痤疮患者经异维A酸系统治疗后外周血CD14~+单核细胞TLR2的表达变化

目的:探讨Toll样受体2(Toll like receptor 2,TLR2)在寻常痤疮发病中的作用及异维A酸治疗痤疮的部分抗炎机制。方法:应用流式细胞术检测35例痤疮患者经异维A酸治疗前后外周血CD14+单核细胞TLR2的表达,并与对照组25例健康人进行比较。结果:未经治疗的痤疮患者外周血CD14+单核细胞TLR2表达明显高于对照组(t=10.63,P<0.01),治疗后TLR2的表达与对照组无明显差异(t=1.73,P>0.05)。结论:TLR2的表达与痤疮的发病相关;异维A酸治疗后可明显减少外周血CD14+单核细胞TLR2的表达,从而抑制炎症反应的发生。     

异维A酸对中重度痤疮患者血清白细胞介素4表达的影响

目的:探讨异维A酸对痤疮患者外周血白细胞介素4(IL-4)表达的影响。方法:选择34例中重度痤疮患者口服异维A酸胶丸治疗,每次10 mg,每天2次,连续治疗12周。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者治疗前后及28名健康对照者外周血中IL-4的表达水平。结果:治疗前中重度痤疮患者血清中IL-4的水平明显高于健康对照者(t=5.61,P0.05);治疗后中重度痤疮患者血清中IL-4的水平较治疗前明显降低(t=-5.34,P0.05),与正常对照组相比差异无统计学意义(t=1.49,P0.05)。结论:异维A酸能抑制中重度痤疮患者外周血IL-4的过度表达,恢复Th1和Th2细胞功能的动态平衡状态,达到良好治疗效果。     

寻常性银屑病患者外周血单核细胞TLR4的表达及意义

目的：探讨寻常性银屑病患者外周血单核细胞Toll样受体4（Toll—likereceptor4，TLR4）的表达及其临床意义。方法：采用流式细胞术检测40例寻常性银屑病患者及30例正常人对照组外周血单核细胞TLR4的表达。结果：寻常性银屑病患者外周血中单核细胞TLR4的表达较正常人对照组明显增高（P〈0．01），而进展期的寻常性银屑病患者外周血中单核细胞TLR4的表达高于稳定期的患者的表达（P〈0．05）。结论：TLR4及其介导的天然免疫应答在银屑病发病机制中起重要作用，而寻常性银屑病患者外周血单核细胞TLR4表达与银屑病PASI评分无关，但与银屑病分期有关。     

Toll样受体2在显性梅毒患者外周血中的表达

目的：研究CD14^＋单核细胞Toll样受体2（TLR2）在显性梅毒患者外周血中的表达，探讨其在梅毒发病机制中的作用。方法：采用双色免疫荧光抗体染色流式细胞仪检测32例显性梅毒患者外周血中TLR2的表达水平，并以20例正常人作为对照组。结果：①显性梅毒患者外周血中TLR2的表达水平显著低于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．001）；一期梅毒患者外周血中TLR2的表达水平明显低于二期梅毒患者，差异有统计学意义（P〈0．001）。②TRUST试验滴度≥1：8组的患者外周血TLR2的表达水平略高：TRUST试验滴度〈1：8组，但二组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。③显性梅毒患者外周血TLR2的表达水平与血清TRUST滴度不存在相关关系（P〉0．05）。结论：TLR2的表达水平低下提示梅毒患者可能存在细胞免疫功能失调和细胞免疫抑制。     

异维A酸对肽聚糖诱导的SZ95人皮脂腺细胞相关炎症基因表达的影响

目的 观察异维A酸体外对肽聚糖诱导的SZ95人皮脂腺细胞中与痤疮发病可能相关的炎症基因表达的影响,探讨异维A酸治疗痤疮的分子机制。方法 将培养的SZ95细胞分成3组,对照组不做处理,另外两组用20 mg/L肽聚糖单独（肽聚糖组）或联合10-5 mol/L异维A酸（共刺激组）共同处理。作用3 h后,实时荧光定量PCR检测上述各组SZ95细胞中白细胞介素（IL）-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α（TNF-α）以及Toll样受体2（TLR2）和其下游基因MyD88 mRNA表达水平;作用24 h后酶联免疫吸附试验检测各组细胞培养上清液中IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、 TNF-α蛋白表达水平;作用48 h后Western印迹检测TLR2和MyD88蛋白表达水平。采用SPSS 23软件, 3组间指标的比较采用单因素方差分析,并采用Bonferroni校正进行两两比较。结果 对照组、肽聚糖组和共刺激组IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α mRNA和蛋白表达水平差异均有统计学意义（均P < 0.01）;其中,肽聚糖组上述指标均高于对照组及共刺激组,差异均有统计学意义（均P < 0.016 7）。上述3组间MyD88 mRNA表达差异也均有统计学意义（分别为6.707 ± 0.950、10.270 ± 0.477、7.892 ± 0.900,F = 10.17,P < 0.01）,肽聚糖组高于对照组及共刺激组,差异均有统计学意义（t值分别为4.740、3.298,均P < 0.016 7）。肽聚糖组TLR2 mRNA和蛋白表达水平均高于对照组,但与共刺激组比较差异无统计学意义。结论 异维A酸抑制肽聚糖诱导的SZ95人皮脂腺细胞中与痤疮发病可能相关的炎症因子的表达,其机制可能是通过抑制天然免疫应答中MyD88的表达而非TLR2本身,这可能是异维A酸治疗痤疮的机制之一。     

寻常痤疮患者外周血单核细胞TLR2的表达及其与IL-8和TNF-α的相关性研究北大核心CSCD

目的 探讨Toll样受体2（TLR2）在寻常痤疮发病中的作用及意义.方法 选择轻、中、重度痤疮患者各30例,采用流式细胞仪检测其外周血CD14＋单核细胞TLR2的表达,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL-8和TNF-α的水平.另取30例正常人作为对照组.结果 轻、中、重度组痤疮患者外周血单核细胞表面TLR2的表达均显著高于正常人对照组（P＜0.01）.各组患者血清中IL-8和TNF-α的水平也显著高于正常人对照组（P＜0.01）.直线相关分析显示,各组患者TLR2的表达与IL-8、TNF-α水平均呈正相关性（r分别为0.382、0.517、0.436、0.641、0.725、0.593,P＜0.05）.痤疮严重程度与TLR2的表达呈正相关性（r=0.406,P＜0.01）.结论 TLR2表达水平及相关细胞因子浓度与痤疮严重程度密切相关.     

玫瑰糠疹与HHV-7感染的相关性及外周血T淋巴细胞亚群的研究

目的：探讨玫瑰糠疹发病与人类疱疹病毒-7（HHV-7）的关系及外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法：用PCR和免疫组化的方法研究了玫瑰糠疹发病与HHV-7的关系及外周血T淋巴细胞亚群比例的变化。结果：玫瑰糠疹患者HHV-7阳性率（88．89％）明显高于健康对照组（52．78％，X^2=9．68，P〈0．01）；玫瑰糠疹患者CD3^＋比例明显低于健康对照组（t=5．09，P〈0．01），CD4^＋比例低于健康对照组（t=2．07，P〈0．05），CD8^＋比例明显高于对照组（t=4．76，P〈0．01），CD4^＋／CD8^＋比例与对照组相比明显降低（1．12：1．30，t=4．31，P〈0．01）；HHV-7感染者CD4^＋／CD8^＋值明显低于HHV-7非感染者（Z=4．9525，P〈0．001）。结论：玫瑰糠疹的发病可能与HHV-7感染后引起的细胞免疫反应有关。     

异维A酸加安体舒通治疗女性青春期后痤疮疗效观察

目的观察异维A酸胶丸联合安体舒通治疗中度女性青春期后痤疮的疗效。方法采用随机对照的方法，治疗组患者采用异维A酸及安体舒通每日口服，对照组0．025％维A酸乳膏每晚外用及安体舒通每日口服。结果治疗组痊愈率和有效率分别为67．5％和87．5％，对照组痊愈率和有效率分别为19．4％和47．2％。两组间疗效比较，差异有非常显著性（P〈0．01），治疗组显著优于对照组。结论异维A酸胶丸联合安体舒通口服治疗中度女性青春期后痤疮疗效确切。     

寻常型银屑病患者外周血单个核细胞TLR9-mRNA的表达及与IFN-γ的相关性分析

目的：探讨寻常型银屑病患者外周血外周血单一核细胞（PBMCs）Toll样受体9（Toll—like receptor9,TLR9）的表达及其与血清中IFN-γ浓度的相关性,初步探讨TLR9在寻常型银屑病发病中的作用。方法：采用荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞TLR9的表达,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IFN-γ的浓度。另取20例正常人作为对照组．结果：寻常型银屑病患者外周血中单核细胞TLR9的表达较正常人对照组明显增高（P〈0．01）,TLR9表达与血清IFN-γ浓度变化呈正相关（P〈0．05）。结论：结果提示TLR9及其介导的天然免疫鹰答在银屑病发病机制中起重要作用,其机制可能是通过上调IFN-γ的表达促使炎症因子产生和分泌而介导银屑病的发病。     

尖锐湿疣复发患者外周血单核细胞Toll样受体3、4、9的表达及意义

目的：观察尖锐湿疣复发患者外周血单核细胞（PBMC）3种Toll样受体TLR3、TLR4和TLR9的表达情况。方法：采用双色免疫荧光抗体染色流式细胞术检测26例复发CA患者PBMC上TLR3、TLR4和TLR9的表达水平,并以30例正常人作为对照组。结果：复发尖锐湿疣患者PBMC上TLR4和TLR9的表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;而TLR3的表达水平,两组间无统计学意义（P〉0．05）。结论：人乳头瘤病毒（HPV）的反复感染可上调PBMC TLR4和TLR9的表达,TLR4和TLR9在尖锐湿疣的复发机制中可能起着重要作用。     

系统性硬皮病CD4+T细胞中CD70mRNA及蛋白表达水平的观察

目的:研究系统性硬皮病(SSc)患者外周血CD4+T细胞中CD70的表达水平.方法:应用密度梯度离心法分离17例SSc患者(女性12例,男性5例)和13例对照者(女性8例,男性5例)的外周血单个核细胞,磁珠分选CD4+T细胞.RT-PCR检测CD4+T细胞中CD70 mRNA的表达水平;流式细胞术检测CD70蛋白在CD4+T细胞的表达水平.结果:与对照组相比,SSc患者CD4+T细胞中CD70 mRNA和CD70蛋白表达均明显升高(P=0.001;P=0.007).结论:CD70在SSc的发生发展中可能起着重要作用.     

胸腺五肽联合干扰素治疗复发性尖锐湿疣疗效分析及对T细胞亚群影响的研究

目的：探讨胸腺五肽治疗复发性尖锐湿疣的临床疗效及对T淋巴细胞亚群水平的影响。方法：选取皮肤性病科门诊的复发性尖锐湿疣患者74名,随机分成治疗组与对照组,用微波将疣体彻底去除,并予以肌注干扰素（100万u/d）治疗,治疗组加用胸腺五肽（1mg/d）肌注,疗程30d。两组均于治疗前及治疗结束3个月后用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群含量。结果：治疗组总有效率为86.8％,对照组总有效率为63.9％,两组差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗组治疗后CD3＋T淋巴细胞、CD4＋T淋巴细胞及CD4＋/CD8＋T淋巴细胞比值上升,CD8＋T淋巴细胞降低,与治疗前比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;对照组治疗后CD3＋T淋巴细胞、CD4＋T淋巴细胞及CD4＋/CD8＋T淋巴细胞比值较治疗前有所上升,CD8＋T淋巴细胞有所下降,但差异均无统计学意义（P＞0.05）;治疗后比较,治疗组CD3＋T淋巴细胞、CD4＋T淋巴细胞及CD4＋/CD8＋T淋巴细胞比值均较对照组高（P＜0.05）,CD8＋T淋巴细胞较对照组低（P＜0.05）,差异均有统计学意义。结论：胸腺五肽能调节T淋巴细胞亚型的动态平衡,提升复发性尖锐湿疣患者T淋巴细胞免疫功能,临床效果显著,且无明显不良反应,安全性好,值得临床推广应用。     

PI3K和Notch信号途径对寻常型银屑病患者外周血CD4+T细胞的增殖和活化发挥协同调控作用

 

目的 研究PI3K和Notch信号途径在寻常型银屑病患者外周静脉血CD4⁺ T细胞增殖、活化中的影响。方法 采集28例寻常型银屑病患者和28例健康对照外周静脉血,采用免疫磁珠法分选外周血CD4⁺ T细胞。将寻常型银屑病患者外周血CD4⁺ T细胞分为4组：空白对照组,10 μmol/L PI3K阻滞剂组（LY294002组）,25 μmol/L Notch阻滞剂组（DAPT组）,10 μmol/L LY294002+25 μmol/L DAPT组（LY294002+DAPT组）。均分别用植物血凝素（PHA）10 μg/mL和IL-2 1 000 U/mL刺激增殖6 h,采用FCM检测CD4⁺ T细胞内的CyclinA、Cyclin D1及P27^kipl细胞周期蛋白水平,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Cyclin A、Cyclin D1及P27^kipl mRNA水平,并对数据进行统计学处理。结果 CD4⁺ T细胞经免疫磁珠法分选后纯度为（90.00±3.90）％,CD4⁺ T细胞培养存活百分率达（92.50±4.60）％。寻常型银屑病患者外周血CD4⁺ T细胞Cyclin A、Cyclin D1水平分别为（27.60±3.80）％、（14.70±3.20）％,mRNA水平分别为0.56±0.14、1.37±0.39,与健康对照组（13.50±3.70）％、（7.80±2.00）％和（0.31±0.12）、（0.93±0.35）比较均明显升高,差异有统计学意义（P分别为0.002、0.037和0.008、0.043）。寻常型银屑病患者外周血CD4⁺ T细胞P27^kipl蛋白和mRNA分别为（23.50±3.60）％和（0.17±0.02）,均低于健康对照组的（36.80±5.60）％和（0.33±0.05）,差异有统计学意义（P分别为0.007、0.001）。与空白对照组CD4⁺ T细胞Cyclin D1蛋白和mRNA表达［分别为（12.30±3.50）％和（1.74±0..39）］比较,LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组表达均下降,分别为（7.20±3.10）％、（8.20±2.50）％、（4.30±1.50）％和（1.11±0.29）、（1.26±0.28）、（0.63±0.20）,差异均有统计学意义（均P<0.05）。与空白对照组CD4⁺ T细胞P27^kipl蛋白［（21.80±3.20）％］比较,LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组蛋白水平均升高,分别为（30.90±5.10）％、（27.60±5.20）％、（43.90±3.00）％,差异均有统计学意义（P分别为0.005、0.006、0.001）;与空白对照组CD4⁺ T细胞P27^kipl mRNA（0.15±0.08）比较,LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组水平均上升,分别为（0.37±0.07）、（0.62±0.09）、（0.99±0.21）,差异均有统计学意义（P分别为0.018、0.002、0.003）。空白对照组、LY294002组、DAPT组、LY294002+DAPT组组间CD4⁺ T细胞Cyclin A蛋白和mRNA表达无显著性差异（均P>0.05）。结论 PI3K与Notch信号途径可协同增强CD4⁺ T细胞内正向调节蛋白Cyclin D1水平升高及负向调节蛋白P27^kipl水平下降,提示PI3K和Notch信号途径对寻常型银屑病患者外周血CD4⁺ T细胞的增殖、活化起着协同调控作用。

     

复发性尖锐湿疣患者HPV感染模式和细胞免疫功能的分析

目的:了解复发性尖锐湿疣(CA)患者的人乳头瘤病毒(HPV)感染亚型和感染模式,以及其外周血T淋巴细胞亚群的表达情况。方法:据纳入标准,选择135例初诊CA患者,将治疗3个月后疣体复发患者81例设为复发组;疣体治疗消失后,随访3个月内未复发患者54例设为治愈组;治疗前对两组患者用聚合酶链式反应(PCR)方法检测HPV亚型;在治疗和随访3个月的截止点采血,应用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群,并与20例健康对照者进行比较。结果:复发组和治愈组HPV感染均以低危亚型HPV6/11为主。复发组单一亚型感染40例(49.38%),混合亚型感染41例(50.62%);治愈组单一亚型感染36例(66.67%),混合亚型感染18例(33.33%),两组HPV感染模式的构成比有统计学差异(2=3.93,P0.05)。复发组外周血T细胞与治愈组比较,CD3+总T细胞[(68.13±8.03)%]降低,CD4+T细胞百分率[(32.42±4.88)%]降低,CD8+T细胞百分率[(38.61±4.19)%]升高,CD4+/CD8+比值降低,差异均有统计学意义(P值均0.01);复发组与正常对照组比较,CD4+T细胞、CD8+T细胞和CD4+/CD8+比值差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论:HPV亚型混合感染模式和T淋巴细胞亚群免疫功能异常是促使尖锐湿疣复发的重要因素。     

重组人干扰素α-2b 凝胶联合伐昔洛韦对复发性生殖器疱疹患者细胞免疫功能的影响及预防复发作用

目的：探讨重组人干扰素α-2 b凝胶联合伐昔洛韦对复发性生殖器疱疹（GH ）患者细胞免疫功能的影响及预防复发作用。方法：选择复发性GH患者共84例,随机分为两组（对照组与观察组）。两组患者均予以伐昔洛韦胶囊300mg,2次/d,饭前空腹口服,连用4周。观察组患者加用重组人干扰素α-2b凝胶局部涂擦,4次/d,连用10d。对照组患者除不使用重组人干扰素α-2b凝胶外余治疗同观察组。观察两组患者治疗前和治疗4周后外周血T淋巴细胞亚群的变化,并比较治疗后随访6个月及1年内的复发率。结果：治疗4周后,观察组患者外周血CD4＋水平和CD4＋/CD8＋比值较前明显上升,CD8＋水平较前明显下降（P＜0.05或P＜0.01）,而对照组治疗前后比较差异不明显（P＞0.05）。治疗后随访6个月及1年,观察组的复发率分别为26.19％和47.62％,均明显低于对照组的47.62％和73.81％（χ2＝4.14和6.04,P＜0.05）。结论：重组人干扰素α-2 b凝胶联合伐昔洛韦治疗复发性GH能调节外周血T淋巴细胞亚群功能紊乱,增强其细胞免疫功能,从而能降低其复发率,具有预防复发作用。     

CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞与IL-17在梅毒血清固定患者外周血中的表达及意义

目的：观察梅毒血清固定患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞和IL-17的表达及意义。方法：采用三色流式细胞术及免疫酶联吸附法测定18例梅毒血清固定患者和18例对照者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞和IL-17的表达水平。结果：梅毒血清固定患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的含量明显高于对照组（t=6.29,P〈0.01）;IL-17的含量与对照组比较差异无统计学意义（t=-1.68,P=0.102）。结论：CD4＋CD25＋调节性T细胞表达水平增高造成的免疫抑制可能与梅毒血清固定有关;IL-17的表达水平可能与梅毒血清固定无关。     

生殖器疱疹病毒感染对精液质量和细胞免疫功能的影响

目的：探讨生殖器疱疹病毒感染对男性患者精液质量和T细胞免疫功能的影响.方法：38例男性生殖器疱疹病毒感染患者为病例组,20例健康体检者为对照组,分析两组精液量、PH值、精子密度、精子存活率、精子活力和精子正常形态率等精液质量指标;采用流式细胞仪分析CD3＋、CD4＋和CD8＋T细胞百分率.结果：精液质量比较,病例组精液量、精液PH值、精液液化时间、精子密度和精子正常形态率与对照组均无明显差异（P〉0.05）,精子存活率[（47.58±13.36）%比（68.92±9.07）%]和精子活力[（45.46±14.11）%比（56.54±12.27）%]均显著降低（P〈0.01）;细胞免疫功能比较,病例组CD3＋ 及CD8＋T细胞百分率无统计学差异,但CD4＋T细胞百分率[（23.62±3.42）%比（33.16±3.75）%]与CD4＋/CD8＋[（0.83±0.12）比（1.45±0.27）]均显著降低（P〈0.01）.结论：男性生殖器疱疹病毒感染可导致精液质量下降和T细胞免疫功能低下.