供者骨髓细胞骨髓腔内输注联合低剂量照射延长大鼠复合组织移植物存活时间

目的探讨供者骨髓细胞骨髓腔内输注联合低剂量照射对大鼠复合组织移植物的影响。方法以SD大鼠为供者,Wistar大鼠为受者,实验分4组进行:A组仅进行肢体移植;B组在肢体移植前1d,受者接受亚致死量60Co照射(4.5Gy/次,共2次,间隔4h),同时腹腔内注射氟达拉滨(50mg/kg);C组于肢体移植当天受者骨髓腔内输注供者骨髓细胞;D组在B组的基础上,受者于肢体移植当天骨髓腔内输注供者的骨髓细胞。所有受者术后均不用免疫抑制剂。术后观察移植物的存活情况及排斥反应征象,对D组存活超过120d的受鼠进行单向混合淋巴细胞反应以及SD大鼠、DA大鼠皮肤移植,同时通过组织学检查,了解受鼠的移植物抗宿主病(GVHD)情况。结果与其它实验组相比,D组移植物的存活时间显著延长(P<0.01),达(284.2±11.8)d,未见排斥反应征象,也未观察到GVHD,其它组均于术后近期发生排斥反应(<20d);D组大鼠对供者的淋巴细胞呈现低反应性,移植的供者同系大鼠的皮肤得以长期存活,而对第三方DA大鼠的淋巴细胞和皮肤呈现强烈的免疫反应。结论供者骨髓细胞骨髓腔内输注联合低剂量照射和短期氟达拉滨应用,在不用免疫抑制剂的情况下,能显著延长移植复合组织的存活时间。     

大鼠异体皮瓣移植后不用免疫抑制剂情况下移植物坏死的主要原因

目的 探讨大鼠异体皮瓣移植后不用免疫抑制剂情况下移植物坏死的主要原因.方法 实验分为3组,每组受者均为8只,以股动、静脉为蒂进行下腹部皮瓣移植.A组:以BrownNorway(BN)大鼠为供者,Lewis(LEW)大鼠为受者,移植术后2周内使用免疫抑制剂西罗莫司4mg·kg-1·d-1腹腔注射;B组:以BN大鼠为供者,LEW大鼠为受者,移植后不使用任何药物;C组:为LEW大鼠自体移植对照组,术后不使用任何药物.术后观察各组移植物的大体变化,并取移植物进行病理学检查,比较各组的病理学变化.结果 A组自术后17 d起,陆续出现皮瓣红斑,表皮脱落,真皮及皮下组织则最后坏死;B组受者排斥反应进展迅速,表皮不出现脱落现象,皮瓣直接完全发黑、坏死.C组移植物长期存活,未见排斥反应征象.A、B两组从出现排斥反应迹象到组织完全坏死的时间分别为(16.7±3.0)d和(5.4±1.1)d.病理检查显示:A组表皮组织首先被排斥,真皮和皮下组织由于大量淋巴细胞浸润而坏死.B组则为移植皮瓣真皮下血管网内皮细胞坏死,血管栓塞,皮肤内细胞缺血而坏死.结论 微血管栓塞是大鼠异体皮瓣移植后不应用免疫抑制剂情况下移植物坏死的主要原因.     

供肝冷缺血时间延长诱发大鼠原位肝移植术后早期急性排斥反应的研究

目的 研究供肝冷缺血时间延长对大鼠原位肝移植术后早期急性排斥反应的影响.方法 选取30只健康纯系清洁级BN大鼠和30只Lewis大鼠.分别作为纯系移植和同种异体移植的供者,受者均为健康纯系清洁级BN大鼠60只,建立纯系和同种异体原位肝移植模型.根据纯系移植和同种异体移植供肝冷缺血时间的不同,将供、受者分为A、B、C和D组,每组15对.A组:供肝冷缺血1 h后进行纯系移植;B组:供肝冷缺血18 h后进行纯系移植;C组:供肝冷缺血1 h后进行同种异体移植;D组:供肝冷缺血18 h后进行同种异体移植.术后观察受者的2周存活率、移植肝组织病理学及肝功能的改变,检测受者主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅱ类分子和核转录因子κB(NF-κB)的表达水平.结果 肝移植术后2周,A、B、C和D组的存活率分别为83.3%、66.7%、16.7%和0%,不管是纯系移植组还是同种异体移植组中供肝的冷保存时间越短,受者的存活率越高,且经肝功能检查发现冷保存时间短的受者移植肝功能恢复较好,移植肝组织病理学损伤和急性排斥反应也明显较轻.B组受者术后移植肝大量表达MHC-Ⅱ类分子,明显高于A组(P＜0.05);两同种异体移植组MHC-Ⅱ类分子的表达量较两纯系移植组增加明显,D组增加最多.A组几乎不表达NF-κB,而B组NF-κB的表达显著增加(P＜0.05);两同种异体移植组受者NF-κB的表达峰值提前.结论 冷缺血时间的延长可以诱导发生和加重大鼠原位肝移植术后早期急性排斥反应,降低术后2周存活率.     

同种异体大鼠外耳郭移植组织学改变的实验研究

目的研究同种异体大鼠外耳郭移植后组织形态学改变及免疫细胞的浸润情况.方法将动物分为自体、异体移植组.自体移植组以SD大鼠兼职供体与受体,进行自体移植;异体移植组以SD大鼠为供体,WISTAR大鼠为受体(SD→WISTAR),然后观察外耳郭的生存情况与组织学变化.结果异体外耳郭移植后可能存在快速排斥反应,组织中不但有T淋巴细胞的浸润而且也发现大量单核细胞的浸润.结论血管化的皮肤复合组织移植物的排斥反应机制与皮肤移植可能有着明显差异,进一步了解其排斥反应机制是解决移植物长期生存的理论基础.     

诱导免疫耐受预防大鼠肾脏移植排斥反应的研究

目的 探讨具有临床应用前景的移植耐受诱导方法。方法 以Lewis大鼠和DA大鼠分别作为肾脏移植的受体和供体,采用注射抗淋巴细胞血清（ALS）、输入供体骨髓细胞（BMT）和环磷酰胺（Cp）注射方法进行移植耐受诱导,观察肾脏移植物的存活情况及受体对供体细胞抗原免疫应答改变。结果 经耐受诱导的大鼠肾脏移植物存活时间明显延长,7只鼠中5只移植物存活73－90 d时仍无排斥反应迹象,混合淋巴细胞反应及诱导迟发型超敏反应表现为供体特异性降低。结论 诱导免疫耐受预防肾脏移植排斥反应具有重要的临床意义,此方法有一定的临床应用前景。     

供体骨髓细胞输注诱导大鼠肢体移植免疫耐受

目的 探讨环磷酰胺(CP)加供体脾细胞输注联合供体骨髓细胞(DBMC)输注诱导大鼠肢体移植免疫耐受的效果及机制.方法选择25只雄性Wistar大鼠、25只雌性SD大鼠分别作为肢体移植的供体和受体.实验分为五组:A组:无处理对照组,B组:受体在肢体移植前给予供体脾细胞输注预处理;C组:受体在肢体移植前给予CP预处理,D组:受体在肢体移植前给予供体脾细胞输注加CP预处理,E组:受体在肢体移植前给予供体脾细胞输注联合DBMC输注加CP预处理,每组5只.建立肢体移植动物模型,诱导耐受后观察大鼠一般情况,移植肢体排斥反应出现时间及存活时间,通过混合淋巴细胞培养确定耐受状态,采用PCR检测嵌合体的形成.结果 E组肢体移植物的存活时间[(27.6±1.1)d]较A组[(6.8±0.4)d]、B组[(7.2±0.8)d]、C组[(7.8±1.3)d]、D组[(17.8±0.8)d]显著延长,差异均有统计学意义(P＜0.01).混合淋巴细胞反应E组特异性抑制率[(88.00±1.06)%]显著高于B组[(36.90±1.08)%]、C组[(37.90±0.95)%]和D组[(67.20±1.12)%],差异均有统计学意义(P＜0.01).E组嵌合体呈阳性.结论联合CP加供体脾细胞输注及DBMC输注可一定程度诱导大鼠同种异体肢体移植的免疫耐受,延长移植物存活时间.嵌合体的形成可能与免疫耐受的形成及维持有关.     

同种异体大鼠外耳郭移植组织学改变的实验研究

目的　研究同种异体大鼠外耳郭移植后组织形态学改变及免疫细胞的浸润情况。方法　将动物分为自体、异体移植组。自体移植组以SD大鼠兼职供体与受体 ,进行自体移植 ;异体移植组以SD大鼠为供体 ,WISTAR大鼠为受体 (SD→WISTAR) ,然后观察外耳郭的生存情况与组织学变化。结果　异体外耳郭移植后可能存在快速排斥反应 ,组织中不但有T淋巴细胞的浸润而且也发现大量单核细胞的浸润。结论　血管化的皮肤复合组织移植物的排斥反应机制与皮肤移植可能有着明显差异 ,进一步了解其排斥反应机制是解决移植物长期生存的理论基础。     

大鼠异体肢体移植术后急性排斥反应阶段血管内皮细胞ICAM-1表达的动态变化

目的 研究大鼠异体肢体移植术后急性排斥反应阶段,移植肢体血管内皮细胞细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)动态变化及环孢素A(cyclosporine A,CsA)抗免疫排斥的作用.方法 建立大鼠肢体移植动物模型,随机分为对照组(Wistar大鼠→Wistar大鼠)、排斥组(SD大鼠→ Wistar大鼠)和CsA治疗组(SD大鼠→Wistar大鼠),术后1、4、7 d获取移植肢体股动脉行病理学观察,采用免疫组化法检测移植肢体血管ICAM-1表达的变化.结果 对照组供体移植肢体股动脉血管内皮细胞仅出现轻微肿胀与ICAM-1表达微弱;排斥组血管内皮细胞肿胀明显,淋巴细胞大量浸润,ICAM-1的表达强度和数量明显增加;CsA治疗组移植肢体血管内皮细胞仅有少量淋巴细胞浸润,ICAM-1表达较弱.结论 大鼠异体肢体移植术后急性排斥反应阶段,血管内皮细胞ICAM-1表达水平与排斥反应的发生和发展有关,CsA可降低移植肢体血管内皮细胞ICAM-1表达,抑制复合组织移植术后急性排斥反应.     

同种异体大鼠外耳郭移植组织学改变的实验研究

目的 研究同种异体大鼠外耳廓移植后组织形态学改变及免疫细胞的浸润情况。方法 将动物分为自体，异体移植组，自体移植组以SD大鼠兼职供体与受体，进行自体移植；异体移植组以SD大鼠为供体，WISTAR大鼠为受体（SD→WISTAR)，然后观察外耳郭的生存情况与组织学变化。结果 异体外耳廓 移植后可能存在快速排斥反应，组织中不但有T淋巴细胞的浸润而且也发现大量单核细胞的浸润。结论 血管化的皮肤复合组织移植物的排斥反应机制与皮肤移植可能有着明显差异。进一步了解其排斥反应机制是解决移植物长期生存的理论基础。     

含丝裂霉素C的灌注液对大鼠移植心脏存活时间的影响

目的研究含丝裂霉素C灌注液对心脏移植物存活的影响以及作用机理。方法BN大鼠做供体，Lewis大鼠做受体。用含丝裂霉素c的溶液灌注及保存Brown—Norway大鼠供体心脏．移植到Lewis大鼠受体。为分析丝裂霉素C的体内效应，受体于术后注射丝裂霉素C或用丝裂霉素C孵化的供体外周血单核细胞进行预处理。结果含丝裂霉素C的灌注液能够显著延长移植物存活．丝裂霉素C预处理受体不能延长移植物存活，但注射丝裂霉素C预处理供体的外周血单核细胞致受体能够延长移植物存活。结论对供体心脏用含丝裂霉素C溶液灌注可减轻移植物的排斥反应，显著延长移植心脏的存活时间。     

骨化三醇在抑制大鼠同种肢体移植排斥反应中的作用

目的 探讨应用骨化三醇(1,25-二羟维生素D;简称:VD5)在抑制肢体移植排斥反应中的作用.方法 以Wistar大鼠为供者,SD大鼠为受者,建立同种肢体移植模型.随机将受者分为4组,每组12只.(1)对照组:术后不用免疫抑制剂,仅以15 ml·kg-1·d-1.生理盐水灌服.(2)他克莫司(FK506)组:将FK506用生理盐水稀释为0.5 mg/ml,术后前2周的用量为1.0 mg·kg-1·d-1,术后第3周起,每周灌服2次.(3)VD3组:将骨化三醇用生理盐水稀释为0.125 μg/ml,术后用量为2.5μg·kg-1·d-1,连续灌服4周.(4)VD3+FK506组:术后联合应用骨化三醇及FK506,用药方法和用量与FK506组和VD3组相同.术后观察各组受者移植肢体排斥反应发生的时间和存活时间;流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+细胞的百分率.结果 对照组、FK506组、VD3组以及VD3+FK506组肢体移植后排斥反应发生的时间分别为:(3.50±0.50)d、(13.13±1.50)d、(10.63±0.38)d和(29.25±0.63)d;移植肢体的存活时间分别为:(8.50±0.50)d、(26.25±1.50)d、(17.25±0.38)d和(62.00±0.63)d;与对照组比较,VD3组排斥反应发生的时间和移植肢体的存活时间均明显延长,差异有统计学意义(P＜0.01);VD3+FK506组抗排斥反应效果更佳,与FK506组和VD3组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).VD3组T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+细胞的比值明显低于对照组,VD3+FK506组又明显低于VD3组和FK506组(P＜0.01).结论 骨化三醇能明显减轻同种肢体移植排斥反应,延长移植肢体的存活时间;骨化三醇与FK506联合应用效果更佳,二者具有协同作用.     

DCs单抗对大鼠肾移植后排斥反应时CD40/CD40L表达的影响

目的：观察大鼠树突状细胞（DCs)单抗单独或与甲泼尼龙（MP）联合应用对移植后排斥反应的影响，并结合检测大鼠移植肾CD40／CD40L表达水平，探讨其抗排斥的作用机制，方法：实验共分为5组，同系移植组，不用药实验对照组；MP治疗组：DCs单抗治疗组；DCs单抗＋MP治疗组，利用免疫组织化学方法检测移植肾内CD40／CD40L表达，每一样本采用计算机图像分析定量测定。结果：大鼠DCs单抗单独或与MP联合治疗组受体鼠存活时间较不用药对照组显著延长（P＜0．01），其中DCs单抗＋MP治疗组尤为明显，术后7d，不用药实验对照组移植肾脏组织CD40／CD40L，表达水平显著高于其它各组，DCs单抗＋MP治疗组表达水平显著低于MP组及DCs单抗组（P＜0．01），同系移植组表达水平最低。结论：单独应用DCs单抗或与MP联合应用均显著延长大鼠肾移植存活期，干扰CD40／CD40L共刺激通路信号传导可能是其抗排斥机制之一。     

弓形虫可溶性抗原混合液延长小鼠移植心脏存活时间

目的 探讨弓形虫可溶性抗原混合液(STAgs)延长小鼠移植心脏存活时间的作用及其作用机制.方法 通过在冰浴中超声粉碎弓形虫速殖子制备弓形虫STAgs.实验分为3组,每组受者9只.STAgs组和急性排斥反应(AR)组:供者为Balb/c小鼠,受者为C57BL/6小鼠,移植前4 d两组受者分别皮下注射STAgs 5μg和磷酸盐缓冲液100μl,同系对照组供、受者均为C57BL/6小鼠,术前未进行任何处理.分组后建立小鼠颈部异位心脏移植模型.术后观察移植心脏存活时间,术后第7天每组处死3只受者,获取移植心脏行病理学检查观察排斥反应,采用免疫组织化学检测移植心中CD4+和CD8+T淋巴细胞.结果 同系移植组在观察终点100 d时均存活,AR组和STAgs组移植心脏存活时间分别为(6.7±0.5)和(70.8±3.5)d,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).术后第7天,同系移植组、AR组和STAgs组移植心排斥反应分级分别为0级、Ⅲ～Ⅳ级和0～Ⅰ级;免疫组织化学检测显示STAgs组CD4+和CD8+T淋巴细胞比例明显少于AR组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 弓形虫STAgs能显著延长小鼠移植心脏的存活时间,减轻移植心脏的排斥反应,县体机制可能与弓形虫STAgs可影响TH1/TH2比例相关,也可能通过刺激机体产生脂氧素A4抑制树突状细胞活化发挥作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of T. gondii soluble tachyzoite antigen (STAgs) on the survival time of mouse heart allograft and the possible mechanism. Methods The STAgs were prepared by pulverizing T. gondii tachyzoite with ultrasound on ice. Cervical heterotopic heart transplantations were done by using Balb/c mice as donors, and C57BL/6 mice as recipients.The recipients were classified randomly into three groups: syngeneic group, acute rejection group and STAgs-treated group. The recipients in acute rejection group and STAgs-treated group were injected subcutaneously with 0. 1 ml PBS and 0. 1 ml (5 μg) STAgs at the 4th day before transplantation respectively, and those in syngeneic group were not subjected to any treatment. The grafts were observed daily by cervical palpation, and the total cessation of cardiac contraction was defined as the endpoint. The heart allografts were harvested at the 7th day after transplantation for pathological examination and immunohistochemical staining for CD4+ T, CD8+ T. Results The recipients in syngeneic group were all alive at the 100th day after transplantation. The average survival time in acute rejection group and STAgs-treated group was (6.7± 0.5) days and (70.8± 3.5) days,respectively (P＜0.05). HE staining showed that the rejection on the 7th day after transplantation in syngeneic group, acute rejection group and STAgs-treated group was fallen into 0 degree, Ⅲ-Ⅳ degree and 0- Ⅰ degree, respectively. Immunohistochemical staining revealed that the CD4+ T and CD8+T were markedly down-regulated in STAgs-treated group as compared with those in acute rejection group. Conclusion T. gondii STAgs can significantly prolong the survival time of mouse heart allograft and inhibit the rejection probably by changing the ratio of TH1/TH2, or inhibiting the effect of dendritic cells by inducing the lipoxin A4.     

CTLA4-Ig基因对大鼠肝移植后免疫细胞浸润及细胞凋亡的影响

目的研究腺病毒介导的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4-Ig(cytolyticT-lymphocyteassociatedantigen4-Ig,CTLA4-Ig)基因对大鼠肝移植后移植物中免疫细胞浸润和细胞凋亡的影响。方法将大鼠原位肝移植模型分为排斥对照组、环孢素A(CsA)组和CTLA4-Ig组。分别于术后1,3,5,7,12d,用免疫组织化学法和缺口末端标记技术(TUNEL法)分别测定移植物中CTLA4-Ig基因的表达和巨噬细胞、CD8 T细胞浸润及细胞凋亡,并以病理形态学变化作参照。结果静脉注射重组CTLA4-Ig基因腺病毒7d后,大鼠肝脏CTLA4-Ig稳定表达,在肝移植60d后仍呈阳性;CTLA4-Ig组汇管区巨噬细胞、CD8 T细胞浸润明显较排斥对照组少;细胞凋亡指数在术后3、5和7d明显低于排斥对照组(P<0·01),汇管区巨噬细胞、CD8 T细胞浸润数和凋亡指数与排斥反应分级均显著相关。结论重组CTLA4-Ig基因腺病毒经静脉一次给药后能在大鼠肝脏稳定表达,并通过抑制移植物中免疫细胞浸润及移植物细胞凋亡,抑制移植后急性排斥反应。     

供体年龄对活体肾移植预后的影响

目的 探讨供体年龄对活体肾移植预后的影响.方法 回顾性分析2004年至2011年间在我院实施的活体亲属肾移植217例,按供体年龄或供受体年龄差异分组,随访并比较各组受者的血肌酐水平和术后并发症情况.结果 随着供体年龄的增长,受体移植术后血肌酐水平呈上升趋势.与供受体年龄差＜-5岁组比较,供体年龄差＞5岁组的Scr水平在1个月[(143.5±42.1) μmol/L比(114.4±30.4)μ mol/L]、3个月[(139.9±36.6) μmol/L比(110.6 ±33.3)μmol/L]、1年[(132.1±22.1)μmol/L比(105.5±35.9) μmol/L]及2年(132.0±45.4) μmol/L比(97.2±17.5) μmol/L]均增高,差异有统计学意义(均P＜0.05).与年轻供肾组(＜50岁)相比,老年供肾组(＞50岁)的急性排斥反应发生率(19.4％比9.7％)和慢性排斥反应发生率(9.7％比1.4％)也显著增高(均P＜ 0.05).术后人及肾的存活率比较差异无统计学意义.供受体年龄差异是术后2年Scr水平异常的独立危险因素(OR=5.010,P＜0.05).结论 供体年龄是肾移植预后的重要影响因素,老年供肾的疗效较差.     

监测大鼠心脏移植前后共刺激分子B7及其受体表达的意义

目的观察共刺激分子B7-1、B7-2及其受体CD28、OX40和CD11a在大鼠心脏移植排斥反应中的变化,探讨其作用及意义。方法用流式细胞仪动态监测大鼠异位心脏移植前后不同时间外周血白细胞中B7分子及OX40、CD11a、CD28受体的表达变化。结果术后淋巴细胞和单核细胞中B7-1、B7-2分子及OX40、CD11a受体的表达高峰值均出现在术后第7d或维持高峰平台至术后第7d,此时移植物排斥反应多表现为2~3级;CD28受体的表达在移植前后与排斥反应程度之间无明显相关。结论动态监测大鼠外周血淋巴、单核细胞中B7-1、B7-2分子及OX40、CD11a受体的表达有助于观察移植排斥反应的进程。     

核心蛋白聚糖抑制淋巴细胞增殖及皮肤移植免疫排斥反应的研究

目的 观察核心蛋白聚糖(DCN)对小鼠皮肤移植模型术后免疫排斥反应的影响.方法 以Ficoll密度梯度离心法提取C57BL/6J脾脏淋巴细胞,96孔板接种后,各孔加入25μg刀豆蛋白A.将细胞分为5组,分别加入0、25、50、75、100μg/L的DCN,同时设立仅含细胞悬液阴性对照组和培养液空白对照组.各组细胞培养24、48、72、96、120 h后,以噻唑蓝(MTT)比色法检测各组淋巴细胞增殖率,并以流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.以24只健康成年BALB/C小鼠为供体,30只健康成年C57BL/6J小鼠为受体,将受体随机分为5组,建立背部皮肤移植模型.A组为阴性对照组,术后腹腔注射生理盐水1 ml;B组、C、D组受体小鼠于术后分别腹腔注射50、100、150μg的DCN.同时设立E组,为C57BL/6J对C57BL/6J的同种同基因移植对照组.观察各组受体移植皮片的存活时间和急性排斥反应发生时间.术后第7天,每组各取1只受体小鼠的移植皮片行病理学检查.结果 各组不同浓度DCN对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖均有抑制作用,并可诱导淋巴细胞凋亡,随DCN浓度升高对淋巴细胞增殖抑制作用更强,100μg/L组抑制作用最明显,细胞凋亡率为77.6%,与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.05);DCN具有抑制皮肤移植免疫排斥反应及延长移植皮片存活时间,150μg组皮片存活时间最长,平均为(16.6±2.4)d,与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.05).且随剂量增大抑制作用明显,移植皮肤急性排斥反应轻.结论 DCN具有免疫抑制作用,可能通过诱导活化的淋巴细胞凋亡抑制小鼠皮肤移植术后急性排斥反应发生,并延长移植皮片的存活时间.

Abstract：

Objective To study the inhibitory effect of decorin (DCN) on immunological rejection in skin transplantation.Methods Spleen lymphocytes were obtained from C57BL/6J mice,inoculated in a 96-well plate,and every well was added with 25 μg CoA.These cells were divided into 5 groups and cultured with DCN in different concentrations (0,25,50,75,100 μg/L) for different time (24,48,72,96 and 120 h).Negative control group (lymphocytes only) and blank control group (culture medium only)were set up.Cell proliferation rate was measured by methylthiazol tetrazolium (MTT) assay,and the percentage of cell apoptosis was analyzed by flow cytometry.Twenty-four healthy BALB/C mice served as donors.Thirty C57BL/6J mice served as recipients and divided into 5 groups.Full-thickness-skin was transplanted through back to back from donor BALB/C to recipient C57BL/6J.Postoperatively,the recipients in group A (negative control) were intraperitoneally injected with 0.9% NaCl,and those in groups B,C and D with DCN (50,100 and 150 μg/L respectively).In group F skin transplantation was performed between two C57BL/6J mice.After skin transplantation,the survival time of skin allografts and the time of acute rejection were observed.Skin specimens were collected from one recipient of every group 7 days after operation and examined pathologically.Results DCN obviously depressed mice spleen lymphocyte proliferation in vitro and inducef lymphocyte apoptosis in vitro.In 100 μg/L DCN group ( group C ),there were most significant inhibitory effects,and the apoptosis rate was 77.6%.There were significant difference between group C and other groups ( P＜0.05 ).DCN could inhibit immunological rejection of skin transplantation and prolong the survival time of skin allografts.Among all the groups,survival time in group D was longest with the average survival time being ( 16.6 ±2.4) days ( P ＜0.05 ).The inhibitory effect of DCN was increased and the acute rejection was alleviated with the increase of DCN dosage.Conclusion DCN has the inhibitory effect.It can induce lymphocyte apoptosis and inhibit acute immunological rejection in skin transplantation.It can prolong the survival time of skin grafts.     

Behavior of male-specific minor histocompatibility antigen in skin and limb transplantation

BACKGROUND: Although the role of male-specific minor histocompatibility antigen H-Y has been increasingly understood in both experimental and clinical organ transplantation, little has been investigated on musculoskeletal tissue transplantation. This study was performed to describe the behavior of male-specific minor histocompatibility H-Y antigen in rat skin and whole limb transplantation. MATERIALS AND METHODS: Using three different strains of inbred rats (Lewis, F344, and Dark Agouti), 75 donor hindlimbs and eighteen skin grafts were isogenically transplanted to the sex-mismatched recipients. Recipients were observed up to 48 weeks postoperatively. Rejection was monitored by the appearance of the skin of the grafted limb and histology. Systemic microchimerism was assessed by polymerase chain reaction using Y-chromosome specific primers. RESULTS: Skin rejection didn't occur in all limb transplant recipients and histology did not show any rejection findings in all components of the limb graft through 48 weeks. Successful functional recovery was expected. Stable and high level of chimerism (>1%) was detected in the lymphoid tissues in nontreated female recipients. Male skin grafts were rejected by Lewis and F344 female recipients within 6 weeks postoperatively. All female skin grafts survived in male recipients. CONCLUSION: Our results suggest that H-Y antigen can induce graft rejection in rat skin graft but causes no rejection reaction in whole limb transplantation. Systemic chimerism may play an important role for acceptance of sex-mismatched limb graft.     

输注转染IL-2基因同源短发夹型RNA的淋巴细胞抑制大鼠肝移植急性排斥反应

目的 探讨输注转染白细胞介素2(IL-2)基因同源短发夹型RNA(shRNA)的受者淋巴细胞对大鼠肝移植后急性排斥反应的影响.方法 构建针对大鼠活化T淋巴细胞IL-2基因编码区的shRNA表达质粒,体外转染受者(BN大鼠)淋巴细胞.以Lewis大鼠为供者、BN大鼠为受者,进行肝移植,干扰组的受者于移植术中经门静脉回输转染IL-2-shRNA的BN大鼠淋巴细胞;环孢素A组(CsA组)的受者移植术中经门静脉输入生理盐水,肝移植后应用CsA肌肉注射;生理盐水对照组的受者移植术中经门静脉输入生理盐水;空载体对照组的受者移植术中经门静脉输入转染空载体的BN大鼠淋巴细胞.术后第7天,处死BN大鼠,取移植肝组织,观察组织和细胞超微结构改变情况以及肝细胞凋亡情况,同时测定肝功能指标、肝组织中IL-2基因的表达以及血清IL-2、肿瘤坏死因子a(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)水平.计算各组受者1周存活率.结果 移植后第7天,生理盐水对照组和空载体对照组的移植肝组织中可见中、重度急性排斥反应改变,而干扰组和CsA组病理切片中无或仅有轻度急性排斥反应征象.干扰组凋亡肝细胞数为(23±3.2)/mm2,CsA组为(26±4.0)/mm2,均明显低于生理盐水对照组和空载体对照组(P＜0.05).干扰组和CsA组的IL-2mRNA表达明显低于生理盐水对照组和空载体对照组(P＜0.05);干扰组和CsA组的血清IL-2、TNF-α和IFN-γ水平较空载体对照组和生理盐水对照组分别有不同程度降低(P＜0.05).干扰组和CsA组的丙氨酸转氨酶和总胆红素均明显低于空载体对照组和生理盐水对照组(P＜0.05).而白蛋白则高于空载体对照组和生理盐水对照组(P＜0.05).干扰组受者1周存活率为87.5%(7/8),明显高于生理盐水对照组的37.5%(3/8)和空载体对照组的37.5%(3/8,P＜0.05).结论 输注转染IL-2-shRNA的受者淋巴细胞可抑制大鼠肝移植后的急性排斥反应,但这种作用是短期的.