复方丹参对异种移植物的保护作用

目的：研究复方丹参在异种移植中对移植物的保护作用。方法：采用颈部套袖法建立豚鼠对大鼠心脏异种移植模型。于术前24h按0.5mg／妇腹腔注射中华眼镜蛇蛇毒(CCV)，术中以复方丹参注射液灌注供心并静注复方丹参。研究对照组、CCV组和CCV 丹参组供心存活时间、复跳时间的改变。结果：复方丹参注射液缩短异种移植心脏复跳时间，合用CCV可使供心存活时间进一步延长。结论：在异种移植中应用复方丹参可减少供心缺血损伤，并改善微循环，与CCV合用能抑制异种移植的超急性排斥反应。     

异种骨移植研究进展

异种骨作为移植骨有着其独特的优点：（1）异种骨来源广泛，价格低廉。（2）经过适当处理能使其保留骨诱导力，并提供骨支架以利新骨沉积。因此，用异种骨作移植骨越来越受到人们的重视。但由干异种骨的抗原性强，骨诱导能力较差，所以必须经过适当的处理后才能应用，本文就目前异种骨移植的处理方法，骨诱导机理以及实验研究和临床应用综述如下。一、异种骨的处理方法异种骨移植成功的关键问题就是消除异种骨的抗原性，同时保留其诱导新骨产生的能力。许多研究表明，异种骨有较强的抗原性。Elves用洗去骨髓的异种骨和冷冻干燥的异种骨作移…     

阻断共刺激信号在异种小动物心脏移植中诱导免疫耐受的研究

目的在非协调性异种小动物豚鼠-大鼠心脏移植模型当中,通过单克隆抗体阻断T细胞B7/CD28及CD40/CD40L激活通路途径来探讨T细胞在异种移植延迟性免疫排斥中的作用,探索诱导异种移植T细胞外周耐受的可能性。方法将供体三色豚鼠和受体SD大鼠随即分成四组：A组（对照组）,在移植前一天大鼠腹腔内注射CVF 0.4mg/kg;B组（B7mAb组）,在移植当天大鼠腹腔内注射B7单抗0.1mg,余处理同A组;C组（CD40LmAb组）,在移植当天大鼠腹腔内注射CD154单抗0.1mg,余处理同A组;D组（联合组）,在移植当天大鼠腹腔内注射B7单抗0.1mg、CD154单抗0.1mg,余处理同A组。观察各组供心存活的时间,并行移植心脏的常规病理和免疫组化检查。结果对照组移植心脏的存活时间为（19.5±2.7）h,与对照组比较,B7组、CD40L组和联合处理组的移植心脏存活时间均得到了显著的延长,但联合处理组延长最为明显。移植心脏组织病理学检查均呈急性血管排斥反应改变,且以CD8＋T细胞浸润为主。结论联合阻断CD28/B7与CD40/CD40L共刺激通路可延长异种移植心脏存活时间。     

雷公藤内酯醇体内外对HL-60细胞作用的研究

目的探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)在体内外对人髓系白血病细胞株HL-60的作用。方法运用MTT比色法检测TPL对HL-60细胞的增殖抑制作用,采用TdT酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测TPL对HL-60细胞的诱导凋亡作用;建立HL-60裸鼠异种移植瘤模型,观察经TPL治疗后的肿瘤抑制率。结果在体外,TPL对HL-60细胞的增殖具有明显的抑制及诱导凋亡作用,呈时间和剂量依赖性;在体内,TPL可抑制HL-60细胞裸鼠异种移植瘤生长,抑制率最高可达53.5%。结论TPL在体内外均可抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。     

移植——21世纪手术舞台的领袖

20世纪初，移植得到认真研究并应用于临床，到70年代已推到高潮，截止2001年底，全世界肾，肝，心，肺的移植数已分别达535，075，100，179，61，195，13，710例，最长存活时间分别为39，32，23，17年，为克服供的短缺和排斥反应，异种移植，移植耐受和克隆器官成为研究的热点。     

人胎儿肝干细胞异种移植治疗小鼠暴发性肝功能衰竭

目的：探讨人胎儿肝干细胞异种移植治疗暴发性肝功能衰竭伴严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠的可能性与有效性。方法：改进Seglen胶原酶（Ⅳ型）原位灌注结合Percol密度梯度离心法分离纯化中期妊娠流产的男性胎儿肝干细胞。经肝脏注射移植（106细胞）治疗D-氨基半乳糖（1600mg／ks）诱发的暴发性肝功能衰竭雌性SCID小鼠（治疗组），于移植前及移植后24，48，72h及1周取血测定血氨、谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBiL），于移植后1，2，4周取受体肝脏组织，PCR方法检测性别决定因子，并与未移植肝干细胞小鼠（对照组）比较。结果：治疗组小鼠中位生存时间较对照组延长（123．4hvs70．4h）（P〈0．05）；移植后治疗组血清ALT、TBiL及血氨水平降低，各时间点均低于对照组（P〈0．05）；治疗组肝脏病理损伤逐渐减轻，存活2周小鼠肝脏组织中性别决定因子呈阳性表达，随时间延长表达增强。结论：人胎儿肝于细胞移植能延长暴发性肝功能衰竭SCID小鼠的存活时间，改善其肝功能及肝脏病理指标。     

脑肿瘤动物模型

由于脑肿瘤生物学特性及血脑屏障的存在，脑肿瘤的治疗效果较差。随着分子生物学技术及遗传学等学科的发展，建立了越来越多的脑肿瘤动物模型，因此对脑肿瘤的生物学特性也了解得越来越多，为临床治疗脑肿瘤打下了坚实的基础。目前建立的脑肿瘤动物模型主要有：化学物质诱导模型，病毒诱导模型，移植模型(同种移模型、异种移植模型)，基因模型(转基因模型、基因敲除模型、基因突变模型)，这些模型在临床治疗脑肿瘤上发挥了极大的指导作用，但是各种模型都有它的优缺点，因此有待进一步探讨。     

人瘤异种移植模型研究及在癌化疗中的应用

近年来,人体肿瘤的异种移植工作已在世界各地蓬勃展开。这一方法学上的进步,对肿瘤研究起了很好的促进作用。许多实验室通过对异种移植前后的人体肿瘤的生物特性观察及对移植后的人体肿瘤株进行抗癌药的敏感性试验发现,异种移植后的人体肿瘤基本上仍保留它本身所具有的特点。目前,美国国立癌症研究所(NCI)等已建立了不同类型的异种移植的人体肿瘤系,开展体内人体肿瘤的药物筛选工作,并取得了成果。本文拟围绕人体肿瘤异种移植研究的发展和应用予以综述。     

原花青素对人胆管癌细胞QBC939抑制的体内外研究

目的研究原花青素(PC)体内外对人胆囊癌细胞的抑制作用。方法常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、空白对照组和PC组。MTT法检测PC对人胆囊癌细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;建立QBC939细胞裸鼠异种移植瘤模型。将荷瘤裸鼠随机分为5组:阴性对照组、5-Fu阳性对照组及PC 3个剂量组,每日腹腔注射给药,每隔3 d测肿瘤大小;12 d后,处死裸鼠,剥瘤称重并计算抑瘤率。结果 PC 3个剂量组显著抑制QBC939细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性;将细胞周期阻滞在S期,并诱导QBC939细胞凋亡;PC可抑制QBC939细胞裸鼠异种移植瘤的生长。结论 PC体内外均可抑制SHG-44细胞生长,并诱导肿瘤细胞凋亡。     

成功的胰肾联合移植1例报告

目的：用胰肾联合移植技术治疗非胰岛素依赖型糖尿病伴尿毒症病人。方法：2002年2月1例Ⅱ型糖尿病伴肾功能衰竭病人接受胰、十二指肠、肾一期联合移植，采用胰液空肠引流术式。结果：病人术后即停用胰岛素，肾功能术后第9天恢复正常，无外科并发症，现已存活5月余，移植胰和移植肾功能正常，未出现排斥反应，病人已参加日常工作。结论：胰肾联合移植治疗胰岛素依赖型糖尿病伴肾功能衰竭的病人，治疗效果确切、安全可靠。     

中国内江猪与中国人头孢唑啉血浆蛋白结合率的比较研究

猪作为异种移植的首选动物，近年已成为各国异种移植界研究的热点，我们曾经对中国内江猪肌肉注射头孢唑啉的药代动力学与中国正常人进行比较，发现内江猪肌肉注射相同剂量头孢唑啉后相同时间的血药浓度与正常人比低得多，并很快降低。由于头孢唑啉是高蛋白结合的抗生素，考虑到血中蛋白结合对头孢唑啉体内分布和排泄的影响，我们采用平衡透析法考察头孢唑啉在内江猪和正常人血中蛋白结合的差异，以进一步探索内江猪与人的肾脏在排泄头孢唑啉的差异。     

黄荆子乙酸乙酯提取物体内外对胃癌SGC-7901细胞作用的研究

目的研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)在体内外对人胃癌SGC-7901细胞的作用。方法细胞计数法检测EVn-50对人胃癌SGC-7901细胞生长增殖的抑制作用,并绘制细胞生长曲线;平板克隆试验测定细胞集落形成率;建立SGC-7901裸鼠异种移植瘤模型,绘制移植瘤生长曲线,计算经EVn-50治疗后的肿瘤抑制率;光镜和电镜观察肿瘤组织病理变化。结果在体外,1、10、100mg·L-1的EVn-50均能抑制人胃癌SGC-7901细胞生长和增殖,呈浓度和时间依赖性;与对照组比较,细胞集落形成率明显下降(P<0.05);在体内,EVn-50能够抑制SGC-7901细胞裸鼠异种移植瘤生长,5、10、20mg·kg-1的EVn-50对移植瘤的瘤重抑制率分别为32%、43%和56%,且呈浓度依赖性;病理学观察结果,EVn-50可引起SGC-7901细胞坏死,诱导SGC-7901细胞凋亡。结论EVn-50在体内外均可抑制SGC-7901细胞生长和增殖,并在体内诱导其凋亡。     

移植胰的超声观察

目的探讨移植胰的声像图特征。方法对三例胰肾联合移植病人行二维和彩色多普勒检测,观察移植胰二维和彩色多普勒特征。结果移植胰术后短期内,内部回声极低,形态饱满,1～3月内胰头、胰尾相对较大,P<0.01或0.05;移植胰周围及腹腔内可出现局限性积液。移植胰血供显示清晰,供胰动脉Vmax63.3±12.5cm/s,RI为0.68±0.07。结论二维超声和多普勒超声检测可进行移植胰二维图像及供胰血管的血流观察。     

大鼠胸腺内猪胰岛异种移植的实验研究

目的:观察胸腺内和肾包膜下胰岛移植对移植物存活时间的影响。方法:我们应用胰管内注射胶原酶的方法分离出猪胰岛为供体,以W istar糖尿病大鼠为受体,通过移植物的存活期来观察大鼠胸腺内及肾包膜下猪胰岛异种移植的效果。结果:单纯胸腺内移植的存活期(6.0±3.6)d,长于单纯肾包膜下组的(5.3±1.8)d。移植的同时加用抗大鼠胸腺淋巴血清(ATS),胸腺内移植+ATS的存活期为(21.7±9.1)d,明显长于肾包膜下移植+ATS组的(13.7±3.2)d。结论:胸腺可能为胰岛移植的理想部位,而且在诱导免疫耐受中具有重要作用。     

胰淀素对胰岛细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的：观察胰淀素对胰岛细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响。方法：应用放免法检测胰淀素培养后大鼠胰岛细胞和胰岛β细胞瘤细胞系(βTc3)高糖刺激后上清液的胰岛素水平；应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术检测胰淀素培养后大鼠胰岛细胞和小鼠βTc3细胞凋亡百分率；应用定量RT-PCR(QRT-PCR)检测培养后bcl-2、bax mRNA的表达。结果：胰淀素使原代培养的大鼠胰岛细胞和βTc3胰岛素分泌功能明显下降，使原代培养的大鼠胰岛细胞和βTc3的凋亡细胞比例明显增加；胰岛细胞凋亡过程中，诱导凋亡的基因bax mRNA表达水平明显升高，抵抗凋亡基因bcl-2 mRNA表达水平明显下降。结论：胰淀素可能通过诱导胰岛细胞凋亡导致或加重糖尿病，其中bcl-2／bax mRNA表达比率变化可能起重要作用。     

黄荆子乙酸乙酯提取物对人乳癌细胞体内外实验的研究

目的研究黄荆子乙酸乙酯提取物（EVn-50）在体内外对人乳癌MDA—MB-435S细胞的抑制作用。方法软琼脂克隆形成法测定细胞生长：溴化尿嘧啶（BrdU）掺入法检测细胞核酸的合成；建立MDA—MB-435S裸鼠异种移植瘤模型，观察经EVn-50处理后的肿瘤抑制率。结果在体外，随EVn-50浓度增高，细胞集落形成率明显下降（P〈0．01）；EVn-50对MDA—MB-435S细胞核酸合成具有抑制作用，呈剂量依赖性，其中高剂量组的BrdU掺入抑制作用最强，IC50为16．8ug／mL。在体内，EVn-50抑制MDA—MB-435S细胞裸鼠异种移植瘤生长，20、40、80ug／mL的EVn-50对移植瘤的瘤重抑制率分别为18％、31％和63％，呈浓度依赖性。结论EVn-50在体内外对MDA—MB-435S细胞均具有生长抑制作用。     

MSCs修饰受体胸腺对异种心脏移植免疫排斥反应的作用研究

目的大鼠胸腺以豚鼠骨髓间充质干细胞进行修饰,然后行豚鼠到大鼠的异种心脏移植。研究以间充质干细胞修饰胸腺对异种移植心脏存活时间的影响。方法供体豚鼠和受体SD大鼠各20只随机分成四组,A组(对照组);B组(胸腺修饰IT组);C组(CVF组);D组(IT加CVF组)。观测指标:移植心脏存活时间,病理变化,供受体异种淋巴细胞毒性试验。结果供心平均存活时间:A组(23.20±6.14)min,B组(24.20±9.28)min,C组(335.40±49.23)min,D组(451.00±50.10)min。A与B组两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。C、D组平均存活时间较A、B明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。D组与C组组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。供受体淋巴细胞反应,测得光密度值分别为:D组为(381.20±12.01),A组为(590.20±15.38),胸腺修饰组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论豚鼠到大鼠心脏异种移植中,豚鼠MSCs修饰大鼠胸腺,当克服HAR后可以延长供心存活时间,但并不能完全克服AVR的发生。     

去甲斑蝥素抑制人脑胶质瘤细胞增殖的体内外研究

目的研究去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)体内外对人脑胶质瘤细胞的抑制作用。方法常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、空白对照组和去甲斑蝥素6个剂量组,MTT法检测NCTD对人脑胶质瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率;建立SHG-44细胞裸鼠异种移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为阴性对照组、顺铂阳性对照组以及NCTD 3个剂量组,腹腔注射给药12 d后,取血检测血常规及肝肾功能;处死裸鼠,剥瘤称重并计算抑瘤率。结果 NCTD 6个剂量组显著抑制SHG-44细胞的增殖,且呈时间和剂量依耐性;并提高SHG-44细胞的凋亡率;NCTD 3个剂量组可抑制SHG-44细胞裸鼠异种移植瘤的生长,对移植瘤裸鼠血常规及肝肾功能无明显影响。结论 NCTD体内外均可抑制SHG-44细胞生长,并诱导肿瘤细胞凋亡。     

酪氨酸激酶受体抑制剂AL3810对人肺腺癌细胞A549的抗肿瘤作用

目的 评价酪氨酸激酶受体抑制剂AL3810对人肺腺癌细胞A549的体外及体内抗肿瘤作用.方法 ①采用MTT法评价AL3810对13种人体肿瘤细胞株和人胚肺细胞的体外增殖抑制作用.②采用流式细胞仪检测AL3810诱导细胞凋亡的能力及其对细胞周期的影响.③采用流式细胞仪检测AL3810诱导Caspase-3活化的作用.④划痕试验评价AL3810对A549细胞体外迁移的影响.⑤以人肺腺癌A549裸鼠异种移植瘤模型评价AL3810对肿瘤生长抑制作用的量效关系.结果 AL3810对大部分细胞均有很强的生长抑制作用.其能诱导A549细胞凋亡且具有时效性,能将细胞周期阻滞于G0-G1期;能将无活性的Caspase-3前体活化且具有时效关系;能时间依赖性地显著抑制A549细胞的体外迁移;对A549异种移植瘤生长具有良好的抑制作用,且具有量效关系.结论 酪氨酸激酶受体抑制剂AL3810具有显著的抗肿瘤活性,能剂量依赖性地抑制A549的生长.可能机制为诱导肿瘤细胞凋亡和阻滞细胞周期于G0-G1期、诱导细胞内Caspase-3活化、抑制细胞迁移等,值得进一步开发.     

猪胰岛移植物制备与异种移植治疗糖尿病

目的 增加胰岛收获量及减少移植后的宿主免疫排斥,异种移植治疗糖尿病。方法 利用机械法分离成年猪胰岛,葡聚糖离心纯化,移植物用羊膜囊包裹移植于糖尿病人大网膜。结果 每个成年猪胰岛６１￣９０万个,纯度达９０％;胰岛形态完整,对葡萄糖刺激反应胰岛素释放量是基础分泌的４倍;异种移植后病人不用免疫抑制剂即可保持正常血糖１￣３月,半年后仍可减少胰岛素用量６０％￣８０％。结论 利用成年猪胰岛行羊膜囊包裹异种移植