槲皮素、补骨脂素、异补骨脂素对人乳腺癌细胞P糖蛋白及耐药性影响的研究

肿瘤细胞对化疗药物产生抗药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一.近年来,已开始试用干扰P-糖蛋白(P-gp)活性的药物来克服多药耐药性.但多数逆转剂本身具有一定毒性.据报道中草药的有效成份川芎嗪[1],汉防己碱,蝙蝠葛碱[2]等,能逆转肿瘤的耐药性.我们期望在中药中找到新的药物来逆转临床肿瘤的耐药性,并为其作用提供理论依据.近年来国内报道补骨脂抽提剂[3],国外有报道天然植物提取成份槲皮素可逆转肿瘤耐药[4].本实验探讨槲皮素及补骨脂的二种主要成份,补骨脂素和异补骨脂素是否可逆转入乳腺癌耐药细胞MCF-7/Adr的耐药性.     

HPLC法测定固本咳喘胶囊和补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的含量

[目的]采用高效液相色谱法测定固本咳喘胶囊和补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的含量.[方法]用C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇:水(52:48)为流动相,检测波长246 nm.[结果]固本咳喘胶囊中补骨脂素平均回收率为96.35％(RSD=0.71％),异补骨脂素平均回收率为102.8％(RSD=1.30％).[结论]该方法简便、快速、准确,适用于固本咳喘胶囊和补骨脂的质量控制.     

D101大孔吸附树脂法富集补骨脂中补骨脂酚的研究*

[目的]开发可工业化生产的补骨脂中补骨脂酚的富集方法。[方法]实验采用大孔吸附树脂技术有针对性地富集补骨脂提取液中的补骨脂酚,并尽可能去除补骨脂素和异补骨脂素等香豆素类化合物。[结果]经过大孔吸附树脂处理,可以有效去除补骨脂素和异补骨脂素,补骨脂酚含量达到45.6%。[结论]大孔吸附树脂方法用于补骨脂中补骨脂酚的富集,可以避免现有技术使用大量有机溶剂的缺点,该方法有效成分转移率高,成本低。     

从补骨脂中分离鉴定补骨脂素和异补骨脂素

中药补骨脂为豆科植物补骨脂果实,性温、味辛,具补肾助阳之功效。主治肾虚冷泻,小便频繁,阳萎,腰膝冷痛,虚寒喘咳,外用治白癜风。补骨脂中含有多种化学成分,其中具有吸收紫外线的光敏性物质是补骨脂素和异补骨脂素,两者均属呋喃香豆精类化合物,是抗白癜风的有效成分。临床上将从补骨脂中提取的补骨脂素和异补骨脂素(称为祛白素)制成片剂与酊剂内服或外用涂抹治疗白癜风病,具有疗效好,副作用小等优     

RP-HPLC测定四神片中补骨脂素和异补骨脂素的含量

四神片是由肉豆蔻、吴茱萸、补骨脂、五味子、干姜、大枣等中药制成的片剂,具有补肾散寒、止泻消胀之功效,而补骨脂素具有温肾助阳的功效.四神片是国家部颁标准收载的药物,标准中无含量测定项.本实验采用高效液相色谱法,对四神片中补骨脂素、异补骨脂素进行含量测定.本法操作简便,测定准确,重现性好,可作为控制该制剂内在质量的依据.……     

肿瘤多药耐药治疗策略：P-gp抑制剂研究进展

肿瘤的多药耐药是导致化疗失败的主要原因,因此多药耐药的逆转一直是肿瘤研究领域的研究热点。P-糖蛋白是引起多药耐药性产生的重要因素之一,也是目前肿瘤多药耐药逆转剂最重要的药物靶点。本文对以P-糖蛋白为靶点的肿瘤多药耐药逆转剂的研究进展予以综述。     

补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚急性毒性的性别差异研究

[目的] 探究补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚对小鼠急性毒性的性别差异。[方法] 补骨脂素给药剂量为雌性（1 125、843、633、475、356 mg/kg）、雄性（633、475、356、267、200 mg/kg）,异补骨脂素给药剂量为雌性（404、343、292、248、210 mg/kg）、雄性（317、292、269、248、229 mg/kg）,补骨脂酚雌、雄剂量均为2 000、1 765、1 500、1 200、1 020 mg/kg。一次性灌胃给予受试药,连续观察并记录14 d小鼠的毒性反应、体质量和死亡情况,应用SPSS统计学软件,采用Probit回归法计算半数致死量（LD₅₀）和95%可信区间。[结果] 给药后小鼠毒性反应主要表现为抽搐、四肢强直,部分动物口眼周围有分泌物,剂量越高反应越明显。与对照组比较,补骨脂素、异补骨脂素给药组随给药剂量增大,小鼠体质量呈现降低趋势。补骨脂素雌性小鼠的LD₅₀为514.35mg/kg,雄性小鼠LD₅₀为421.37 mg/kg,雌性小鼠LD₅₀值比雄性高出22%。异补骨脂素雌性小鼠LD₅₀为258.02 mg/kg,雄性小鼠LD₅₀为255.26 mg/kg。补骨脂酚雌性小鼠LD₅₀超出2 000 mg/kg,雄性小鼠LD₅₀为1 679.4 mg/kg。[结论] 补骨脂素和补骨脂酚对小鼠的急性毒性存在一定性别差异,但无统计学意义。     

反相高效液相色谱法测定补骨脂酊中补骨脂素和异补骨脂素的含量

目的 建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定补骨脂酊中补骨脂素(psoralen)和异补骨脂素(isopsoralen)的含量.方法 以Waters Xterra RPl8(4.6mmx 250mm,5μm)为色谱柱,以乙腈一水(0.28:0.52)为流动相,检测波长247mm.结果 补骨脂素和异补骨脂素保留时间分别为14.326 min和15.259min;补骨脂素的线性范围为0.88-14.08mg·L-1(r=0.9998);异补骨脂素的线性范围为0.80～12.80mg·L-1(r=0.9999).补骨脂素的平均加样回收率为99.5%,RSD为1.10%;异补骨脂素的平均加样回收率为100.4%,RSD为0.59%.结论 本方法简便、快速、准确,可用于补骨脂酊制剂的质量控制.     

“Cocktail”体外探针法评价补骨脂素对人肝微粒体P450酶亚型活性的影响

[目的]利用Cocktail体外探针法,测定补骨脂有效成分补骨脂素对人肝微粒体多种P450酶亚型活性的影响,为补骨脂临床联合用药安全提供参考。[方法]建立液质联用方法,同时测定人肝微粒体P450酶中各探针代谢产物6α-OH紫杉醇、α-OH咪达唑仑、4-OH甲苯磺丁脲、去甲基右美沙芬、7-OH香豆素、对乙酰氨基酚和6-OH氯唑沙宗的含量。通过Cocktail体外探针实验中补骨脂素对人肝微粒体P450酶各亚型的影响,证明补骨脂对人体肝脏的代谢有影响作用。[结果]所建立的液质联用方法精密可靠,符合生物样品测定要求,可用于人肝微粒体中各P450酶探针的代谢产物的定量分析。与对照组相比,补骨脂素组各底物的转化率均下降,其中香豆素的转化率下降最为显著,补骨脂素对其转化的抑制率为95.84%,而紫杉醇的转化的抑制最不明显,仅为10.39%。补骨脂素对其他几种底物的转化抑制率均在82%～91%之间。[结论]补骨脂素对人肝微粒体的CYP1A2、2A6、2C8、2C9、2D6、2E1和3A4亚型均有抑制,其中对CYP2A6、1A2和2D6 3种亚型的影响较为显著,表明补骨脂素对人肝微粒体P450酶不同亚型影响差异显著,长期给药补骨脂应关注药物联合用药安全。     

补骨脂注射液中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定及稳定性研究

目的建立 1种HPLC法测定补骨脂注射液中补骨脂素和异补骨脂素的含量 ,并对注射液的稳定性进行研究。方法色谱柱为NucleodurC1 8柱 ( 2 5 0mm× 4.6mm ,5 μm) ,流动相为甲醇—1 %冰醋酸溶液 (5 0∶5 0 ) ,流速 0 .8mL/min ,检验波长为 2 95nm。结果补骨脂素回归方程为Y =91 2 0 8X - 1 4 4 5 0 4 ,r=0 .9995 ,线性范围为 2 .5～ 2 5 μg/mL ,平均回收率为 1 0 0 .5 0 % ,RSD为0 .96 % ,异补骨脂素回归方程为Y =7835 6X - 1 2 32 95 ,r =0 .9991 ,线性范围为 2 .5～ 2 5 μg/mL ,平均回收率为 1 0 0 .2 3% ,RSD为0 .96 %。结论HPLC法操作简便 ,准确 ,重现性好 ,可作为该制剂的质量控制方法 ;补骨脂注射液对光不稳定 ,应避光保存     

复方补骨脂口服液中补骨脂素的含量测定

根椐收载的验方,我们制成复方补骨脂口服液用于治疗五更泄泻、便溏腹痛。方中主要生药有补骨脂、肉豆蔻等。补骨脂温肾暖脾为君,肉豆蔻为臣,其余为佐使。补骨脂生药中所含补骨脂素为呋喃香豆素化合物,在紫外光区有吸收,在一定浓度范围内呈线性关系。本法采用薄层层析,苯—氯仿—乙酸乙脂为展开剂,展开后在紫外灯下,将补骨脂素斑点刮取,用乙醇洗脱完全,在328nm 处     

补骨脂素对HL60/HT耐药细胞的逆转作用及对细胞内钙离子浓度的影响

目的研究补骨脂素对HL60/HT耐药细胞的逆转作用及对耐药细胞内Ca2 浓度的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用MTT法测定补骨脂素对细胞增殖的抑制作用,高效液相色谱法检测细胞内三尖杉酯碱(HT)的量,激光共聚焦显微镜测定细胞内不同时段和不同时间点的Ca2 浓度。结果补骨脂素在1~20μmol/L能不同程度降低HT对HL60/HT细胞的IC50,并不同程度提高细胞内HT的量;1~20μmol/L补骨脂素作用不同时段(24、48、96h),HL60/HT细胞内Ca2 浓度与作用时间成负相关,10和20μmol/L补骨脂素作用HL60/HT不同时间(5、10、15、20、25min),细胞内Ca2 浓度与作用成负相关性。结论补骨脂素能逆转HL60/HT细胞的多药耐药,其作用机制与影响耐药细胞内Ca2 浓度、增加细胞内HT的量有关。     

HPLC法对不同产地补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定

目的：建立补骨脂中主要成分含量的HPLC（高效液相色谱）测定方法。方法：色谱柱填料为：Kromasil C18（4．6×150mm）,流动相为甲醇-水（50：50）,检测波长为330nm,流速为1．0mL／min。结果：补骨脂素在4．8—20．16μg／mL（r=0．9996）范围内、异补骨脂素在4．55—19．11μg／mL（r=0．9999）范围内线性关系良好;补骨脂素与异补骨脂素平均回收率分别为103．59％（RSD=1．75）、99．28％（RSD=1．30）。结论：该方法准确、稳定、简单,可以作为补骨脂药材的质量控制方法。     

肿瘤多药耐药逆转剂研究进展

肿瘤细胞多药耐药性的产生是临床肿瘤化疗的主要障碍之一。近年来随着安全、有效的多药耐药逆转剂应用于临床，针对不同的耐药机制选择适当的逆转剂结合抗肿瘤药物进行肿瘤的防治已成为一个非常活跃的研究领域。目前大多数的多药耐药逆转剂主要与肿瘤细胞膜上的特定转运蛋白结合，通过抑制该类蛋白泵出抗肿瘤药物的能力从而产生逆转作用。肿瘤多药耐药逆转剂化学结构种类繁多，到目前为止还没有统一的构效关系研究结果，本仅就近年来相关的研究进展作一简要综述。     

植物多酚类化合物逆转肿瘤多药耐药的筛选

目的：研究槲皮素，小檗碱，黄芩甙，芦丁，牛蒡子甙逆转肿瘤多药耐药（MDR）的作用及机制。方法：MTT法检测槲皮素，小檗碱，黄芩甙，芦丁，牛蒡子甙的细胞毒性作用及耐药逆转效果。流式细胞术检测槲皮素作用前后MCF-7/ADR细胞P-糖蛋白（Pgp)表达的变化。结果：小檗碱能显著抑制MCF-7/ADR及MCF-7细胞的增殖，槲皮素，黄岑甙，芦丁能显著抑制MCF-7细胞增殖，槲皮素能提高MCF-7/ADR细胞对阿霉素的敏感性，逆转倍数为3.19，并能降低MCF-7/ADR细胞Pgp的表达。结论：槲皮素能够部分逆转多药耐药，其逆转机制与下调Pgp表达有关。     

异补骨脂素在大鼠体内药代动力学的性别差异研究

[目的]比较异补骨脂素单次灌胃给药后,在雌性和雄性大鼠体内的药代动力学差异.[方法]测定雌、雄大鼠单次灌胃给予56、28、14和7 mg/kg异补骨脂素后不同时间点的大鼠血浆药物浓度,计算相应的药代动力学参数.[结果]4个不同剂量的异补骨脂素单次灌胃给药后,药物在不同性别大鼠血浆中Tmax,Cmax,AUC等参数存在差...     

双波长薄层扫描法测定强骨宝胶囊中补骨脂素和异补骨脂素的含量

为制定强骨宝胶囊的质量标准，运用薄层扫描法对处方中补骨脂的补骨脂素、异补骨脂素进行含量测定。经反复验证，本方法较简便，重现性好，可控制产品质量。     

补骨脂中补骨脂素的提取及纯化

目的 从中药材补骨脂中提取补骨脂素。方法 补骨脂经粉碎后用50%乙醇浸渍提取,浸提液进行浓缩沉淀,得到膏状物,膏状物用甲醇溶解,活性碳脱杂质,再除去溶剂,放置过夜析出晶体。甲醇洗去稠状物得黄色片状晶体,甲醇重结晶后得针状白色晶体。薄层分析、高效液相色谱分析其纯度。紫外吸收光谱、H1-NMR谱鉴定其结构。结果与结论晶体物得率0.147%,是一个单体,经过波谱分析确定其为补骨脂素。用本方法获取纯品补骨脂素比较简便的方法。     

砒霜主要成份可改善肺癌化疗耐药状况

武汉市普爱医院的一项最新研究表明：古老的剧毒药物“砒霜”的主要有效成份——三氧化二砷可部分逆转肺腺癌化疗药物的耐药性，由于癌症耐药机理一致，这意味着三氧化二砷可大大改善部分肿瘤化疗的耐药性，从而延长肿瘤患者的生命。     

HPLC测定两种不同浓度乙醇提取补骨脂素的含量

目的：建立高效液相色谱测定用50%和75%两种不同浓度乙醇分别从补骨脂中提取、分离补骨脂素含量的方法。方法：高效液相色谱法。C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：甲醇-1%冰醋酸（50：50）;流速：1.0mL/min;λ：245nm。结果：两种不同浓度的补骨脂素提取物均在进样量22.0～440.0ng内线性关系良好;r=0.9993。结论：HPLC方法操作简便,重现性较好,结果准确。从含量测定方面进比较,认为在生产中用50%乙醇从补骨脂中提取补骨脂素优于用75%乙醇浓度。