己烯雌酚对催乳激素在小鼠淋巴结内表达的影响

目的 探讨新生期雌性和雄性BALB/c小鼠接触己烯雌酚(DES)后其淋巴结内催乳激素(PRL)表达的变化,以及这种变化在两性之间是否存在差异.方法 选取同窝及体重差异小于5%的新生BALB/c小鼠,随机分为DES组与对照组,雌、雄各选25对,在生后24 h内,DES组小鼠颈背部皮下注射DES,每隔24 h注射1次,共连...     

IL-8在大肠癌的表达及意义

目的探讨大肠癌组织IL-8表达及其临床意义。方法用免疫组化SP法测定56例大肠癌组织IL-8表达,分析IL-8表达与大肠癌临床病理因素之间的关系。结果癌组织和癌旁正常组织IL-8表达有显著差异(P<0.05)。癌组织IL-8表达与淋巴结转移、血管侵犯、肝转移及肿瘤病理分期密切相关(P<0.05),与肿瘤部位、肿瘤大小、组织学类型、及患者的性别和年龄等无关(P>0.05)。结论IL-8高表达同大肠癌生物学行为密切相关,可能与大肠癌的发生、发展及预后有关联。     

大肠癌可能的特异性染色体改变

人类某些肿瘤具有特异性染色体改变特征,然而这些染色体改变对癌起因的含意仍未确定。最近发现若干肿瘤形成有不同的细胞转化基因(癌基因)被激活,并且发现其中一些癌基因被定位在人和小鼠的正常染色体上。据报导从人大肠腺癌的细胞株分离的大肠癌原癌基因被定位在12号染色体上。因此,大肠癌细胞核型的检测,对于此恶性     

实时荧光定量PCR检测MMP-3 mRNA在大肠癌的表达

目的探讨大肠癌组织MMP-3 mRNA表达及其临床意义。方法用实时荧光定量PCR检测56例大肠癌组织及癌旁正常组织MMP-3 mRNA表达，分析MMP-3 mRNA表达与大肠癌临床病理因素之间的关系。结果癌组织和癌旁正常组织MMP-3 mRNA表达有显著差异（P〈0．05）。癌组织MMP-3 mRNA表达与淋巴结转移、组织学类型、血管侵犯、肝转移及肿瘤病理分期密切相关（P〈0．05），与肿瘤部位、肿瘤大小、及患者的性别和年龄等无关（P〉0．05）。结论MMP-3高表达同大肠癌生物学行为密切相关，可能与大肠癌的发生、发展及预后有关联。     

鹿茸多肽对APP/PS1双转基因小鼠Rho/ROCK通路的影响

目的 探讨鹿茸多肽(VAP)对APP/PS1双转基因小鼠Rho/ROCK通路的影响.方法 APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组和鹿茸多肽组,每组20只,另以同窝同性别阴性小鼠20只设立为对照组.鹿茸多肽组小鼠鹿茸多肽100 mg/kg灌胃给药,每天1次,连续28 d.治疗后水迷宫实验检测并记录小鼠逃避潜伏期和穿越平...     

香菇多糖对荷瘤小鼠胸腺、脾和肿瘤的影响

目的:探讨香菇多糖不同给药次数对小鼠S180肉瘤的作用及其机制.方法:制备S180荷瘤小鼠动物模型,于接种肿瘤后第2日始分别隔日腹腔注射生理盐水或香菇多糖,按给药3次和7次后分刖处死各组小鼠,观察小鼠胸腺指数、脾指数、肿瘤指数等各项指标以及肿瘤组织的病理改变.结果:给药7次组与同时期荷瘤生理盐水组相比,胸腺指数、脾指数明显增加,且肿瘤生长缓慢,肿瘤重量明显降低,抑瘤率达到47.85%;而给药3次组各项指标的差别与同时期小鼠相比无统计学意义;病理学观察显示香菇多糖给药7次组肿瘤组织中的细胞间质显著增多,瘤细胞周围有较多的淋巴细胞浸润.结论:腹腔注射7次合适剂量的香菇多糖能明显抑制S180荷瘤小鼠肿瘤的生长,其作用机制可能是通过增强荷瘤小鼠自身免疫功能来实现.     

大肠癌干细胞基因Bmi-1表达与大肠肿瘤组织病理特征的关系

背景:大肠癌干细胞基因Bmi-1(B-cell-specific moloney murineleukemia virus insertion site)在调节人端粒反转录酶的转录状态和活性情况,对细胞的衰老、癌变具有重要意义。目的:观察大肠癌干细胞基因Bmi-1的表达及其与肿瘤组织病理学变化之间的关系。方法:采用实时荧光定量PCR技术对50例大肠癌患者肿瘤组织中Bmi-1 mRNA的表达情况进行检测,采用苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色染色SP法测定患者肿瘤组织中Bmi-1蛋白的表达。结果与结论:大肠癌患者的性别、年龄、肿瘤直径对肿瘤组织中大肠癌干细胞Bmi-1 mRNA的表达差异无显著性意义。在不同性别、年龄、肿瘤直径和Duke分期的大肠癌患者肿瘤组织中大肠癌干细胞Bmi-1蛋白表达差异无显著性意义。肿瘤淋巴结转移和浸润深度超过浆膜层的大肠癌患者Bmi-1 mRNA和蛋白的表达明显高于无转移和浸润深度较低的患者(P0.05)。大肠癌Duke分期较高的患者体内大肠癌干细胞Bmi-1 mRNA的表达也较高(P0.05)。结果证实,大肠癌干细胞基因Bmi-1的表达与大肠癌的转移、浸润及Duke分期的病理特征密切相关。     

大肠癌肿瘤标志物联合多层螺旋CT检查在大肠癌诊断中的意义

目的 探讨大肠癌患者血清肿瘤标志物(CEA、CA19-9、CA242、CA50、CA72-4)的含量变化,联合多层螺旋CT(MSCT)检查,评价两者联合检测对大肠癌诊断的意义.方法 回顾性研究唐山市人民医院2012年7月至2014年5月间80例健康体检者、78例肠道良性病变患者(结肠炎30例,结、直肠息肉48例)、96例大肠癌患者(直肠癌50例,结肠癌46例)的肿瘤标志物含量及影像学变化,应用SPSS17.0软件进行统计分析.结果 大肠癌患者肿瘤标志物水平明显高于健康对照组及大肠良性病变组.肿瘤标志物联合诊断大肠癌的阳性率达93.75％,特异性为91.25％,优于单项肿瘤标志物检测;多层螺旋CT对大肠癌诊断的阳性率为91.67％,特异性为98.75％;大肠癌肿瘤标志物联合多层螺旋CT诊断大肠癌的阳性率可达100％,特异性91.25％,与健康对照组及大肠良性病变组比较,差异均具统计学意义(P＜0.05).结论 大肠癌肿瘤标志物、多层螺旋CT对大肠癌诊断各有优点及不足,两者联合检测有助于大肠癌的诊断及鉴别诊断.     

Down综合征16三体小鼠胃的神经发育观察

目的　研究Dow n 综合征动物模型16 三体和正常同窝鼠支配胃的神经发育。方法　采用16三体鼠培育,同窝鼠胚胎龄(em bryonic days, ED)13～18 天细胞遗传学分析,蛋白基因产物9.5(proteingene product 9.5, PGP9.5)免疫组化等方法对16 三体小鼠胃的神经发育进行了研究。结果　正常同窝鼠,胎龄13 天(ED13)来源于外胚层神经嵴的神经母细胞迁移并进驻胃壁;ED14 神经元发出突起,形成原始神经网络;ED15 形成简单排列的肌间神经丛,开始出现早期的神经节;ED16 有分布规则的肌间神经丛;ED17 神经母细胞进驻粘膜下层,形成粘膜下神经丛;ED18 完整的胃神经丛形成,即粘膜下浅、深神经丛和肌间神经丛。与正常同窝鼠比较,16 三体鼠胃神经系发育迟缓,ED14 胃壁始有散在分布神经元。此后,胃神经系的发育与分化均较正常延迟,至ED18 仅有肌间神经丛。根据胃神经系的发育程度和PGP9.5 免疫反应强度作半定量分析及秩和检验,16 三体鼠胃神经的发育明显落后于它们正常的同窝鼠,两者比较有显著性差异(P< 0.05)。结论　16 三体小鼠是公认的Dow n 综合征动物模型,它除了有多系统和多器官的畸型外,还发现有小鼠胃神经丛发育迟缓,粘膜下神经丛缺失。     

己烯雌酚对促甲状腺激素受体在小鼠淋巴结内表达的影响 

目的 了解生后不同时期BALB/c小鼠淋巴结内促甲状腺激素受体（TSHR）的表达状况及给予新生期BALB/c小鼠己烯雌酚（DES）后对该表达所产生的影响,并借此探讨生后不同时期小鼠淋巴结内促甲状腺激素（TSH）的可能来源及DES对TSH表达所产生影响的可能机制。方法 选取同窝及体重差异小于5%的新生BALB/c小鼠,随机分为DES组与对照组,雌、雄各选30对,即共取小鼠120只,在生后24h内,DES组小鼠颈背部皮下注射DES,每隔24h注射1次,共连续注射5次;对照组小鼠平行注射等量无菌豆油。分别在生后第7、14、21、35、49和第63天将小鼠处死,每个时间点雌、雄各取5对小鼠,取其颈深淋巴结进行常规石蜡包埋、切片及TSHR的免疫组织化学检测。结果 无论是对照组还是DES组,小鼠从生后第7天到第63天,淋巴结内均可见到TSHR阳性细胞,阳性表达在雌性和雄性小鼠     

鲨鱼软骨粉对小鼠移植性肿瘤的抑制作用与微血管的关系

目的 观察鲨鱼软骨粉对小鼠移植性ＳＲＳ淋巴瘤生长的影响与微血管密度的关系。方法荷瘤小鼠体重的动态测定、肿瘤重量测定、ｖＷＦ免疫组化染色及微血管计算机扫描方法。结果　在已建立的小鼠ＳＲＳ实体瘤模型上应用口服鲨鱼软骨分治疗,发现 ５４毫克／天治疗 １５天后肿瘤重量及微血管密度较对照组明显减少（Ｐ＜０．０５）、结论上述剂量的鲨鱼软骨粉可抑制小鼠移植性ＳＲＳ淋巴瘤的生长;肿瘤微血管形成的抑制可能是鲨鱼软骨粉抗肿瘤机制之一。     

大肠癌分子遗传学的研究进展

大肠癌是研究肿瘤进展的良好模型,腺瘤息肉是大肠癌的癌前病变,可以作为系统研究大肠癌演变的分子遗传学变化。研究大肠癌演变过程中各种不同的等位基因缺失,亦是研究其他实体瘤,特别是研究肿瘤抑制基因(又称抗癌基因)的突破口。本文提出了癌基因及肿瘤抑制基因在肿瘤进展中可能的作用机理。     

根据临床病理学特征鉴别无家族史MSI-H大肠癌

目的根据修订的Bethesda指南,分析无家族史大肠癌患者的病理学特征和微卫星不稳定检测结果的关系,探讨无家族史高度微卫星不稳定(MSI-H)大肠癌的临床病理学特征。方法纳入150例无家族史大肠癌患者,选取5个标准位点(BAT25、BAT26、D2S123、D5S346、D17S250)进行免疫荧光PCR,以GeneMapper软件分析PCR产物;收集患者年龄、性别及肿瘤部位信息;光学显微镜观察多种病理特征(分化程度、黏蛋白分化、组织学异质性及类Crohn反应);免疫组化方法检测肿瘤浸润淋巴细胞CD4+和CD8+的表达。Logistic逐步回归分析产生回归方程,依据病理特征计算MSI-H表型的概率。结果无家族史大肠癌中MSI-H表型为13.33%;低分化、组织学异质性、类Crohn反应和TILs是MSI-H表型大肠癌的独立鉴别因子,Logistic回归方程鉴别MSI-H表型大肠癌的敏感性为70.0%,特异性为99.2%,总准确率为95.3%。结论MSI-H表型构成了一个病理学特异的无家族史大肠癌类型,根据临床病理学特征能够有效地检出MSI-H表型大肠癌。     

用B7~ 瘤细胞诱导抗肿瘤CTL及其杀伤活性的测定

目的和方法 :研究利用脂质体转染的方法 ,将小鼠Ｂ7基因导入Ｃ57ＢＬ小鼠大肠癌细胞株ＣＭＴ93细胞 (弱免疫原性 )。用 80 0 μｇ/ｍＬ的Ｇ41 8筛选得到阳性克隆 ,免疫组织化学检测发现Ｂ7分子得到充分表达 ,主要以细胞膜染色为主 ,也有部分细胞浆着色。将 5× 1 0 6Ｂ7 ＣＭＴ93细胞接种于Ｃ57ＢＬ小鼠背部皮下 ,以相同细胞数的野生型瘤细胞接种为阴性对照。结果 :实验组小鼠 (ｎ =4)第 2周开始肿瘤的体积逐渐缩小 ,至第 4周末肿瘤全部消失 ,而对照组肿瘤呈进行性生长 (ｎ =3) ,至第 4周末肿瘤大小为 ( 1 7654± 0 4963)ｃｍ2 (长径×短…     

Orai2蛋白的表达纯化与多克隆抗体制备及初步应用

目的:原核表达跨膜蛋白Orai2的GST融合蛋白,获得高敏感性、高特异性的兔抗Orai2多克隆抗体,用于Orai2条件性基因敲除小鼠鉴定及Orai2蛋白功能研究.方法:PCR扩增Orai2 CDS编码序列,亚克隆到编码GST的pGEX-6p-1原核表达载体上,将编码Orai2的pGEX-6p-1-Orai2重组质粒化学转化BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导GST-Orai2融合蛋白表达,经固化的谷胱苷肽琼脂糖珠亲和纯化,透析浓缩,获得用于免疫的高纯度GST-Orai2融合蛋白.SDS-PAGE鉴定后,将纯化的融合蛋白辅以弗氏佐剂,按常规方法免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体.Western blot检测抗体效价和特异性,并进行Orai2条件性基因敲除小鼠和同窝野生型小鼠脑组织鉴定.结果:经亲和纯化后的GST-Orai2融合蛋白纯度较高,BCA蛋白定量检测试剂盒测定蛋白浓度约0.35 mg/ml.抗Orai2多抗抗体效价达1:10 000.能特异性识别转染真核细胞获得的过表达Orai2,以及小鼠脑组织内源性的Orai2蛋白,而不与Orai1发生交叉反应.同时,用自制的Orai2多克隆抗体检测发现,与同窝野生型小鼠相比,Orai2条件性基因敲除小鼠脑组织中Orai2蛋白表达明显降低.结论:成功表达并纯化了GST-Orai2融合蛋白,获得了高敏感度、特异性的抗Orai2蛋白的多克隆抗体,该抗Orai2多抗能特异性识别过表达的和小鼠脑组织内源性Orai2蛋白,能对Orai2条件性基因敲除小鼠和同窝野生型小鼠脑组织进行鉴定,且与Orai1没有交叉反应,为进一步研究Orai2功能奠定了基础.     

益气增乳胶囊小鼠围产期毒性实验研究

益气增乳胶囊浸膏20、40、80g(原生药)/kg剂量(分别相当于临床日剂量的13.3、26.7、53.3倍)给围产期小鼠连续灌胃26天。结果各组动物一般体征、行为均未见异常,体重正常生长,母鼠均正常分娩,顺产活胎。受哺乳的子鼠发育正常,外观未见畸形,体重持续增长。断乳后每窝随机抽取子鼠剖检,外观脏器均未见异常,主要脏器系数与对照组比较无显著性差异,组     

Cyclin D1在肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠大脑皮层和海马中的表达

目的:通过检测细胞周期相关蛋白D1(Cyclin D1)在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因小鼠大脑皮层和海马中的表达变化,探讨Cyclin D1表达改变与ALS发病的关系。方法:选取成年ALS小鼠和同窝野生型小鼠,于发病早、中、晚期(95 d,108 d,122 d)取材,应用免疫荧光技术检测Cyclin D1在大脑皮层和海马的表达规律及与神经元和星形胶质细胞的共定位关系,应用RT-PCR检测Cyclin D1 mRNA表达情况,应用免疫印迹法检测蛋白表达量的改变。结果:ALS小鼠和野生型小鼠大脑皮层和海马中均可检测到Cyclin D1阳性细胞,且与神经元共表达。在发病早、中、晚期,ALS小鼠大脑皮层中Cyclin D1 mRNA和蛋白表达较野生型鼠增多(P0.05,P0.01,P0.001);与同窝野生型小鼠相比,ALS小鼠海马中Cyclin D1 mRNA和蛋白在发病的早、中、晚期表达均降低(P0.05,P0.01,P0.001)。Cyclin D1阳性细胞主要分布在海马CA区(包括CA1、CA2和CA3),DG区仅散在表达。结论:Cyclin D1在ALS转基因小鼠大脑皮层和海马中表达异常,表明Cyclin D1调节的细胞周期改变与ALS大脑皮层和海马区病变密切相关。     

~(131)I-Hb_3单克隆抗体在移植人大肠癌裸鼠体内定位的初步研究

近年来,以单克隆抗体作载体标记核素进行肿瘤的定位诊断已取得了引人注目的成果。本室利用移植人大肠癌的裸鼠模型,研究~(131)I-Hb_3单克隆抗体(以下简称单抗)在肿瘤中的定位情况。 采用6～7周龄的NC系裸小鼠,雌雄不拘;以1×10~7/0.1ml/只的细胞量,接种人类大     

利用基因芯片筛查大肠癌肿瘤相关基因

目的探讨大肠癌肿瘤相关基因的差异表达。方法采用含有8064个人类靶基因的基因表达谱芯片筛选大肠癌组织同正常大肠黏膜的差异表达基因,并用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对其中4条差异表达基因加以验证。结果大肠癌差异表达基因有1807条,发现上调表达的基因有936条,下调表达的基因有871条,其中癌基因及抑癌基因共57条。这57条基因中,36条基因表达上调．21条基因表达下调。结论大肠癌的发生发展与多个原癌基因及抑癌基因的差异表达有关。     

小鼠宫颈癌14号(U_(14))皮下移植后自发淋巴道转移的观察

本实验用U14瘤细胞接种于Km小鼠前肢腋部皮下,每只鼠接种细胞数8×10~6。小鼠体重18～22g,雌雄各半。三批实验小鼠于不同时间一次全部杀死,解剖检查肿瘤局部侵袭和全身转移情况,各脏器用Bouin液固定、石蜡包埋、切片、