甲磺酸阿帕替尼治疗肾透明细胞癌的实验和临床研究

目的 探讨甲磺酸阿帕替尼对人肾透明细胞癌786-O细胞在裸鼠皮下移植瘤生长中的抑制作用,并回顾分析2018年1月—2019年9月甲磺酸阿帕替尼治疗晚期肾癌的疗效及安全性。方法 将体外培养的人肾透明细胞癌786-O细胞接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型,随机分为对照组(生理盐水组)及甲磺酸阿帕替尼低剂量组(50 mg/kg)、中剂量组(100 mg/kg)和高剂量组(200 mg/kg),每组6只,灌胃连续治疗14 d,治疗过程中测量肿瘤的质量和体积,观察各组移植瘤组织血管生成和增殖情况。观察32例晚期肾癌患者接受甲磺酸阿帕替尼治疗效果及安全性。结果 治疗2周后,与对照组相比,甲磺酸阿帕替尼中、高剂量组裸鼠移植瘤体积缩小、质量下降,CD34和Ki-67蛋白表达水平降低(P<0.05)。32例晚期肾癌患者疾病控制率为81.2%,客观缓解率为28.1%。不良反应大部分为1～2级,3级以上不良反应可通过停药或减量缓解症状。结论 甲磺酸阿帕替尼对肾癌裸鼠移植瘤具有抑制作用,可能与抑制肿瘤血管生成及增殖有关,同时临床研究提示,甲磺酸阿帕替尼可有效控制疾病进展,多数不良反应可耐受。     

吉非替尼乳剂单次与多次给药后在大鼠体内的药动学研究

目的:研究吉非替尼乳剂单次和多次给药后在大鼠体内的药动学特征。方法:将大鼠分为单次给药组和多次给药组。单次给药组大鼠分为吉非替尼原料药组(50 mg/kg)和吉非替尼乳剂组(50 mg/kg),每组6只,灌胃给药1次。多次给药组大鼠分为吉非替尼原料药组(50 mg/kg)和吉非替尼乳剂组(50 mg/kg),每组8只,连续灌胃给药7 d,每天1次。吉非替尼原料药组大鼠于给药前和给药后1、2、2.5、3、3.5、3.75、4、4.25、4.5、6、8、12和24 h取血0.3 mL,吉非替尼乳剂组大鼠于给药前和给药后(多次给药组为给药7 d后)2、4、6、8、9、10、11、12、13、14、16、24、36和48 h取血0.3 mL,采用高效液相色谱法测定大鼠血浆中吉非替尼的血药浓度,绘制药-时曲线,并用DAS 2.0软件拟合药动学参数。结果:单次给药后,与吉非替尼原料药组tmax[(2.67±0.75)h]、MRT0-24 h[(8.68±0.91)h]、MRT0-∞[(14.20±3.45)h]比较,吉非替尼乳剂组tmax[(8.33±4.41)h]、MRT0-48 h[(15.00±1.60)h]、MRT0-∞[(17.60±2.66)h]均显著增加(P<0.05)。多次给药后,与吉非替尼原料药组tmax[(6.79±3.75)h]、AUC0-48 h[(41.10±8.92)mg·h/L]、Vz/F[(16.30±5.45)L/kg]、CLz/F[(0.94±0.19)L/(h·kg)]、MRT0-48 h[(10.10±0.36)h]比较,吉非替尼乳剂组Vz/F[(44.20±30.30)L/kg]、CLz/F[(1.89±1.56)L/(h·kg)]、MRT0-48 h[(16.20±2.52)h]均显著增加(P<0.05),AUC0-48 h[(38.70±26.20)mg·h/L]显著减少(P<0.05),tmax[(10.40±3.25)h]增加,但差异无统计学意义。结论:与吉非替尼原料药比较,单次和多次给药吉非替尼乳剂,均可延长药物的达峰时间;本研究结果可为吉非替尼新型给药系统的研究提供参考。     

采用活体成像技术观察肿瘤组织在裸鼠体内生长情况的研究

目的 采用活体成像技术监测稳定高表达荧光素酶报告基因的肿瘤细胞在裸鼠体内生长及转移情况,为肿瘤治疗药物的研发提供新的评价技术和方法.方法 采用Lipofectamine 2000介导的基因转染方法,将pGL4.17[luc2/neo]载体转染人肝癌细胞株HepG2,经G418抗性筛选及有限稀释法获得稳定高表达荧光素酶的单克隆细胞;采用活体成像的方法检测转染细胞在裸鼠体内的成瘤情况.结果 获得了可稳定高表达荧光素酶基因的单克隆细胞株,将单克隆细胞株植入裸鼠皮下.采用活体成像技术准确监测肿瘤细胞体内生长情况.结论 采用活体成像技术构建的肿瘤动物模型是拓展肿瘤体内生长、转移及治疗相关研究的理想模型.     

金复康口服液对吉非替尼耐药人肺腺癌PC9/R的增敏作用和机制研究

目的 研究金复康口服液对人肺腺癌PC9细胞及耐药PC9/R细胞的吉非替尼增敏作用及机制。方法 金复康口服液20 mg/mL联合不同浓度的吉非替尼（40、20、10、5、2 μmol/L）作用于PC9/R细胞,CCK-8法检测细胞增殖;培养PC9、PC9/R细胞,分为对照组、金复康口服液组、吉非替尼组、联合用药组,流式细胞术检测PC9、PC9/R细胞周期和凋亡。在BALB/c裸鼠右前肢腋窝皮下接种PC9/R细胞建立裸鼠移植瘤模型,观察金复康口服液联合吉非替尼的体内抑瘤作用;对AKT、p-AKT、PTEN、PDCD4蛋白表达的影响和对miRNA-21表达的影响。结果 与吉非替尼（2、5、10、20 μmol/L）组比较,吉非替尼（2、5、10、20 μmol/L）+金复康口服液（20 mg/mL）组的PC9/R细胞抑制率显著增加（P<0.01）;与吉非替尼组比较,联合用药可以通过显著增加早期凋亡细胞比例诱导PC9及PC9/R细胞凋亡,并使PC9、PC9/R细胞停滞在DNA合成前期,从而抑制细胞增殖,差异均具有统计学意义。体内实验表明,与吉非替尼组比较,联合用药显著抑制裸鼠PC9/R移植瘤的生长（P<0.05）,且能显著降低裸鼠PC9/R组织p-AKT表达（P<0.05）,增强PTEN、PDCD4的表达（P<0.05）,联合用药组裸鼠PC9/R瘤组织miRNA-21的表达显著降低（P<0.05）。结论 金复康口服液能提高人肺腺癌PC9/R细胞对吉非替尼的敏感性,其作用的可能机制为通过降低miRNA-21的表达从而增强PTEN、PDCD4的表达以抑制AKT通路活性。     

荷瘤裸鼠按时辰给予吉非替尼的药效学研究

目的:研究荷瘤裸鼠按时辰给予吉非替尼的药效学。方法:取BALB/c-nu裸鼠复制非小细胞肺癌模型后,随机分为不同时间给药的吉非替尼(4:00、8:00、12:00、16:00、20:00、24:00)组和模型组,每组10只。吉非替尼组裸鼠分别按相应时间ig给药1 mg/kg,模型组裸鼠ig给予等量的1%聚山梨酯80溶液,连续给药21 d。检测20 d内各组裸鼠的瘤体积及第21天时的瘤质量,计算抑瘤率;检测各组裸鼠肿瘤组织中表皮生长因子受体(EGFR)和细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)的m RNA及蛋白表达情况。结果:与模型组比较,各吉非替尼组裸鼠第18天时肿瘤体积均增加缓慢,除20:00组外其余各吉非替尼组裸鼠瘤质量降低、抑瘤率增加,其中4:00、8:00组裸鼠肿瘤组织中EGFR m RNA表达减弱,4:00、8:00、12:00组裸鼠肿瘤组织中ERK1/2 m RNA表达减弱,4:00、8:00、12:00、24:00组裸鼠肿瘤组织中p-EGFR蛋白表达减弱,4:00、8:00、24:00组裸鼠肿瘤组织中p-ERK1/2蛋白表达减弱,以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。与20:00组比较,4:00、8:00、12:00组裸鼠瘤质量降低,4:00、8:00组裸鼠肿瘤组织中p-EGFR蛋白表达减弱,8:00组裸鼠肿瘤组织中p-ERK1/2蛋白表达减弱,以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:吉非替尼对荷瘤裸鼠具有瘤抑制作用,并呈现时辰节律性,其中8:00给药肿瘤抑制效果最好,20:00给药抑制效果最差;其机制可能与EGFR、ERK1/2介导的传导通路有关。     

南京地区医保新增抗肿瘤药物利用分析及医保支付费用预测

目的：分析南京地区34家医院2014-2016年医保新增抗肿瘤药物的利用情况,并预测其医保支付费用。方法：2014-2016年南京地区医保新增抗肿瘤药物及抗肿瘤药物的用药数据来自江苏省医药情报研究所。药物利用情况以用药金额、DDDs、DDC和B/A值表示。结果：新增抗肿瘤药物的利用情况,2015年与2014年基本持平,2016年显著增加。三年来用药金额最高的均为靶向药物,DDDs最高的均为抗肿瘤中成药。销售金额排名靠前的品种为利妥昔单抗、参一胶囊、重组人血管内皮抑制素、曲妥珠单抗和吉非替尼。DDDs排名靠前的为参一胶囊、吉非替尼、重组人血管内皮抑制素、厄洛替尼和达沙替尼。大部分药物的DDC值相对稳定。B/A值较高的是参一胶囊、达沙替尼、吉非替尼和厄洛替尼。纳入"新医保"后,13个品种的价格及DDC值降低,若DDDs不变,用药金额降至87.94百万元,预测医保支付金额为47.70万元。结论：南京地区医保新增抗肿瘤药物的利用基本合理,纳入"新医保"后的降价,有助于降低整体用药金额和医保支付费用。     

2015—2017年辽宁省肿瘤医院抗肿瘤分子靶向药物的使用情况分析

目的 了解并分析2015-2017年辽宁省肿瘤医院抗肿瘤分子靶向药物的临床应用及用药趋势,为靶向药物的规范管理和合理应用提供参考。方法 采用WHO推荐的限定日剂量（DDD）法对2017年2015-2017年辽宁省肿瘤医院门诊麻醉药品的规格、销量、销售金额、用药频度（DDDs）、日均费用（DDC））和排序比（B/A）等进行统计分析。结果 门诊用药以小分子靶向药物为主,治疗非小细胞肺癌的吉非替尼、厄洛替尼以及埃克替尼的用量和DDDs相对较高,其他小分子靶向药物排名靠后。住院病房用药以抗体类靶向药物为主,以贝伐珠单抗和曲妥珠单抗的DDDs最高。相对于小分子靶向药物,抗体类靶向药物的DDC普遍偏高。利妥昔单抗（500、100 mg）、西妥昔单抗的B/A连续3年<1.00。埃克替尼、厄洛替尼（150 mg）以及吉非替尼的B/A均大于1.00。结论 随着对抗肿瘤分子靶向药物认识的逐渐深入,辽宁省肿瘤医院靶向药物的使用情况将更加合理。     

我院4种靶向抗肿瘤药物不良反应的调查与分析

目的：调查并分析我院4种靶向抗肿瘤药物的不良反应。方法：将我院2013年1月～2014年4月收治的100例确诊为恶性肿瘤的患者纳入本研究,本组患者均接受化疗,采用厄洛替尼、吉非替尼（易瑞沙）、利妥昔单抗（美罗华）、西妥昔单抗（爱必妥）进行治疗,分析其不良反应情况。结果：100例患者中,厄洛替尼、吉非替尼（易瑞沙）、利妥昔单抗（美罗华）、西妥昔单抗（爱必妥）处方量分别为187、119、245、312,不良反应发生率分别为12.5%、13.3%、7.1%,12.1%,与国外报道大致相当。与传统抗肿瘤药物相比,这些药物的不良反应发生率相对较低,不良反应程度也较轻,多为I级与II级,不会危及患者的生命安全。结论：厄洛替尼、吉非替尼（易瑞沙）、利妥昔单抗（美罗华）、西妥昔单抗（爱必妥）引发的不良反应相对较少,利妥昔单抗不良反应发生率较低,但是,本研究选择的样本量较少,还有待进一步的调查研究。     

吉非替尼对比GP方案治疗女性晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的比较吉非替尼与GP方案（吉西他滨＋顺铂）治疗女性晚期非小细胞肺癌的疗效与毒性。方法80例ⅢB～Ⅳ期从未接受过化疗的女性非小细胞肺癌患者中,吉非替尼组40例,GP组40例。吉非替尼组为吉非替尼250 mg/d;GP组为吉西他滨1 250 mg/m^2,第1、8天,顺铂75 mg/m^2,分为第1～3天,静脉滴注。每3周为1周期,2周期后评价客观疗效及不良反应。结果吉非替尼组和GP组客观有效率分别为37.5%（15/40）和30.0%（12/40）,差异无统计学意义（P〉0.05）;疾病控制率吉非替尼组77.5%（31/40）,GP组47.5%（19/30）,差异有统计学意义（P〈0.05）。吉非替尼组血液学不良反应明显小于GP组,吉非替尼组的不良反应主要为皮疹和腹泻。2组近期疗效差异无统计学意义（P〉0.05）,但不良反应吉非替尼组显著少于GP组（P〈0.05）。结论吉非替尼可作为晚期女性非小细胞肺癌患者的一线治疗药物。     

盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌Ⅲ期临床试验

目的观察比较盐酸埃克替尼与吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效及毒副反应。方法随机双盲双模拟、阳性药物平行对照的方法,13例患者接受盐酸埃克替尼125mg,口服,3次/日,或对照药为吉非替尼250mg,口服,1次/日。结果治疗晚期非小细胞肺癌,盐酸埃克替尼的疾病进展时间（TTP）108天,吉非替尼的疾病进展时间（TTP）96天,盐酸埃克替尼总生存时间（OS）6月,吉非替尼OS4.8月。两组患者均无严重毒副反应。结论盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效与吉非替尼疗效等同,毒性反应低。     

Antitumor and immunomodulatory properties of artemether and its ability to reduce CD4+ CD25+ FoxP3+ T reg cells in vivo

Background

Development of agents that specifically kill cancer cells and simultaneously elicit antitumor immune response is a step forward in cancer therapy. In the present study, we investigated whether the administration of artemether contributes to the augmentation of antitumor immunity and the regression of tumor tissues in a mouse model of breast cancer.

Methods

An optimal immunostimulatory dose of artemether (ART) was defined by DTH reaction and antibody production in sRBC-challenged mice. Subsequent experiments were carried out on tumor-bearing BALB/c mice. In the first group of tumor-bearing mice, the dose of 10 mg/kg/day of artemether were intraperitoneally administered to each animal for six times. The second group was treated with 20 mg/kg/day of cyclophosphamide as a positive control, and the last group (negative control) received the ART diluents. Tumor size was measured during the 10-day experiment; on the last day, mice were sacrificed and their splenocytes and tumor infiltrating lymphocytes were harvested. The concentration of IL-4 and IFN-γ cytokines (using ELISA assay) and the percentage of splenic and tumor Treg cells (using Flowcytometry analysis) were measured.

Results

Artemether could increase both DTH reaction and the production of hemagglutinating antibody in normal mice. Administration of ART profoundly suppressed the progression of tumor tissues. As well, it was significantly effective in the depletion of splenic CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg cells (p-value > 0.05). ART also increased the production of IL-4 (p-value < 0.05) and IFN-γ (p-value > 0.05). As a conclusion, the cytotoxic and immunomodulatory properties of artemether were acknowledged in vivo     

柠檬苦素对MFC胃癌荷瘤模型小鼠免疫功能及凋亡相关因子表达的影响

目的:研究柠檬苦素对MFC胃癌荷瘤模型小鼠免疫功能及凋亡相关因子表达的影响。方法:将MFC胃癌细胞接种于小鼠右侧腋下以复制MFC胃癌荷瘤模型,造模成功后分为模型组、环磷酰胺组(阳性对照,25 mg/kg)和柠檬苦素高、中、低剂量组(100、50、25 mg/kg),每组10只。除模型组小鼠灌胃0.5%羧甲基纤维素钠外,其余各组小鼠灌胃相应药物,每天1次,连续14天。小鼠给药前及末次给药后均测定体质量,并在末次给药后取脾、胸腺、肿瘤组织以计算脾指数、胸腺指数及抑瘤率;采用流式细胞术检测小鼠CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞百分数和CD4⁺/CD8⁺比值;采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中免疫功能相关指标[白细胞介素2(IL-2)、IL-10、干扰素γ(IFN-γ)]的表达水平;采用实时定量聚合酶链式反应法和Western blot法检测小鼠肿瘤组织中凋亡相关因子[细胞色素C(Cyt-C)、B淋巴细胞瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的mRNA和蛋白的相对表达水平。结果:除环磷酰胺组小鼠体质量较模型组显著降低外(P<0.05),其余各组小鼠体质量的差异均无统计学意义(P<0.05)。环磷酰胺组和柠檬苦素高、中、低剂量组小鼠的抑瘤率分别为(58.16±7.07)%、(37.09±4.26)%、(27.30±3.64)%、(15.13±2.95)%。与模型组比较,环磷酰胺组小鼠脾指数、胸腺指数、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞百分数、CD4⁺/CD8⁺比值、血清中IL-2和IL-10的表达水平、肿瘤组织中Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平以及柠檬苦素各剂量组的IL-10表达水平、Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平均显著降低(P<0.05);环磷酰胺组IFN-γ表达水平、Cyt-C和Bax的mRNA和蛋白的相对表达水平,以及柠檬苦素各剂量组的脾指数(低剂量组除外)和胸腺指数、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞百分数、CD4⁺/CD8⁺比值、IL-2和IFN-γ的表达水平、Cyt-C和Bax的mRNA和蛋白的相对表达水平均显著升高(P<0.05)。结论:柠檬苦素能抑制MFC胃癌荷瘤模型小鼠肿瘤组织的生长,且毒副作用相对较小;其作用机制与提高免疫功能和诱导凋亡有关。     

薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠体内抗肿瘤作用

目的 研究薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠体内抗肿瘤作用。方法 采用小鼠肝癌 H22腹水型瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型, 将 84 只模型小鼠随机均分为薏苡茎醇提取物剂量 1~5 组、 模型对照组、 环磷酰胺组, 分别灌胃薏苡茎醇提取液 10、 8、 6、 4、 2 g/kg, 等体积生理盐水和环磷酰胺 0.02 g/kg, 每日 1 次, 连续 8 d。观察小鼠的活动能力、 腹部膨隆大小及出现的时间、 毛发和摄食、 饮水量变化等情况。测量荷 H22小鼠的实体瘤质量, 计算抑瘤率, 并计算肝脏指数、 脾脏指数和胸腺指数。结果 模型对照组最先出现腋下肿瘤鼓起且生长最快, 自主活动减少、 食欲下降、 毛色开始暗淡等反应, 剂量 1、 2 组次之, 剂量 5 组和环磷酰胺组最慢。薏苡茎醇提取物剂量 1~5 组瘤质量[分别为 （0.47±0.18）、（0.37±0.13）、（0.34±0.10）、（0.30±0.11）、（0.28±0.09） mg]均低于模型对照组(0.60±0.21)mg[F=5.700, P＜0.05], 薏苡茎醇提取物剂量 1~5 组、 环磷酰胺组抑瘤率依次升高 （分别是 21.67%、 38.33%、 43.33%、50.00%、 53.33%和60.00%）。环磷酰胺组和薏苡茎醇提取物组的肝脏指数、 脾脏指数和胸腺指数均低于模型对照组（剂量 1 组脾脏指数除外）; 薏苡茎醇提取物各剂量组的肝脏指数低于环磷酰胺组, 脾脏指数、 胸腺指数与环磷酰胺组差异无统计学意义。结论薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠体内肿瘤和肝脏损害有抑制作用。     

小叶莲提取物抗乳腺肿瘤活性研究

目的:研究小叶莲提取物抗乳腺肿瘤活性。方法:培养人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231,每孔分别加入1、25、50、100μg/ml小叶莲乙醇提取物(X1)、乙酸乙酯提取物(X2)、正丁醇提取物(X3),6.25、12.5、25、50、100μmol/L 8,2’-二异戊烯基槲皮素-3-甲醚(S1)、槲皮素(S2),测定各成分对癌细胞的抑制率。裸小鼠腋下注射MCF-7人乳腺癌细胞以复制荷瘤小鼠模型。模型小鼠分别灌胃给予等容生理盐水(模型组)、15 mg/kg环磷酰胺(环磷酰胺组)、500 mg/kg X1(X1组)、500 mg/kg X2(X2组)、500 mg/kg X3(X3组),每天1次,连续15 d,测定小鼠体质量、瘤质量,计算瘤质量抑制率。模型小鼠分别灌胃给予等容生理盐水(模型组)、15mg/kg环磷酰胺(环磷酰胺组)、15 mg/kg S1(S1组)、15 mg/kg S2(S2组),每天1次,连续9 d,测定小鼠瘤体积,计算瘤体积抑制率。结果:1、25、50、100μg/ml X1、X2与12.5、25、50、100μmol/L S1、S2对MCF-7人乳腺癌细胞有较强抑制作用;各成分对MDA-MB-231细胞抑制作用均较弱。与模型组比较,X1组、X2组、X3组小鼠瘤质量抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,S1组、S2组小鼠瘤质量抑制率、瘤体积抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:小叶莲提取物有一定的抗乳腺肿瘤活性。     

苦参碱对人肝癌细胞HepG2荷瘤裸鼠的抑瘤作用研究

目的研究苦参碱对人肝癌细胞HepG2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法 BALB/C裸鼠随机分为对照组和苦参碱25、50、75 mg/kg组,每组各10只。建立裸鼠肝癌细胞HepG2移植瘤模型。对照组ip生理盐水1 mL,1次/d;苦参碱25、50、75 mg/kg组分别ip 0.5、1.0、1.5 mg/mL苦参碱溶液1 mL,1次/d。连续给药35 d。计算瘤体体积和肿瘤体积抑制率。观察裸鼠瘤体HE染色病理改变和免疫组化染色,测定各组裸鼠瘤体Survivin蛋白表达量,并采用RT-PCR法检测裸鼠瘤体Survivin mRNA相对表达量。结果与对照组比较,苦参碱50、75 mg/kg组裸鼠瘤体体积显著减小(P0.01);苦参碱组裸鼠瘤体生长速度较对照组减慢,肝癌细胞分布较对照组稀疏,且剂量越大越明显。苦参碱50、75 mg/kg组仅有少量Survivin表达于细胞质。与对照组比较,苦参碱50、75 mg/kg组裸鼠Survivin蛋白表达量和Survivin mRNA相对表达量显著减小(P0.01)。结论苦参碱对人肝癌细胞HepG2荷瘤裸鼠具有抑瘤作用,有效剂量为50 mg/kg,其机制可能与下调Survivin表达、诱导肝癌细胞凋亡有关。     

Effect of acetyl 11-keto beta-boswellic acid on metastatic growth factor responsible for angiogenesis

Basic fibroblast growth factor (bFGF), a metastatic growth factor is known to be one of the promoting factors in the tumor induced angiogenesis. The antiangiogenic activity of acetyl 11-keto beta-boswellic acid was screened against bFGF-induced angiogenesis using in-vivo Matrigel Plug Assay. Histological & colorimetric examination confirmed that numerous blood vessels were present in Matrigel+bFGF group in comparison to Matrigel alone treated mice. Acetyl 11-keto beta-boswellic acids (10 mg/kg/d) inhibited the Matrigel+bFGF-induced angiogenesis significantly (P<0.01) in contrast to anti-inflammatory agent indomethacin (10 mg/kg/d) and alkylating agent cyclophosphamide (10 mg/kg/d).     

Tumor regression in tumor-bearing mice by inoculations of immunogenic somatic hybrid cells in combination with cyclophosphamide

Some somatic hybrid cells prepared by cell fusion of MC-induced primary tumor cells with 8-azaguanine resistant L cells were immunogenic in the induction of specific resistance in syngeneic normal mice to the challenge of parental tumor cells. However, inoculations of immunogenic hybrid cells in tumor-bearing hosts evoked enhancement of tumor growth. In these mice with enhanced tumors, the level of immune complexes and antitumor antibodies in sera was more markedly elevated than in sera of untreated tumor-bearers, despite generation of effective cytotoxic T cells in the spleen. Enhancement was not observed by pretreatment with cyclophosphamide (CY), followed by treatment with hybrid cells, but tumor regression occurred. Complete tumor regression was observed in about 70% of animals treated with CY (100 mg/kg) plus viable hybrid cells (10(6)) three times at weekly intervals starting 1 week after tumor transplantation. Coincidental decreases of immune complexes and antitumor antibodies in sera were observed. The results suggest that suppression of the immunological escape mechanism is of primary importance in active tumor-specific immunotherapy.     

Successful chemoimmunotherapy of murine L1210 lymphatic leukemia with cyclophosphamide and mafosfamide-treated leukemia cells

Summary Balb/c × DBA/2 F₁ mice (CD2F₁ mice) bearing L1210 lymphatic leukemia (10 L1210 cells i.p. injected on day 0) were subjected to chemoimmunotherapy. They received 100 mg/kg of cyclophosphamide i.p. on day + 8 and 10⁶ or 10⁷ immunogenic L1210 cells treated in vitro with mafosfamide — ASTA Z7654 (L1210-Maf cells) i.p. or i.p. + s.c. on days 0, + 3, + 6, + 9, + 12 after the leukemia implantation.About 30% of leukemia-bearing mice receiving cyclophosphamide and L1210-Maf cells after L1210 inoculation were able to reject the leukemia (as compared with 0% after injection of L1210-Maf cells only or 5% after cyclophosphamide administration). Better results (54% of cured mice) were obtained if 10⁷ L1210-Maf cells were injected i.p. + s.c. beside cyclophosphamide. Biological response modifiers (BRM's): levamisole, BCG, bestatin did not improve these results in the doses used in the experiment.Augmentation of anti-L1210 therapeutic response is dependent on the administration of cyclophosphamide and L1210-Maf cels. Cyclophosphamide not only reduces the tumor burden but probably can potentiate the L1210-Maf dependent antitumor immunity as well.     

基于AMPK/ULK1介导的自噬探讨牡荆素对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤生长抑制作用及其机制

目的 探究牡荆素对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其可能的调控机制。方法 将BALB/c裸鼠通过左侧前肢腋窝下接种CNE-2细胞构建鼻咽癌裸鼠成瘤模型,待模型构建成功后随机分为模型组、牡荆素组（5、10 mg/kg）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）激动剂组（AICAR,200 mg/kg）、牡荆素+AMPK抑制剂组（Compound C,20 mg/kg）,每组各10只。牡荆素组分别按照相应剂量ig;AICAR组ip 200 mg/kg AICAR;牡荆素+Compound C组采取ig 10 mg/kg牡荆素的同时ip 20 mg/kg Compound C,以上各组连续给药21 d。给药结束后测定裸鼠移植瘤体积和质量;苏木素–伊红（HE）染色观察移植瘤组织病理学改变;TUNEL染色检测肿瘤组织细胞凋亡情况;免疫组织化学检测肿瘤组织微管相关蛋白轻链3(LC3)-II、泛素结合蛋白（p62）蛋白表达;免疫荧光检测肿瘤组织LC3-II和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达;Western blotting检测肿瘤组织Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞...