应用鲎试剂检查临床输液反应的原因

鲎试验是利用鲎血细胞溶解物与微量细菌内毒素(革兰氏阴性细菌细胞壁成分—酯多糖)起凝胶化反应,从而检测微量内毒素的一种实验技术。近年来,国外的很多报道普遍认为用鲎试验检测内毒素,确实是一种快速、简便、灵敏的方法。现介绍一组有关应用鲎试剂检查临床患者发生输液热原反应的原因、消灭输液装置存在热原的方法及应用鲎试验法对无菌手术器械的管理等文章,供读者参考。     

医学问答

问:最近参加一次考试,第一个名词解释就是“鲎试验”,似曾相识,但查找许多书刊,未找到适当解释,请给予解答。湖北襄樊202信箱杨志章答:鲎试验(Limulus test)是利用鲎血细胞溶解物与微量细菌内毒素起凝胶化反应,从而检测微量内毒素的一种实验技术与方法。鲎是一种栖生于海洋     

怎样做鲎试验

卫生部要求各医院供应室对发放的各种无菌物品抽样做细菌培养及热原鲎试验。鲎试验即细菌内毒素试验,是医院用来检查无菌物品是否有热原的一种方法。整个鲎试验分阳性对照组、阴性对照组和样品组,样品组的数目要由检测的样品而决定。     

影响鲎试验结果的相关因素及对策

鲎试验是利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应机理来判断无菌物品中内毒素限量是否符合规定的一种热原检测方法。准确的试验结果能真实反应供应室所供应物品的质量,是控制院内感染的重要环节之一。 我院供应室自2001年3月开展鲎试验检测项目,在实际工作中,发现有些因素能影响热原检测结果的判断,现总结如下。     

应用鲎试验检测新洁尔灭消毒液的污染的探讨

<正> 鲎试验即鲎变形细胞溶解物试验(Limulus Amebocyte Lysate Test),系利用鲎血细胞所含可凝性蛋白提取物能与微量细菌内毒素结合呈凝胶的原理,以检测内毒素。近年来,鲎试验技术已在输液器材、药剂及食品卫生检验等方面得到广泛应用。我们试将这一技术应用于消毒药液使用中的监测,现将试验情况介绍如下。     

肝移植术后细菌感染的非培养快速诊断方法

目的 通过对拟诊感染的患者外周血标本行细菌PCR检测和内毒素鲎试验,确立细菌感染的诊断,并分类检出革兰阴、阳性菌,从而指导临床用药.方法 以2005年10月至2007年10月在我院移植中心接受肝脏移植的50例患者为研究对象,分别抽取术前或手术当日(D0)、术后第1天(D1)、D7、D14 4个时段的外周血标本.样本处理后,行细菌PCR检测、细菌内毒素鲎试验.结果 细菌PCR检测的敏感度为66.7%,特异度为95.0%,诊断符合度为78.0%;内毒素鲎试验敏感度为84.2%,特异度为83.9%,诊断符合度为84.0%.两试验平均总耗时为3 h.结论 PCR试验阳性,内毒素鲎试验阴性,提示阳性菌感染;PCR试验阳性,内毒素鲎试验阳性,提示阴性菌感染或混和感染;PCR试验阴性,提示无严重感染.两试验诊断速度明显快于传统的培养方法,可以作为早期诊断的指标.     

干扰鲎试验的因素探讨

鲎试验是一种检查供试品的细菌内毒素是否符合规定的体外检测法，其试验结果须尽可能排除各种干扰因素，减少误差。本文就干扰试验结果的原因进行了初步的探讨。     

玻璃注射器去除细菌内毒素最佳消毒剂选择

<正> 细菌内毒素是导致输液热原反应的主要因素,临床常因输入的液体和药物含热原物质、输液器具上存在内毒素等导致输液反应。因此,玻璃注射器和输液器等需要彻底去除细菌内毒素。为了提高玻璃注射器洗涤质量,分别采用三种消毒剂浸泡洗涤再灭菌,最后通过鲎试验法检测细菌内毒素含量,以确认效果最好的洗涤消毒剂。     

动态比浊法定量检测血液保存液Ⅱ中细菌内毒素含量

目的应用动态比浊法定量测定血液保存液Ⅱ中细菌内毒素含量。方法通过对样品中定量添加标准内毒素的干扰试验,检测其回收率应在50％-200％范围。结果确定血液保存液Ⅱ进行80倍稀释后可以有效地消除其对鲎试验的干扰。结论Ati320细菌内毒素测定仪可以高效定量地测定样品中细菌内毒素含量,替代凝胶法。     

动态比浊法定量测定丹参川芎嗪注射液细菌内毒素的含量

【目的】建立丹参川芎嗪注射液中细菌内毒素含量测定方法。【方法】将丹参川芎嗪注射液作8倍稀释,采用动态比浊法,通过预干扰试验和干扰试验,测定丹参川芎嗪注射液中细菌内毒素含量。【结果】将样品作8倍稀释可以有效地消除对鲎试验的干扰,检测其平均回收率均在50％～200%范围内。【结论】动态比浊法鲎试验可以高效地测定丹参川芎嗪注射液中的细菌内毒素含量。     

鲎试验检测尿中内毒素用于尿路感染诊断的临床观察

1968年Levn等报告鲎变形细胞溶解物在极微量革兰氏阴性细菌内毒素的参与下即形成凝胶化反应”’，这种试验称鲨变形细胞溶解物试验（Limnius。meb0CytelyS8tetest）简称鲎试验。此后，尝试验便广泛得到临床医学、注射药品检验及制药工业等方面的重视与应用，成为检测微量革兰氏阴性细菌内毒素的一个快速、简便、灵敏的方法。目前尿略感染是临床上常见病、多发病，在妇女及儿童中发病尤高，其病原体主要是革兰氏阴性杆菌，以往常规的病原学诊断主要依靠细菌培养，不仅需18～24h以上，且需一定的实验条件。为了观察自试验对尿路感染诊断的价…     

血液透析患者热原反应原因的探讨

实验室与临床资料证明,血液透析患者发生热原反应,可能原因之一是透析膜通透性加大,热原穿透进入血液。用鲎试验法可检出透出液中微量细菌内毒素,有助于预防热原反应的发生。     

复发性中耳炎中耳渗液细菌生物膜的观察及方法学研究

目的观察细菌生物膜(bacterial biofilms,BBF)在复发性或顽固性中耳炎患者中耳积液的形成,探讨鲎试验及免疫荧光二重染色结合激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)方法研究细菌生物膜感染的可行性。方法抽取12例(18耳)复发性或顽固性中耳炎患者中耳积液分别行细菌培养鉴定、鲎试验检测细菌内毒素、免疫荧光双重染色标记后CLSM观察。结果所有患者细菌培养鉴定阳性率为22.2%(4/18);快速凝胶法鲎试验检测细菌内毒素反应阳性率为72.2%(13/18);中耳积液标本行异硫氰酸荧光素标记的刀豆球蛋白(FITC-ConA)及碘化丙啶(PI)双重染色后,CLSM下见大量绿色荧光,代表该处较多多糖基质,其间有橙红色荧光,代表细菌和宿主细胞。其中稀薄、清亮积液标本的橙红色荧光明显较黏稠积液标本的弱。结论复发性或顽固性中耳炎患者中耳积液存在细菌生物膜形成,中耳炎反复发作或迁延不愈可能与此有关;本研究建立的鲎试验及免疫荧光二重染色结合CLSM方法是检测细菌内毒素和观察BBF形成有效可行的方法。     

乙醇除细菌内毒素污染的效果观察

[目的]寻找一种简便的除细菌内毒素污染的方法。[方法]将被内毒素污染的试管和细胞培养板浸泡于不向浓度的乙醇溶液中一定时间后,分别以鲎试验和嗜中性粒细胞产一氧化氮检测内毒素残留情况。[结果]75％乙醇浸泡48h可基本去除实验器材上的内毒素污染。[结论]75％乙醇浸泡是一种简便可行的除内毒素污染方法。     

盐酸普鲁卡因注射液的细菌内毒素检查实验

目的 :用鲎试验法检查盐酸普鲁卡因注射液的细菌内毒素。方法 :参照中国药典 2 0 0 0年版附录中细菌内毒素检查法进行。结果 :1%盐酸普鲁卡因注射液 1:2 0稀释 ,对细菌内毒素检查无干扰。结论 :用鲎试验法检查盐酸普鲁卡因注射液内毒素的方法可行。     

用微量■试验改良法检测内毒素

近十年来,鲎试验已广泛用以检测注射用药物和医疗器具中的细菌内毒素,在某些国家还用来部分代替家兔的发热试验。目前常用的试管法虽结果判断容易,方法简单,但试剂用量过大,成本较高。其它一些改良法如微量玻片法、微量稀释板法、放射同位素法及基质成色法等虽所用试剂较少,但结果不易判断,方法也较复杂。作者在毛细管法的基础上提出了一种改良法。试剂:将冻干的鲎变形细胞溶解物重新融化,保存在-20℃冰箱中(时间不得超过4周)。将标准大肠杆菌、克雷伯氏菌内毒素,流感疫苗(作参考内毒素)和未知内毒素含量的假单胞菌苗(预先稀释1×10~(-5)分别用蒸馏水稀释到1.0 ng/ml,-70℃贮存,待用。以0.1%溴麝香草酚蓝酒精/磷酸盐缓冲液     

盐酸普鲁卡因注射液的细菌内素检查实验

目的：用鲎试验法检查盐酸普鲁卡因注射液的细菌内素。方法：参照中国药典2000年版附录中细菌内毒素检查法进行。结果;1％盐酸普鲁卡因注射液1：20稀释,对细菌内毒素检查无干扰。结论：用鲎试验法检查盐酸普鲁卡因注射液内毒素的方法可行。     

内毒素的鲎试验法检测与临床应用

196 8年LevinJ发现鲎试验法 ,1 971年CooperJF首先建立标准的鲎试验 ,因其灵敏度高 ,设备简单 ,操作方便 ,结果快速等优点 ,被医药领域广泛应用。 70年代初期 ,我国学者对鲎试验开始研究 ,并用东方鲎成功制备了鲎试剂。随后 ,我国学者将鲎试验成功应用于药品和临床血液、体液等标本的检测及辅助疾病诊断。本文对我国用鲎试验检测临床用器具和样品中内毒素的情况进行回顾。鲎试验检测一次性医疗器具的内毒素一次性医疗器具内毒素含量的多少是导致病人产生输液反应的原因之一 ,甚至影响治疗效果和危及病人的生命。李彦文等利用三种方法对一…     

尿液鲎试验在尿路感染诊断中的应用

作者根据鲎(海洋节肢动物)血液变形细胞溶解物可与含极微量内毒素的体液作用而生成一种白色凝胶的原理(即鲎试验),来诊断革兰氏阴性杆菌败血症和内毒索毒血症。鉴于尿路感染的病原菌75%以上为革兰氏阴性杆菌,因此,作者试用尿液鲎试验诊断尿路感染。试验结果:感染组59例次中,阳性者42例次     

鲎试验法检查细菌内毒素

鲎试验法检查输液中细菌内毒素具有简便、快速、灵敏度高等特点。该法系酶促凝胶反应，具有特异性，但使用有一定的局限性。该文探讨其有关影响因素，以促进鲎试验法的合理应用。