阴性组、GAL-3 RNAi组,实时定量PCR检测各组GAL-3 mRNA的表达,MTT法检测各组转染后24 h、72h、144h细胞增殖.结果 模型组GAL-3基因表达显著增加,健脾理气组能下调其表达;转染72h后GAL-3 RNAi组GAL-3 mRNA表达量明显降低;转染144h后,GAL-3 RNAi组肝癌细胞的生长增殖得到了明显的抑制(P＜0.01).结论 GAL-3基因在肝癌组织中高表达,健脾理气方能显著下调该基因表达.