乳酸脱氢酶同工酶检测初探

由于乳酸脱氢酶同工酶分布有明显的组织特异性,因此同工酶的组成特征可以辅助进行病理来源的确定,确定血清LDH及其同工酶的含量有利于疾病的判断.本文从乳酸脱氢酶同工酶的特点、临床意义、检测方法及比较三方面进行了初步探讨.     

精浆/精子乳酸脱氢酶活性与男性不育的相关性

目的探讨精浆及精子中乳酸脱氢酶同工酶X(LDH-X)活性与男性不育的关系。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、全谱酶联染色等方法检测精浆、精子中的LDH-X活性并计算其比值;按照WHO人类精液实验室手册要求对精液进行常规分析。结果83例不育组精浆LDH-X活性(826.0±47.3U/L)与40例生育组LDH-X活性(614.0±22.1U/L)比较有统计学差异(P0.01),同时其精子LDH-X的活性(8.40±3.50mU/106)则小于生育组(15.8±10.8mU/106),差异也具有统计学意义。不育组、生育组精浆/全精子中LDH-X的比值比较差异具有显著性(P0.01)。而两组的精液密度、活动率及精子活力无统计学差异。结论精浆及精子LDH-X活性检测能够反应精子的质量、生育功能以及对受精过程的预期,对选择辅助生育的方法有指导意义。     

男性不育患者精浆透明质酸含量观察

男性不育是男性学研究的重要课题，病因较为复杂，我们观察了68例精液常规异常的不育症患者精浆透明质酸(Hyaluronic acid，HA)含量，现报道如下。     

培养细胞中琥珀酸脱氢酶和乳酸脱氢酶的简单显示方法

琥珀酸脱氢酶(SDH)和乳酸脱氢酶(LDH)的组织化学显示方法在许多组织化学手册中均有记载,但这些方法都有一个突出的缺点,即需频繁配液并且所配制的孵育液只能一次性消耗、不能长期保存.本文介绍一种新的琥珀酸脱氢酶和乳酸脱氢酶的显示方法,解决了以上矛盾,特别是对培养的单层细胞效果更好.1 材料与方法1.1 细胞培养 将小鼠成纤维细胞株3T3培养到3×3mm的小玻璃盖片上,培养液为DME外加入10%的小牛血清,待细胞贴壁长满盖片的70%左右时,取出盖片用无钙镁的Hank液洗去培养液中的血清,丙酮4℃下固定10分钟,低温储存备用.     

纳米铁对小鼠血清乳酸脱氢酶及其同工酶的影响

目的 探讨大剂量纳米粒径铁粉经口染毒对小鼠血清乳酸脱氢酶（LDH）及其同工酶的影响.方法 40只CD小鼠随机均分（雌雄各半）为对照（Control）组、微米粒径铁粉（Micro-Fe）组、微米粒径氧化铁粉（Micro-Fe2O3）组和纳米粒径铁粉（Nano-Fe）组.将以上材料制成水溶液,以羧甲醛纤维素为辅剂,以5 g/Kg体重剂量一次经口灌胃,14天后处死,分别测定脏器系数,取血分离血清,测定LDH及其同工酶、α-HBDH活性变化.结果 Micro-Fe、Micro-Fe2O3和Nano-Fe组小鼠肝脏系数明显高于对照组（P＜0.05）,血清LDH活性明显低于对照组（P＜0.05）,4组小鼠血清α-HBDH活性间差异无显著性（P＞0.05）.Nano-Fe组小鼠血清LDH3明显低于Micro-Fe组,但与Control组和Micro-Fe2O3组相比差异不显著;Nano-Fe组小鼠血清LDH4和LDH5明显高于对照组（P＜0.05）.结论 大剂量铁摄取可能对小鼠血清LDH具有一定抑制效应,Nano-Fe对血清LDH同工酶的影响与Micro-Fe和Micro-Fe2O3有所不同,血清LDH同工酶分析可能比血清LDH能更好地反映Nano-Fe对生物效应的影响.     

硫氰酸胍抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶1的方法学评价

目的 对硫氰酸胍抑制法检测乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)进行方法学评价及性能验证.方法 对硫氰酸胍抑制法检测LDH1的不精密度、线性分析、回收实验以及正常参考范围等方面进行评价.结果 高、中、低值样本批内不精密度分别为4.25％、1.57％和0.97％,批间不精密度分别为4.57％、2.55％和1.20％;线性分析的稀释健全性良好,R2=0.998;平均回收率为101.56％;LDH1水平在性别间差异无统计学意义;正常参考范围为33.11±5.76U/L.结果 硫氰酸胍抑制法检测LDH1方法可靠、性能良好,符合实验室要求,可在临床广泛开展使用.     

蜂花粉对小鼠腹腔巨噬细胞乳酸脱氢酶活性及其同工酶谱的影响

用蜂花粉和生理盐水分别给实验组和对照组小鼠灌胃,持续28天后,灌洗和培养两组小鼠的腹腔巨噬细胞,并用速率法测定细胞内的乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果实验组小鼠腹腔巨噬细胞内的LDH活性显著高于对照组;进一步用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析LDH同工酶谱,结果发现实验组小鼠腹腔巨噬细胞内LDH_(3-4)有显著的升高。提示蜂花粉通过激活、增加LDH_(3-4)以激活巨噬细胞,提高其吞噬功能,增强免疫力。     

精浆抗精子抗体对男性不育症患者精液参数的影响分析

目的分析男性不育症患者精浆抗精子抗体对精液相关参数的影响.方法收集男性不育症患者260例,均采用免疫珠法测定精浆抗精子抗体(AsAb,IgA或IgG型),根据结果分为AsAb阳性组(41例)和阴性组(219例).结果在这260例男性不育症患者中精浆抗精子抗体检出率为15.77%.AsAb阳性组患者的精液主要参数(精液密度、活动率、a b活动力)均低于AsAb阴性组患者,两组间比较差异具有显著性(P<0.05).结论精浆抗精子抗体对精液主要参数有明显影响,是导致男性免疫性不育的重要因素之一.     

乳酸与ATP敏感钾通道的关系

在组织细胞缺血缺氧时,葡萄糖无氧酵解造成乳酸堆积;而 Ａ Ｔ Ｐ 敏感钾通道开放,使细胞膜超极化,降低细胞兴奋性,起到对缺血缺氧的保护作用。乳酸作为缺血缺氧的代谢产物,一方面 Ｋ Ａ Ｔ Ｐ通道开放剂可引起其增加,而 Ｋ Ａ Ｔ Ｐ通道阻断剂则可减少其生成;另一方面,细胞内外乳酸却又可以激活 Ｋ Ａ Ｔ Ｐ通道,进一步加强其保护作用     

乳酸脱氢酶在前列腺增生与前列腺癌中的分析

目的 探讨乳酸脱氢酶在前列腺增生与前列腺癌患者血清中的表达情况,在前列腺穿刺活检或手术前的诊断价值.方法 回顾性分析2018年1月至2021年3月就诊于首都医科大学附属北京世纪坛医院进行前列腺手术或穿刺活检患者临床资料,按照纳入及排除标准,最终选择262例患者,其中前列腺癌89例,前列腺增生患者173例.以病理结果为诊断标准,使用SPSS 21.0软件进行数据分析处理,比较前列腺癌与前列腺增生组间乳酸脱氢酶表达水平,并分析疾病诊断风险因素,绘制受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve,ROC),分析术前乳酸脱氢酶对于前列腺癌疾病预测的诊断价值.结果 乳酸脱氢酶在前列腺癌血清中表达水平显著高于前列腺增生患者,差异具有统计学意义(P<0.05).单变量Logistic回归研究发现术前血清乳酸脱氢酶(P=0.010)是预测前列腺癌的独立危险因素之一.将乳酸脱氢酶用于前列腺癌诊断,其曲线下面积为0.610,约登指数最高时乳酸脱氢酶截止值为173.5 U/L时,特异性为72.3％,灵敏度为50.6％.结论 血清乳酸脱氢酶对于前列腺癌有一定诊断价值,可以作为前列腺疾病辅助诊断指标之一.     

精子形态与顶体酶活性关系的研究

目的探讨精子形态与精子顶体酶活性的关系。方法对395例男性不育患者采用精子形态检测系统下人工修正方法分析精子形态,用酶标法检测精子中的顶体酶和顶体酶活力指数（AAI）。结果精子形态正常组的顶体酶活性明显高于精子形态异常组,两组差异显著（P〈0.05）;顶体酶活性正常组形态正常精子百分率明显高于顶体酶活性异常组形态正常精子百分率,两组间较差异极显著（P〈0.001）;顶体酶活性与形态正常精子百分率间呈显著正相关关系（r=0.169,P〈0.001）。结论精子形态可影响精子顶体酶活性。     

不育男性精浆/精子乳酸脱氢酶活性检测及其临床意义

目的探讨精浆及精子中乳酸脱氢酶同工酶X（LDH-X）活性与男性不育的关系。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、全谱酶联染色等方法检测精浆、精子中的LDH-X活性并计算其比值;按照WHO人类精液实验室手册要求对精液进行常规分析。结果 83例不育组精浆LDH-X活性（826.0±47.3U/L）与40例生育组LDH-X活性（614.0±22.1U/L）比较有统计学差异（P〈0.01）,同时其精子LDH-X的活性（8.40±3.50mU/106）则小于生育组（15.8±10.8mU/106）,差异也具有统计学意义。不育组、生育组精浆/全精子中LDH-X的比值比较差异具有显著性（P〈0.01）。而两组的精液密度、活动率及精子活力无统计学差异。结论精浆及精子LDH-X活性检测能够反应精子的质量、生育功能以及对受精过程的预期,对选择辅助生育的方法有指导意义。     

Influence of maternal nicotine exposure during gestation and lactation on lactate dehydrogenase isoenzyme profile and transcript levels in developing neonatal rat lung

In this study we investigated the effect of (a) aging on rat lung lactate dehydrogenase (LDH) mRNA expression and isoenzyme profile and, (b) the effect of maternal nicotine exposure during gestation and lactation on LDH isoenzyme profile and mRNA expression in the lungs of the offspring. Pregnant rats were injected subcutaneously (1 mg nicotine/kg body weight/day) from day 1 after mating. Lung tissue to determine LDH isoenzyme profile and mRNA expression was obtained from the offspring. LDH mRNA expression and isoenzyme profile was determined on postnatal days 1, 7, 14, 21 and 49. Generally the %Densities of all the isoenzymes decreased between postnatal days 1 and 49. Between postnatal days 7 and 14, a period associated with rapid alveolar formation, all isoenzymes except LDH-1, decreased (P < 0.01). During this period all the isoforms in nicotine-exposed lung increased (P < 0.05). In both control and nicotine-exposed lung LDH-1 is the dominant isoenzyme. The LDH-M and LDH-H isoenzyme levels are higher (P < 0.001) in the lungs of the nicotine exposed rats. Maternal nicotine exposure during gestation and lactation changed the metabolic status of the nicotine-exposed lungs to become more glycolytic compared to that of the control lung. These changes in LDH isoenzyme profiles and mRNA expression are irreversible.     

精子顶体酶检测对男性不育症辅助诊断的价值分析

目的分析人精子顶体酶检测对男性不育症的诊断意义.方法收集200例男性不育症患者,根据精液常规分析结果分为精液参数正常不育组(59例)和精液参数异常不育组(141例);另40例正常生育男性作为对照组.对所有患者及对照组的精液进行精子顶体酶检测.结果精液参数正常组酶活性阳性率为56.21%,酶活性亮区直径为40.03μm.精液参数异常组酶活性阳性率为33.74%,酶活性亮区直径为26.88μm.正常对照组的精子顶体酶活性阳性率为88.79%,酶活性亮区直径为44.13μm.男性不育组精子顶体酶阳性率与正常生育组比较差异具有显著性(P＜0.05).结论精子顶体酶阳性率降低和活性低下是导致男性不育的一个重要原因.     

前列腺炎合并不育症患者的抗精子抗体评价

目的评价前列腺炎合并不育症患者的抗精子抗体关系.方法应用混合球蛋白试验(MAR试验)、浅盘精子凝集试验(TAT试验)和浅盘精子制动试验(SIT),对35例前列腺炎合并不育症患者(A组)的血清和精子表面抗精子抗体进行检测,随机选择35例男性不育门诊初诊者作对照(B组).结果 A组采用TAT检出血清抗精子抗体阳性5例,滴度水平在1:8～16,SIT未测出阳性,采用MAR试验检出精子表面抗体阳性8例.B组采用TAT检出血清抗体阳性4例,SIT阳性1例,采用MAR试验检出精子表面抗体阳性2例.经t检验,A组精子表面抗精子抗体阳性率显著高于B组(P＜0.01).结论前列腺炎合并不育症患者存在着精子免疫因素,且表现出精子表面抗体发生率升高,临床对这类不育患者治疗要重视前列腺炎的抗炎处理.     

不育男性精子膜表面抗精子抗体水平与精液主要参数及精子功能的相关性

目的探讨男性不育症患者精子膜表面抗精子抗体与精液主要参数的相关性。方法收集男性不育症患者350例,均采用免疫珠法测定精子膜表面抗精子抗体(AsAb,IgA或IgG型),根据结果分为AsAb阳性组(43例)和阴性组(307例)。结果在这350例男性不育症患者中精子膜表面抗精子抗体检出率为14.00%。AsAb阳性组患者的精液主要参数(精液密度、活动率、活动力、精液量)均低于AsAb阴性组患者,两组间比较差异具有显著性(P<0.05)。结论精子膜表面抗精子抗体与精液主要参数及精子功能下降有明显相关性,是导致男性免疫性不育的重要因素之一。     

The lactate dehydrogenase activity and isoenzyme pattern of normal and hypokinetic human tendons

Summary The LDH specific activity and the LDH isoenzyme pattern of eleven pairs of different normal tendons were compared with hypokinetic tendons. The LDH specific activity of hypokinetic tendons was 13–66% of the specific activity of normal tendons. The isoenzyme pattern of hypokinetic tendons altered in such a way that — with one exception — the ratio of LDH-5 and LDH-4 decreased and the ratio of LDH-1, LDH-2, and LDH-3 increased and, as a consequence, the amount of the M subunit decreased.     

A fructose bisphosphate activated lactate dehydrogenase in the liver fluke Fasciola hepatica

Lactate dehydrogenase of Fasciola hepatica showed typical Michaelis-Menten kinetics at pH 7.2, with respect to pyruvate. Addition of physiological levels of fructose bisphosphate activated the enzyme at all substrate concentrations tested; the response to this effector being hyperbolic in nature. As well as depending upon the fructose bisphosphate concentration, the Vmax and Km are modified by different buffers. The degree of activation is much greater using Tris-HCl than phosphate buffer. The pH optimum occurs at pH 6.5 whether using physiological levels of substrate in the presence or absence of fructose bisphosphate, or high levels of substrate. Of the potential effectors tested, significant inhibition was shown by the nucleoside triphosphates, especially ATP. The importance of this inhibition, coupled with the activation by fructose bisphosphate is discussed. Fasciola hepatica lactate dehydrogenase is unusual in that it does not catalyse the reverse reaction to any measurable extent. That is, lactate oxidation is negligible unless the effector fructose bisphosphate is present. Use was made of this fact to visualise the isoenzymes of lactate dehydrogenase separated by polyacrylamide disc gel electrophoresis. Five isoenzyme bands became apparent when stained in this manner.     

不育男性精浆果糖及精浆锌含量的研究

目的探讨不育男性精浆果糖含量及精浆锌含量与精子密度、活力及形态的关系。方法分析89例不育男性患者（不育组）、33例正常生育后男性（生育组）的精液样本,采用计算机辅助精液分析进行精子密度、活力参数检测,采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,精浆果糖及精浆锌含量采用分光光度比色法测定。结果不育组精浆果糖及锌含量均显著低于生育组（P〈0.05）;精浆果糖含量异常组精子密度显著高于果糖含量正常组（P〈0.05）;精浆锌含量正常组精子活力高于异常组（P〈0.05）。结论精浆果糖含量与精子密度密切相关,精浆锌含量与精子活力密切相关,但二者与精子形态无关。     

精子形态与活率相关性的研究及其在男性不育中的应用

目的探讨精子形态与活率的相关性,以便为男性不育的诊断提供理论指导。方法分别利用改良的巴氏染色法和伊红染色法,对精子形态和精子活率进行分析。结果与精子形态正常组相比,畸形精子组中精子活率异常的比例明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论精子活率与精子形态呈正相关。精子形态可影响精子活率,进而影响男性的生育。