妊娠滋养细胞肿瘤中E-cadherin和增殖细胞核抗原的表达

目的：研究妊娠滋养细胞肿瘤(GTT)中E-cadherin与PCNA的表达意义。方法：采用免疫组化SP法检测了妊娠滋养细胞肿瘤中E-cadherin与PCNA的表达。结果：E-cadherin在正常早期绒毛(NP)及其肿瘤(CM、IM、OCA)中表达率分别为56．29％、42．07％、19．30％、7．14％,各组间差异非常显著。PCNA在NP、CM、IM和OCA中表达率分别为10．40％、20．76％、53．60％、51．95％,各组间差异非常显著。E-cadherin与PCNA阳性率呈负相关。结论：E-cadherin和PCNA的检测有助于良恶性GTT的鉴别;E-cadherin表达减弱或消失促进了GTT的增殖活性。     

诱导型一氧化氮合酶对大鼠胰岛细胞凋亡的影响

目的:探讨细胞因子和诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)对体外培养的大鼠胰岛细胞凋亡和功能的影响及其机制。方法:大鼠胰岛细胞体外培养,随机分组,培养液中分别加入细胞因子IL-1β、TNF-α和/或iNOS抑制剂氨基胍,分为空白对照组、细胞因子组、氨基胍组、氨基胍+细胞因子组。检测指标包括:培养液NO水平和组织iNOS、结构型NOS活性,RT-PCR检测胰岛组织中iNOS基因和凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达情况,AO/EB染色检测胰岛存活,胰岛素释放实验检测胰岛功能。结果:与细胞因子IL-1β和TNF-α共同培养后,大鼠胰岛组织中iNOS的表达增强,活性显著提高(38.93±4.72)U/mL,NO水平上升(313.0±35.4)mol/L,而结构型NOS没有变化;同时胰岛促凋亡基因表达上调,抗凋亡基因表达下降,细胞的存活率下降,胰岛素分泌大大减少。加入氨基胍后,随着胰岛组织中iNOS的活性明显受到抑制,胰岛的凋亡程度减轻,存活和胰岛素分泌情况都明显改善。结论:iNOS在细胞因子诱导的胰岛细胞凋亡中起到十分关键的作用,而氨基胍通过抑制iNOS活性,减轻了细胞因子的损害,降低了胰岛凋亡水平,改善胰岛的存活与功能。     

褪黑激素对小鼠睾丸生精细胞凋亡和睾丸间质细胞nNOS表达的影响

目的：观察外源性褪黑激素(MT)对睾丸生精细胞凋亡和nNOS表达的影响,探讨MT诱导生精细胞凋亡的可能机制。方法：20d和30d小鼠,应用化学发光法检测血清睾酮浓度,TUNEL测定生精细胞凋亡,免疫组化,SABC法观察nNOS在睾丸中的表达。结果：20d和30d实验组血清中睾酮水平明显下降,TUNEL阳性生精细胞数显著增多,TUNEL阳性生精细胞数与睾酮浓度呈负相关;20d实验小鼠中睾丸间质nNOS阳性细胞数与对照组相比明显减少,且与睾酮浓度呈正相关,而与TUNEL阳性生精细胞数呈负相关。结论：MT具有促进生精细胞凋亡的作用,与睾酮分泌受抑制有关;青春期前MT引起生精细胞凋亡可能还与nNOS表达有关。     

LPS性肺损伤大鼠一氧化氮合酶表达和肺细胞凋亡变化

目的: 观察内毒素性肺损伤过程中肺细胞凋亡和一氧化氮合酶（NOS）mRNA表达的时程性变化及关系,探讨LPS性肺损伤（ALI）的发病机制。方法: 健康雄性SD大鼠48只,随机分成2组:①对照组：静注等量生理盐水；②模型组(LPS组)：静注LPS复制ALI模型,分别于给药1、3、6、9及12h后采集样品；逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定肺组织中NOSmRNA表达变化；电镜、流式细胞术检测肺细胞凋亡率；免疫组化法测定Bcl-2和Bax；光镜、电镜观察肺组织病理变化。结果: 与对照组比较，LPS组iNOSmRNA表达随时间延长而增强，给予LPS 3 h后有显著差异(P<0.05)，eNOSmRNA随时间延长而降低，给LPS 3 h时有显著差异(P<0.05)，nNOSmRNA在观察时间内没有变化；光镜和电镜下可见在观察时间内1 h起肺损伤随时间延长加重；流式细胞术显示LPS组凋亡细胞随时间延长增多，9 h达高峰，12 h有所降低；免疫组化结果显示，LPS组随时间延长Bcl-2减少，主要表现在肺上皮细胞，Bax增多；对照组无明显变化。结论: 不同一氧化氮合酶在ALI中表达强度不同；抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax是ALI时调节细胞凋亡的途径之一；一氧化氮合酶可能通过调节Bcl-2和Bax平衡而影响凋亡。     

乳腺叶状囊肉瘤的增殖细胞核抗原的表达及其意义

目的研究乳腺叶状囊肉瘤增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化ＳＰ法对１００例乳腺叶状囊肉瘤及３９例乳腺腺纤维瘤进行检测。结果叶状囊肉瘤中间质性瘤细胞呈ＰＣＮＡ阳性着色者８６例（８６％），不同组织学级别者ＰＣＮＡ指数之间有显著差异（Ｆ＝８５．３３，Ｐ＜０．０１），分化越差，ＰＣＮＡ平均指数越高，ＰＣＮＡ指数与组织学分级密切相关（ｒ′ｓ＝０．７７）。Ⅰ级叶状囊肉瘤与乳腺腺纤维瘤间质性瘤细胞丰富组的ＰＣＮＡ指数也有显著差异（ｔ＝３．４２，Ｐ＜０．０１）。ＰＣＮＡ指数与核分裂相计数间相关关系并不密切（ｒ＝０．３９）。结论用ＰＣＮＡ来反映乳腺叶状囊肉瘤增殖活性，辅助进行组织学分级，鉴别良恶交界性病变及估测预后，都具有一定的实用价值。     

肝细胞癌一氧化氮合酶的表达及其临床意义

目的：研究肝细胞癌（HCC）组织中一氧化氮合酶（NOS）的表达及其临床意义。方法：通过免疫组化的方法检测51例HCC组织和46例癌旁肝组织（LTBC）中NOS1、NOS2、NOS3的表达,探讨3指标与HCC单发还是多发、肿瘤大小、有否合并肝硬化、肿瘤坏死、组织分化程度、门静脉癌栓形成、肝外转移和预后等的关系。结果：NOS1、NOS2、NOS3在46例LTBC的阳性率均明显高于51例HCC组织的阳性率（P<0.01）;NOS1两年内复发组的阳性率明显高于无复发组（P<0.01）;NOS2在无癌栓形成组的阳性率明显高于伴有癌栓形成组（P<0.05）;NOS3在复发组的阳性率明显高于无复发组（P<0.01）。结论：NOS的表达与HCC的组织分化程度、门静脉癌栓形成和预后等生物学行为有密切关系     

寒冷应激对小鼠脑内一氧化氮及一氧化氮合酶的影响研究

目的探讨寒冷应激(-10℃、10h)对小鼠脑内一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的影响及意义.方法将40只雄性昆明品系小鼠随机分为对照组和实验组,每组20只.寒冷应激实验结束后取脑组织检测一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性.结果对照组NO及NOS分别为21.12±8.68μmol/gprot、2.21±0.57U/mgprot.实验组为16.03±6.98μmol/gprot、2.84±0.79U/mgprot.寒冷应激后NO水平降低并有统计学意义(t=2.58,P<0.05),NOS活性增高并有统计学意义(t=-2.72,P<0.05).应激后NO与NOS呈显著性负相关(r=-0.461,P<0.05).结论神经递质NO及NOS参与了中枢神经寒冷应激反应,且NO水平降低、NOS活性增高,可能对中枢神经细胞主要起保护作用.在寒冷应激后期吸入适量NO可能增强脑神经元对寒冷应激的耐受性.     

db/db自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞增殖及凋亡研究

目的　研究糖尿病对生殖细胞增殖和凋亡的影响。　方法　以免疫组织化学ABC法检测增殖细胞核抗原 (proliferationcellnucleusantigen ,PCNA)检测生殖细胞的增殖情况 ,电镜和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)检测凋亡的生殖细胞。　结果　PCNA阳性率随糖尿病病程进展 (糖尿病组 )和年龄增加 (对照组 )均呈明显下降趋势 ,但每年龄段糖尿病组PCNA阳性率均明显低于相应正常对照组。凋亡管横断面数及凋亡阳性率糖尿病组均较正常高 ,而且随糖尿病病程进展呈明显增加趋势 ,对照组中随加龄二者有增加。电镜下 ,糖尿病组小鼠睾丸精原细胞、精母细胞和精子细胞均可见到核染色质凝集、边集 ,凋亡小体形成和降解等凋亡过程。　结论　db/db自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞PCNA表达减弱 ,TUNEL标记凋亡细胞增加 ,说明糖尿病使生殖细胞增殖与凋亡的平衡破坏 ,这可能是糖尿病生殖功能障碍的原因     

不同固定剂对检测增殖细胞核抗原表达的影响

不同固定剂对检测增殖细胞核抗原表达的影响牛兆山邹伟项锋刚郭成浩增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉ－ｇｅｎ，ＰＣＮＡ）作为评价细胞增殖指数的指标之一，已广泛地应用于肿瘤病理学研究中。但许多证据表明，ＰＣ－ＮＡ的免疫反...     

实验性精索静脉曲线大鼠睾丸组织和血清一氧化氮和一氧化氮合酶的改变

目的：检测实验性精索静脉曲线大鼠睾丸组织和血清NO含量和NOS活性的改变，以进一步阐明精索静脉曲线的发生机制。方法：通过手术方法建立大鼠精索静脉曲张模型，检测NO和NOS的变化。结果：实验组左侧睾丸组织NO含量显著高于对照组左侧睾丸含量；实验组血清NOS活力明显低于对照组。结论：实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织和血清NO和NOS有改变。     

大鼠生精小管体视学及PCNA、凋亡表达的发育变化研究

目的　探讨大鼠生精小管面积、管腔等体视学参数与生精细胞增殖、凋亡在发育过程中的变化及其之间的关系。　方法　应用免疫细胞化学、凋亡细胞原位检测和图像分析技术。　结果　大鼠从出生后生精小管平均面积逐渐增加 ,于生后 3月龄时达到最大 ,除与生后 6月龄组差异不显著外 ,与其他各组间差异显著 (P <0 0 5 ) ,6月龄后生精小管面积逐渐减少 ,2 5月龄时生精小管面积与 3周龄时相当 ;生精小管在 3周龄时开始出现管腔 ,在生后 6月龄时其平均面积最大 ,与其他各组间差异显著或极显著 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,至生后 2 5月龄 ,管腔不明显 ,多被结缔组织填充 ;生精细胞间于生后 10月龄开始出现空泡 ,生后 2 5月龄空泡化明显 ,生精小管基膜及间质血管增生严重。PCNA及凋亡的阳性表达在生后 3周龄出现高峰 ,生后 2 5月龄细胞凋亡又出现 1个高峰。　结论　 1 生后 3周龄至 3月龄生精细胞增殖旺盛是生精小管平均面积迅速增大的原因之一。 2 生后一定阶段生精小管管腔的出现与生精细胞的凋亡有关 ,而生精小管管腔的出现有利于精子的生成与运输。 3 衰老大鼠生殖功能的下降与其组织结构的纤维化及生精小管基膜厚度增加等因素有关     

咖啡因对胎鼠及乳鼠睾丸生殖细胞数量和PCNA表达的影响

为了深入了解咖啡因(Caffeine,Caf.)对胎儿、新生儿生殖细胞数量及其PCNA(增殖细胞核抗原)表达的影响,本实验采用低(0.3mM)、中(0.6mM)、高(1.2mM)浓度Caf.体外培养SD孕18天胎鼠、0天及4天乳鼠睾丸组织块,培养时间分别为1周、2周、3周,观察Caf.对睾丸内生殖细胞数量及其表达PCNA的影响.结果如下:(1)18天胎鼠睾丸培养组织内生殖细胞数量受Caf.影响最小,0天乳鼠次之,4天乳鼠受影响较大.(2)低浓度的Caf.对生殖细胞数量影响较少;中等浓度的Caf.在培养三周后,生殖细胞的数量才减少;而高浓度的Caf.在培养二周后,生殖细胞数量已有下降,三周更明显.(3)Caf.对生殖细胞PCNA表达阳性率无明显影响,但PCNA含量在大多数实验组都有降低.由此可知高浓度Caf.长时间培养后使生殖细胞数量减少,降低了生殖细胞PCNA的含量.     

小鼠肺发育中细胞增殖与凋亡及相关调控基因的表达

目的 探讨小鼠肺发育过程细胞增殖与凋亡的变化规律及凋亡相关基因ｐ５３、ｂｃｌ－２ｄ在肺发育中的表达意义。方法 不同发育天数的小鼠肺组织,采用免疫组织化学及ＴＵＮＥＬ法,观察细胞增殖与凋亡及相关基因ｐ５３、ｂｃｌ－２的表达。结果 １．胎１４和１６ｄ肺ＰＣＮＡ阳性细胞数达到高峰;之后ＰＣＮＡ阳性率逐渐下降;生后４到１４ｄ,又恢复低水平的细胞增殖,２．小鼠肺发育过程中出现两个细胞凋亡高峰：即胎１４至１６     

bcl—2基因在小鼠睾丸及试验隐睾中表达的研究

目的 研究ｂｃｌ－２基因在正常小鼠睾丈中的定位表达及试验隐睾所导致的改变。方法 以Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ印迹法从蛋白水平检测ｂｃｌ－２基因在正常小鼠睾及及试验隐睾中的表达、变化;地高辛标记ｂｃｌ－２基因ｃＤＮＡ探针,石蜡组织切片原位杂交技术,从ｍＲＮＡ水平检测ｂｃｌ－２基因在小鼠精上皮中的定位及试验隐睾所导致的改变。结果 ｂｃｌ－２蛋白在正常小鼠睾丸中有较丰富的表达,试验隐睾导致其表达明显降低;ｂｃｌ－２基因在生精细胞中有较高水平的ｍＲＮＡ转录,表达细胞主要为各级生精细胞,支持细胞和间质细胞未见表达,隐睾术后仍然保持较高水平的ｍＲＮＡ转录。结论 ｂｃｌ－２蛋白可能在生精细胞主动退化的调节中起着重要作用。     

大鼠胸腺内促性腺激素释放激素-mRNA的表达

目的 对大鼠胸腺ＧnＲＨ的存在及胸腺ＧnＲＨ－mＲＮＡ的表达进行研究。方法 采用免 主原位杂交方法。结果 大鼠胸腺内不仅有ＧnＲＨ样物质，而且有ＧnＲＨ－mＲＮＡ的表 达。这种ＧnＲＨ除了表达在胸腺上皮细胞以外，在皮质和髓质的部分淋巴细胞及巨噬细胞也有表达。结论 ＧnＲＨ可能是一种在免疫系统和神经内分泌系统之间起双向直接联系作用的因子。     

发育期小鼠肾小体细细胞增殖与凋亡的研究

目的研究小鼠肾小体发育过程中细胞增殖与凋亡的变化规律.方法采用PCNA免疫组织化学方法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL染色法）和光、电镜技术,对发育不同阶段肾小体的细胞增殖和凋亡进行观察.结果 PCNA免疫组织化学染色显示：在Ⅰ和Ⅱ期肾小体内几乎所有细胞PCNA呈强阳性反应,Ⅲ、Ⅳ期肾小体PCNA阳性细胞数逐渐减少,Ⅴ期肾小体PCNA阳性细胞少见.TUNEL阳性细胞多出现在出生前,主要在Ⅲ、Ⅳ期肾小体表达.电镜观察：早期肾小体所有细胞核分裂象机率均高,Ⅲ期肾小体中的内皮细胞、足细胞核分裂象机率高,Ⅳ期肾小体中只见到内皮细胞核分裂象,Ⅴ期细胞核分裂象少见.电镜下所见的细胞凋亡多在Ⅲ、Ⅳ期肾小体,其中以内皮细胞、肾小囊壁层细胞凋亡居多.结论细胞增殖与凋亡行为在小鼠肾小体发育的整个过程中普遍存在,协同参与了调控肾小体正常发育过程.     

bax基因在小鼠睾丸及实验性隐睾中表达的研究

目的 研究ｂａｘ基因在正常小鼠睾丸中的表达、定位及隐睾所导致的改变。方法 以Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｏｔｔｉｎｇ印迹法从蛋白水平检测ｂａｘ基因在正常小鼠睾丸及实验性隐睾中的表达、变化;原位杂交技术及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交法从ｍＲＮＡ水平检测ｂａｘ基因在小鼠生精上皮中的定位及隐睾所导致的改变。结果 ｂａｘ基因在正常小鼠睾丸中有弱表达,实验性隐睾导致其表达明显增强,表达细胞为主要为精母细胞、精原细胞和精子细胞     

高压氧对短暂前脑缺血小鼠海马脑红蛋白表达的影响

目的 观察小鼠脑缺血再灌注以及高压氧治疗后海马脑红蛋白表达的变化,探讨高压氧对脑红蛋白表达的影响及其意义.方法 雌性C57B/6N小鼠随机分为假手术对照组、缺血再灌注48h组(48h I/R组)及缺血再灌注48h加高压氧治疗组(48h HBO组).对各组小鼠脑组织神经元进行HE及免疫组织化学染色、图像学分析及统计学处理.结果 48h I/R组及48h HBO组的脑红蛋白表达均高于假手术组(P＜0.01和P＜0.001),48hHBO组吸光度高于48h I/R组(P＜0.01).结论 高压氧对缺血性脑损伤有显著治疗作用,提高脑红蛋白的表达水平可能是其治疗的机制之一.     

8-Br-cAMP对人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞抑癌基因表达的效应

目的 探讨８－Ｂr－CＡＭＰ对人视网膜母细胞瘤之ＨＸＯ－Ｒb４４细胞抑癌基因表达的 效庆及其对细胞生长的影响。方法 应用原位杂交、ＲＮＡ斑点印迹检测Ｐ１６＾ＩＮＫ４mＲＮＡ、p２１＾ＷＡＦ１mＲＮＡ、wp５３mＲＮＡ、mp５３mＲＮＡ和ＲｂｍＲＮＡ,应用免疫组织和化学和蛋白质斑点印迹技术检测ＰＣＮＡ－ＩＲ、p２１＾ＷＡＦ１－ＩＲ、 ｐ１６－ＩＲ、ｐＲｂ－ＩＲ、ｃｄｋ２、ＩＲ和ｃｄｋ４－ＩＲ。结果 在人ＨＸＯ－Ｒ