应用聚合酶链反应研究载脂蛋白B基因多态性及其临床意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１００例正常人及１０３例冠心病人载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因ＸｂａＩ和ＥｃｏＲＩ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰｓ）研究表明：①此两个位点上少见等位基因（Ｘ＾＋和Ｅ＾－）相对频率在冠心病组中均明显高于正常对照组，提示这些基因多态性与冠心病发病有一定关联。②ＸｂａＩ位点上具Ｘ＾＋Ｘ＾－基因型者血浆ＨＤＬ－Ｃ水平明显低于相应的Ｘ＾－Ｘ＾－基因型者，可能为Ｘ＾＋等位基因与冠心病关     

载脂蛋白B基因位点多态性与冠心病关系的研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增技术对载脂蛋白（ａｐｏ）Ｂ基因点３＇端可变数目串联重复位点（ＶＮＴＲ）作快速而准确分型。研究了该位点多态性与冠心病之间关系，与相关疾病及正常对照组作了比较。在２５３例中，各组的ａｐｏＢ基因位点呈现了不同的基因带型。扩增片段大小为５５２～１１２８ｂｐ。冠心病组发现有１５个ａｐｏＢ等位基因，正常人群组有１２个等位基因。ａｐｏＢ３＇端ＶＮＴＲ的基因频率分布为０．００１～０．４３，杂合度为４１．９％～８０．０％。急性心肌梗塞组中８０８ｂｐ等位基因的检出率明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。同时研究了冠心病组ａｐｏＢ基因与血清脂类、脂蛋白及载脂蛋白Ａ１、Ｂ水平之间的关系。     

载脂蛋白B基因的多态性及其意义

载脂蛋白B（apolipoprotein B,ApoB)基因具有丰富的多态性,这些多态性及其意义已经或正在作广泛的研究,本文此方面进行综述。     

载脂蛋白B基因的多态性及其意义

载脂蛋白B(apolipoproteinB ,ApoB)基因具有丰富的多态性 ,这些多态性及其意义已经或正在作广泛的研究 ,本文就此方面进行综述。     

载脂蛋白B基因位点多态性与冠心病关系的研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增技术对载脂蛋白（ａｐｏ）Ｂ基因点３＇端可变数目串联重复位点（ＶＮＴＲ）作快速而准确分型。研究了该位点多态性与冠心病之间关系，与相关疾病及正常对照组作了比较。在２５３例中，各组的ａｐｏＢ基因位点呈现不同的基因带型。扩增片段大小为５５２～１１２８ｂｐ。冠心病组发现有１５个ａｐｏＢ等位基因，正常人群组有１２个等位基因。ａｐｏＢ３＇端ＶＮＴＲ的基因频率分布为０．００１～０．４     

载脂蛋白B基因多态性与冠心病的关系

随着医学分子生物学的发展 ,遗传在疾病的发病机制、传递方式、诊断、治疗及预测和预防方面已成为当今医学领域的研究热点 ,特别是严重威胁人类健康的常见复杂性疾病。其中针对冠心病的多个侯选基因 ,国内外学者进行了深入、广泛的研究。载脂蛋白 B(apolipoprotein B,apop B)基因作为其候选基因之一 ,参与体内的脂质代谢 ,其表型 apo B为低密度脂蛋白(low density lipoprotein,L DL)的主要蛋白质成分 ,apo B及L DL 水平的增高是冠心病发病的重要危险因素。近年来 ,多数研究认为 apo B是指示冠状动脉粥样硬化的风险度的良好指标 ,国内外…     

载脂蛋白B基因MspI多态性分析及其临床应用

为研究载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因多态性与冠心病的关系，应用ＰＣＲ检测９０例冠心病患者和１２０例健康人ａｐｏＢＭｓｐＩ酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）。结果产生三种基因型：Ｍ＋Ｍ＋、Ｍ＋Ｍ－、Ｍ－Ｍ－，冠心病组等位基因Ｍ＋、Ｍ－频率分别为０．９２、０．０８；对照组Ｍ＋、Ｍ－频率分别为０．９８、０．０２，少见等位基因Ｍ－的频率在冠心病组显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），但两组各基因型之间的血脂、脂蛋白、载脂蛋白水平均无显著性差异。提示ａｐｏＢ基因该位点的多态性可能与冠心病的发病有关，但与血浆脂质及载脂蛋白的关系不明显     

载脂蛋白E的基因多态性与冠心病关系的研究进展

载脂蛋白E（ApoE）在血脂代谢的过程中发挥着重要的作用,由于基因突变而产生的基因多态性对冠状动脉硬化性心脏病的发病具有重要的影响。检测载脂蛋白E基因多态性对发现冠心病的易感人群及开展一级预防具有重要意义。     

聚合酶链反应限制性内切酶消化法检测人载脂蛋白E基因多态性

采用聚合酶链反应与限制性核酸内切酶ＨｈａＩ消化相结合的方法建立一种简便。实用的人载脂蛋白Ｅ基因多态性检测方法。ＰＣＲ扩增含有编码１１２和１５８位氨基酸的基因片断序列，产物经ＨｈａⅠ酶消化，经聚丙烯酸 胺凝胶电泳可见２－４条特定长度的ＤＮＡ条带易于判定ａｐｏＥ基因型。     

昆明地区汉族人群载脂蛋白B基因多态性频率分布与高脂血症关系研究

目的探讨昆明地区汉族人群载脂蛋白B(ApoB)基因中,MspI、XbaI、EcoRI基因型及等位基因频率分布及其与原发性高脂血症的相关性。方法采用病例-对照相关性研究策略,选择昆明地区汉族人群作为研究对象,对91例高脂血症患者及76例健康对照者进行基因多态性检测。结果 1)76例健康者中,MspI位点的+/+、+/-基因型频率分别是0.618、0.382,未检出-/-基因型;+和-的等位基因频率分别是0.809、0.191;XbaI位点的+/+、+/-、-/-基因型频率分别为0.013、0.145、0.842;+和-等位基因频率分别是0.086、0.914;EcoRI位点的+/+、+/-基因型频率分别是0.961、0.039,未检出-/-基因型;+和-等位基因频率分别是0.980、0.020。2)91例高脂血症患者中,XbaI位点的+/+、+/-及-/-基因型和等位基因频率与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);MspI位点+/+基因型频率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),Odd Ratio=27.40(95%CI:6.28～120.12);EcoRI位点的+/+基因型频率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05),Odd Ratio=0.247(95%CI:0.068～0.901)。结论 1)昆明地区汉族健康人群ApoB基因MspI、XbaI、EcoRI基因多态性有地区特征;2)该地区汉族高脂血症患者中的MspI基因位点的+/+基因型与高脂血症易感性相关,而EcoRI基因位点+/+基因型与高脂血症发病保护性可能相关。     

汉族人载脂蛋白B基因EcoRⅠMspⅠ多态性与冠心病的关系研究

目的 探讨我国北方地区汉族人载脂蛋白B(apoB)基因EcoRⅠ、MspⅠ多态性与冠心病的关系。方法 应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)技术，检测了120名对照组和137例冠心病组apoB基因EcoRⅠ、MspⅠ多态性基因型和等位基因频率分布。研究了apoB基因多态性对血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响。结果 冠心病组与对照组apoB基因EcoRⅠ、MspⅠ多态性基因型和等位基因频率分布差异无显著性，且与性别、家族史、吸烟史、体重指数及冠脉病变程度无明显关系。两组间罕见的E—和M—等位基因存在连锁不平衡。冠心病组中E—等位基因携带者血清血清总胆固醉(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)明显高于仅含E 等位基因者。M—等位基因与各项血脂水平无明显相关性。结论 apoB基因EcoRⅠ、MspⅠ多态性对人群血脂水平有一定影响，但不是我国北方地区汉族人冠心病发生的独立危险因素。     

聚合酶链反应检测克隆性免疫球蛋白重链基因重排

目的建立较简便、敏感的Ｂ细胞恶性肿瘤微小残留病（ＭＲＤ）检测方法。方法根据免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因的保守序列设计引物，应用半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）基因扩增技术检测克隆性ＩｇＨ基因重排。结果该方法敏感性达１０－３。６２例Ｂ细胞恶性肿瘤患者，５１例检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，阳性率为８２％，假阴性率为１８％（１１／６２）。同时检测３５例非Ｂ细胞恶性肿瘤患者和２０例正常人均阴性，无假阳性。检测１４例Ｂ细胞非何杰金淋巴瘤患者形态学检查正常的骨髓标本，ＭＲＤ检出率为７１％（１０／１４）。随访５例处于完全缓解期的Ｂ细胞型急性淋巴细胞白血病患者，６个月内ＭＲＤ均阳性，１２个月后３例转阴性，２例持续阳性，１８个月后持续阳性的２例患者均复发，而转阴性的３例仍处于完全缓解状态。结论半巢式ＰＣＲ检测克隆性ＩｇＨ基因重排，方法简便，敏感性和特异性高，可用于Ｂ细胞恶性肿瘤ＭＲＤ检测     

粤北地区瑶族人群载脂蛋白B基因多态性与血脂的关系

目的探讨粤北地区瑶族人群ApoB基因多态性与血脂的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术对粤北地区瑶族高脂血症患者和健康个体各250例的ApoB进行基因分型,并检测其血脂水平。结果 X＋X-、E＋E-基因型个体中TC、LDL-C水平高于X-X-、E＋E＋纯合型（P〈0.05）,X＋X-、E＋E-基因型个体中TG水平明显高于X-X-、E＋E＋纯合型（P〈0.01）;携带X＋等位基因的个体患高脂血症的风险高于携带X-等位基因者（OR=1.957,95%CI：1.214~3.154）;携带E-等位基因的个体患高脂血症的风险高于携带E＋等位基因者（OR=1.466,95%CI：0.889~2.416）。结论瑶族人群ApoB基因XbaⅠ和EcoRⅠ位点基因多态性与血脂水平有关,X＋和E-等位基因可能是血脂增高的遗传危险因素。     

ATP敏感性钾离子通道基因多态性与冠心病的相关分析

目的 初步探讨中国汉族人群Kir6.2基因E23K多态性与冠心病（CHD）的关系。方法提取119例CHD患者和101例对照者的基因组DNA,采用PCR-限制性位点多态性（PCR-RSP）方法检测Kir6.2基因E23K多态性分布特点,同时检测各项血脂水平。结果 湖北地区汉族人群中普遍存在该位点的基因多态性,在冠心病组中,G等位基因频率高于正常组（63.4%vs.56.9%,P〉0.05）;A等位基因频率低于正常组（36.6%vs.43.1%,P〉0.05）,两组间等位基因频率无显著性差异（P〉0.05）,但携带A等位基因的基因型（GA＋AA）与GG基因型频率在两组间存在显著性差异（58.0%vs.71.3%;42.0%vs.28.7%,P=0.040）。结论 Kir6.2基因E23K多态性与冠心病之间存在一定的相关性,影响冠心病的及早诊断和治疗。     

Detection of hepatitis B virus DNA using the polymerase chain reaction technique

The polymerase chain reaction (PCR) technique has been utilized for the detection of hepatitis B virus (HBV) DNA, and several factors related to the selection of primer pairs for the PCR amplification have been demonstrated. The sensitivity of the PCR assay was compared with that of slot-blot hybridization for detecting HBV-DNA. Analysis by the PCR technique with Southern blot hybridization provided a greater than 10(4)-fold increase in sensitivity over the slot-blot hybridization analysis. Also, a rapid and sensitive PCR method for the detection of serum HBV-DNA was developed: HBV-DNA is released from virions by incubating serum with NaOH followed by neutralization with HCl. HBV-DNA sequences are then detected by agarose gel electrophoresis and ethidium bromide staining after PCR amplification with successive sets of primer pairs. In testing serial samples from chimpanzees experimentally infected with HBV, HBV-DNA was detected 2-3 wk before the appearance of hepatitis surface antigen (HBsAg) and continued to be detectable for a short period after the production of antibody to HBsAg. Results from testing of human serum demonstrated that the majority of patients with HBsAg in serum had HBV-DNA as well and that some patients had HBV-DNA in serum in the absence of HBsAg.     

2型糖尿病患者脂蛋白酯酶、血管紧张素转换酶及载脂蛋白-E基因多态性与冠心病的关系

目的　探讨 2型糖尿病患者脂蛋白酯酶 (LpL)、血管紧张素转换酶 (ACE)及载脂蛋白 E(ApoE)基因与冠心病的关系。方法　采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR PFLP)、聚合酶链反应 (PCR)和聚合酶链反应 等位基因特异性寡核苷酸 (PCR ASO)探针杂交技术分别检测 2型糖尿病并冠心病组及对照组LpL、ACE、ApoE基因型。结果　① 2型糖尿病并冠心病组LpL/P P 及P 频率分别为 18.2 %和 4 2 .9% ,高于对照组 (9.5 %和 32 .5 % ) ,但差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。LpL/HindⅢ多态性频率分布两组间无明显差异 (P >0 .0 5 )。② 2型糖尿病组ACE/DD及D频率分别为 33.8%和 5 7.1% ,明显高于对照组(12 .7%和 36 .5 % ) (P <0 .0 1)。③ 2型糖尿病并冠心病组ε 3/ 3和ε 4 / 3频率分别为 5 4 .8%和 31.2 % ,分别明显低于 (ε 3/ 3)和高于 (ε 4 / 3)对照组 (76 .19%和 11.11% ) (均为P <0 .0 1)。ε 4等位基因频率为 2 0 .8% ,明显高于对照组 (9.5 2 % ) (P =0 .0 1)。结论　LpL/ p 、ACE/D及ApoE/ε 4等位基因增高 2型糖尿病并发冠心病患者的遗传易感性。     

Rapid analysis of XRCC1 polymorphisms using real-time polymerase chain reaction

DNA repair plays a critical role in protecting the genome from carcinogens or ionizing radiation. Three coding polymorphisms at codons 194, 280, and 399 in X-ray cross-complementing group 1 (XRCC1) DNA repair gene have been identified that may affect DNA repair and alter cancer susceptibility. In order to study their role in molecular-epidemiology studies we developed a single-step procedure for genotyping these polymorphisms using real-time polymerase chain reaction (rt-PCR) and subsequent melting curve analysis. Genotypes of 622 unrelated Caucasians without prior history of cancer were determined by real-time PCR and compared to genotypes obtained by restriction fragment length polymorphism PCR. In the population studied, the allele frequency of the XRCC1 26304 site (C-->T) of codon 194 in exon 6 was 0.065, the allele frequency of the XRCC1 27466 site (G-->A) of codon 280 in exon 9 was 0.048 and of the XRCC1 28152 site (G-->A) of codon 399 in exon 10 was 0.35. There was no disagreement between the two methods. These findings confirm the real-time fluorescence PCR method as a rapid and reliable assay for the analysis of large numbers of samples.