TNF-α引起的微血管内皮细胞功能障碍及其细胞分子机制

血管内皮细胞是肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ α)作用的靶细胞之一。由ＴＮＦ α引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓性疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的ｒｈＴＮＦ α(简称ＴＮＦ)引起微血管内皮细胞功能、代谢的早期损伤以及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系 ,试图从中说明ＴＮＦ引起微血管内皮细胞功能障碍的表现及其部分细胞分子机制。实验是在体外培养的第二代大鼠肺微血管内皮细胞(ＲＰＭＶＥＣ ,简称内皮细胞 )中进行的。细胞经光镜、电镜的形态观察 ,ｖＷＦ免疫组化阳性 ,ＣＤ3 1免疫…     

TNFα对血管内皮细胞的损伤作用及其分子机制

ＴＮＦα是一种重要的炎症介质。血管内皮细胞是ＴＮＦα作用的靶细胞之一。由ＴＮＦα引起的血管内皮细胞损伤在很多炎症性疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的ｒｈＴＮＦα（简称ＴＮＦ）引起大血管内皮细胞（人脐静脉内皮细胞）和微血管内皮细胞（大鼠肺微血管内皮细胞）形态、功能、代谢的损伤以及其与内皮细胞中原癌基因表达的关系,试图从中说明ＴＮＦ引起血管内皮细胞早期损伤的部分分子机制。１－细胞增殖动力学：在体外培养的大血管内皮细胞（ＨＶＥＣ,第３～４代）中发现,加入ＴＮＦ（２０～４０ｎｇｍＬ）后…     

TNFα对微血管内皮细胞的损伤作用及其分子机制(摘要)

血管内皮细胞是肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）作用的靶细胞之一。由ＴＮＦα引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的。ＴＮＦα（简称ＴＮＦ）引起微血管内皮细胞功能、代谢的早期损伤及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系,试图从中说明ＴＮＦ引起微血管内皮细胞早期损伤的部分分子机制。 １细胞增殖动力学在体外培养的肺微血管内皮细胞（ＰＭＶＥＣ）中发现,加入 ＴＮＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）后,细胞形态从圆形、多角形变成梭形,细胞的纵轴拉长,横轴缩小。此种变化从培养６ｈ开始,７２ｈ最显。光镜下未见明显细胞损伤表现,电镜下（透射电镜及扫描电镜）细胞器无明显改变,但见内皮细胞表面微绒毛减少。当ＴＮＦ的浓度增高到４０ｎｇ／ｍｌ以上,将其与ＰＭＶＥＣ共同孵育培养７２ｈ后,ＴＮＦ组内皮细胞总数比对照组（ＰＢＳ组）显著减少（５．２３ ±０．５０减到４．３０±０．３４,Ｐ＜０．０１）。用流式细胞仪分析细胞增殖周期发现,ＴＮＦ组处于Ｇ_１期的细胞明显增多,Ｓ期和Ｍ期的细胞明显减少（Ｐ＜０．０５）。结果提示,高浓度ＴＮＦ抑制内皮细胞增生,使细胞分裂延缓。 ２ ＰＧＩ_２和ｔ－ＰＡ前列腺素Ｐ     

TNF-α引起的微血管内皮细胞功能障碍及其细胞分子机制1

血管内皮细胞是肿瘤坏死因子(TNF-α)作用的靶细胞之一. 由TNF-α引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓性疾病的发病中具有重要意义. 本工作主要研究不同浓度的rhTNF-α(简称TNF)引起微血管内皮细胞功能、代谢的早期损伤以及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系, 试图从中说明TNF引起微血管内皮细胞功能障碍的表现及其部分细胞分子机制.     

FAS， NF-κB及Caspases在TNFα介导的微血管内皮细胞凋亡中的作用

目的 :研究肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ)引起微血管内皮细胞凋亡的特点及ＦＡＳ ,ＮＦ -κＢ和Ｃａｓｐａｓｅｓ在此种凋亡中的作用。方法 :用ＴＵＮＥＬ ,流式细胞仪等方法测定ＴＮＦ引起体外培养的大鼠肺微血管内皮细胞(内皮细胞 )凋亡。用免疫组化方法测定ＴＮＦ引起内皮细胞ＮＦ -κＢ的活化 ,研究其活化对ＴＮＦ引起的内皮细胞凋亡的影响。用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、ＦＡＳ抗体测定ＴＮＦ对内皮细胞ＦＡＳ表达的影响及ＦＡＳ在内皮细胞凋亡中的作用。用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、免疫组化测定ＴＮＦ作用后凋亡蛋白酶Ｃａｓｐａｓｅ- 8,Ｃ…     

国内微循环研究的若干进展

近年来微循环研究已深入到细胞分子水平,微血管分子医学的研究已广泛开展。本文主要环绕血管内皮细胞功能障碍的细胞分子机制、血管新生、血管平滑肌细胞病变和缺血再灌注损伤四个方面对2001年国内的主要研究进展作一综述。 1血管内皮细胞功能障碍的细胞分子机制 LPS和TNFα引起内皮细胞功能障碍的细胞分子机制是研究的重点。在研究脂多糖(LPS)刺激人血管内皮细胞(HVEC)分泌内皮素-1(ET-1)与肾上腺髓质素(Adm)的机制时发现,LPS刺激HVEC分泌ET-1     

新型人肿瘤坏死因子基因在血管内皮细胞中的靶向表达

目的 探索一条肿瘤特异性基因治疗的新途径。方法 将新型人ＴＮＦ－αＤ１１ａ基因和ＫＤＲ特异性启动子插入到３’ＬＴＲ缺失２９９ｂｐ的逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ中,构建成ｐＬＸＳＮ－Ｄ２９９－ＫＤＲｐ－ＴＮＦ－α－Ｄ１１ａ重组逆转录病毒载体,使目的基因转录受ＫＤＲ启动子驱动。通过脂质体介导将该重组载体转染ＰＡ３１７包装细胞,并用病毒上清感染血管内皮细胞和ＮＩＨ３Ｔ３细胞。分别经ＥＬＩＳＡ和ＭＴＴ法测定ＴＮＦ－αＤ１１ａ在血管内皮细胞中的表达及其生物学活性。结果 成功构建了携带ＴＮＦ－αＤ１１ａ和ＫＤＲ启动子的逆转录病毒载体,ＴＮＦ－αＤ１１ａ在血管内皮细胞中的表达水平及细胞增殖抑制作用均高于ＮＩＨ３Ｔ３细胞。结论 ＫＤＲ启动子可使外源ＴＮＦ－αＤ１１ａ在血管内皮细胞中特异性表达。     

核转录因子在TNF-α引起牛肺动脉内皮细胞中的作用

核转录因子在ＴＮＦ－α引起牛肺动脉内皮细胞中的作用湖南医科大学病理生理学教研室（长沙４１００７８）钟林罗非君谭琛尢家马录罗正曜目前认为，败血症时内皮细胞的损伤可能与ＴＮＦ－α引起内皮细胞凋亡有关。但ＴＮＦα引起内皮细胞凋亡的具体机制尚未得到阐明。本...     

TNFα对血管内皮细胞PDGF-B链基因转录的影响

ＴＮＦα主要由巨噬细胞、Ｔ细胞和ＮＫ细胞产生,是一种在急、慢性炎症过程中均有重要作用的炎症介质。动脉粥样硬化（ＡＳ）是以动脉壁内皮结构、功能损害和平滑肌细胞增殖变化为主的慢性炎症过程。ＡＳ时ＴＮＦα合成增多,且与ＡＳ的严重程度成正比。ＰＤＧＦ是以二聚体（ＡＡ,ＢＢ和ＡＢ）形式存在的促分裂剂。其中,ＰＤＧＦ－Ｂ链由ＰＤＧＦ－Ｂ链基因编码,该基因ｍＲＮＡ在ＡＳ血管内皮细胞中表达明显增高。因此,研究在ＴＮＦα作用下,血管内皮细胞ＰＤＧＦ－Ｂ链基因表达调控的分子机制对于阐明动脉粥样硬化的发病机制具有重要…     

肿瘤坏死因子与移植肝的保存再灌注损伤

肝移植过程中的保存再灌注损伤是缺血再灌注损伤的特殊类型。肝移植过程中肿瘤坏死因子水平升高，可能与内毒素的产生和枯否氏细胞的激活有关。肿瘤坏死因子通过促进血管内皮细胞粘附白细胞及分泌炎性介质，增强中性粒细胞对内皮细胞的粘附、激活巨噬细胞释放白介素等，介导组织损伤，通过使用降低ＴＮＦ合成的药物，设计新型保存液及ＴＮＦ抗体的使用可拮抗ＴＮＦ对原位肝移植功能的影响     

抗氧化剂和NFκB对大鼠肺微血管内皮细胞iNOS表达的影响

目的：探讨ＮＦкＢ在大鼠肺微血管内皮细胞ｉＮＯＳ基因诱导表达中的作用及抗氧化睦内皮细胞ｉＮＯＳ诱导表达的影响及其机制。方法：Ｇｒｉｅｓｓ法测定细胞上清液ＮＯ２水平以反映ＮＯ的生成,Ｎｒｔｈｅｒｎ印迹分析ｉＮＯＳｍＲＮＡ水平,ＥＭＳＡ法测定细胞核内ＮＦкＢ的结合活性。结果：抗氧化可阻断内皮细胞培养体系ＬＰＳ和ＴＮＦα诱导的ＮＯ生成及ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达;ＬＰＳ和ＴＮＦα可诱导大鼠肺微血管内皮细胞Ｎ     

细胞因子与全身性炎症反应综合征发生机理的研究进展

ＳＩＲＳ的发生过程中有多种细胞因子参与。促炎因子的持续性大量产生、促炎／抗炎平衡的破坏以及机体细胞反应性的异常等可能是ＳＩＲＳ及其所致炎性器官损伤的主要原因。基因缺陷小鼠的研究提示：ＬＰＳ刺激ＩＣＡＭ －１ 表达并通过诱导血管内皮细胞和中性粒细胞的相互作用造成器官损伤；ＩＦＮγ／ＴＮＦα则可直接诱导靶器官中的细胞大量凋亡引起器官功能衰竭；ＳＥＢ 则通过活化Ｔ 细胞、产生ＩＦＮγ进而诱导炎症损伤。     

细胞因子与全身性炎症反应综合征发生机理的研究进展

ＳＩＲＳ的发生过程中有多种细胞因子参与。促炎因子的持续性大量产生,促炎／抗炎平衡的破坏以及机体细胞反应性的异常等可能是ＳＩＲＳ及其所致炎性器官损伤的主要原因,基因缺陷小鼠的研究提示：ＬＰＳ刺激ＩＣＡＭ－１表达并通过诱导血管内皮细胞和中性粒细胞的相互作用造成器官损伤;ＩＦＮγ／ＴＮＦα则可直接诱导靶器官中的细胞大量凋亡引起器官功能衰竭,ＳＥＢ则通过活化Ｔ细胞,产生ＩＦＮγ进而诱导炎症损伤。     

肿瘤坏死因子与脑创伤

脑创伤后ＴＮＦ－α水平升高，直接或间接地导致脑血管内皮细胞的严重损伤、激活磷脂酶Ａ２和肾上腺素能β受体，使血脑爱透性增高，出现血管源性、细胞毒性脑水肿，诱导白细胞和巨噬细胞呼吸爆发，进一步损害一的脑组织，同时ＴＮＦ－α能促进凝血过程和血管内血栓怪及缩血管物质的合成，最终造成脑血流量减少，使脑组织出现弥漫性乏氧。由于ＴＮＦα对物质代谢的影响以及对脑一肺、心、肝、肾等重要器官的作用加重脑创伤病人的病情     

TNF_α对大鼠肺微血管内皮细胞NO的产生及NOSmRNA表达的影响

ＴＮＦα对大鼠肺微血管内皮细胞ＮＯ的产生及ＮＯＳｍＲＮＡ表达的影响上海医科大学病理生理学教研室（上海２０００３２）刘清行金惠铭阐明ＴＮＦα对内皮细胞ＮＯ的产生及ＮＯＳｍＲＮＡ表达的作用及其机制。以大鼠肺微血管内皮细胞为材料，测定细胞培养上清液中ＮＯ?..     

山莨菪碱减轻TNF-α所致内皮细胞凋亡

目的 :从转录因子水平观察山莨菪碱能否减轻ＴＮＦ -α所致内皮细胞的凋亡 ,并探讨其机制是否与其抑制ＮＦ -κＢ活化有关。方法 :培养小牛肺动脉内皮细胞 (ＢＰＡＥＣ) ,将山莨菪碱 ( 0 2ｍｇ/ｍＬ)加入细胞培养基中 ,30ｍｉｎ后再加入ＴＮＦ -α( 2 50 0Ｕ/ｍＬ)损伤 2 4ｈ ,采用Ｈｏｅｃｈｓｔ 332 58染色 ,荧光显微镜观察细胞凋亡情况 ,并进行显微照相。采用Ｓｅｌｌｉｎ法抽提细胞上清片段ＤＮＡ及琼脂糖电泳 ,观察是否出现ＤＮＡ梯状条带 ,用二苯胺法测定上清液及沉淀物中ＤＮＡ含量 ,计算细胞ＤＮＡ断裂百分率。ＢＰＡＥＣ表达Ｉ-κ…     

细胞因子对心脏微血管内皮细胞与淋巴细胞粘附的影响

目的：观察细胞因子对心脏微血管内皮细胞表面细胞间粘附分子－１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１，ＩＣＡＭ－１）的表达的调控，及对内皮细胞与激活淋巴细胞粘附的影响。方法：体外培养大鼠心脏微血管内皮细胞，以肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）、白细胞介素－６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ－６）和白细胞介素－１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１β，ＩＬ－１β）诱导。采用免疫组织化学染色法观察内皮细胞表面ＩＣＡＭ－１表达；采用粘附试验和抗ＩＣＡＭ－１或抗ＬＦＡ－１单克隆抗体阻断抑制试验。结果：ＴＮＦ－α、ＩＬ－６和ＩＬ－１β诱导内皮细胞１８～２４ｈ，均可使内皮细胞与淋巴细胞的粘附率显著增加，ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β的诱导还可使内皮细胞表面ＩＣＡＭ－１分子表达明显增强，表现为ＩＣＡＭ－１表达阳性细胞数增多，着色加深。用１０～２０ｍｇ／Ｌ抗ＩＣＡＭ－１或抗ＬＦＡ－１单克隆抗体均可部分抑制内皮细胞与淋巴细胞的粘附。结论：ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β可以有效地激活心脏微血管内皮细胞，通过诱导内皮细胞ＩＣＡＭ－１表达增多，促进内皮细胞与淋巴细胞的粘附     

抗氧化剂和NFκB对大鼠肺微血管内皮细胞iNOS表达的影响

目的 :探讨ＮＦκＢ以及抗氧化剂在大鼠肺微血管内皮细胞中对ＴＮＦ α加ＬＰＳ诱导的ｉＮＯＳ基因表达的作用及其机制。方法 :通过免疫组化染色ＡＢＣ法用抗内皮细胞抗体ＣＤ31对培养的大鼠肺微血管内皮细胞进行鉴定。Ｇｒｉｅｓｓ法测定细胞培养上清液中的亚硝酸盐浓度以反映ＮＯ的生成。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结合ＲＴ ＰＣＲ分析ｉＮＯＳｍＲＮＡ水平。ＥＭＳＡ法测定细胞核内ＮＦκＢ的结合活性。结果 :ＴＮＦα(10 0Ｕ/ｍｌ)加ＬＰＳ(1ｕｇ/ｍｌ)处理内皮细胞 2ｈ后ｉＮＯＳｍＲＮＡ水平明显上升 (Ｐ <0 .0 5 ) ,2 4ｈ后能明显增加…     

细胞因子诱导的生长因子在人脐内皮细胞的基因表达

众所周知 ,内皮细胞能产生许多生在子而参与各种不同的促生长过程 ,如血管生成、动脉粥样硬化、造血过程。血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)和碱性纤维生长因子(ｂＦＧＦ)主要参与内皮细胞增殖、新血管形成 ;血小板源性生长因子 (ＰＤＧＦ Ｂ)、ｂＦＧＦ主要参与动脉粥样硬化过程 ;在造血过程中 ,干细胞因子 (ＳＣＦ)、粒细胞集落刺激因子 (Ｃ ＣＳＦ)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (ＧＭ ＣＳＦ)非常重要。所有这些生长因子在内皮细胞于一定的因素或条件下 (如缺氧、应激等 )可以被诱导产生。白介素 1(ＩＬ 1α)和ＴＮＦ α被认为是内皮细…     

TNFα的中枢神经系统来源

ＴＮＦα是一个重要的细胞因子,有着广泛的生物学作用,主要来源于单核／巨噬细胞和Ｔ 细胞。ＣＮＳ一直被认为是免疫豁免部位,这是部分因为血脑屏障的存在限制了免疫能细胞、细胞因子和免疫球蛋白的通过,部分因为ＣＮＳ的细胞缺乏免疫活性。目前后者受到越来越多的研究结果的冲击。ＴＮＦα不但可以在周围循环中产生,而且可以在ＣＮＳ内由小胶质细胞、星形细胞、神经细胞和血管内皮细胞产生,在ＣＮＳ免疫炎性反应中发挥着重要作用