细胞周期调控网络在肝部分切除术后肝再生中的作用(文献综述)

肝再生所必需的细胞外刺激信号最终要集中到细胞核 ,包括细胞周期调节。研究表明 ,细胞核内细胞周期依赖性激酶 (CDK)、细胞周期素 (cyclin)及细胞周期依赖性激酶抑制素 (CKI)共同构成的细胞周期调控网络 (cyclin- CDK- CKI)与肝部分切除术后肝脏再生密切相关 ,研究细胞周期的调控有可能进一步了解肝脏再生。     

细胞周期调控与骨肉瘤

近年来，随着细胞和分子生物学的发展，人们逐步认识到细胞周期不仅与细胞增殖直接相关，而且也与细胞分化和凋亡有关［１］，可见细胞周期调节失控是癌变的重要原因。骨肉瘤（ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ，ＯＳ）好发于青少年，是最常见的恶性骨肿瘤，其生物学行为多呈高度恶性，血行转移的发生率高并且早，严重危胁着患者的健康和生命。骨肉瘤的病因和发病机制尚不完全清楚，现认为细胞周期调节失控是其发病机制之一。细胞周期是指各次细胞分裂之间的间隙，包括Ｇ１、Ｓ、Ｇ２、Ｍ四期。细胞周期调控是在各期的控制点（ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ…     

Cyclin-CDKs-CKIs调控系统与大肠癌关系的研究进展

越来越多的研究表明，恶性肿瘤是一类细胞周期性疾病，细胞分裂周期是在精确的调控机制下进行的，包含于这一过程中的相关蛋白和基因的改变都会导致肿瘤的发生。细胞周期素（Cyclin）-细胞周期素依赖激酶（CDKs）-细胞周期素依赖激酶抑制蛋白（CKIs）为细胞分裂周期的主要调节系统。近年来的研究表明它们和大肠癌的发生发展有密切联系。     

细胞周期素D1、p16、Rb蛋白在骨肉瘤中的表达及其意义

我们应用免疫组织化学方法 ,检测43例骨肉瘤和 15例骨软骨瘤手术标本中细胞周期素Ｄ1(ｃｙｃｌｉｎＤ1)、ｐ16、Ｒｂ蛋白的表达 ,探讨 3种基因表达在骨肉瘤发生发展中的意义 ,现报道如下。一、材料和方法1.标本 :中国医科大学附属第一、二医院骨科 1986～ 1998年手术切除骨肉瘤标本 43例 ,按细胞相对分化程度分为 :高分化 9例 ,低分化 34例。良性骨软骨瘤 15例。全部 5 8例标本均不伴有其他部位肿瘤。均经体积分数为10 %甲醛常规固定、脱水透明、石蜡包埋。经常规苏木精 伊红 (ＨＥ)染色 ,重新确诊分级后 ,进行免疫组织化学染色。2 .主要试…     

缺氧诱导因子-1α和细胞周期素E在骨肉瘤中的表达及其预后意义

[目的]探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和细胞周期素E(cyclinE)蛋白表达情况与骨肉瘤生物学特性的关系及预后意义.[方法]采用免疫组化SP法检测36例骨肉瘤组织中HIF-1α和cyclinE的表达情况,并分析与临床病理参数及预后的关系.[结果](1)HIF-1α、cyclinE蛋白在骨肉瘤中的阳性率和平均阳性标记指数分别为[61.6%(22/36),(19.64±8.78)、55.6%(20/36),(19.20±9.27)];(2)HIF-1α和cyclinE蛋白表达的一致符合率为65.8%,且两者表达呈正相关(r=0.7435,P＜0.05);(3)HIF-1α、cyclinE蛋白表达强度与骨肉瘤细胞分化程度密切相关(P＜0.01);(4)有转移组病例的HIF-1α蛋白表达强度高于无转移组病例(P＜0.01);(5)单因素和多因素生存分析显示HIF-1α、cyclinE高表达与患者预后不良有关(P＜0.05).[结论]HIF-1α、cyclinE高表达可能参与骨肉瘤的恶性进展,二者的联合检测对评价骨肉瘤患者的预后有一定价值.     

细胞周期素H和细胞周期素依赖性激酶7在人乳腺癌组织中的表达及其意义

目的研究人乳腺癌组织中细胞周期素H(cyclinH)和细胞周期素依赖性激酶 7(CDK7)蛋白表达以及术前化疗对其表达的影响。方法应用固定化蛋白质印迹法检测 40例乳腺癌及相应正常乳腺组织cyclinH和CDK7蛋白表达。结果乳腺癌组织cyclinH和CDK7表达水平明显高于正常乳腺组织 (t值分别为 9 5 2 4和 2 984,P <0 0 1)。Ⅲ期乳腺癌与Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌相比 ,差异有显著性 (t值分别为 6 0 3和 4 6 9,P <0 0 5 ) ;直径大于 5cm的乳腺癌cyclinH表达水平高于直径小于 2cm者 (t=4 49,P <0 0 5 )。术前行化疗的乳腺癌cyclinH蛋白表达水平明显下降 (t =6 .5 2 ,P <0 0 5 )。结论　cyclinH和CDK7在乳腺癌中呈过度表达 ,术前化疗可抑制乳腺癌cyclinH及CDK7蛋白表达     

p16ink4a/hRb1对骨肉瘤细胞周期协同的调控作用

目的 观察外源性p16ink4a／hRb1基因联合导入骨肉瘤细胞后，对其细胞周期的协同调控作用。方法 利用本室构建的pIRES-p16ink4a-hRb1、pIRES-p16ink4a与pIRES-hRb1质粒，脂质体介导转染p16缺失，hRb1表达阳性的骨肉瘤细胞株MG63，G418筛选获得抗性克隆，通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot半定量分析外源基因表达；SubG1法流式细胞术分析细胞周期特异性和凋亡率，噻唑蓝（MTT）比色法与细胞生长曲线观察细胞增殖情况。结果 外源基因在靶细胞mRNA和蛋白水平分别有独立表达。与对照组比，所有外源性基因导入组细胞周期均显著阻滞在G1期（P〈0．01）并存在凋亡，且双基因导入组凋亡率分别比单基因组高4．04和6．94倍（P〈0．01）；所有外源性基因导入组各时间点细胞生长抑制率均显著上升，且双基因导入组细胞高于单基因组（P〈0．01）。结论 p16ink4a／hRb1联合导入骨肉瘤细胞后，干扰了p16ink4a-CyclinD1／CDK-hRb1负反馈循环，比单基因导入更能抑制肿瘤细胞生长和杀灭肿瘤细胞。     

细胞周期素H及细胞周期素依赖性激酶-7在皮肤血管瘤组织中的表达及意义

目的 探讨细胞周期素H(cyclin H)、细胞周期素依赖性激酶-7(CDK-7)在人皮肤血管瘤组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法分别检测皮肤血管瘤组织中增牛期、退化期及正常皮肤组织中cyclin H和CDK-7蛋白的表达.并结合第Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色证实表达cyclin H和CDK-7蛋白的细胞是血管内皮细胞.利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织cyclin H和CDK-7表达的平均吸光度A值和平均阳性面积.结果 增生期血管瘤内皮细胞cyclin H和CDK-7的表达水平明显高于退化期及正常皮肤组织,差异有统计学意义(P<0.01);退化期与正常皮肤组织血管内皮细胞cyclin H和CDK-7表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 CDK7和cyclin H在增生期血管瘤组织中促使内皮细胞大量增生,使血管瘤不断生长,提示CDK7和cyclin H在血管瘤的发生、发展中起了重要作用.     

神经母细胞瘤细胞周期素依赖激酶抑制因子p27表达检测及其意义

目的探讨细胞周期素依赖激酶(CDKs)抑制因子p27表达对神经母细胞瘤(NB)发生发展的影响。方法检测26例NB标本中p27基因表达,结合增殖细胞核抗原(PCNA)表达和细胞凋亡检测结果进行分析。结果I～II及IVS期、神经节母细胞瘤(GNB)、预后好组织（FH）型标本p27表达指数(EI)为27.28±13.61、34.60±12.16、26.29±14.71,显著高于Ⅲ～Ⅳ期、NB、预后差组织(UFH)型标本15.81±12.92、18.77±14.77、13.34±13.79(P值均<0.05）;Ⅰ～Ⅱ或IVS期、GNB、FH型标本PCNAEI为9.47±8.43、0.83±0.57、11.05±10.71则显著低于Ⅲ～Ⅳ期、NB、UFH型标本27.05±19.24、24.44±17.42、32.09±17.04(P值均<0.05）。p27EI与有丝分裂核碎裂指数(MKI)呈负相关（n=26,r=-0.513）,与NB细胞凋亡指数呈正相关（n=17,r=0.490）,与存活时间呈正相关（n=12,r=0.635）;PCNAEI与MKI呈正相关（n=20,r=0.903）。结论p27抑制细胞增殖周期及诱导细胞凋亡的功能,在NB的发病机制中可能具有重要作用。     

多肿瘤抑制基因（MTS1）的发现与研究进展

多肿瘤抑制基因ＭＴＳ１（Ｐ１６）是１９９４年初发现的新型抑癌基因。据统计，约有７５％的癌细胞株有Ｐ１６基因的缺失与突变。Ｐ１６基因仅抑制ＣＤＫ４，对细胞周期有直接的调控作用。作为一种新型抑癌基因，Ｐ１６基因较小，易于操作，在肿瘤的基因治疗方面有广阔的应用前景。     

Critical role for cell cycle regulators in androgen receptor function]

Androgen plays an important role in the growth of prostate cancer, but the molecular mechanism that underlies development of resistance to antiandrogen therapy remains unknown. Cyclin E has now been shown to increase the transactivation activity of the human androgen receptor (AR) in the presence of its ligand dihydrotestosterone. The enhancement of AR activity by cyclin E was resistant to inhibition by the antiandrogen 5-hydroxyflutamide. Cyclin E was shown to bind directly to the AB domain of the AR, and to enhance its AF-1 transactivation function. These results suggest that cyclin E functions as a coactivator of the AR, and that aberrant expression of cyclin E in tumors may contribute persistent activation of AR function, even during androgen ablation therapy.     

Mutation of cell cycle regulators and their impact on superficial bladder cancer

Early cytogenetic studies in bladder cancer identify regions of chromosomal gain or loss that can be candidate loci for oncogenes and tumor suppressor genes. Oncogenes with potential prognostic significance identified in bladder cancer the RAS family, epidermal growth factor receptor, ERBB-2, MDM2, and cyclin D1. The TP53 gene has been the most thoroughly characterized tumor suppressor gene in bladder cancer, with correlation of TP53 alterations with type of carcinogenic exposure, tumor stage and grade, as well as prognosis. Studies evaluating alterations of the retinoblastoma pathway have identified the retinoblastoma gene, RB, p161NK4A/CDKN2, and E2F-1 as tumor suppressor genes with potential prognostic significance in patients with bladder cancer. Better understanding of the genetic mechanisms underlying bladder tumor development and progression will allow better prevention, diagnosis, and treatment strategies.     

Notch1 siRNA对乏氧环境骨肉瘤细胞MG-63增殖及周期的影响

[目的]探讨Notch1 siRNA对乏氧环境人骨肉瘤细胞MG-63细胞增殖和周期的影响。[方法]将骨肉瘤细胞株MG-63细胞置于乏氧(37℃、1%O2、5%CO2)环境下培养作为实验组,以正常氧环境(37℃、21%O2、5%CO2)下培养作为对照组,培养72 h,应用MTT方法检测不同时间乏氧培养对MG-63细胞增殖的影响;采用Notch siRNA转染乏氧环境中的MG-63细胞,MTT方法检测细胞增殖变化;流式细胞术检测细胞周期的变化;Western blot检测细胞HIF-1a、Notch1蛋白表达变化。[结果]乏氧培养可促进MG-63细胞增殖,48 h常氧及乏氧对细胞增殖的作用可见明显差异(2.164±0.075 vs 1.421±0.086)(P<0.01)。流式细胞分析显示实验组、对照组MG-63细胞培养48 h G1/G2期细胞比例分别为(41.79±3.25)%和(53.87±2.31)%(P<0.05),乏氧可以促进细胞周期进展,Notch1 siRNA有效下调乏氧MG-63细胞Notch1蛋白表达,Notchl siRNA作用48 h后乏氧环境MG-63细胞周期阻滞于G1/G2期。Western-blot结果显示乏氧环境下MG-63细胞HIF-1a、Notch1蛋白表达增高。[结论]乏氧环境能通过促进MG-63细胞周期进展,从而明显促进细胞增殖,阻断Notch可逆转乏氧对MG-63细胞促增殖作用,提示Notchl是治疗骨肉瘤的有效分子靶点。     

Intercellular adhesion molecule 1 discriminates functionally different populations of human osteoblasts: characteristic involvement of cell cycle regulators.

The concept of differential regulation of certain adhesion molecules on different cell subsets and their relevance to cell functions has emerged in recent years. The initial event in bone remodeling is an increase in osteoclastic bone resorption and cell adhesion between osteoclastic precursors and bone marrow stromal cells or osteoblasts is known to commit the osteoclast development. Here, we show that human osteoblasts can be divided into two subsets based on the expression of the intercellular adhesion molecule (ICAM)-1; ICAM-1+ osteoblasts highly adhered to monocytes, including osteoclast precursors, produced osteoclast differentiation factor (ODF), and induced multinuclear osteoclast-like cell formation. Anti-ODF monoclonal antibody (mAb) did not inhibit the adhesion of monocytes to osteoblastic cells, whereas anti-leukocyte function-associated antigen (LFA)-1, a receptor for ICAM-1, mAb blocked the adhesion. We thereby propose that the higher affinity adhesion via LFA-1/ICAM-1 is prerequisite for efficient function of membrane-bound ODF during osteoclast maturation. The functional characteristics of ICAM-1+ osteoblasts were emphasized further by cell cycle regulation, as manifested by (i) up-regulation of p53 and p21, (ii) reduction of activity of cyclin-dependent kinase (cdk) 6, (iii) underphosphorylation of retinoblastoma protein, (iv) increased Fas but reduced bcl-2 expression, and (v) majority of cells remained at G0/G1 phase. Furthermore, ICAM-1+ osteoblasts were induced by interleukin-1beta (IL-1beta). Taken together, we propose that the differentiation of osteoblasts to ICAM-1+ subpopulation by inflammatory cytokines plays an important role in osteoporosis, which is observed in patients with chronic inflammation, because ICAM-1+ osteoblasts can bias bone turnover to bone resorption, committing osteoclast maturation through cell adhesion with its precursor, and the majority of ICAM-1+ osteoblasts arrested at G0/G1 phase. Such regulation of cell cycle arrest also is an important determinant of the life span of cells in bone in which continuous bone remodeling maintains its homeostasis.