蟾毒灵抗肿瘤作用及其研究进展

蟾毒灵(bufalin)是中药蟾酥中提取的一种毒性配基之一,属强心甙类物质.近年来许多研究发现,蟾毒灵具有抑制多种肿瘤细胞增殖的作用,如血液系统肿瘤、肝癌、胃癌等.其能抑制肿瘤细胞增殖,并诱导肿瘤细胞分化和凋亡,抑制内皮细胞增生和血管生成等.本文就蟾毒灵在其抗肿瘤作用及其机制方面的研究进展作一综述.     

蟾毒灵抑制人前列腺癌PC3细胞迁移侵袭的机制研究

本研究主要探讨了蟾毒灵(bufalin)对人前列腺癌PC3细胞的体外增殖、迁移和侵袭的抑制能力,初步探讨蟾毒灵抑制上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation, EMT)过程的分子机制。采用MTT法评价PC3细胞活力;划痕和Transwell实验用于检测细胞的迁移和侵袭能力;采用Western blot实验检测EMT和整合素家族蛋白的表达情况。结果显示,蟾毒灵对人前列腺癌PC3细胞的半数抑制浓度值为0.26±0.03μmol·L-1,蟾毒灵处理后, PC3细胞的迁移速度变慢(P <0.05),穿过微孔滤膜的PC3细胞数量减少(P <0.05),这表明蟾毒灵能够浓度依赖性地抑制PC3细胞的增殖、迁移与侵袭能力。本研究发现蟾毒灵可以影响EMT相关蛋白的表达,包括E-钙黏附素(E-cadherin)的上调以及N-钙黏附素(N-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶9 (MMP9)、基质金属蛋白酶2 (MMP2)、癌基因c-myc、锌指转录因子Snail的下调;蟾毒灵还可以抑制整合素家族蛋白的表达,包括...     

蟾毒灵抑制低氧条件下乳腺癌细胞干性机制研究

目的:探究蟾毒灵(bufalin, BUF)对低氧条件下乳腺癌细胞干性的影响以及可能的机制。方法:慢病毒转染构建稳转低氧乳腺癌细胞模型MDA-MB-231/HIF1α^OE细胞株,以CCK-8、平板克隆、Transwell、划痕实验、克隆球悬浮实验检测BUF对低氧模型组乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测BUF对低氧模型组干性指标和PI3K/AKT信号通路的影响。结果:成功构建乳腺癌低氧细胞模型;低氧模型组的增殖率、克隆形成率、侵袭迁移能力以及克隆球形成能力明显高于Ctrl组;BUF干预后,上述干性指标明显降低;Western blot实验结果显示,低氧刺激激活PI3K/AKT信号通路,BUF可抑制低氧模型组PI3K/AKT信号通路的激活。结论:BUF可抑制低氧条件下乳腺癌细胞的干性,其机制可能与调控PI3K/AKT信号通路相关。     

HPLC法同时检查华蟾素片中蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基限量和测定蟾蜍噻咛的含量

目的 采用HPLC法对华蟾素片中有毒成分蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基进行限量检查;并利用HPLC法测定其有效成分蟾蜍噻咛的含量.方法 限量检查:色谱柱为Agela C18柱,流动相为乙腈-0.5％磷酸二氢钾溶液(50∶50)(用磷酸调节pH为3.2),检测波长为296nm.含量测定:色谱柱为Kromasil C18柱,流动相为乙腈-水(10∶90),检测波长为226nm.结果 在与蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基对照品色谱峰相同的保留时间处,5批样品出现的色谱峰面积之和小于对照品峰面积之和.蟾蜍噻咛在0.1045～1.0448μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率为98.9％,RSD=1.6％;每片含量不得少于0.15mg.结论 方法快速、准确、重复性好,可用于华蟾素片质量标准的控制.     

蟾毒灵对裸鼠人胰腺癌的作用和诱导细胞调亡的研究

目的观察蟾毒灵对裸鼠人胰腺癌的疗效和诱导细胞凋亡作用。方法建立裸鼠人胰腺癌移植瘤模型,随机分为蟾毒灵低剂量组(1.0mg/kg)、蟾毒灵高剂量组(1.5mg/kg)、5-Fu组(24mg/kg)、5-Fu+低剂量蟾毒灵组(24mg/kg+1.0mg/kg),生理盐水(NS)组。腹腔注射给药,1次/d,连续给药6d。各组保留6只荷瘤鼠观察带瘤生存期,其余6只于用药第7天处死,测量鼠重变化、肿瘤生长抑制率;TUNEL法检测瘤体凋亡指数。结果治疗后,与NS相比,蟾毒灵高、低剂量组裸鼠体重无显著差异(P>0.05),5-Fu组、5-Fu+低剂量蟾毒灵组裸鼠体重明显降低差异(P<0.01);各用药组瘤体体积与NS组相比均显著缩小(P<0.05),蟾毒灵高剂量组较低剂量组瘤体体积显著缩小(P<0.05),蟾毒灵+5-Fu组较单纯蟾毒灵组瘤体体积显著缩小(P<0.05);蟾毒灵高、低剂量组平均生存期较NS组显著延长(P<0.05);蟾毒灵高剂量组凋亡指数明显高于其他各组(P<0.01)。结论蟾毒灵对裸鼠人胰腺癌移植瘤有显著的抑制作用,诱导肿瘤细胞凋亡可能是蟾毒灵的抗肿瘤机理之一。     

酚酸类化合物抗肝细胞癌作用机制及应用的研究进展

目的:总结酚酸类化合物抗肝细胞癌作用机制的研究进展。方法:以"酚酸""肝细胞癌""抗癌机制""Hepatocellular carcinoma""HCC""Phenolic acid""Anti-cancer mechanism"等为关键词,在中国知网、万方数据、维普网、PubMed等数据库中组合查询2000年1月-2020年4月发表的相关文献,对酚酸类化合物抗肝细胞癌的作用机制,以及在药物研发中的应用进行综述。结果与结论:酚酸类化合物主要通过阻滞细胞周期,减缓细胞有丝分裂速率,调节上皮-间质转化相关分子抑制肝癌细胞侵袭和转移,通过调控微管相关蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ信号通路促进肝癌细胞自噬,以及激活胱天蛋白酶3(Caspase-3)诱导肝癌细胞凋亡。其作用机制主要是抑制肝癌细胞增殖(如柯里拉京、齐墩果酸、藤黄酸、熊果酸等)、抑制肝癌细胞侵袭和转移(如银杏酸、科罗索酸、藤黄酸等)、促进肝癌细胞自噬(如松萝酸、鼠尾草酸、甘草次酸等)、诱导肝癌细胞凋亡(如土荆酸乙酯、没食子酸、柯里拉京等)等;同时,酚酸类化合物在抗肝癌药物研发中具有降低化疗药物对正常组织器官的毒副作用以及提高其抗癌活性等作...     

静脉注射蟾毒它灵和华蟾毒它灵后大鼠胆汁中代谢产物的UPLC-UV-MS法分析

建立了超高效液相色谱-紫外分光光度-质谱(UPLC-UV-MS)法研究蟾毒它灵和华蟾毒它灵静脉给药后大鼠胆汁中的代谢产物.UPLC的高分辨率能够基线分离胆汁中的原药和代谢物,UV光谱图揭示了各种化合物量的关系,MS进一步对代谢物进行结构表征.结果显示,大鼠胆汁中原药的含量小于5%,主要代谢物是去乙酰基并羟基化蟾毒它灵和去乙酰基华蟾毒它灵.表明蟾毒它灵在大鼠体内代谢途径主要是水解并羟基化,华蟾毒它灵主要是水解反应.     

蟾毒灵对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响

摘要目的：研究蟾毒灵对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响,初步探讨其在膀胱癌中的抗肿瘤机制。方法：采用MTT法测定蟾毒灵对人膀胱癌T24细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）检测蟾毒灵对癌细胞凋亡和细胞周期的影响;RT—PCR法检测癌细胞周期蛋白D1（CyclinDl）基因表达情况。结果：蟾毒灵可抑制人膀胱癌T24细胞的增殖,并呈现出时间和浓度依赖性;蟾毒灵能诱导T24细胞凋亡;20nmol／L浓度的蟾毒灵预处理膀胱癌T24细胞后,与对照组（36．42％）进行比较,可分别在12h（69．76%）和24h（88．14%）显著诱导细胞G0／G1期阻滞（P〈0．05）,且可降低膀胱癌T24细胞的CyclinDlmRNA表达水平。结论：蟾毒灵能显著抑制人膀胱癌T24细胞增殖,诱导T24细胞G0／G1周期阻滞,下调人膀胱癌T24细胞CyclinDl基因表达。     

蟾毒灵对人脑胶质瘤U251细胞生长增殖的影响

摘 要 目的：探讨蟾毒灵(Bufalin)对人脑胶质瘤U251细胞生长增殖的影响。方法: 采用四甲基偶氮蓝（MTT）比色法检测Bufalin对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响;倒置显微镜观察各组细胞数目、形态及活性的变化;膜联蛋白（AnnexinV）碘化丙啶（PI）标记法检测其对细胞凋亡的影响。结果: 不同浓度Bufalin对U251细胞增殖活性具有不同程度的抑制作用,在0.001～10 μmol·L^-1浓度范围内呈剂量和时间依赖性;与对照组相比,Bufalin给药组对U251细胞的凋亡率均显著增高（P<0.01）。结论:Bufalin可显著抑制U251细胞的生长增殖,并在一定范围内呈浓度和时间依赖性,诱导其凋亡。     

蟾毒灵诱导人胰腺癌细胞凋亡及其对TGF-β1表达的影响

目的研究蟾毒灵对裸鼠人胰腺癌的疗效及细胞凋亡的作用和机理。方法建立裸鼠人胰腺癌模型,随机分为对照组(NS)、5-氟尿嘧啶组(5-Fu)、蟾毒灵低剂量组(BuL)、蟾毒灵高剂量组(BuH)。分别腹腔注射生理盐水NS,20ml/kg、5-Fu24mg/kg、Bu1mg/kg、Bu1·5mg/kg。用药后第7天处死,计算肿瘤生长抑制率;TUNEL法检测瘤体凋亡指数;免疫组化S-P法检测P38、TGF-β1的表达。结果治疗后与NS组相比,各组瘤体体积均显著缩小(P<0·05)。其中Bu高剂量组瘤体体积明显相似文献   

Novel therapeutic targets and predictive markers for hepatocellular carcinoma

Introduction: Following the approval of sorafenib as the first systemic agent for treatment of advanced hepatocellular carcinoma (HCC), there have been an increasing number of targeted treatments under testing for the cancer. However, most of the recently published drug trials in HCC failed to produce remarkable results. The researchers are actively pursuing novel therapeutic targets as well as predictive biomarker for treatment of HCC.

Areas covered: This review discusses a number of potential novel targets for drug development of HCC. Focus is put on the underlying rationale for therapeutic development of the target and the possibility of using a predictive biomarker to select patients for drug testing.

Expert opinion: Future direction of drug development will be discussed. Notably, a clinical trial on drug testing in HCC should be shifted from all-comers approach to selected populations based on underlying viral etiology and molecular targets. A study to evaluate predictive biomarker is crucial to the development of targeted agents for HCC. Design of clinical trials on HCC should introduce measures to encourage acquisition of tumor and plasma samples for biomarker development.     

参芪扶正注射液对肝癌细胞株H22的抑制作用及机制研究

目的研究参芪扶正注射液体内外对肝癌H22细胞的抑制作用及其机制。方法 MTT法检测参芪扶正注射液体外对H22细胞增殖的影响;利用H22小鼠模型进行体内抗肿瘤作用试验,计算抑瘤率;酶联免疫ELISA法测荷瘤小鼠血清IFN-γ含量;双抗体夹心ABC-ELSA法测荷瘤小鼠血清TNF-α的含量。结果参芪扶正注射液体内外均能抑制H22细胞的生长,具有浓度和时间依赖性;促进荷瘤小鼠血清中IFN-γ和TNF-α的表达。结论参芪扶正注射液体内外均能抑制肝癌H22的生长,其抗肿瘤作用与调节荷瘤小鼠的免疫功能有关。     

古抑菌素对人肝癌细胞作用的研究

目的:通过组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDACS)抑制剂古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)对人肝癌细胞HepG2(以下简称HepG2)和正常肝细胞LO2(以下简称LO2)增殖与凋亡作用的比较,探讨TSA对肝癌的作用机制.方法:应用光学显微镜、透射电镜、四氮唑蓝(MTT)法、免疫细胞化学法观察经不同浓度TSA处理后的HepG2和LO2的增殖、凋亡与凋亡相关蛋白的改变.结果:HepG2细胞经TSA处理后,电镜下超微结构发生了凋亡早期改变;小剂量TSA对HepG2细胞具有较强的抑制作用,对LO2细胞影响不明显,当TSA浓度达到1000 nmol/L以上时,对LO2表现出明显的细胞毒性作用;TSA可诱导HeptG2细胞凋亡,并增加凋亡相关蛋白Bax的表达.结论:TSA可明显抑制肝癌细胞HepG2的增殖,其机制可能与上调Bax的表达,诱导细胞凋亡有关.     

输注新鲜冰冻血浆对晚期肝癌患者的临床疗效观察

目的探讨输注新鲜冰冻血浆对晚期肝细胞癌患者的临床疗效。方法统计我院2013年1月至2015年1月的晚期肝细胞癌患者共125例,分为血浆组(92例)和对照组(33例)。对照组给予内科常规治疗和介入治疗,血浆组患者在进行内科常规治疗和介入治疗的同时对其进行血浆输注辅助治疗,血浆输注隔天1次,每次200~400mL,持续输注2周,检测2组患者治疗后肝功能、彩色多普勒超声检查腹腔积液深度等指标的变化,同时评估患者焦虑、疼痛评分。结果血浆组患者治疗14d后丙氨酸转氨酸、天冬氨酸转氨酶、总胆红素较对照组均降低(P<0.05),白蛋白、胆碱酯酶、凝血酶原活动度较对照组均明显升高(P<0.05)。Child-Pugh肝功能评级较对照组明显好转(P<0.05),同时患者焦虑程度和疼痛程度得到缓解。结论对晚期肝癌患者输注新鲜冰冻血浆可显著改善患者肝功能及临床体验。     

原发性肝癌合并门静脉癌栓不同治疗方法的疗效观察

目的评价原发性肝癌合并门静脉癌栓不同治疗方法的疗效。方法回顾性分析我院83例原发性肝癌伴门静脉癌栓患者的临床资料,根据不同的治疗方法分为肝癌手术切除+癌栓切除或取出+术后肝动脉化疗栓塞治疗组(A组),肝癌手术切除+癌栓切除或取出治疗组(B组),肝动脉化疗栓塞治疗组(C组)。结果 A组中位生存期17个月,术后0.5、1、3年生存率分别为92.1%、64.6%和19.1%。B组中位生存期12个月,术后0.5、1、3年生存率分别为58.3%、41.7%和7.1%。C组中位生存期5个月,术后0.5、1、3年生存率分别为37.0%、15.9%和0。各组生存率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肝切除和门静脉取栓术是肝癌伴门静脉癌栓的有效治疗方法,术后联合肝动脉化疗栓塞能提高治疗效果,延长患者的生存期。     

Therapeutic effect of several therapeutic methods for hepatocellular carcinoma with tumor thrombosis in portal vein

目的 评价原发性肝癌合并门静脉癌栓不同治疗方法的疗效.方法 回顾性分析我院83例原发性肝癌伴门静脉癌栓患者的临床资料,根据不同的治疗方法分为肝癌手术切除+癌栓切除或取出+术后肝动脉化疗栓塞治疗组(A组),肝癌手术切除+癌栓切除或取出治疗组(B组),肝动脉化疗栓塞治疗组(C组).结果 A组中位生存期17个月,术后0.5、1、3年生存率分别为92.1%、64.6%和19.1%.B组中位生存期12个月,术后0.5、1、3年生存率分别为58.3%、41.7%和7.1%.C组中位生存期5个月,术后0.5、1、3年生存率分别为37.0%、15.9%和0.各组生存率比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 肝切除和门静脉取栓术是肝癌伴门静脉癌栓的有效治疗方法,术后联合肝动脉化疗栓塞能提高治疗效果,延长患者的生存期.     

DNA-PKcs影响肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu增殖及机制的研究

目的 检测DNA-PKcs对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu增殖的影响及其相关机制,探讨DNA-PKcs在肝癌多药耐药的发生发展中的作用.方法 采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs转染Bel-7402/5-Fu细胞,cck-8法检测细胞增殖情况;流式细胞技术检测细胞周期;Western blot检测DNA-PKcs、TS蛋白的表达情况.结果 实验组与对照组比较,细胞增殖减少(P＜0.05);实验组S期细胞与对照组比较,细胞数减少(P＜0.05);DNA-PKcs、TS蛋白表达结果显示,实验组相比对照组蛋白表达下调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DNA-PKcs的表达沉默能抑制肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu的细胞增殖;其机制可能与沉默DNA-PKcs蛋白表达后,TS蛋白表达下调有关.     

The inhibitory effect and mechanism of quetiapine on tumor progression in hepatocellular carcinoma in vivo

Hepatocellular carcinoma (HCC) is the primary tumor of the liver and the fourth leading cause of cancer-related death. Recently, several studies indicated the anti-tumor potential of antipsychotic medicine. Quetiapine, an atypical antipsychotic, is used to treat schizophrenia, bipolar disorder, and major depressive disorder since 1997. However, whether quetiapine may show potential to suppress HCC progression and its underlying mechanism is persisting unclear. Quetiapine has been shown to induce apoptosis and inhibit invasion ability in HCC in vitro. Here, we established two different HCC (Hep3B, SK-Hep1) bearing animals to identify the treatment efficacy of quetiapine. Tumor growth, signaling transduction, and normal tissue pathology after quetiapine treatment were validated by caliper, bioluminescence image, immunohistochemistry (IHC), and hematoxylin and eosin staining, respectively. Quetiapine suppressed HCC progression in a dose-dependent manner. Extracellular signal-regulated kinases (ERKs) and Nuclear factor-κB (NF-κB) mediated downstream proteins, such as myeloid leukemia cell differentiation protein (MCL-1), cellular FLICE-inhibitory protein (C-FLIP), X-linked inhibitor of apoptosis protein (XIAP), Cyclin-D1, matrix metallopeptidase 9 (MMP-9), vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A) and indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) which involved in proliferation, survival, angiogenesis, invasion and anti-tumor immunity were all decreased by quetiapine. In addition, extrinsic/intrinsic caspase-dependent and caspase-independent pathways, including cleaved caspase-3, ?8, and ? 9 were increased by quetiapine. In sum, the tumor inhibition that results from quetiapine may associate with ERK and NF-κB inactivation.     

雷帕霉素对肝癌化疗的增敏作用及相关机制研究

目的探讨雷帕霉素(rapamycin)对阿霉素(DOX)治疗肝癌效果的影响以及相关机制。方法 DOX单独或与rapamycin联合处理HepG2、Hep3B 2种肝癌细胞48 h,用MTT法测定细胞的增殖情况;DOX、rapamycin以及两者联合处理HepG2、Hep3B细胞24 h,以流式细胞术检测细胞凋亡率,用Western blot法检测PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白(p-Akt、p-mTOR、p21和p53)的表达。结果 DOX能浓度依赖性抑制HepG2和Hep3B细胞的增殖,且对HepG2细胞的抑制作用明显强于Hep3B细胞;与单用DOX比较,DOX与rapamycin联用对2种细胞增殖的抑制作用明显增加,且增加Hep3B细胞对DOX敏感性的作用尤为显著。DOX作用HepG2和Hep3B细胞24 h,可诱导2种细胞发生不同程度的凋亡,rapamycin单独作用的促凋亡作用不明显,但与DOX联用后能明显增加DOX的促凋亡作用,2种细胞的凋亡率均明显增加。Western blot结果显示,rapamycin能明显上调p-Akt、p21和下调p-mTOR在2种细胞的表达水平,轻度上调p53在HepG2中的表达;DOX能轻度上调p-Akt、p21和下调p-mTOR在2种细胞的表达水平,明显上调p53在HepG2中的表达,Hep3B中无p53表达;两药合用对上述蛋白表达的影响有协同作用。结论 rapamycin能增加DOX对不同p53状态肝癌细胞的增殖抑制和促凋亡作用及肝癌对DOX化疗的敏感性,其机制可能与rapamycin激活凋亡的p53和不依赖p53的p21途径有关。