超声参数－造影剂到达时间成像在肝移植术后缺血性胆管炎中的诊断价值

目的探讨超声参数－造影剂到达时间成像(P-MFI)技术在肝移植术后缺血性胆管炎(ITBL)中的诊断价值。 方法回顾性分析2015年1月1日至2017年12月31日随访期间在中山大学附属第三医院确诊ITBL的25例肝移植受者(ITBL组)临床资料,选取同期肝移植术后随访中移植肝功能正常受者作为对照组(33例)。由2名分别具有8、2年腹部超声诊断经验的医师(医师1和医师2)采用双盲法,分别对所有病例进行超声造影及P-MFI诊断信心评分。采用成组t检验比较ITBL组与对照组年龄以及医师1和医师2对两组受者超声造影和P-MFI诊断信心评分。采用卡方检验或Fisher确切概率法比较两组受者性别、胆管吻合方式、原发病以及医师1和医师2对两组受者P-MFI诊断信心评分差异。采用Kappa检验评价医师1和医师2的诊断一致性。P<0.05为差异有统计学意义。 结果两组受者年龄、性别、胆管吻合方式和原发病等一般资料差异均无统计学差异(P均>0.05)。ITBL组和对照组受者平均P-MFI编辑时间分别为(8.2±1.8)s和(6.8±1.9)s,差异具有统计学意义(t＝－2.516,P<0.05)。对照组动脉首先显影,为红色;随后胆管壁与门静脉管壁显影(几乎为同一时段),胆管壁显影清晰,20例为黄绿色或绿色,9例为绿色和蓝色混合,4例为蓝色与紫色相间;最后为门静脉与肝实质显影,颜色多为蓝色和紫色。ITBL组动脉首先显影,为红色;随后门静脉和肝实质显影,门静脉壁为黄色或绿色,门静脉及肝实质为蓝色或蓝色与紫色相间;最后胆管壁显影,胆管壁显影较晚且不清晰,其中8例颜色充填较好,为绿色,4例为零星点状绿色,10例为稀疏深蓝或紫色,3例无颜色填充。医师1超声造影和P-MFI平均诊断信心评分分别为(4.4±0.5)分和(4.8±0.3)分,差异有统计学意义(t＝25.35,P<0.05)。ITBL组和对照组分别有22、5例P-MFI诊断信心评分高于超声造影,两组差异有统计学意义(χ²＝50.088,P<0.05)。医师2超声造影和P-MFI平均诊断信心评分分别为(4.2±0.6)分和(4.7±0.5)分,差异有统计学意义(t＝22.52,P<0.05);ITBL组和对照组分别有20、6例P-MFI诊断信心评分高于超声造影,两组差异有统计学意义(χ²＝40.798,P<0.05)。两位阅片者对于ITBL组和对照组受者评判一致性分别为较好和一般(Kappa值＝0.706和0.455)。 结论P-MFI技术可更直观、清晰显示胆管壁、肝脏血管及肝实质血流灌注情况,能为肝移植术后并发ITBL的诊断提供更丰富的信息,增强检查者的诊断信心。     

普通超声及超声造影检测兔胆道缺血模型胆道异常的可行性研究

目的探讨普通超声及超声造影应用于检测兔胆道缺血模型胆道异常的可行性。方法将20只健康新西兰兔随机分为两组,对照组及肝动脉和胆总管联合阻断2h(HBO2h)组(各10只)。HBO2h组用无损伤动脉夹阻断肝动脉及胆总管下段2h后去除动脉夹制作胆道缺血模型,对照组不进行任何手术处理。术后5d两组实验兔先后采用普通超声、超声造影观察胆总管-左叶胆管情况,然后处死动物取胆总管-左叶胆管标本行苏木素-伊红(HE)染色,对胆管组织缺血损伤程度进行评分,CD34免疫组织化学染色后行微血管密度(microvascular density,MVD)定量分析。结果普通超声表现:对照组门静脉管径/胆管管径比值为3.47±0.23,所有胆管(100%)均表现为管壁连续性好、无增厚,管腔清晰;HBO2h组胆管明显扩张,门静脉管径/胆管管径比值为1.25±0.42,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);所有胆管均表现为管壁毛糙、增厚。超声造影表现:对照组所有胆管壁(100%)较肝实质提早增强,动脉期胆管壁呈细线状高增强,门静脉期及延迟期呈等增强;HBO2h组中60%(6/10)表现为动脉期胆管壁呈增强水平明显降低,门静脉期及延迟期呈低增强;40%(4/10)表现为增强扫描全过程均呈无增强;与对照组相比,HBO2h组各时相胆管壁增强表现差异均有统计学意义(均为P<0.05)。病理学表现:对照组胆管黏膜上皮细胞和黏膜下腺体上皮细胞呈柱状,排列紧密、完整,无上皮细胞变性、坏死、脱落等,胆管损伤评分为0分,MVD为(6.1±2.5)个。HBO2h组胆管壁增厚,胆管黏膜上皮细胞及黏膜下腺体上皮变性、坏死、脱落,管壁炎症细胞浸润,胆管损伤评分为(2.1±0.6)分,MVD为(2.2±1.6)个,与对照组比较差异有统计学意义(均为P<0.01)。结论普通超声及超声造影能较早发现胆道缺血兔模型的胆道异常,为缺血型胆道病变动物实验研究提供了一种简便、无创、动态监测病程发展的有效手段。     

CTLA4-Ig基因修饰骨髓间充质干细胞抑制大鼠肝移植排斥反应

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA4-Ig)基因转染骨髓间充质干细胞(MSC)在抑制大鼠原位肝移植排斥反应的作用及机制。方法采用重组腺病毒(Ad)5-CTLA4-Ig转染MSC。转染72 h后,提取细胞总蛋白,采用蛋白质印迹法检测转染后MSC中CTLA4-Ig的蛋白表达。采用细胞计数试剂盒(CCK)-8方法检测未转染和转染后的MSC对外周血淋巴细胞增殖的抑制作用。以雄性Lewis大鼠为供体(40只);以雄性Brown Norway(BN)大鼠为受体(40只)。采用改良的Kamada两袖套法进行原位肝移植,建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。40只受体大鼠随机分为4组,每组10只。其中对照组(A组),于肝移植时门静脉输注生理盐水;MSC治疗组(B组),于肝移植时门静脉输注MSC;转基因MSC治疗组(C组),于肝移植时门静脉输注转基因MSC;免疫抑制剂治疗组(D组),于肝移植时门静脉输注生理盐水,术后即给予环孢素(CsA)1.5 mg/(kg·d)肌内注射,连续8 d。每组大鼠取5只观察生存情况。每组其余5只于术后第9日处死,检测外周血细胞因子白细胞介素(IL)-2、IL-4、干扰素(IFN)-γ水平,光学显微镜下观察肝组织病理学变化和排斥反应程度。结果重组Ad5-CTLA4-Ig转染MSC 72 h后,蛋白质印迹法可检测到转染后的MSC中有CTLA4-Ig的蛋白表达。当未转染的MSC∶外周血单核细胞比例为1∶10、1∶20时,MSC抑制淋巴细胞增殖的作用分别为85.60%、76.69%。重组Ad5-CTLA4-Ig转染MSC 72 h后,在相同的数量比下,其抑制淋巴细胞增殖的作用分别为90.50%、84.20%;与未转染的MSC比较,转染后抑制淋巴细胞增殖的作用增强(P0.05)。A、B、C、D组大鼠肝移植术后存活时间分别为(13±3),(41±6),(90±15),(102±18)d。A、B、C组的大鼠术后存活时间比较差异有统计学意义(P0.05),C组和D组的大鼠术后存活时间比较差异无统计学意义(P0.05)。与A组比较,B组和C组的IL-4水平明显升高;与B组比较,C组的IL-4水平明显升高,差异均有统计学意义(均为P0.05);C组和D组的IL-4水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。与A组比较,B组和C组的IL-2、IFN-γ水平明显降低,C组的IL-2、IFN-γ水平亦低于B组,差异均有统计学意义(均为P0.05),C组和D组的IL-2、IFN-γ水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。大鼠肝组织病理检查结果显示,A组移植肝发生重度排斥反应,B组移植肝亦发生排斥反应,但与A组比较程度较轻。C组与D组移植肝有轻度排斥反应。结论重组Ad-CTLA4-Ig转染MSC可抑制肝移植排斥反应,其效果优于MSC单独应用。     

ZT胶栓塞兔门静脉的可行性研究

目的探讨不同浓度ZT胶栓塞兔门静脉的可行性及其机制。方法24只新西兰白兔分为三组,A组、B组分别为ZT胶:碘油1∶1、1∶2混合物组,对照组C组为碘油组,数字减影血管造影(DSA)下对门静脉左支进行栓塞,术后检测门静脉压力、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的变化,术后30dDSA下门静脉造影。结果门静脉栓塞(PVE)后门静脉压力、ALT、AST呈一过性升高。术后5min门静脉造影,A组表现为门静脉大分支栓塞,B组、C组为周围性栓塞。术后30d门静脉造影,A组、B组呈永久性栓塞。结论不同浓度ZT胶可选择性栓塞到门静脉各级分支,并造成永久性栓塞。     

肝前性门静脉高压大鼠门静脉血流对肝脏影响的实验观察

目的 研究肝前性门静脉高压大鼠门静脉血流改变对肝脏功能的影响.方法 雄性Wistar大鼠66只,完全随机化分为5组:门静脉部分缝扎组(A组,n=20);部分门静脉、肝动脉顺序缝扎组(B组,n=20);肝动脉缝扎组(C组,n=10);假手术组(D组,n=10);部分门静脉、肝动脉同时缝扎组(E组,n=6).观察术后12周各组病死率和肝功能变化情况.免疫组化方法检测肝脏汇管区小胆管周围微血管密度、肝脏胆管增生细胞核抗原;透射电镜观察肝脏超微结构的改变.结果 术后12周肝功能检测显示,A、B、C、D组谷草转氨酶分别是(132.69±21.03)U/L、(154.40±28.73)U/L、(125.84±26.60)U/L、(134.02±18.42)U/L,各组之间差异无统计学意义(P＞0.05);谷丙转氨酶各组分别是(39.33±8.62)U/L、(44.84±9.47)U/L、(40.41±8.04)U/L、(38.47±7.29)U/L,各组之间差异无统计学意义(P＞0.05).与C、D组相比,A组和B组病死率分别为20％和25％,病死率增加,肝脏小胆管周围血管密度增加(P＜0.05);B组肝脏胆管增生细胞核抗原表达增强,平均吸光度值为0.345±0.027,较A、C、D组(平均吸光度值分别为0.264±0.015、0.258±0.022和0.249±0.021)差异均有统计学意义(P＜0.01);超微结构观察A组和B组,细胞质内可见较多脂肪颗粒聚集,线粒体可出现空泡样变.结论 肝前性门静脉高压大鼠门静脉侧支血流对肝脏生理功能的维持具有较为重要的作用;肝前性门静脉高压可使肝内胆管上皮细胞和胆管周围微血管出现轻度增生,肝细胞内发生脂肪颗粒聚集;如果肝动脉血供丧失,则这些变化会更加显著.     

骨髓间充质干细胞移植途径对胰岛移植物免疫排斥反应的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)与胰岛共移植对诱导胰岛移植物免疫耐受的作用,并比较MSC不同途径移植的效果。方法:SD大鼠和Lewis大鼠分别作为供、受体。取SD大鼠股骨,贴壁培养法分离和扩增MSC,胶原酶V分离胰岛。应用链脲佐菌素制备Lewis大鼠糖尿病模型后,将其随机均分为A组(将BrdU标记的MSC与胰岛经门静脉混合输入),B组(将胰岛经门静脉输入,BrdU标记的MSC经尾静脉输入),C组(胰岛经门静脉输入,联合应用环孢素A)和D组(单纯胰岛门静脉移植)。观察各组术后血糖变化,比较各组胰岛移植物存活时间。术后第7天切取各组部分存活大鼠肝脏、胸腺、脾脏行免疫组化染色观察MSC归巢位置。结果:A,B两组大鼠术后正常血糖维持时间最长,C组次之,D组最短;各组胰岛存活时间A组为(12.1±2.3)d,B组为(8.6±1.4)d,C组为(13.2±1.9)d,D组为(2.2±0.6)d;MSC归巢部位观察显示,A组BrdU阳性的MSC主要分布于肝脏,并在植入胰岛周围形成"类微囊化效应",B组BrdU阳性的MSC主要分布于胸腺、脾脏。结论:MSC与胰岛共移植能诱导胰岛移植物免疫耐受,且MSC和胰岛混合经门静脉移植效果优于胰岛门静脉移植联合MSC外周静脉移植。     

大鼠失神经靶肌肉注射异体不同细胞对神经再生影响的研究

目的研究注射异体不同细胞于大鼠失神经靶肌肉对神经再生的影响.方法 SD成年大鼠36只,雌性,体重120～150 g,随机分为4组,每组9只.无菌条件下切断左侧坐骨神经,一期神经外膜缝合.术后即于小腿三头肌处注射相应细胞,7天注射1次,共4次.A组注射单纯雪旺细胞1×106/ml 1 ml,B组注射雪旺细胞加成肌细胞(雪旺细胞∶成肌细胞为1∶1)1×106/ml 1 ml,C组注射肾内皮细胞提取液1 ml,D组注射无血清培养液1 ml作对照.术后3个月取手术侧坐骨神经及坐骨神经所支配的小腿三头肌,进行大体和组织形态学观察、神经鞘细胞密度及单位面积靶肌肉(小腿三头肌)运动终板计数.结果术后3个月,各组近端神经鞘细胞均数为A组0.134 5±0.029 8,B组0.093 1±0.025 6,C组0.072 4±0.023 7,D组0.187 7±0.054 2;A组∶D组P值<0.05,B组∶D组、C组∶D组及A组∶B组P值均<0.01,B组∶C组P值＞0.05.术后3个月各组远端神经鞘细胞密度均数为A组0.186 0±0.042 5,B组0.155 1±0.032 1,C组0.104 7±0.013 3,D组0.240 9±0.056 8;A组∶D组P值<0.05,B组∶D组、C组∶D组及B组∶C组P值<0.01,A组∶B组P值＞0.05.术后3个月各组靶肌肉运动终板个数均数为A组6.000±0.866,B组9.000±2.291,C组12.780±1.394,D组3.110±0.782;A组∶D组、B组∶D组及C组∶D组P值<0.01,A组∶B组、A组∶C组及B组∶C组P值<0.01.结论雪旺细胞、混合细胞、肾内皮细胞提取液均有促进神经再生作用,肾内皮细胞提取液优于雪旺细胞及混合细胞.     

超声造影早期检出联合间充质干细胞治疗改善肝移植术后胆道缺血预后的初步探讨

目的 探讨超声造影(CEUS)早期检出联合间充质干细胞(MSC)治疗肝移植术后胆道缺血的疗效.方法 回顾性分析9例肝移植术后4周内CEUS提示胆道缺血且术后1年内确诊为非吻合口胆管狭窄(NAS)受者的临床资料.常规治疗组4例,行常规治疗,治疗方式包括护肝、利胆、介入治疗等;MSC治疗组5例,在常规治疗的基础上,分别于C...     

不同门奇断流术式对门静脉高压症犬血流动力学的影响

目的 观察不同门奇断流术式对肝硬化门静脉高压症犬血流动力学的影响.方法 将肝硬化门静脉高压症模型犬32只,随机分为A(传统断流)组、B(选择性断流)组、C(吻合器断流)组及D(对照)组.于术前1周、术后1、6月测定各组犬的门静脉直径(PVD)、门静脉流速(PVV)和门静脉血流量(PVF),于术中、术后1、6月测定各组犬的自由门静脉压力(FPP).结果 术后1月A、B、C组的PVD、PW、PVF均较术前明显降低(P<0.05),其中A组各项指标(0.54±0.03)cm、(11.45±1.27)cm/min、(160.82±30.85)ml/min显著高于B(0.45±0.01)cm、(8.71±0.48)cm/min、(83.37±9.39)ml/min及C组(0.49±0.02)cm、9.85±0.39)cm/min、(111.21±12.68)ml/min(P<0.05),C组显著高于B组(P<0.05).各组术后6月各指标与术后1月比较,差异无统计学意义(P>0.05).D组手术前后差异无统计学意义(P>0.05).A、B、C组手术后FPP均明显下降(P<0.05),其中A组(2.05±0.07)kPa显著高于B组(1.28±0.05)kPa、C组(1.41±0.04)kPa,C组显著高于B组(P<0.05).术后1、6个月,A、B、C组FPP与手术后比较,差异无统计学意义(P>0.05).D组手术前、手术后、术后1、6个月比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 肝硬化门静脉高压症犬在行传统断流术、选择性断流术和吻合器断流术术后6个月内PVD、PVV、PVF和FPP均显著下降,其中传统断流术影响最小,选择性贲门周围血管离断术最大.     

输注受者骨髓间充质干细胞对肝移植大鼠免疫功能的影响

目的 观察肝移植同时输注受者骨髓间充质干细胞(MSCs)对受者肝移植免疫功能的影响.方法 实验分为4组:A组SD大鼠只行剖腹探查;B、C、D组各组行Wistar-SD大鼠肝移植同时,C组提取受者MSCs同期经门静脉输注给受者,D组给予肌注CsA,B组给予门静脉输注生理盐水.观察术后第1、7、14天肝功能的变化、病理改变和细胞因子变化.结果 肝移植同时输注受者MSCs,谷氨酸转移酶、血清总胆红素较对照组显著降低,病理改变仅呈急性轻度排除反应,与肌注CsA组相似,而单纯移植组呈急性重度排除反应.术后第7天,白细胞介素(IL)-2和干扰素(IFN)-γ浓度,C组分别为(443.89±2.39)、(347.55±3.35)ng/L,B组分别为(600.36±2.98)、(373.77±1.81)ng/L,而IL-4和IL-10浓度,C组分别为(126.99±1.18)、(147.40±1.07)ng/L,B组分别为(102.02±0.94)、(111.03±1.15)ng/L,C组和B组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肝移植同时输注MSCs,可通过抑制Th1细胞因子的表达,减轻受者对移植肝的排斥反应.     

临床多选题与题解

[A型题] 问1.肝内胆管结石不能取净或伴有肝胆管良性狭窄时宜选用哪种引流管? A.T管B.Y管C.U管D.J管E.以上各管均可选用问2.下列哪项检查对肝内胆管结石的诊断最有价值? A.X线电子计算机断层扫描(CT)B.B型超声检查(B超)C.内窥镜逆行胰胆管造影(ERCP)D静脉胆道造影E.同位素扫描问3.胆石症再次手术最常见的原因是: A.肝内胆管残余结石B.胆外胆管残余结石C.胆肠吻合(内引流)术后逆行感染D.第一次采取的术式不当或胆道狭窄处未予处理E.术中胆道损伤或术后胆道出血问4.下列哪项不是肝胆管结石的基本病理改变: A.胆管炎B.胆管梗阻C.肝组织坏死D.肝囊肿E.肝叶萎缩问5.下列哪项不是肝胆管结石的临床表现特点?     

320排CT灌注检查在肝移植后肝动脉狭窄合并缺血性胆道病变中的应用价值

目的 通过应用320排CT灌注(CTP)成像技术检查肝移植后肝动脉狭窄(HAS)患者的移植肝血流灌注情况,以明确HAS与缺血性胆道病变(ITBL)的关系,为HAS的治疗提供依据.方法 收集肝移植后经320排CT血管成像(CTA)检查证实为中重度HAS的患者13例,根据经皮经肝胆管造影(PTC)检查是否有ITBL,将HAS患者分为无ITBL组(5例)和ITBL组(8例).分别对两组患者进行CTP检查,定量检测其肝动脉灌注量(HAP)、门静脉灌注量(PVP)、总肝灌注量(TLP),并计算肝动脉灌注指数(HPI),比较两组间各灌注量的差异.结果 ITBL组与无ITBL组的HAP分别为(59.8±19.9)和(35.1±4.9)ml·min-1·100 ml-1,PVP分别为(125.4±27.3)和(166.2±21.1)ml·min-1·100ml-1,TLP分别为(185.2±27.9)和(201.3±23.6)ml·min-1·100 ml-1,HPI分别为(33.6±10.9)％和(18.2±1.9)％,两组间比较,HAP、PVP及HPI差异均有统计学意义(P＜0.05),TLP的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CTP成像通过定量检测肝动脉、门静脉的血流灌注量,无创性地反映了移植肝的血流动力学变化情况 ;当肝移植后HAS患者的HAP和HPI升高及PVP降低时,应警惕ITBL的发生,为临床及时治疗HAS,预防ITBL的发生提供客观依据.     

组蛋白预处理对胆道梗阻大鼠肝功能影响的实验研究

【摘要】〓目的〓探讨组蛋白预处理对胆道梗阻大鼠肝功能的影响。方法〓104只大鼠随机分成4组:正常组(A组)、假手术组(B组)、胆管结扎组(C组)和His预处理组(D组,胆管结扎前24 h腹腔注射组蛋白(200 μg/kg)。设A组为0时相,B、C、D组分为术后12、24、48、72 h 4个时相,每个时相8只。留取血样和肝组织标本,检测血清ALT、DB、TB水平,观察肝组织病理学改变。ELISA检测血清IL-6和TNF-α水平,RT-PCR方法检测Kupffer细胞TLR4 mRNA表达水平。结果〓C组各时相肝组织病理评分高于A和B组(P<0.01)和D组(P<0.05)的相应时相。C组血清IL-6和TNF-α水平术后逐渐升高,高于B组相应时相(P<0.01);D组各时相血清IL-6和TNF-α水平低于C组,(P<0.05)。C组Kupffer细胞Toll-样受体4 mRNA(TLR4 mRNA)表达术后逐渐升高,高于A和B组相应时相(P<0.01);D组各时相Kupffer细胞TLR4 mRNA表达低于C组(P<0.05)。结论〓对胆道梗阻大鼠给予组蛋白预处理,可以减轻肝功能损害;通过激活Kupffer细胞TLR4减少炎症介质IL-6、TNF-α产生,抑制局部及全身的炎症反应。     

骨隧道大小对前交叉韧带止点转归的影响

目的 观察前交叉韧带(anterior cruciate ligament, ACL)重建中不同直径骨隧道对移植韧带止点转归的影响.方法 日本大耳兔90只,雌雄不拘,体重2.5～3.0 kg,随机分为3组,每组30只.制备ACL止点转归动物模型,分成移植韧带直径(d)与骨隧道直径(D)之比(d/D)为1/1组(A组)、1/1.5组(B组)和1/2组(C组).观察术后一般情况,并于术后4、8和16周每组处死10只动物,行移植止点大体、组织学观察及最大抗拉力载荷实验.结果 3组动物术后伤口愈合佳.平均双下肢行走时间:A组1.5 d、B组2.0 d及C组3.5 d.大体观察:术后4周,A、B组骨隧道口软组织生长多于C组;8周A、B组骨隧道口已无缝隙,C组无改善;16周A、B组与正常韧带止点相同,C组未形成止点结构.组织学观察:术后4周各组肌腱与骨隧道间充满疏松结缔组织;8周A、B组潮线结构不连续,C组未见潮线样结构;16周A、B组出现连续潮线样结构,C组仍未形成潮线样结构.术后4周,A、B及C组最大抗拉力载荷分别为(75.44±7.06)、(91.37±6.14)和(126.91±4.61)N;8周为(74.31±4.81)、(88.30±7.46)和(124.34±8.44)N;16周为(62.20±5.32)、(71.53±5.99)和(83.62±5.69)N;术后各时间点A、B组间最大抗拉力载荷差异无统计学意义(P>0.05),A、B组与C组间差异有统计学意义(P<0.01).结论 在ACL重建中d/D为1/1.5时,对止点转归无明显影响,但d/D小于此范围将影响移植物止点的转归.     

羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射对兔肝VX2种植瘤生长的影响

目的 研究羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射对兔肝VX2种植瘤生长的影响.方法 将接种VX2肝肿瘤的新西兰白兔随机分成4组,每组10只.A组:肝种植瘤内注入含0.2%羧甲基纤维素钠的生理盐水1 ml;B组:注入20 mg/ml 5-Fu 1 ml;C组:注入20 mg/ml Nano-HAP溶胶1 ml;D组:注入同样浓度5-Fu和Nano-HAP混合液2 ml.四组实验动物于注药后7、14、21 d行肝脏B超扫描,记录生存时间,取肝肿瘤组织病理学检查.结果 术后7、14、21 d A组平均肿瘤体积分别为(4.93±0.76)cm3、(15.67±2.75)cm3和(52.36±10.57)cm3 ; B组为(4.16土0.33)cm3、(10.26±1.60)cm3和(18.89±4.65)cm3;C组为(1.43±0.13)cm3、(3.69±0.77)cm3和(9.51±2.09)cm3;D组为(2.80±0.46)cm3、(3.77±0.91)cm3和(8.46±0.95)cm3.B、C、D三组肿瘤体积均小于同期对照组,D组肿瘤体积最小.四组动物中位生存期分别为34、41、51和44 d.B、C、D三组生存期较对照A组延长.超声监测显示C、D组羟基磷灰石纳米粒子溶胶瘤内注射时可见肿瘤内强回声光点.多次注射后瘤体内可见钙化样强回声光团.HE染色后光镜下观察见A组和B组肿瘤组织出现多处片状坏死,C、D组注射区域呈片状坏死,被条索状或片状钙化灶分隔.结论 羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射治疗兔VX2肝肿瘤是安全、可行的,对肿瘤生长有明显的抑制作用,未见毒性反应.     

门静脉动脉化对梗阻性黄疸时肝胆切除术后肝再生的影响

目的 观察慢性、梗阻性黄疸小型猪肝-胆切除术中限流性部分门静脉动脉化(PP-VA)对术后残肝再生能力的影响.方法 利用梗阻性黄疸小型猪模型,模拟进行联合半肝切除的肝门部胆管癌扩大根治性手术.实验分组:无黄疸对照组(A组)、门静脉动脉化组(B组)及非门静脉动脉化组(C组).对照观察根治术中应用限流性PPVA在术后30 d内对残肝再生的作用.结果 术后即刻及第30天门静脉PO2:B组高于C组[(47.33±2.43)比(35.38土4.06)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)、(48.50±4.44)比(35.55±2.55)mm Hg,P<0.01、P<0.01].肝细胞有丝分裂指数:术后第14及21天B组高于C组[(12.55±2.85)%比(6.85±2.10)%、(15.25±1.99)%比(11.88±1.15)%,P<0.05、P<0.05].术后第14、21天肝脏体积再生率B组分别高于C组[(24.56±6.15)%比(11.96±5.43)%、(70.63±9.83)比(44.92±7.42)%,P<0.05、P<0.01].结论 限流性PPVA可促进慢性梗黄小型猪肝-胆切除术后残肝再生,从而预防肝功能衰竭.     

大鼠同种骨髓间充质细胞门静脉输注对肝大部分切除肝衰模型术后肝功能、生存率的影响

目的 观察大鼠同种骨髓间充质细胞(BMSCs)经门静脉肝内移植对80％肝切除肝衰竭模型术后肝功能、生存率的影响.方法 通过80％肝切除建立大鼠边缘肝衰竭模型,经门静脉输注绿荧光蛋白(GFP)标记的第5代(P5)大鼠同种MSC,观察BMSCs肝内移植对肝大部分切除边缘肝衰竭模型术后生存率、肝功能的影响.结果 术后7d内的存活率:MSC组72.2％( 13/18)、对照组44.4％ (8/18).MSC组的存活率明显高于对照组(72.2％比44.4％,P＜0.05;MSC组大鼠术后肝功能恢复情况明显优于对照组(P＜0.05);MSC组肝组织中可观察到移植的细胞.结论 经门静脉的BMSCs移植可促进80％肝切除边缘肝衰竭大鼠的肝功能恢复和提高生存率.     

单孔腹腔镜胆囊切除术的学习曲线

目的:总结单孔腹腔镜胆囊切除术(single-incision laparoscopic cholecystectomy,SILC)的经验与体会,初步研究SILC的学习曲线。方法:回顾分析2011年7月至2014年4月40例SILC患者的临床资料,按施行手术的先后顺序分成A、B、C、D四组,每组10例,分析手术时间、出血量、术后并发症等指标。结果:本组40例患者均成功施行SILC,无中转常规腹腔镜手术或开腹手术。均未放置腹腔引流管。手术时间平均(61.0±19.7)min,A组手术时间平均(79.5±21.4)min,B组平均(68.0±15.7)min,C组平均(49.3±10.0)min,D组平均(47.3±9.2)min,其中B、C组差异有统计学意义(P<0.05),A、B组,C、D组差异均无统计学意义(P>0.05)。手术出血量平均(15.3±21.1)ml。B组术后腹腔内出血1例,经保守治疗而愈,A组、B组、D组各有1例切口感染,B组、C组各有1例术中胆囊破裂,术后无黄疸、胆漏、胆管损伤、脐部切口疝等并发症发生,瘢痕不明显,美容效果满意。术后第1天进低脂半流质饮食,术后1~3 d出院。结论:SILC是相对安全的,随着手术例数的增加,手术时间明显缩短,学习曲线约为20例。     

依达拉奉和1,6-二磷酸果糖联合应用对心脏瓣膜置换手术患者的心肌保护作用

目的探讨氧自由基清除剂依达拉奉和能量代谢调节剂1,6-二磷酸果糖(FDP)联合应用在CPB下行心脏瓣膜置换手术患者的心肌保护作用。方法选取ASAⅡ或Ⅲ级、拟在CPB下行二尖瓣置换、主动脉瓣置换和联合瓣膜置换术患者40例。随机均分为对照组(A组)、依达拉奉组(B组)、FDP组(C组)和联合用药组(D组)。A组给予等容量生理盐水;B组将依达拉奉0.5mg/kg一次性加入CPB预充液中;C组于主动脉阻断前15min静脉滴注FDP 200mg/kg;D组为将依达拉奉0.5mg/kg一次性加入CPB预充液中,并于主动脉阻断前15min静脉滴注FDP 200mg/kg。分别于麻醉后切皮前(T1)、主动脉阻断前(T2)、CPB停止后2h(T3)、CPB停止后6h(T4)和术后24h(T5)采集桡动脉血,测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)浓度;血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、肌钙蛋白I(cTnI)的浓度并记录两组临床效果。结果与T1时比较,T2～T4时A组血浆SOD活性明显降低(P<0.05或P<0.01);T3～T5时四组血浆MDA浓度明显升高、CK-MB活性明显升高(P<0.05或P<0.01);T2～T5时四组血浆cTnI浓度明显升高(P<0.05或P<0.01)。与A组比较,T2～T4时B、C、D组血浆SOD活性明显升高(P<0.05);T3、T4时B、C、D组血浆MDA浓度、T3～T5时B、C、D组血浆CK-MB活性明显降低,T3时B、C、D组和T4时B、D组cTnI浓度明显降低(P<0.05或P<0.01)。与D组比较,T3、T4时B、C组血浆cTnI浓度明显升高(P<0.05)。术中多巴胺最大用量、术后24h引流量A组明显多于D组(P<0.05)。结论依达拉奉或FDP单独用药可以减轻心肌缺血-再灌注损伤,两者联合用药作用更加明显。     

与大鼠胰岛细胞联合移植的骨髓间充质干细胞的免疫调节作用

目的 研究同种异体或自体的大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)与胰岛肝内联合移植对胰岛移植物的免疫调节作用及其机制.方法 以链佐星制备Lewis大鼠的糖尿病模型,作为胰岛移植受者,分为3组:单纯移植组大鼠经门静脉单独移植SD大鼠胰岛6000 IEQ/kg;同系MSC组大鼠经门静脉共同移植1×109/L的Lewis大鼠MSC 1 ml与SD大鼠胰岛6000 IEQ/kg;同种MSC组大鼠经门静脉共同移植1×109/L的SD大鼠MSC 1 ml与SD大鼠胰岛6000 IEQ/kg.检测受鼠的血糖变化,术后1、3 d大鼠外周血γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4和IL-10的含量.结果 3组大鼠术后第1天血糖均下降到13.9 mmol/L以下.同系MSC组移植物存活时间为(11.38±4.03)d,同种MSC组为(5.50±2.07)d,单纯移植组为(2.88±1.25)d(P＜0.01).术后1、3 d,单纯移植组IFN-γ和IL-2的含量显著高于同系MSC组和同种MSC组(P＜0.01),同种MSC组IFN-γ和IL-2的含量高于同系MSC组(P＜0.05);单纯移植组IL-10的含量低于同系MSC组和同种MSC组(P＜0.01),同系MSC组IL-10的含量与司种MSC组相比较,差异无统计学意义(P＞0.05);各组IL-4含量的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MSC与同种胰岛共移植可以延长胰岛移植物存活时间,应用同系MSC的效果优于同种异体MSC.共移植的MSC主要通过减少TH1类细胞因子(IFN-y和IL-2)的表达使受者TH1/TH2平衡向TH2方向偏移.

Abstract：

Objective To compare the immune regulation of syngenic and allogenic mesenchymal stem cells (MSCs) in the transplantation combined with islets. Methods After induction of diabetes in 30 Lewis rats with streptozotocin (STZ), the recipient Lewis rats received islets from SD rats combined with syngenic (group B) or allogenic (group C) MSCs injection via the portal vein. The group of islets transplanted alone served as control (group A). The survival time of grafts in all groups was assessed by the level of blood glucose. ELISA was used to detect the levels of interferon-γ (IFN-γ), interleukin 2 (IL-2), IL-4 and IL-10 in the peripheral blood on the 1st and 3rd day after transplantation. Results The blood glucose levels in all three groups were decreased in a normal range (13. 9 mmol/L) and the survival time of grafts in group B (11.38 ± 4. 03 days) was significantly longer than in group C (5. 50± 2. 07 days) as well as group A (2. 88 ± 1.25 days). On the 1 st and 3rd day after transplantation, the levels of TH 1 cytokines IFN-γ and IL-2 in group A were significantly higher than in groups C and B (P＜0.05). Meanwhile the levels of TH 2 cytokine IL-10were increased in group B, but there was no significant difference between groups A and C (P＞0.05). The levels of IL-4 had no significant difference among these three groups (P ＞ 0.05).Conclusion Islet transplantation combined with MSCs could prolong the survival time of grafts.Syngenic MSCs, superior to allogenic ones, were more effective in changing the balance of TH1/TH2to TH2. Decreased expression of TH1 cytokine (IFN-γ, IL-2), which was closely related to the induction of immune tolerance, was beneficial to the long-term survival of grafts.