PEG-沸石固-固相变材料的制备及性能

采用接枝共聚法合成了以聚乙二醇（PEG）为相变物质,沸石为骨架的PEG沸石固固相变材料。通过红外光谱（FT-IR）、热失重分析（TGA）和差示扫描量热法（DSC）等测试手段对PEG-沸石固-固相变材料的结构、相变行为及热稳定性进行了研究。结果表明：通过改变PEG的分子量,可以得到不同相变焓和不同相变温度的PEG沸石固-固相变材料,其相变焓可达105.41 J/g,热稳定性良好,起始分解温度高于300 ℃。     

基于聚赖氨酸和聚乙二醇星形嵌段共聚物的基因载体研究

目的：合成以聚乙烯亚胺（PEI）为内核、聚赖氨酸（PLL）为内层、聚乙二醇（PEG）为外围的系列星形三嵌段共聚物（PEI-g-（PLL-b-PEG））,研究其作为基因载体的性能。方法：用超支化PEI表面氨基引发赖氨酸酸酐的开环聚合,再将活化的PEG以不同接枝率修饰得PEI-g-（PLL-b-PEG）。通过体外细胞实验测定系列共聚物对293T细胞毒性和转染效率。结果：成功合成PEI-g-（PLL-b-PEG）系列共聚物,在共聚物外围接入少量PEG时,不仅可降低细胞毒性,还可有效提高转染效率。结论：PEI-g-（PLL-b-PEG）可用作潜在的非病毒基因载体。     

多模微波辅助的聚乙二醇化聚苯乙烯树脂制备

目的：研究一种微波辅助的聚苯乙烯树脂聚乙二醇（PEG）化的方法。方法使用PEG 200对市售Merrifield树脂进行修饰,尝试了不同条件下PEG化的效率。使用自行制备的PEG化树脂进一步衍生化,并进行氨基酸的负载,与市售王树脂进行比对。结果优选出了一套较为合适的反应参数,使用5 g树脂,50 ml PEG 200,微波功率600 W,预设温度170℃,照射15 min,共2次,获得了接近90%的负载率。衍生化得到PEG化王树脂后与氨基酸进行缩合,获得了令人满意的产率。结论本文首次报道了多模微波装置辅助的聚苯乙烯树脂PEG化,该方法操作简单,制备快速,条件温和,产率满意,远远优于传统制备方法。     

基因芯片制作中长片段（70mers）寡核苷酸探针的合成与纯化

研究长片段（70mers）的寡核苷酸探针的合成与纯化。采用固相亚磷酰胺法合成长70mers的寡核苷酸片段，并通过改进的实验装置进行PAGE纯化和分析。结果表明此法能快速、高产率的制备可直接用于点样、长度为70mers的寡核苷酸探针．纯化后探针纯度高，满足基因芯片检测的制作要求。     

以磺胺嘧啶为载体的氟尿嘧啶导向药物的合成

目的：合成以磺胺嘧啶为载体的氟尿嘧啶导向药物。方法：将氟尿嘧啶与氯甲酰三氯甲酯（TCF）反应生成氯甲酰氟尿啶嘧，再与磺胺嘧啶磺酰胺基端高分子连续臂聚乙二醇（PEG）的羟基反应，使氟尿嘧啶通过PEG与碘胺嘧啶相连，紫外分光光度法检测载药量，紫外光谱（UV），红外光谱（IR）及差热分析（DSC）对合成产物进行鉴定。结果：合成产物的载药量为3．2％，UV，IR，DSC检测表明氟尿嘧啶成功的接入，结论：通过以TCF活化氟尿嘧啶可以使氟尿嘧啶与PEG的末端羟基成功地连接，从而合成氟尿嘧啶导向药物。     

丝素蛋白-聚氨酯水凝胶的制备和性能

以异佛尔酮二异氰酸酯（IPDI）、聚乙二醇（PEG）、聚氧化丙烯二醇（PPG）等为主要原料,合成了一系列—NCO封端的水性聚氨酯（PU）预聚体,与自制的丝素蛋白（SF）水溶液混合进行交联反应,制备出丝素蛋白聚氨酯（SF-PU）水凝胶。研究了SF-PU水凝胶的合成工艺,对SF-PU水凝胶进行了红外和电镜表征及性能测试,并对其溶胀动力学以及结构与性能之间的关系进行了研究。研究表明：成功合成了具有三维结构、溶胀响应性良好的SFPU水凝胶。     

黏蛋白质手性合成多肽疫苗对BALB/c小鼠CTL的诱导作用

目的：研究由具有局部手性特征的合成多肽D-MUC1和小鼠血清白蛋白(mouse serum albumin,MSA)构成的多肽疫苗对小鼠MUCl特异性CTL的诱导作用．方法：用固相合成法合成含有D-Ser的多肽D-MUC1,纯化后与载体蛋白MSA偶联,分别以细胞因子重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和胸腺肽(TP)为佐剂,免疫BALB／c小鼠,测定淋巴细胞增殖活性、MUCl特异性CTL杀伤活性．结果：合成肽经HPLC纯化后,质谱分析证明目的肽的分子量与理论值相符;D-MUCl多肽疫苗对BALB／c小鼠淋巴细胞增殖有明显的促进作用;D-MUCl多肽疫苗诱导出的特异性CTL杀伤MUCl阳性肿瘤细胞GZ．A5．3H．4．结论：研究结果表明D．MUCl合成肽疫苗可以在小鼠体内诱导出MUC1特异性CTL,为具有局部手性特征的MUCl合成肽疫苗进行肿瘤免疫治疗提供了实验依据。     

腺病毒载体的PEG修饰及其特性研究

目的：本研究通过对腺病毒载体（Adv）进行聚乙二醇（PEG）修饰,以达到改善Adv在体内免疫原性较强、血液半衰期短的不足.方法：使用活化的甲氧基PEG对Adv衣壳蛋白质进行修饰得到PEG化Adv（PEG-Adv）,用A549细胞评价了PEG-Adv的抗体抵抗能力、基因转导能力,并以体内试验考察其半衰期.结果：用本实验方法可通过调整反应中的PEG量控制Adv的PEG修饰率,PEG-Adv的血液半衰期及抗体抵抗能力显著优于普通Adv.结论：Adv经PEG修饰后,可显著改善Adv血液半衰期短、易被抗体中和等缺点,对开发高效的、有理想药动学特征的Adv具有重要意义.     

HSA-TP5融合基因表达载体的构建及其真核表达

目的：构建人血清白蛋白（HSA）-胸腺五肽（TP5）融合蛋白表达载体,并在毕赤酵母中表达,阐明其生物学活性。方法：利用基因重组技术构建HSA-TP5融合基因,并转染至毕赤酵母中从而构建其真核表达体系,通过琼脂糖凝胶电泳分离及试剂盒纯化获得PPICZαC-HSA-TP5真核重组表达质粒;采用两步发酵法对HSA-TP5基因工程菌进行高密度发酵,对发酵液上清蛋白沉淀浓缩,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法、阳离子交换层析及疏水层析等方法分离纯化蛋白;采用MTT法检测该融合蛋白促淋巴细胞增殖活性。结果：PCR法获得HSA目的基因片段长度为1 845 bp。酶切鉴定融合质粒HSA-TP5-pPICZαC得到片段长度为707 bp。测序分析,目的基因HSA和TP5序列与GenBank公布的基因序列完全一致,并正向连接融合。PCR法鉴定PPICZαC-HSA-TP5真核重组质粒与酵母基因组DNA整合,与对照组比较,转化组出现基因片段长度为1 860 bp。SDS-PAGE分析,在甲醇诱导后72 h内,随着诱导时间延长,HSA-TP5融合蛋白表达量逐步升高。利用阳离子交换层析及AKTA多功能蛋白纯化系统纯化得到HSA-TP5融合蛋白。MTT法检测,HSA-TP5融合蛋白与TP5蛋白具有一致的促淋巴细胞增殖活性。结论：通过构建HSA-TP5毕赤酵母真核表达体系可获得HSA-TP5融合蛋白并具有生物学活性。     

RP-HPLC法测定左卡尼汀片中左卡尼汀杂质A

目的 探讨聚乙二醇（PEG）化葛根素对大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的保护作用。方法 将SD大鼠随机分为6组（每组10只）： 假手术组,MIRI模型组,葛根素注射剂（20 mg/kg）对照组,PEG化葛根素低、中、高剂量（244、488、976 mg/kg）组。阻断大鼠升主动脉造成心肌缺血30 min,再灌注120 min,造成大鼠MIRI模型,在结扎后5 min各给药组尾iv给药。心电图监测心律失常情况,再灌注结束后腹主动脉采血,测定血清肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、天冬氨酸转氨酶（AST）和丙二醛（MDA）水平,并测量心肌梗死面积。结果 葛根素注射剂和PEG化葛根素均具有抗心律失常,降低血清中CK、LDH、AST和MDA水平的作用,减少心肌梗死面积;其中PEG化葛根素中、高剂量组的药效明显强于葛根素注射剂组。结论 PEG化葛根素对大鼠MIRI引起的损伤具有保护作用。     

茶多酚对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的 观察茶多酚对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响.方法 采用组织块培养法培养原代人牙周膜成纤维细胞并传代,经免疫组化SABC法检测角蛋白和波形丝蛋白鉴定,取5～8代细胞用于实验;按茶多酚不同浓度分1 mg/ml(B组)、0.5mg/ml(C组)、0.25mg/ml(D组)、0.125mg/ml(E组)、0.0625mg/ml(F组)组和空白对照组(A组),采用细胞计数法、MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞DNA含量.结果 不同浓度茶多酚均促进人牙周膜成纤维细胞的增殖和DNA合成(P＜0.05),茶多酚作用的最适浓度为0.5 mg/ml,最佳作用时间为48 h.结论 茶多酚对人牙周膜成纤维细胞增殖具有明显的促进作用.     

王树脂固相法人工合成生长抑素

目的：人工合成生长抑素。方法：以侧链保护的氨基酸为原料,用王树脂作为反应载体,在固相合成反应器中手工合成14个氨基酸的多肽生长抑素,并探讨影响合成的因素。结果：王树脂固相法合成生长抑素的纯度高达70%以上。结论：标准化的合成流程对生成抑素的人工合成有一定价值。     

2-苄氧基-5-氟-4-嘧啶酮-3-丁酸乙酯的合成及结构鉴定

目的: 合成氟尿嘧啶类衍生物合成中的关键中间体2-苄氧基-5-氟-4-嘧啶酮-3-丁酸乙酯.方法: 以5-氟尿嘧啶为原料, 经4步反应合成目标产物,并用红外光谱(IR)、核磁共振(1H-NMR)进行了结构确证.结果: 2-苄氧基-5-氟-4-嘧啶酮和γ-溴代丁酸乙酯反应得到两个化合物.结论: 通过IR谱确证一个化合物是目标物2-苄氧基-5-氟-4-嘧啶酮-3-丁酸乙酯,另一化合物是它的同分异构体.     

体外循环术后使用小剂量胸腺五肽体会

目的 :研究体外循环术后使用小剂量胸腺五肽对改善患者免疫功能、防止术后感染的效果。　方法 :随机选择 94例患者分组对照使用胸腺五肽 ,比较术后血常规、血生化及胸部X线片 ,观察感染情况。　结果 :使用胸腺五肽组的患者术后免疫功能较未使用组明显提高。　结论 :使用胸腺五肽可以通过改善细胞免疫的途径 ,提高患者免疫力 ,降低感染的发生率     

Effects of vitamin E on the proliferation and collagen synthesis of rat hepatic stellate cells treated with IL-2 or TNF-α

Objective To study the effects of vitamin E on the proliferation and collagen synthesis of rat hepatic stellate cells treated with interleukin-2 (IL-2 ) or tumor necrosis factor-α (TNF-α). Methods Hepatic stellate cells were isolated from male Sprague-Dawley rats by using modified Friedman’s method. Using the isolated cells cultured and treated with IL-2 or TNF-α, we studied the effects of vitamin E on their proliferation and collagen synthesis through an (3)H-thymidine and (3)H-proline incorporation assay, as well as through observation of these cells under a contrary phase microscope. Results Adding IL-2 increased the both proliferation and collagen synthesis of hepatic stellate cells. Their proliferation was also increased by the addition of TNF-α, although it decreased collagen synthesis. Vitamin E had marked inhibitory effects on the ability of cells treated with IL-2 or TNF-α to reproduce or synthesize collagen. Conclusion Vitamin E can inhibit the proliferation and collagen synthesis of hepatic stellate cells. It is possible that vitamin E affects liver fibrosis through these activities.     

肉桂提取物醇质体透皮吸收研究

目的 合成一长链肽47肽。方法 采用Fmoc/t-Bu正交保护多肽固相合成策略,使用9-芴甲氧羰基（Fmoc）保护氨基酸的α-氨基,用Liberty微波多肽合成仪,每个耦合循环用20%哌啶脱除Fmoc保护基团,连续添加氨基酸,并用茚三酮法检测反应终点,有效检测反应的进度,最后用82.5%的三氟乙酸将多肽从树脂上切割下来,得到47肽粗品。经过反相高效液相制备系统纯化得到多肽纯品,用反相高效液相分析仪和傅里叶高分辨质谱仪验证该产物。结果 高分辨质谱仪验证了该产物,纯品质量分数达98%。结论 微波可促进多肽特别是长链肽的合成。     

采用二酰氯法合成三肽

目的：设计出一种合成三肽的方案。方法：采用二酰氯法。结果：合成三肽5种,均经质谱、红外光谱、核磁共振和元素分析法证实。结论：此法适用于酸性氨基酸的三肽合成。     

干扰素-α在肝癌细胞对5'-脱氧-5-氟尿苷敏感性及其胸苷磷酸化酶表达的作用

目的探讨肝癌细胞SMMC-7721在干扰素-α（IFN-α）的作用下,对氟尿嘧啶类化疗药物敏感性的变化,及其与胸苷磷酸化酶（TP）表达水平的关系。方法：利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测SMMC-7721细胞TPmRNA表达水平,利用MTF法检测肝癌细胞对氟尿嘧啶类化疗药物的敏感性。结果：IFN-α上调TP mRNA表达具有时间一剂量依赖性。10000U／ml的IFN-α处理SMMC-7721细胞8h后TP mRNA表达水平开始升高,至12h达到峰值,此后维持较高水平至72h。5000U／ml与10000U／ml IFN-α处理肝癌细胞24h,TP mRNA表达水平显著升高,与未用IFN-α处理组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。IFN-α能明显提高SMMC-7721细胞对5′-脱氧-5-氟尿苷（5＇-dFUrd）的敏感性,在10000U／ml IFN-α作用下,5’-dFUrd的IX50由（102．1±18．4）μmol／L降低至（34．2±4．1）μmol／L（P〈0．05）。而IFN-α对5-氟尿嘧啶（5-FU）的敏感性影响不大,IC50与对照组（6．3±1．4）μmol／L相比,10000U／ml IFN-α作用时为（5．8±2．0）μmol／L。细胞对5′-dFurd敏感性的增加与IFN-α上调TPmRNA正相关,相关系数为0．6（Pearson检验P=0．008）。结论：IFN-α显著增强肝癌细胞SMMC-7721对5一Fu前体药物5′-dFUrd的敏感性,与其上调肝癌细胞TP mRNA表达水平正相关;IFN-α上调SMMC-7721细胞TP mRNA表达水平具有时间,剂量依赖性。     

6—氟—L—多巴的不对称合成

目的：合成6-氟-L多巴（FDOPA）。方法：以硝基藜芦醛为原料,经亲核取代、还原碘化、手性相转移催化烷基化=水解及HPLC纯化等步骤制备FDOPA,用手性流动相结合反相C18柱的HPLC法测定其对照纯度。结果：合成FDOPA总反应时间（不包括催化剂的合成时间）少于90min,总产率约为33%,对映纯度大于95%。结论：手性相转移催化烷基化法可以高选择性地合成FDOPA,本研究为6-[^18F]-L-多巴及春它[^18F]芳香氨基酸的放射化学合成及其对映纯度的测定提供了可靠的技术。