血液动力学超负荷患者心肌肥大时bFGF、TGFβ_1的变化

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)和转化生长因子 (ＴＧＦβ1)在容量或压力超负荷患者心肌肥大发病机理中的作用。方法 :本项研究心肌肥大病人 32例 ,均经二维超声心动图和病理组织学检查证实 :容量超负荷组 (ＶＧ)均系 16例风心病二尖瓣闭锁不全伴狭窄的人工瓣膜置换术病人的左室肥大心肌 ,平均年龄 2 8± 5 (2 4～ 5 0 )岁 ;压力超负荷组 (ＰＧ)系 16例先心病法乐氏四联征或三联征病人的右室肥大心肌 ,平均年龄 14± 6 (5～ 2 3)岁 ;正常的左、右心室心肌 (ＮＧ)各 5例 ,平均年龄 2 2± 4(18～ 2 8)岁 ;均系无心脏疾病的意外…     

013 血液动力学超负荷患者心肌肥大时bFGF、 TGFβ1的变化

目的: 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子(TGFβ1)在容量或压力超负荷患者心肌肥大发病机理中的作用. 方法: 本项研究心肌肥大病人32例, 均经二维超声心动图和病理组织学检查证实: 容量超负荷组(VG)均系16例风心病二尖瓣闭锁不全伴狭窄的人工瓣膜置换术病人的左室肥大心肌, 平均年龄28±5(24～50)岁; 压力超负荷组(PG)系16例先心病法乐氏四联征或三联征病人的右室肥大心肌, 平均年龄14±6(5～23)岁; 正常的左、右心室心肌(NG)各5例, 平均年龄22±4(18～28)岁; 均系无心脏疾病的意外死亡者. 采用免疫组织化学及原位杂交技术结合彩色图像分析技术对VG和PG心肌肥大病人的心室乳头肌组织中bFGF、 TGFβ1的mRNA及其蛋白水平进行测定并与正常人心室乳头肌组织对照: 以HE染色及天狼星红染色分别检查肌细胞肥大和基质胶原Ⅰ、Ⅲ型变化情况. 结果: (1) 心肌纤维增粗、体积增大、排列紊乱, 细胞间质胶原纤维明显增多, 尤其Ⅲ型胶原增加更突出; (2) VG或PG病人的心肌肥大中bFGF和TGFβ1的mRNA表达及其蛋白水平均显著增加. 结论: (1) 容量或压力超负荷导致心肌重构(remodeling). 病理组织学研究的结果表明, 无论容量或压力超负荷均引起心肌细胞肥大, 即体积增加和细胞排列方向改变; 细胞间质胶原纤维, 尤其以Ⅲ型胶原纤维增加更明显, 这就是心肌对血液动力学超负荷的适应性重构. (2) bFGF和TGFβ1在心肌重构中的作用在血液动力学超负荷情况下, bFGF以自分泌及/或旁分泌方式, 亦可以通过胞内分泌的方式核转位直接发挥其基因调控作用, 最终导致心肌细胞肥大; TGFβ1是成纤维细胞的强效趋化因子, 能明显促进成纤维细胞对胶原及纤维连接蛋白合成, 同时对新合成基质的降解有明显的抑制作用, 从而使胶原纤维明显增加.     

Akta和FoxO1在超负荷性心肌肥大时大鼠心肌的表达

目的 通过检测Akt和FoxO1基因在大鼠超负荷性心肌肥大过程中的表达,探讨心肌肥大时的细胞周期调控机制.方法 采用升主动脉缩窄的方法制作大鼠超负荷心肌肥大动物模型,通过三维彩色超声技术评价心肌肥大程度,采用RT-PCR技术检测心肌组织Akt和FoxO1的mRNA表达,用Western blots方法检测Akt磷酸化水平.结果 与假手术组相比,模型组的左室后壁厚度(LVPW)、室间隔厚度(IVS)增加(P<0.01),左室舒张末内径(LVDD)减小(P<0.01).模型组心肌组织中FoxO1的mRNA表达下调(P<0.01).Akt的基因表达没有明显变化但蛋白的磷酸化水平显著增加(P<0.01).结论 大鼠超负荷性心肌肥大时Akt激活,同时FoxO1的表达下调.     

Akt和FoxO1在超负荷性心肌肥大时大鼠心肌的表达

目的通过检测Akt和FoxO1基因在大鼠超负荷性心肌肥大过程中的表达,探讨心肌肥大时的细胞周期调控机制。方法采用升主动脉缩窄的方法制作大鼠超负荷心肌肥大动物模型,通过三维彩色超声技术评价心肌肥大程度,采用RT-PCR技术检测心肌组织Akt和FoxO1的mRNA表达,用Westernblots方法检测Akt磷酸化水平。结果与假手术组相比,模型组的左室后壁厚度(LVPW)、室间隔厚度(IVS)增加(P<0.01),左室舒张末内径(LVDD)减小(P<0.01)。模型组心肌组织中FoxO1的mRNA表达下调(P<0.01),Akt的基因表达没有明显变化但蛋白的磷酸化水平显著增加(P<0.01)。结论大鼠超负荷性心肌肥大时Akt激活,同时FoxO1的表达下调。     

环核苷酸对心肌细胞bFGF与TGFβ_1基因表达的调控初探

目的 :探讨环核苷酸 (ｃＡＭＰ/ｃＧＭＰ)对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)与转化生长因子 β1基因表达调节中的作用 ,为心肌肥大的防治提供一定的理论依据。方法 :将Ｗｉｓｔａｒ乳鼠无血清培养 2 4ｈ的细胞分为对照组、ｃＡＭＰ组 ( 8-Ｂｒｏｍｏ -ｃＡＭＰ 0 .1ｍｍｏｌ/Ｌ)、ｃＧＭＰ组 [加入一氧化氮 (ＮＯ)的供体 -硝普钠 1ｍｍｏｌ/Ｌ ,借此升高心肌细胞内ｃＧＭＰ浓度 ],并在 30ｍｉｎ、3ｈ、2 4ｈ、48ｈ、72ｈ等 5个时相点检测如下指标 :( 1 )细胞生长代谢活性 (ＭＴＴ法 ) ;( 2 )ｂＦＧＦ和ＴＧＦβ1 的ｍＲＮＡ表达 …     

环核苷酸对心肌细胞bFGF与TGFβ_1基因表达的调控初探

目的 :探讨环核苷酸 (ｃＡＭＰ/ｃＧＭＰ)对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)与转化生长因子 β1基因表达调节中的作用 ,为心肌肥大的防治提供一定的理论依据。方法 :将Ｗｉｓｔａｒ乳鼠无血清培养 2 4ｈ的心肌细胞分为对照组、ｃＡＭＰ组 (8 ＢｒｏｍｏｃＡＭＰ 0 .1ｍｍｏｌ/Ｌ)、ｃＧＭＰ组 [加入一氧化氮 (ＮＯ)的供体硝普钠 1ｍｍｏｌ/Ｌ ,借此升高心肌细胞内ｃＧＭＰ浓度 ],并在 30ｍｉｎ、3ｈ、2 4ｈ、48ｈ、72ｈ等 5个时相点检测如下指标 :(1)细胞生长代谢活性 (ＭＴＴ法 ) ;(2 )ｂＦＧＦ和ＴＧＦβ1的ｍＲＮＡ表达 (原位…     

当归及阿魏酸钠对内皮细胞中TGFβ_1及bFGF表达的影响

目的 :检测高脂血清对内皮细胞中转化生长因子 β1(ＴＧＦβ1)、碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)表达的影响 ,并观察当归、阿魏酸钠的作用。方法 :实验分四组 ,即 :正常对照组 ;高脂血清损伤组 ;当归 高脂血清组 ;阿魏酸钠 高脂血清组。用培养人脐静脉内皮细胞 (ＥＣＶ3 0 4 )为研究对象 ,以高脂血清为损伤因子 ,观察当归及阿魏酸钠的作用。实验中用扫描电镜观察内皮细胞形态变化 ,用免疫细胞化学方法观测培养细胞中ＴＧＦβ1及ｂＦＧＦ的表达改变。结果 :高脂血清能明显使内皮细胞的超微结构受损。细胞表面干裂 ,有孔隙 ;微绒毛分布不…     

多发性硬化患者血清TGF←β_1的检测及其临床意义

目的 :探讨转化生长因子 β1(TGF β1)在多发性硬化 (MS)发生、发展中的作用。方法 :采用酶联免疫吸附ELISA方法 ,对 45例MS患者血清TGF β1的含量进行了测定。结果 :与对照组和NIND组相比 ,MS患者血清TGF β1含量明显下降 (P <0 0 1) ;与StableMS组相比 ,RRMS组和CPMS组TGF β1含量亦明显下降 (P <0 0 5 ) ;动态观察显示 ,随着病情的好转 ,TGF β1含量亦逐渐升高。结论 :血清中TGF β1的检测对判断MS患者的病情变化具有重要的临床实用价值。     

TGFβ1 诱导 THP-1 细胞分化为巨噬细胞时原癌基因表达的变化

对重组转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）诱导前单核白血病细胞系ＴＨＰ－１细胞向巨噬细胞分化过程中核内原癌基因表达的动态变化进行了研究。结果发现，在诱导分化过程中不同的原癌基因表达变化不仅具有时序性，调节方式也呈多样性。ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ表达变化在时间上有一致性，诱导分化早期（２４小时）贴壁细胞的表达量明显增加，延长ｒｈＴＧＰ－β１作用时间至４８～７２小时时，这种上调作用消失，回复到对照组ＴＨＰ－１细胞原有的或低于原有的表达水平。ｃ－ｍｙｃ在细胞分化过程中表达逐渐降低，作用７２小时时表达量不足对照组细胞的１０％。而ｃ－ｓｉｓ在ｒｈＴＧＰ－β１作用７２小时内未发现其表达被调节。提示ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ基因在分化早期的表达上调，以及ｃ－ｍｙｃ基因在分化中期的表达被强烈抑制可能分别在分化进程中发挥重要作用。     

正、反义TGFβ_1逆转录病毒载体的构建及鉴定

ＴＧＦβ１对肝纤维化起着明确作用，其在肝癌中的作用受到重视。以逆转录病毒作为介导基因转移的载体是目前广泛使用在基础和临床应用研究中的基因转移方法，国外学者构建的逆转录病毒载体较多，其中Ｍｉｌｅｒ教授所构建的系列载体受到大家一致公认［１］。本文报告我们...     

VEGF、bFGF、TGFβ1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨VEGF、bFGF、TGFβ1在非小细胞肺癌的表达及与其生物学行为特征的关系.方法 应用链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin-perosidase,SP)免疫组化方法检测VEGF、bFGF、TGFβ1及CD34在50例非小细胞肺癌的表达,并进行微血管密度计数,以18例癌旁组织为对照.结果 VEGF、bFGF、TGFβ1的阳性表达率分别为68%、58%、60%,VEGF、bFGF、TGFβ1表达均与NSCLC的临床分期(χ2值分别为4.535、3.864、3.852,P＜0.05)、淋巴结转移有关(χ2值分别为4.235、3.876、4.151,P＜0.05),而TGFβ1,表达还与组织学类型有关(χ2=4.443,P＜0.05),鳞癌比腺癌表达率高.MVD表达与NSCLC的临床分期、淋巴结转移有关(t值分别为2.312和2.865,P＜0.05),与组织学类型、组织分化程度无关;且四者表达在癌组织与癌旁组织之间均有显著性统计学意义.VEGF、bFGF表达与MVD有关(t值分别为2.518和3.679,P＜0.05);TGFB.表达与MVD无显著关系.结论 VEGF、bFGF、TGFβ1在NSCLC均有很好的表达,并且其表达与NSCLC的生长、进展、转移等生物学关系密切;VEGF、bFGF在肿瘤血管形成、转移中起重要作用,TGFβ1可能与机体免疫功能降低及肿瘤细胞免疫逃逸有关.     

012 环核苷酸对心肌细胞bFGF与TGFβ1基因表达的调控初探

目的: 探讨环核苷酸(cAMP/cGMP)对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与转化生长因子β1基因表达调节中的作用, 为心肌肥大的防治提供一定的理论依据. 方法: 将Wistar乳鼠无血清培养24 h的心肌细胞分为对照组、 cAMP组(8-BromocAMP 0.1 mmol/L)、 cGMP组[加入一氧化氮(NO)的供体硝普钠1 mmol/L, 借此升高心肌细胞内cGMP浓度], 并在30min、 3 h、 24 h、 48 h、 72 h等5个时相点检测如下指标: (1) 细胞生长代谢活性(MTT法); (2) bFGF和TGFβ1的mRNA表达(原位杂交技术)及其蛋白表达水平(免疫细胞化学技术). 结果: (1) 与对照组比较cAMP组细胞代谢活跃程度增加, 尤以72 h明显(P<0.05); cGMP组细胞代谢受抑制, 尤以48 h明显(P<0.05). (2) 与对照组比较, cAMP组主要分布在心肌细胞浆及细胞膜的bFGF mRNA及其蛋白和主要分布在胞浆的TGFβ1蛋白水平表达均降低, 尤其在24 h(P<0.05)和48 h(P<0.01); cGMP组bFGF mRNA及其蛋白和TGFβ1蛋白表达水平均降低, 尤其在24 h(P<0.05). (3) 3H-leu掺入实验提示cAMP使细胞内RNA及蛋白质合成增加, 而cGMP可抑制细胞内RNA及蛋白质合成; 3H-TdR掺入实验提示cAMP和cGMP对培养的心肌细胞数量无显著影响(P<0.05). 结论: cAMP浓度增高使培养的心肌细胞代谢活跃、 bFGF mRNA及其蛋白和TGFβ1表达明显增加; cGMP浓度增高却使培养的心肌细胞代谢抑制、 bFGF mRNA及其蛋白和TGFβ1蛋白表达下降, 从而提示环核苷酸在心肌细胞肥大信号调控中, 起着重要的作用.     

bFGF促进内皮细胞β_1整合素表达及其意义探讨

目的 :观察碱性成纤维细胞生长因子对血管内皮细胞 β1整合素表达的影响。方法 :采用WesternBlot法结合图像处理分析 ,检测bFGF作用前后培养血管内皮细胞 β1整合素的表达。结果 :bFGF处理组和对照组平均灰度值分别为 16 6 11± 9 86和 175 32± 5 12 ,两组免疫酶显色有显著差异。结论 :bFGF能够诱导内皮细胞膜表面β1整合素合成增加。推测bFGF通过上调内皮细胞 β1整合素表达 ,可能在促进血管生成方面有重要作用。     

丹参涂膜剂对肥厚性瘢痕细胞因子TGF-β_1、bFGF的影响

目的:通过丹参涂膜剂用于移植人体肥厚性瘢痕裸鼠模型,以观察对瘢痕内细胞因子TGF-β1和bFGF的影响,探讨丹参活血化瘀中药抗肥厚性瘢痕的作用机制,为临床中医预防和治疗瘢痕用药提供实验依据。方法:制作丹参涂膜剂,用于移植人体肥厚性瘢痕裸鼠模型,免疫组化EnVision法检测细胞因子TGF-β1、bFGF的表达。结果:丹参涂膜剂可促使瘢痕组织内细胞因子TGF-β1的表达明显下降,可增强瘢痕组织内细胞因子bFGF的表达。结论:丹参活血化瘀中药具有抑制瘢痕组织内细胞因子TGF-β1的表达和增强瘢痕组织内细胞因子bFGF的表达,从而具有抑制瘢痕的作用。     

子痫前期患者胎盘组织TGF-β1、TGFβRⅠ和TGFβRⅡ的表达及其意义

目的检测胎盘组织中TGF-β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)及其受体(TGF-beta receptor,typeⅠandtypeⅡ,TGFβRⅠ,TGFβRⅡ)的表达,评估TGF-β1及其受体在子痫前期发病中的作用。方法采用SP免疫组化法检测正常妊娠组和轻、重度子痫前期组胎盘组织中TGF-β1、TGFβRⅠ和TGFβRⅡ的分布与定位,并通过高清晰度彩色病理图像分析系统对其进行定量分析。结果重度子痫前期组TGF-β1和TGFβRII的平均光密度较正常妊娠组显著增加(P<0·01),TGFβRI的平均光密度也较正常妊娠组增加(P<0·05)。结论TGF-β1、TGFβRI和TGFβRII在滋养细胞的浸润过程中发挥重要作用,它们可能与子痫前期的发病有着重大的关系。     

达利全对心力衰竭大鼠β_1、β_2、β_3肾上腺素能受体的影响

目的研究达利全(α_1肾上腺素受体阻断剂、β肾上腺素受体非选择性阻断剂)对升主动脉缩窄压力超负荷心力衰竭大鼠β_1、β_2、α_3肾上腺素能受体(β_1AR、β_2Ar、β_3AR)表达的影响,探讨达利全改善心力衰竭的新机制。方法将升主动脉缩窄术后心力衰竭Wistar雌性大鼠随机分为4组,一组为心力衰竭组,给予生理盐水灌胃,每日2次(n=10);其余3组为治疗组,治疗组分别给予达利全3mg/Kg、达利全12.5mg/Kg、达利全50mg/Kg,灌胃,每日2次(n=10);治疗12周。同时制备模型设置假手术组作为对照(n=10),不予处置。观察各组大鼠各项指标变化。结果与假手术组对比,心力衰竭鼠心肌细胞β_1ARmRNA表达显著降低(P<0.05),而β_3ARmRNA表达显著升高(P<0.05),药物治疗12周后,与心力衰竭组对比,β_1ARmRNA表达显著升高,β_3ARmRNA表达显著降低,且随剂量增加作用越明显(P<0.05);β_2AR mRNA表达各组之间无明显差异(P>0.05)。结论达利全通过调节心肌细胞内β_1ARmRNA和β_3ARmRNA表达,缓解心力衰竭症状。     

心肌L型钙通道/电流及其在心肌肥大和心力衰竭时的变化

心肌细胞电活动的基础就是各种通道的离子流。有两类离子流左右心肌细胞的电活动 :一类是内向离子流 ,包括Ｉｎａ、Ｉｎａ-ｂ、Ｉｆ、Ｉｃａ-Ｌ、Ｉｃａ-Ｔ;另一类是外向离子流 ,包括Ｉｔｏ(Ｉｔｏ1 、Ｉｔｏ2 )、ＩＫ(ＩＫｒ、ＩＫｓ、Ｉｋｐ)、ＩＫ1 、ＩＫ -ＡＴＰ、ＩＫ -Ａｃｈ等。心肌细胞的钙通道 /电流属内向电流 ,可分为两大类 :(1 )Ｌ型Ｃａ2 通道 /电流(ＩＣａ-Ｌ) ,它在决定心肌细胞动作电位平台期的内向电流和启动心肌细胞兴奋 -收缩耦联都发挥极其重要的作用。 (2 )Ｔ型Ｃａ2 通道 /电流 (Ｉｃａ-Ｔ) ,它可能在心脏起搏细胞…     

043 当归及阿魏酸钠对内皮细胞中TGFβ1及bFGF表达的影响

目的: 检测高脂血清对内皮细胞中转化生长因子β1(TGFβ1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响, 并观察当归、阿魏酸钠的作用. 方法: 实验分四组, 即: 正常对照组; 高脂血清损伤组; 当归+高脂血清组; 阿魏酸钠+高脂血清组. 用培养人脐静脉内皮细胞(ECV304)为研究对象, 以高脂血清为损伤因子, 观察当归及阿魏酸钠的作用. 实验中用扫描电镜观察内皮细胞形态变化, 用免疫细胞化学方法观测培养细胞中TGFβ1及bFGF的表达改变. 结果: 高脂血清能明显使内皮细胞的超微结构受损. 细胞表面干裂, 有孔隙; 微绒毛分布不规则, 减少甚至消失. 细胞中TGFβ1的表达明显增高, 而bFGF的表达降低. 结论: 当归及阿魏酸钠对内皮细胞TGFβ1、 bFGF表达的影响可能为其抗动脉粥样硬化的机理之一; 阿魏酸钠可能为当归的有效成分之一.     

Neuregulin-1β对压力超负荷心肌肥大大鼠治疗作用及机制的研究

 目的：研究神经调节蛋白 1β（NRG-1β）对压力超负荷所致大鼠心肌肥大的治疗作用并探讨其机制。方法：Wistar雄性大鼠采用腹主动脉缩窄的方法复制心肌肥大模型。术后8周,将模型动物随机分成模型（model）组、NRG-1β治疗组（尾静脉注射NRG-1β,10 μg·kg-1·d-1）和NRG-1β+赫赛汀(Herceptin, HERCE)治疗组（尾静脉注射NRG-1β的同时给予注射HERCE 10 μg·kg-1·d-1）。假手术（sham）组除不以银夹缩窄腹主动脉外,其余操作同腹主动脉缩窄组。7　d后分别采用心动超声、血流动力学评价心功能;Masson染色观察心肌组织的超微结构;放射免疫法检测心肌组织中血管紧张素II（Ang II）,酶联免疫吸附法测定心肌组织中肿瘤坏死因子 α（TNF-α）的变化;RT-PCR法检测心肌中bcl-2和bax mRMA表达的改变。结果：（1）心动超声显示,和模型组比较,NRG-1β组左室射血分数(LVEF)及短轴缩短率(LVFS)升高,左室收缩末内径(LVESD)及舒张末内径(LVEDD)减小（P<0.01）。（2）血流动力学检测显示,NRG-1β治疗组左室收缩末压(LVESP)和左室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)均明显高于模型组（P<0.01）;左室舒张末压(LVEDP)低于模型组（P<0.01）。（3）与模型组比较,NRG-1β组心肌胶原容积分数（CVF）下降,心肌中Ang II和TNF-α明显减少,bcl-2 mRNA表达显著升高,而bax mRNA表达下降（P<0.01）。（4）NRG-1β+ HERCE治疗组与模型组相比各项指标无明显改变（P>0.05）。结论：NRG-1可以减少压力超负荷大鼠心肌Ang II和TNF-α的生成,从而减轻Ang II和TNF-α介导的心肌间质重构; NRG-1可通过上调bcl-2 mRNA表达、下调bax mRNA表达,抑制心肌细胞的凋亡,改善压力超负荷大鼠的心功能,进而在心肌肥大的过程中发挥作用。