重组人内皮抑素的纯化及抗肿瘤活性研究

[目的]从高效表达的基因工程菌中纯化重组人内皮抑素,对其抗肿瘤活性进行研究.[方法]经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,重组人内皮抑素在大肠杆菌基因工程菌中以包涵体形式高效表达.通过凝胶层析纯化重组内皮抑素蛋白.应用鸡胚绒毛尿囊膜实验(CAM),肺癌细胞MTT试验及细胞迁移抑制实验,裸鼠皮下移植喉癌抑瘤实验、病理组织切片、免疫组化指标的测定等检测研究重组人内皮抑素的抗肿瘤活性.[结果]重组内皮抑素的复性率可达40%.重组内皮抑素在体外直接抑制肺癌细胞的增殖及迁移.用药21天,对裸鼠皮下移植喉癌的抑瘤率达到40.66%,HE染色、免疫组化及CAM实验表明其对肿瘤组织新生血管的生成有较强的抑制作用.[结论]重组人内皮抑素具有抑制肿瘤组织新生血管生成和直接抑制肿瘤细胞生长和迁移的双重抗肿瘤活性.     

罗勒多糖对肿瘤转移行为的影响

目的:研究腺病毒介导的鼠内皮抑素基因对胃癌的治疗作用.方法:利用病毒重组技术将内皮抑素克隆入增殖缺陷型腺病毒基因组中,观察体外转染表达后的生物学活性.通过建立荷人胃癌的裸鼠动物模型,分析基因转导后动物肿瘤细胞中内皮抑素的表达情况及对肿瘤的抑制作用.结果:构建了表达内皮抑素的重组腺病毒载体pCA13-mEndo;检测到内皮抑素在体外的mRNA水平和蛋白质水平均有表达;鸡胚绒毛尿囊膜实验表明其对血管生长起抑制作用;荷瘤裸鼠体内肿瘤生长抑制明显.结论:所构建的pCA13-mEndo重组腺病毒载体可有效表达具有生物学活性的内皮抑素,使得肿瘤内微血管生成减少,肿瘤细胞增殖减慢,为抗血管生成方法治疗实体瘤的临床应用奠定基础.     

重组腺相关病毒介导人内皮抑素抑瘤作用的实验研究

背景与目的：研究表明,内皮抑素能抑制肿瘤血管的生成,进而抑制肿瘤的生长和转移,然而有关内皮抑素治疗的研究报道却很少。本研究初步探讨了重组腺相关病毒介导内皮抑素对肿瘤生长和转移的作用。方法：用RT-PCR方法获得人内皮抑素基因,构建内皮抑素可分泌表达的通用型重组腺相关病毒（rAAV）载体,包装获得重组腺相关病毒rAAV-SS-Endostain。以动物实验分析其抗肿瘤作用。结果：C57BL/6小鼠肌肉注射10^11TUrAAC-SS-Endostatin一次,该重组病毒对小鼠黑色瘤B16F10移植瘤生长的抑制率为57.1％,在实验肺转移模型中,对转移灶的抑制率为70.7％。结论：重组腺相关病毒介导的内皮抑素能有效抑制肿瘤的生长和转移。     

血管内皮抑素治疗恶性肿瘤的研究进展

重组人血管内皮抑素是一种广谱的抗血管生成分子靶向药物,其通过抑制肿瘤的病理性血管生成以及抑制肿瘤细胞的增殖和转移而发挥抗肿瘤作用.血管内皮抑素联合化疗已成为治疗各种恶性肿瘤的重要治疗手段.     

内皮抑素研究新进展

内皮抑素(ES)为内源性抗血管生成物质,体内外试验表明,它具有抑制肿瘤新生血管形成、无细胞毒性、也不产生耐药等特点,已显示良好的临床应用前景.现综述近年有关内皮抑素基础和临床研究新进展.     

重组人内皮抑素对荷人肺腺癌裸鼠肿瘤微环境的调节作用

目的研究重组人内皮抑素对荷人肺腺癌裸鼠肿瘤微环境的调节作用。方法构建人肺腺癌裸鼠模型,重组人内皮抑素5mg／kg皮下给药14天。采用荧光素（TRITC—Dextran）示踪法,荧光显微镜观察重组人内皮抑素处理后不同时间点荧光素在肿瘤中的分布,并计算肿瘤实质内部荧光素不能弥散到的面积相对于总面积的比例。结果给予处理14天后,对照组肿瘤内部血液弥散减少（低弥散面积占总面积的10．01％±4．50％）,相对于第7和第21天显著增高（分别为1．49％±1．14％和2．90％±2．02％）。重组人内皮抑素能够在治疗的初始阶段抑制血液的弥散（低弥散面积占总面积的16．85％±4．03％）,但第14天后这种抑制作用解除,肿瘤内部血液弥散反而增加（0．54％±0．32％,P=0．000）,到第21天时则两组没有明显差别。讨论重组人血管内皮抑素能够暂时性的抑制肿瘤血管,此外重组人内皮抑素还能够调节肿瘤的内环境,在一段时间内增加了肿瘤内部血液弥散。     

内皮抑素研究新进展

内皮抑素通过特异地抑制血管内皮细胞的生长来抑制肿瘤的生长和转移,是一种很有前景的抗肿瘤药物.该文就内皮抑素的结构与功能、作用机制、提取与应用等方面进行综述.     

血管抑素基因和内皮抑素基因抑制肝癌作用的比较

日的:比较血管抑素(angiostatin)和内皮抑素(endostain)基因抑制肝癌作用的差异.方法:建立大鼠肝癌模型,随机分组,在肝癌局部分别注入血管抑素基因、内皮抑素基因、血管抑素 内皮抑素基因及0.9%氯化钠溶液,观察各组肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)、肿瘤凋亡率、肺转移瘤的数量、大鼠生存期及肿瘤生长率等指标.结果:所有治疗组的肿瘤体积生长率均受到抑制,以双基因联合的作用最为明显.各治疗组肺内转移灶数、MVD和凋亡指数与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05和P<0.05);双基因联合应用组与其他治疗组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);而单一基因治疗组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).双基因联合应用后大鼠存活时间最长,而对照组生存时间最短.结论:血管抑素、内皮抑素均通过抑制肿瘤新生血管的生长、迁移而达到抑制肿瘤生长和转移的目的,2种抑素基因的协同作用更加明显.     

重组人血管内皮抑素联合化疗治疗多种晚期恶性肿瘤的护理观察

重组人血管内皮抑素注射液（Endostar,YH．16,恩度）是我闺学者自主创新研发的新型人血管内皮抑素。实验研究表明恩度能够特异性强烈抑制血管内皮细胞增殖和肿瘤生长,Ⅰ、Ⅱ期临床研究结果证实该药单药应用有效且安全性好。Ⅲ期临床研究中恩度与NP方案联合治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）,能够显著提高客观疗效,[第一段]     

血管内皮抑素抗肿瘤研究进展

血管内皮抑素是一种广谱的抗血管生成分子靶向物,其通过抑制肿瘤形成过程的病理性血管生成及抑制肿瘤细胞增殖和转移,发挥抗肿瘤作用。近年来随着靶向治疗药物不断进入临床,血管内皮抑素成为肿瘤综合治疗研究的热点之一。     

重组人血管内皮抑素与多西紫杉醇不同顺序用药调控移植瘤组织MMP及抗瘤效应观察

背景与目的 通过药物干预性动物实验,观察重组人血管内皮抑素(rh-endostatin)与多西紫杉醇不同顺序联合用药后MMP-2及相关因子的变化及其对移植瘤生长与血管生成的影响,探索两药联合的作用机制和最佳抗肿瘤方案.方法 建立肺腺癌A549荷瘤裸鼠模型,分两个阶段进行实验.第一阶段:将荷瘤小鼠随机分为重组人血管内皮抑素组(重组人血管内皮抑素400μg·d-1,d1-d14)和多西紫杉醇组(多西紫杉醇10 mg·kg1·3d-1,d1-d14);第二阶段:将荷瘤小鼠随机分为同时用药组(重组人血管内皮抑素400μg·d-1、d1-d35,多西紫杉醇10mg·kg-1·3d-1、d1-d19)、先重组人血管内皮抑素组(重组人血管内皮抑素400μg·d-1、d1-d35,多西紫杉醇10 mg·kg-1·3d-1、d16-d34)和模型组.实验中动态测量移植瘤体积,结束后以免疫组化方法检测MMP-2、TIMP-2、EMMPRIN表达并计数微血管密度(MVD).结果 两单药组比较,重组人血管内皮抑素组MMP-2和EMMPRIN表达下调较多西紫杉醇组(P=0.024,P=0.081)明显,两组间TIMP-2表达无明显差异(P＞0.05).联合组用药结束时,同时用药组与先重组人血管内皮抑素组的移植瘤体积小于模型组(P＜0.001,P=0.003),且MMP-2表达均明显下调、微血管数减少(P＜0.05),但同时用药组对肿瘤生长的抑制较先重组人血管内皮抑素组明显;与模型组相比,同时用药组TIMP-2上调(P=0.001)、EMMPRIN下调(P=0.018),先重组人血管内皮抑素组未见相似结果.结论 同时用药方案可以从TIMP-2、EMMPRIN两个环节下调MMP-2的表达,从而更好地抑制肿瘤生长.     

重组人血管内皮抑素联合化疗治疗非小细胞肺癌的观察与护理

内皮抑素（endostatin,ES）为内源性抗血管生成因子,特异性地作用于内皮细胞,尤其是微血管的内皮细胞,抑制其迁移,诱导其凋亡,从而抑制血管生成和肿瘤生长,近年来已成为肿瘤治疗的新策略。2006年7月我国国家食品药品监督管理局正式批准重组人血管内皮抑制素（商品名：恩度）上市,成为世界上第一个血管内皮抑制素抗肿瘤新药。我院自2006年9月至今对36例非小细胞肺癌患者使用重组人血管内皮抑制素注射液联合化疗治疗,     

血管内皮抑素在非小细胞肺癌治疗中的研究进展

肿瘤血管生成及其生长、侵袭和转移是一个复杂的多因素多步骤的调控过程。肿瘤生长及转移依赖于新生血管形成，抑制血管形成是抗肿瘤治疗的新方法。血管内皮抑素是一种新型内源性血管生成抑制剂，体内外试验证明其能特异性抑制血管内皮细胞的增殖与迁移，诱导其凋亡，从而抑制肿瘤新生血管的形成，达到抑制肿瘤生长的目的。有关血管内皮抑素的具体作用机制及信号传导通路尚不十分明确。同时其表达水平与肿瘤具有明显的相关性．可作为肿瘤的临床预后指标。血管内皮抑素的基因治疗与化疗、放疗、免疫治疗联合应用不仅显著增强其他治疗抗肿瘤效应，而且可减少其他治疗的毒副反应，显示出良好的临床应用前景。其抗血管生成作用具有广谱、低毒的特点，更重要的是克服了肿瘤的耐药性，这对于人类最终克服肿瘤是非常重要的。多年来国内外对其用于非小细胞肺癌治疗的报道较多。本文就血管内皮抑素的结构、作用机制、在非小细胞肺癌中的临床前及临床试验研究做一综述。     

内皮抑素研究新进展

内皮抑素(ES)为内源性抗血管生成物质，体内外试验表明，它具有抑制肿瘤新生血管形成、无细胞毒性、也不产生耐药等特点，已显示良好的临床应用前景。现综述近年有关内皮抑素基础和临床研究新进展。     

重组内皮抑素对肿瘤血管结构和乏氧改善作用的实验观察

目的 观察重组内皮抑素作用下小鼠Lewis肺癌移植瘤在血管退化前是否存在血管正常化时间窗,在此时间窗内肿瘤乏氧是否改善.方法 激光共聚焦显微镜动态观察重组内皮抑素作用下肿瘤血管的形态学变化,免疫组化染色检测不同时间段肿瘤乏氧细胞比例,观测肿瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线.结果 重组内皮抑素处理后肿瘤血管密度逐渐下降,连续治疗9 d较对照组下降最为明显.重组内皮抑素处理后周细胞覆盖内皮细胞比例逐渐增加,第3天开始明显增加,第5天增加最明显,第7天后明显下降.对照组基底膜与内皮细胞连接松散,厚度增加,而重组内皮抑素处理后,基底膜与内皮细胞连接紧密,厚度下降.在重组内皮抑素处理后第5天肿瘤乏氧细胞比例下降最明显,连续5 d用重组内皮抑素,肿瘤生长未见加快.结论 重组内皮抑素能使肿瘤血管正常化,其时间窗为治疗后3～7 d;此时肿瘤氧供明显改善,为临床联合应用放疗和重组内皮抑素提供了实验依据.

Abstract：

Objective To investigate whether recombinant human endostatin can create a time window of vascular normalization prior to vascular pruning to alleviate hypoxia in Lewis lung carcinoma in mice. Methods Kinetic changes in morphology of tumor vasculature in response to recombinant human endostatin were detected under a confocal microscope with immunofluorescent staining in Lewis lung carcinomas in mice. The hypoxic cell fraction of different time was assessed with immunohistochemical staining . Effects on tumor growth were monitored as indicated in the growth curve of tumors . Results Compared with the control group vascularity of the tumors was reduced over time by recombinant human endostatin treatment and significantly regressed for 9 days. During the treatment, pericyte coverage increased at day 3, increased markedly at day 5, and fell again at day 7. The vascular basement membrane was thin and closely associated with endothelial cells after recombinant human endostatin treatment, but appeared thickened, loosely associated with endothelial cells in control tumors. The decrease in hypoxic cell fraction at day 5 after treatment was also found. Tumor growth was not accelerated 5 days after recombinant human endostatin treatment. Conclusions Recombinant human endostatin can normalize tumor vasculature within day 3 to 7, leading to improved tumor oxygenation. The results provide important experimental basis for combining recombinant human endostatin with radiation therapy in human tumors.     

重组人血管内皮抑素抑制Namalwa淋巴瘤裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的:探讨重组人血管内皮抑素对Namalwa淋巴瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法:建立Namalwa淋巴瘤裸鼠移植瘤模型.从Namalwa淋巴瘤细胞种植后第11天开始给予腹腔注射2.5、5和10 mg/kg重组人血管内皮抑素,以腹腔注射75 mg/kg环磷酰胺作为阳性对照组,腹腔注射0.9%氯化钠溶液作为阴性对照组.比较各组相对肿瘤体积(relative tumor volume,RTV),计算相对肿瘤增殖率.结果:药物干预8 d后,环磷酰胺组RTV小于阴性对照组;干预12 d后,5 mg/kg重组人血管内皮抑素组移植瘤RTV小于阴性对照组(P＜0.05),但大于环磷酰胺组(P＜0.05);而2.5 和10 mg/kg组与阴性对照组之间的差异无统计学意义.2.5、5和10 mg/kg重组人血管内皮抑素组和环磷酰胺组的肿瘤相对增殖率分别为87.4%、64.2%、85.9%和39.2%.结论:重组人血管内皮抑素可抑制Namalwa淋巴瘤裸鼠移植瘤生长,其抑瘤作用与合适的剂量和足够的疗程相关.     

血管内皮抑素与肿瘤关系研究进展

 新生血管的生成在肿瘤的生长和转移中起重要作用,抗血管生成治疗已成为当今肿瘤治疗领域的热点,血管内皮抑素作为一种新型的内源性血管生成抑制剂,能特异性抑制内皮细胞的增殖和迁移,诱导细胞凋亡,并能抑制动物模型中新生血管生成,文章就内皮抑素的抗血管生成机制,诱导细胞凋亡及临床应用等方面进行综述。     

内皮抑素在肺癌诊断及治疗方面的研究进展

内皮抑素是胶原XⅧC球形末端部分片段,其对内皮细胞具有明显增殖抑制活性和抑制新生血管生成的作用。研究表明,测定血清及体液中内皮抑素有望用于肺癌的诊断及预后判断;它对肺癌新生血管生成、肿瘤生长及转移具有抑制作用,且不产生耐药,具有广阔的临床应用前景。     

内皮抑素在肺癌诊断及治疗方面的研究进展

内皮抑素是胶原XⅧC球形末端部分片段,其对内皮细胞具有明显增殖抑制活性和抑制新生血管生成的作用。研究表明,测定血清及体液中内皮抑素有望用于肺癌的诊断及预后判断;它对肺癌新生血管生成、肿瘤生长及转移具有抑制作用,且不产生耐药,具有广阔的临床应用前景。     

贲门腺癌中内皮抑素表达的临床病理学意义

目的：检测贲门腺癌组织中内皮抑素表达水平与责门腺癌临床病理特征的关系.方法：应用免疫组化染色SP法分析62例贲门腺癌患者肿瘤组织中内皮抑素的阳性表达水平.结果：内皮抑素表达水平与责门腺癌原发肿瘤的浸润深度、细胞分化程度、临床TNM分期均有密切关系（P均＜0.05）,而与区域淋巴结转移状态无明显关系（P＞0.05）;多因素相关分析发现内皮抑素阳性表达水平与原发肿瘤侵润深度、临床TNM分期均呈负相关（P均＜0.05）,与细胞分化程度呈正相关（P＜0.05）.结论：内皮抑素的表达水平与贲门腺癌临床病理分期、浸润深度及细胞分化程度有相关性,而与区域淋巴结转移状态无明显关系.