Sonic hedgehog信号通路对AGM区来源的成血-血管细胞增殖、迁移和分化作用

目的探讨Sonichedgehog（Shh）信号通路对小鼠主动脉-中肾-肾上腺（AGM）区来源的成血．血管细胞增殖、分化和迁移的影响。方法联合应用抗小鼠CD34、Flkl单克隆抗体（单抗）的磁珠，从孕11dBALB／c鼠胚胎AGM区分离培养成血-血管干细胞，并同时培养AGM区来源基质细胞，用流式细胞术对所分离细胞进行表型鉴定。用免疫组织化学法检测基质细胞表达Shh蛋白的情况；借助TransweU细胞共培养体系，观察在AGM的基质细胞共培养体系中，不同浓度的Shh活性肽及其单抗对成血．血管干细胞增殖、细胞周期、迁移及向内皮细胞定向分化的影响。结果AGM区基质细胞高表达Shh蛋白（阳性率高达90％以上），并可促进成血-血管干细胞增殖，其增殖效应可被10．00μg／mlShh单抗阻断；0．10-10．00μg／ml外源性Shh活性蛋白与AGM区基质细胞共培养的成血-血管干细胞，可使成血．血管干细胞长时间增殖，并促进细胞迁移，但并不诱导细胞凋亡与分化；而当0．10-10．00μ／ml外源性Shh活性蛋白作用于单独培养的成血-血管干细胞，细胞经过短时间增殖后，随后发生凋亡并向内皮细胞分化。结论Shh信号通路参与了成血-血管干细胞的增殖、分化、凋亡及迁移等生物学特性的调控，但其具体作用存在时空的差异，AGM区微环境对Shh信号通路具有整合和调试的作用。     

Shh信号阻断对胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响

目的研究胚胎发育相关信号通路Sonichedgehog（Shh）对人胰腺癌细胞系PANC-1生物学行为的影响。方法试验组以cyclopamine阻断Shh信号通路,并设立对照,四唑蓝（MTT）比色试验检测Shh信号通路特异性抑制剂cyclopamine对胰腺癌细胞系PANC-1增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞增殖指数（PI）和凋亡指数（越）,Transwell侵袭小室检测两组PANC-1细胞侵袭能力的变化。结果cyclopamine对PANC-1细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时问依赖性。cyelopamine作用后使胰腺癌细胞周期阻滞在G0／G1期,细胞凋亡增加;PANC-1的AI为15．2±0．54,PI为38．3±0．23（P〈0．05）.Transwell侵袭小室检测对照组穿透细胞数为（96±4）个,而实验组穿透数为（43±5）个。结论shh信号分子对胰腺癌细胞的增殖起维持作用;通过特异性阻断该信号通路,可以抑制胰腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,并抑制癌细胞的侵袭能力。     

Shh信号通路与先天性肛门直肠畸形的相关性研究

先天性肛门直肠畸形(ARM)是小儿最常见的消化道畸形,其病因至今未被完全阐明,多认为是环境因素和遗传因素共同作用所致。遗传因素方面,国内外研究均表明,Shh(Sonic Hedgehog)基因及其介导的信号通路与ARM的发生密切相关。了解Shh基因信号通路以及该通路与ARM的相关性为明确ARM病因及更好地进行诊疗提供方向及理论基础。     

Hedgehog信号通路效应蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义

目的探讨Hedgehog（Hh）信号通路中效应蛋白在人前列腺癌、癌旁正常前列腺组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测51例前列腺癌和癌旁正常前列腺组织中Shh、Ptchl和Glil的表达。结果Shh、Ptchl和Glil在前列腺癌组织中均为高表达,Shh与Ptchl的表达呈正相关。结论在前列腺癌Hh信号通路中Shh、Ptchl和Glil呈现高度表达状态,Glil更能准确地反映前列腺癌细胞的增殖水平和分化程度。     

Hedgehog信号传导通路在肝癌发生中的作用

目的研究Hedgehog信号传导通路在肝癌发生中的作用，以及抑制该通路对肿瘤细胞生长的影响。方法用免疫组织化学的方法研究了14例肝癌组织切片；使用RT—PCR和Westernblot方法分别研究了9例新鲜肝癌组织标本、4个肝癌细胞系和正常肝二倍体细胞中Hedgehog信号传导通路成员的转录和表达情况。结果免疫组织化学染色显示14例肝癌组织切片中，Hedgehog信号传导通路成员Gli阳性6例（42．9％），Ptch阳性10例（71．4％），Ihh阳性10例（71．4％），Smo阳性12例（85．7％）。RT—PCR和Westemblot的结果显示，在肝癌组织和肝癌细胞系中，Ihh、Ptch、Smo、Gli、Hip基因的转录和蛋白表达可检测到差异。环耙明（KAAD—cyclopamine）可使Hedgehog信号传导通路各成员的表达出现不同程度的降低。结论原发性肝癌中Hedgehog信号传导通路是活化的，环耙明有阻断Hedgehog信号传导通路的作用。     

三草尿毒灵通过调控Shh/Gli信号通路表达减轻肾脏纤维化的实验研究

目的 探究三草尿毒灵调控Shh/Gli信号通路抑制肾脏纤维化的作用与机制。方法：选取24只雄性BALB/c小鼠并随机分为假手术组、模型组、三草尿毒灵组以及CPN组,每组6只。制备单侧肾缺血再灌注损伤模型后第3天起,三草尿毒灵组每天给予三草尿毒灵汤剂（9g/kg）灌胃,CPN组每天给予CPN（5mg/kg）腹腔注射。术后第10天切除小鼠右侧肾脏,第11天处死小鼠,获取小鼠血清和肾脏进行肾功能检测、免疫组化、Western Blot和qRT-PCR分析。结果：与假手术组相比,模型组的血肌酐和尿素氮水平明显升高,而且相关纤维化指标的表达显著上调（P<0.05）。而三草尿毒灵与CPN均可明显保护小鼠肾功能,减轻肾脏纤维化（P<0.05）。进一步研究发现三草尿毒灵可以抑制肾脏Shh/Gli信号表达及成纤维细胞的活化。结论：三草尿毒灵可通过调控Shh/Gli信号通路的表达以减轻肾脏纤维化。     

TGF—β受体Ⅲ型与泌尿系肿瘤的研究进展

在肿瘤的分子致病机制研究中，TGF-β信号通路（trans—forming growth factor－β pathway）是受到全世界科研工作者广泛关注的通路之一。在该通路中活化的TGF-β配体通过与细胞表面特异性受体Ⅰ型（TβR1）、Ⅱ（TβR2）和Ⅲ型（TβR3）结合而发挥细胞生物学效应，该作用与人类肿瘤的发生、发展关系密切。     

前列腺癌细胞株PC-3中PKB信号通路拮抗TGF-β信号

目的研究前列腺癌中蛋白激酶B（PKB）信号通路对转化生长因子β（TGF-β）信号通路的调节作用，探讨两信号通路在前列腺癌发生发展中的作用。方法通过生长抑制实验、细胞周期停滞实验、荧光素酶报告基因、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫共沉淀检测PC-3细胞中PKB信号通路对TGF-β信号的调节作用。结果PKB信号通路可以抑制TGF-β反应性的CAGA报告基因活性；应用LY294002（PKB通路特异性抑制剂）可以增强TGF-β抗增殖和诱导细胞周期停滞作用；PKB信号通路的活化和抑制均不能影响TGF-β通路信号分子的表达；LY294002和TGF-β可以协同抑制cyclinD1的表达；LY294002增强TGF-β诱导的P15表达；PKB与Smad3之间存在蛋白质相互作用。结论PKB信号通路通过凋节cyclinD1和P15的表达拈抗TGF-β诱导的抗增殖和诱导细胞周期停滞作用，Smad3与PKB的相互作用可能介导了该作用。PKB信号通路通过上述拈抗性作用促进了前列腺癌的发生发展。     

Shh在散发性甲状腺髓样癌中的表达及其临床意义研究

目的 通过检测Sonic Hedgehog信号通路关键分子Shh在散发性甲状腺髓样癌表达情况,探讨其与散发性甲状腺髓样癌临床病理特征的关系及临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测11例甲状腺髓样癌患者癌组织及其癌旁组织病理蜡块标本中Shh的表达情况,分析其与临床病理特征的关系.结果 Shh蛋白主要表达于细胞膜与细胞质中.甲状腺髓样癌组织中Shh阳性表达率72.7％ (8/11)明显高于癌旁组织的9.1％(1/11).癌组织中Shh的表达与患者性别及年龄均无关(P＞0.05),而与肿瘤的TNM分期有关(P＜0.05).Shh在肿瘤直径≥1 cm和直径＜1 cm的表达阳性率分别为100％和20％,差异有统计学意义(P＜0.01).Shh在有淋巴结转移的肿瘤组织中和无淋巴结转移的肿瘤组织中的表达阳性率分别为100％和40％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Shh信号通路的主要配体Shh蛋白在散发性甲状腺髓样癌中表达升高,并与肿瘤发生、分期及淋巴结转移有关,提示Shh信号通路的异常激活在散发性甲状腺髓样癌中发挥一定的作用,Shh蛋白为散发性甲状腺髓样癌预后判断指标及潜在的治疗靶点.     

促红细胞生成素对糖尿病视网膜病变致病通路的调节分析

目的采用基因芯片分析技术探讨玻璃体腔内注射促红细胞生成素对糖尿病大鼠视网膜游在的保护作用机制及作用靶点。方法采用SD大鼠45只，并分为3组：正常组（15只）、糖尿病组（15只）及糖尿病玻璃体腔内注射促红细胞生成素组（15只）。运用腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）的方法建立糖尿病模型（60mg／kg BW）。玻璃体腔内注射促红细胞生成素在糖尿病发病后的第0，30d及120d进行，并于注射后4d将大鼠处死，提取视网膜RNA进行基因芯片分析。结果糖尿病组与眼内注射促红细胞生成素组相比在三个时间点有超过1000个基因发生了变化，正常对照组与耱尿病组相比发生变化的基因也超过了1000个。通过进一步分析得出在糖尿病发病的第4，34d及124d，糖尿病组与正常大鼠组相比均下调的通路分别为Pyruvate metabolism丙酮酸盐代谢通路，Galactose metabolism半乳糖代谢通路，Calcium signaling pathway钙离子信号通路，MAPK丝裂原活化蛋白激酶通路。三个时间点同样对照组均下调的通路分别为Starch and sucrose metabolism淀粉蔗糖代谢通路，Neuroactive ligand—receptor interaction刺激神经组织的配体受体相互作用通路，Focal adhesion表面黏附通路。而在给予EPO治疗组中，与同期糖尿病大鼠组相比，原本下调的MAPK丝裂原活化蛋白激酶通路被上调了，而原本上调的Focal adhesion表面黏附通路被下调了。结论糖尿病的发生增加了体内基因信号通路的变化，而给予眼内注射促红细胞生成素后使得原先有变化的信号通路发生了逆转。     

Shh信号阻断对胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响

目的研究胚胎发育相关信号通路Sonic hedgehog(Shh)对人胰腺癌细胞系PANC-1生物学行为的影响。方法试验组以cyclopamine阻断Shh信号通路,并设立对照,四唑蓝(MTT)比色试验检测Shh信号通路特异性抑制剂cyclopamine对胰腺癌细胞系PANC-1增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞增殖指数(PI)和凋亡指数(AI),Transwell侵袭小室检测两组PANC-1细胞侵袭能力的变化。结果cyclopamine对PANC-1细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。cyclopamine作用后使胰腺癌细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞凋亡增加;PANC-1的AI为15.2±0.54,PI为38.3±0.23(P<0.05)。Transwell侵袭小室检测对照组穿透细胞数为(96±4)个,而实验组穿透数为(43±5)个。结论shh信号分子对胰腺癌细胞的增殖起维持作用;通过特异性阻断该信号通路,可以抑制胰腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,并抑制癌细胞的侵袭能力。     

轻重型再生障碍性贫血患者Shh蛋白表达与外周血白细胞计数、淋巴细胞的关系分析

目的 不同分型再生障碍性贫血患者Shh蛋白表达与外周血白细胞计数、淋巴细胞的关系。方法 选取我院2020年12月至2022年11月收治的再生障碍性贫血患者68例，对比不同分型再生障碍性贫血患者的Shh蛋白表达水平、白细胞、淋巴细胞、红细胞以及中性粒细胞计数，根据患者Shh蛋白表达均值分析Shh蛋白高表达和低表达患者的白细胞、淋巴细胞、红细胞以及中性粒细胞计数水平，并分析Shh蛋白表达与白细胞、淋巴细胞、红细胞以及中性粒细胞计数的相关性。结果 重型再生障碍性贫血患者Shh蛋白表达显著低于非重型再生障碍性贫血患者，差异有统计学意义（P<0.05）。重型再生障碍性贫血患者白细胞、淋巴细胞、红细胞以及中性粒细胞计数均显著低于非重型再生障碍性贫血患者，差异有统计学意义（P<0.05）。低表达组患者白细胞、淋巴细胞、红细胞以及中性粒细胞计数均显著低于高表达组患者，差异有统计学意义（P<0.05）。相关性分析结果显示，患者Shh蛋白表达水平与白细胞、淋巴细胞、红细胞以及中性粒细胞计数均呈正相关性（P<0.05）。结论 再生障碍性贫血患者Shh蛋白表达明显降低，重型再生障碍性贫...     

Shh、Ptch、Gli1与CyclinB1-CDK1在肝癌发生发展过程中的改变

目的观察大鼠诱发肝癌过程中Shh信号通路相关蛋白及细胞周期蛋白的表达变化,探讨其在肝癌发生发展过程中的作用。方法利用二乙基亚硝胺(DEN)制备诱发性大鼠肝癌模型,通过HE染色观察肝组织的形态学变化,应用免疫组织化学方法检测Shh、Ptch、Gli1、CyclinB1、CDK1蛋白在诱发性肝癌发生过程中的表达变化。结果根据HE染色结果将实验动物分为正常对照组、肝细胞损伤期、肝细胞增生-硬化期和肝细胞癌变期。Shh、Ptch、Gli1蛋白阳性表达细胞主要分布在增生结节、癌结节、小叶间胆管上皮细胞和癌周组织中,其阳性表达率均随肝癌发生发展过程逐渐增高的趋势;CyclinB1和CDK1阳性表达的细胞主要分布于门管区、肝小叶的周边及癌结节内,在肝细胞增生-硬化期和肝细胞癌变期大鼠肝组织中表达均高于正常对照组。结论 Shh信号通路被激活后,可通过影响CyclinB1和CDK1蛋白的表达促进细胞G2/M期转变,完成有丝分裂,导致细胞失控性增殖,促进肝癌的发生发展。     

MAPK通路参与小鼠骨实质来源间充质干细胞向成骨的分化

本研究探讨丝裂原活化蛋白激酶（mitogen—activated protein kinase,MAPK）通路对间充质干细胞（mesen chymal stemcell,MSC）向成骨分化的影响。采用骨片法分离培养C57／BL小鼠骨实质来源的MSC;取第4代MSC进行成骨诱导,利用Western blot检测在MSC向成骨分化过程中MAPK所包含的细胞外信号调节激酶（ex—tracellular signal—regulated kinase,ERK）、c-JunN端激酶（c—Jun N—terminal kinase,JNK）和p38通路磷酸化水平的变化,以及分别加入3种相应通路抑制剂PD98059、JNK Ⅱ和SB203580后碱性磷酸酶（ALP）和钙沉积的相应变化。结果表明：MSC在向成骨分化过程中MAPK通路所包括的ERK、INK和p38通路均发生活化;加入PD98059后,ALP的表达在诱导早期显著提高,而后无显著改变;加入JNKII后不影响ALP和钙的沉积;而加入SB203580后,可显著抑制MSC中ALP的表达和钙的沉积。结论：p38通路在MSC向成骨分化中起正调控作用,ERK通路可能在早期起负调控作用,而JNK通路在其中未见显著作用。     

Rap1 gap基因在造血细胞中的调控功能和表达

Rap1是Ras超家族中一种微小G蛋白。在不同的组织细胞中,Rap1在调节细胞增殖、分化以及黏附方面都发挥着十分重要的作用。在调控细胞增殖和分化的过程中,Rap1可能通过调控细胞内促丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）以及细胞外信号激酶（ERK）通路来发挥作用。Rap1对特定种类细胞的ERK信号途径是增强还是减弱,取决于该种细胞是否具有Raf1或B—Raf。Rap1调控的活性通路独立于Ras通路,但两者之间又相互作用。而Ras基因的致癌突变发生在超过30％的人类恶性肿瘤中。本综述对Rap1在造血细胞发育中的调控功能,以及它在恶性血液病中的改变和作用作一简明扼要的介绍。     

Notch1信号通路与白藜芦醇抗急性T淋巴细胞白血病作用机制研究进展

摘要: 急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）是一类预后不良的恶性淋巴细胞增殖性疾病。T-ALL的发生与Notch1及其介导的信号通路密切相关。Hes-1基因是Notch1的靶基因,被激活后通过PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制抑癌基因p53表达阻止细胞凋亡,诱导TALL发生。白藜芦醇（Res）是一种具有化学防癌作用的多酚类植物抗生素。Res对T-ALL Molt-4细胞具有抑制增殖、诱导凋亡的作用。但Res是否通过Notch1通路发挥作用及其机制尚不十分清楚。本文就Notch1信号通路与T-ALL的发生、治疗以及Notch1信号通路与白藜芦醇抗T-ALL作用机制的研究现状作一综述。     

14-3-3σ基因影响人低分化鼻咽癌细胞CNE-2的信号通路

目的探讨14-3-3σ对鼻咽癌CNE-2细胞的信号通路的影响。方法通过反相蛋白质阵列检测14-3-3σ转染鼻咽癌CNE-2细胞前后特定蛋白质表达量的变化。结果10种蛋白的表达量在14-3-3σ转染CNE-2细胞的前后发生了大于15％的变化,分别是Akt与pAkt（S473）,mTOR与pmTOR,ERK2,p-p38,pSTAT3（Y705）与pSTAT3（S727）及Rb与p—Rb。结论14-3-3σ在鼻咽癌CNE．2细胞中所起的作用可涉及4条信号通路,分别是Akt通路、MAPK通路、JAK-STAT通路及Rb—E2f通路。     

Sonic hedgehog信号通路调节痛觉敏化的研究进展

神经病理性痛是一种由于躯体感觉神经系统的损伤或疾病而直接造成的疼痛。Sonic hedgehog(Shh)信号转导通路是经典的控制胚胎发育的信号转导途径。近年来发现,该信号途径不仅参与胚胎神经系统模式发育,在成熟机体的稳态调节中也发挥重要作用,因此正逐渐成为信号转导领域新的研究热点。最新文献表明,Shh通路调节神经病理性疼痛的痛觉敏化,且其可能机制与星形胶质细胞激活,炎症因子以及突触可塑性的改变相关。     

华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科胡波教授团队

华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科胡波教授团队：一直致力于神经系统相关疾病的信号调控机制研究，重点探讨胚胎发育中重要信号途径Shh—G1i在神经母细胞瘤中的重要作用及调控机制，取得一定成果，有一定的创新性见解，     

PI3K/Akt信号通路与脑出血的研究进展

磷脂酰激醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路作为经典的细胞信号转导途径,在细胞生长、增殖、分化和凋亡等多种生物学过程中发挥作用。脑出血是一种高致残率和高致死率的脑血管疾病,该通路在脑出血发生发展中的研究也备受关注。该文以PI3K/Akt信号通路为主线,对该通路的结构及生物学特点、与脑出血之间的关系以及基于该通路探讨药物对脑出血的作用进行综述,为临床脑出血的治疗提供新的思路。