从人工蛹虫草培养基残基提取虫草素的研究

目的：探索人工蛹虫草培养基残基中虫草素的纯化技术，为进一步工业纯化打下基础。方法：经收割子实体的人工蛹虫草培养基残基先用石油醚脱脂，残渣干燥后以热乙醇提取得浸膏，浸膏转水溶后调节等电点，再用活性炭脱色，脱色后的溶液最后过732阳离子交换树脂以NH3·H2O洗脱液洗脱。结果：所得虫草素纯度约为80％，总得率约为1‰。结论：该提取方案设计合理、操作简便，便于工业化生产。     

人工培养蛹虫草子座中核苷类化合物的提取工艺研究

目的: 研究人工培养蛹虫草子座中核苷类化合物的提取条件和分离方法.方法: 采用正交设计法优化核苷类化合物的提取条件,用色谱方法分离核苷类化合物.结果: 最佳的提取条件为蒸馏水80 ℃水浴温浸提取2次,每次5 h.结论: 本法从人工培养蛹虫草子座中提取、分离得到腺苷和虫草素两种核苷类化合物.     

人工培养蛹虫草多糖的研究

以人工培养蛹虫草为原料 ,分离纯化得到蛹虫草多糖 (CMPS) ,经紫外扫描测定其为糖蛋白 .用凝胶过滤色谱法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法验证了纯度 .测定了多糖的分子质量、糖含量和糖醛酸含量、单糖组成及摩尔比、蛋白含量及氨基酸组成、苷键构型等     

蛹虫草子实体中多肽的提取分离及组成初探

目的获取蛹虫草子实体中的肽并对其分离纯化。方法采用水提醇沉法提取,葡聚糖凝胶色谱法分离纯化,继而用氨基酸自动分析仪分析组成。结果由单因素考察和正交试验法确定了最佳提取条件,经分离纯化后得到两个小分子量的肽组分,分别测定出了两组分的氨基酸组成及含量。结论分离出的肽类组分氨基酸种类丰富齐全,具有一定的营养和药用价值。     

人工蛹虫草子实体多糖的提取与含量测定

目的 建立人工蛹虫草子实体多糖的提取与含量测定方法.方法 采用正交试验筛选提取条件，苯酚-硫酸法测定多糖的含量。结果 多糖的最佳提取条件为80倍量纯化水，45 ℃提取1次，每次10 min；线性范围为10～100 μg·mL^-1，r= 0.999 8，加样回收率为99.41%，RSD= 2.36%。3批供试品中多糖的平均含量为22.12%。结论 该提取和测定方法操作简单，重复性好，结果准确可靠，可用于人工蛹虫草中多糖的提取与含量测定。     

人工培养蛹虫草多糖的分离纯化及其结构的初步研究

目的人工培养蛹虫草多糖类成分的提取与纯化。方法采用SephadexG 10 0柱色谱法进行了分离纯化 ;通过理化常数测定、化学和光谱分析等方法研究了其化学结构特征。结果分离得到CPS 1、CPS 2和CPS 33种多糖 ,其单糖组成分别为 :CPS 1:鼠李糖 木糖 甘露糖 葡萄糖 半乳糖 (1∶6 .4 3∶2 5 .6∶16 .0∶13.8) ;CPS 2 :鼠李糖 葡萄糖 半乳糖 (1∶4 .4 6∶2 .4 3) ;CPS 3为只含葡萄糖的均一多糖。 3种多糖的分子量分别为 2 30 0 0、12 90 0和 5 0 0 0。CPS 1主要含有β糖苷键 ,CPS 2和CPS 3主要含有α糖苷键。 结论CPS 1为一种含有 5种单糖 ,糖苷键为 β构型的多糖 ;CPS 2是一种含有 3种单糖 ,糖苷键为α构型的多糖 ;CPS 3是一种仅含葡萄糖、糖苷键为α构型的多糖     

蛹虫草培养基中虫草素的几种提取方法比较

目的对6种方法提取蛹虫草固体培养基中的虫草素进行比较。方法以各法提取虫草素的的含量为考察指标,优选虫草素的提取工艺。结果渗漉提取率较高,而微波法提取则具有提取时间更短的优点。结论两法的提取率均明显高于其它方法,可在研究中进一步扩大规模。     

蛹虫草中虫草素的研究进展

本研究综述了蛹虫草中虫草素的药理作用、检测方法、培养技术及分离纯化工艺的研究进展。为蛹虫草与虫草素进一步研究、开发奠定了基础。     

蛹虫草培养液成分研究(Ⅰ)

目的对人工蛹虫草培养液的化学成分进行研究。方法采用常压、加压硅胶柱色谱、制备色谱进行分离 ,通过理化和波谱分析方法鉴定化合物结构。结果目前从氯仿部分分离得到 9个化合物 ,鉴定了其中的 5个化合物 ,分别为 :环 (苯丙氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L phenylalanyl L prolyl) ,Ⅰ ];环 (亮氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L leucyl L prolyl) ,Ⅱ ];环 (缬氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L valyl L prolyl) ,Ⅲ ];环 (丙氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L alanyl L prolyl) ,Ⅳ ];7,8 二甲基 异咯嗪 (7,8 dimethyl iso allox azine ,Ⅴ )。结论这 5个化合物均是从蛹虫草培养液中首次分离 ,且化合物Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ 3个化合物均为属中首次发现     

人工蛹虫草子实体对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的：观察人工蛹虫草子实体及其不同提取物对正常小鼠脾淋巴细胞增殖的影响，分析其影响免疫功能的有效提取部位。方法：以不同浓度提取物与脾细胞共孵育72h，采用MTT法测定淋巴细胞的增殖，观察提取物对淋巴细胞增殖的影响。另以10mg·kg^-1，30mg·kg^-1剂量人工蛹虫草子实体的水提取物及微粉化原药水溶液小鼠ig给药11d，制备脾淋巴细胞悬液，培养72h后测定细胞增殖。结果：在体外。水提取物有显著增强脾淋巴细胞增殖效应，且与ConA和LPS有协同促增殖效应，水提醇沉提取物可促进正常淋巴细胞增殖，而对ConA、LPS活化后的增殖无明显影响；甲醇提取物对淋巴细胞增殖有抑制作用。体内给予水提物和子实体微粉水溶液两个剂量也均显示促进淋巴细胞的自然增殖作用（P〈0．05），但对ConA或LPS活化后的淋巴细胞无协同作用。结论：人工蛹虫草子实体含有免疫促进和免疫抑制的成分。其水溶性和中等浓度的醇溶性成分有免疫促进作用。甲醇提取物抑制淋巴细胞增殖。     

工厂化培育北冬虫夏草子实体替代野生虫草的药效学研究

目的探讨工厂化培育的北冬虫夏草子实体的动物体内药效学参数。方法健康ICR小鼠或Wistar大鼠分成空白对照组、模型组和给药组,予北冬虫夏草子实体和野生虫草持续给药后,分别检测各组负重持续游泳时间和常压耐缺氧时间、小鼠脾淋巴细胞增殖和NK细胞活性、对CCl4引起的小鼠急性肝损伤的保护作用、对庆大霉素引起的大鼠急性肾损伤的保护作用。结果高剂量北冬虫夏草子实体可延长小鼠持续游泳和常压耐缺氧的平均存活时间至29.05%和31.08%;增加小鼠脾淋巴细胞增殖和NK细胞的活性;明显降低庆大霉素诱发的小鼠肾损伤导致的尿液异常,对BUN和Cr的缓解率分别为71.09%和44.96%,对CCl4诱发的小鼠转氨酶升高,特别是ALT的缓解率为37.82%。结论工厂化培育的北冬虫夏草子实体在保护肝、肾损伤、耐缺氧、抗疲劳以及增强免疫力方面与同剂量野生冬虫夏草相当,值得进一步开发。     

高效液相色谱法同时测定人工蛹虫草子实体中核苷类成分的含量

目的:建立高效液相测定人工培养蛹虫草子实体中核苷类成分含量的方法。方法:采用KNAUER Eurospher-100 C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-50mmol.L-1磷酸二氢钾(7∶93)为流动相,检测波长为260nm。结果:测定3批人工培育蛹虫草中核苷类成分的含量,腺苷、腺嘌呤、虫草素的平均含量分别为0.14%,0.0095%,0.42%。结论:本方法能同时测定人工蛹虫草中多种核苷类成分的含量,具有较高的灵敏度,操作简单,可用于人工蛹虫草的质量评价。     

人工培养北虫草多糖含量测定研究

目的测定不同基地、不同批次的北虫草子实体、培养基中多糖含量。方法硫酸-蒽酮显色法,检测波长625nm。结果蚕蛹培养基质培养的北虫草中多糖含量最高(42.07%),小麦基质为37.95%,大米基质培养的子实体多糖含量最低(34.41%);大米基质培养基多糖含量稍高于小麦。结论小麦作为基质培养的北虫草子实体中多糖含量虽不为最高,但比蚕蛹、大米基质经济实用;三种培养基中多糖含量均较高,应对培养基进行综合利用。     

高效液相色谱法测定天然冬虫夏草和蛹虫草及其人工培养物中3个核苷类化合物含量

目的:建立快速分析天然冬虫夏草、蛹虫草及其发酵制品中核苷类化合物成分的高效液相色谱法,比较天然冬虫夏草和蛹虫草及其发酵制品中核苷类化合物的含量。方法:采用超声提取的方法,制备供试品溶液。色谱柱为Hypersil C₁₈柱(200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为 pH 6.5磷酸盐缓冲液-甲醇(85:15),检测波长为260 nm。结果:天然冬虫夏草和蛹虫草及其人工培养物中的3种核苷类成分在25 min内达到基线分离;腺苷在5.0~80.0 μg·ml^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系,相关系数为0.999 3,样品回收率为99.4%;虫草素在4.37~70.0 μg·ml^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系,相关系数为0.999 7,样品回收率为98.3%;腺嘌呤在6.75~108.0 μg·ml^-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系,相关系数为0.999 7, 样品回收率为98.9%。结论:天然虫草与人工虫草培养物有相似的核苷类化合物,但在含量上有较大差异。此方法简便、准确,重复性好,可作为判定天然虫草及其培养物质量的一种方法。     

RP-HPLC法测定北虫草发酵培养物中虫草素的含量

目的:建立测定北虫草发酵培养物中虫草素含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为DIAMONSIL-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水-甲醇(5∶90∶5),流速为0.8mL·min-1,柱温为40℃,检测波长为259nm。结果:虫草素检测浓度在2.56～51.20μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9998);平均回收率为98.35%,RSD=2.71%(n=6)。结论:本方法灵敏、快速、准确,适用于北虫草发酵培养物中虫草素的检测。     

高效液相色谱法测定蛹虫草人工固体培养物中核苷类化合物的含量

目的建立高效液相色谱法测定蛹虫草人工固体培养菌皮中核苷类化合物的含量。方法采用pH 6 .5磷酸盐缓冲液 甲醇 (85∶15 )为流动相 ,流速为 1.0ml/min ,检测波长为 2 6 0nm。结果蛹虫草人工固体培养物菌皮中主要成分虫草素在 4 .0 3～ 10 0 .8μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =39.5 8C - 0 .0 342 ;尿苷在 3.6 8～ 92 .0μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =2 4 .32 9C - 0 .0 0 2 7;腺苷在 3.84～ 96 .11μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =18.0 12C - 0 .0 2 35。结论人工固体培养菌皮中核苷类成分的含量随培养时间发生一定的变化 ,高效液相色谱法可用于蛹虫草人工培养物中核苷类化合物的测定 ,为控制其质量提供了简便易行的方法。     

北冬虫夏草对皮肤细菌感染的体外抗菌活性观察

目的：探索北冬虫夏草（蛹虫草）对皮肤细菌感染的体外抗菌活性。方法：用纸片琼脂扩散法进行体外药敏试验。结果：北冬虫夏草的萃取液（1：10mg／mL）体外药物试验,对25株金黄色葡萄球菌敏感率为88．00％,19株化脓性链球菌敏感率为68．42％,8株绿浓杆菌敏感率为75．00％。结论：北冬虫夏草的萃取液对金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、绿杆菌都有不同程度的抗菌活性,并与其浓度呈线性关系。