双胸蚓溶栓酶制剂对家兔血浆t—PA与PAI活力的影响

从双胸蚓组织分离、提取的溶栓酶制剂含有纤溶酶类及纤溶酶原激活物,具有良好的溶解血栓作用。动物实验表明该制剂能使体内t-PA活力增加,但不影响PAI活力。     

双胸蚓溶栓酶对体外培养的WISTAR胎鼠大脑神经元突起生长的影响

目的 探讨双胸蚓溶栓酶对神经元突起的影响及其作用机制。方法 应用神经元细胞体外培养技术观察了1~10 d内在不同剂量双胸蚓溶栓酶作用下的Wistar胎鼠大脑神经元突起的生长发育过程。结果 不同剂量双胸蚓溶栓酶对神经元突起的数量和长度以及轴索的形态与增长均有影响。结论 双胸蚓溶栓酶对体外培养的胎鼠大脑神经元突起的生长发育有促进作用。     

双胸蚯蚓溶栓酶对大鼠血栓形成及血液流变学的影响

双胸蚓溶栓酶不同剂量静脉给药对大鼠实验性血栓形成有明显的抑制作用。8u/kg和16u/kg时其抑制率分别为36.62％和43.62％。通过对血液流变学3项指标的对照观察,结果表明双胸蚓溶栓酶能够使聚集的血小板解聚,降低血液粘度,加速血流,促进微小血管扩张,从而改善血液循环及增加血流量,为临床用药提供了一定的依据。     

双胸蚓溶栓酶对胎鼠大脑神经元突起生长的影响

应用神经细胞体外培养技术观察了不同剂量双胸蚓溶栓酶作用下的1～30日内Wistar胎鼠大脑神经细胞的生长发育过程。结果显示,不同剂量溶栓酶对神经元突起数量以及轴索的形成和发展均有促进作用。     

双胸蚯蚓溶栓酶对胎鼠大脑神经细胞生长发育的作用

为了探讨双胸蚯蚓溶栓酶对神经细胞的影响及其作用机制,应用神经细胞体外培养技术观察了1—30日内在不同剂量双胸蚯蚓溶栓酶作用下的Wis-tar胎鼠大脑神经细胞的生长发育过程。结果显示,不同剂量溶栓酶对神经元突起的数量和长度以及轴索的形成和发展均有影响,表明双胸蚯蚓溶栓酶对体外培养的胎鼠大脑神经细胞的生长发育有促进作用。     

双胸蚯蚓溶栓酶抗缺血性脑损伤作用的实验研究

用沙土鼠30只,随机分为两组,夹闭双侧颈总动脉致前脑缺血后再灌流性脑损伤。两组均于右侧大脑皮质体感区注入25％HRP 20μl。实验组动物腹腔注射双胸蚓溶栓酶(bimastos thrombolytic enzyme,BTE)10ml,而对照组动物腹腔注射生理盐水10ml。心脏灌流固定,取材,冰冻切片,行TMB法呈色反应,光镜下观察。结果表明:实验组15例150张切片中丘脑标记细胞总数为2221个,平均为14.8个;对照组15例15O张切片中丘脑标记细胞总数为838个,平均为5.59个,两组差异非常显著(P<0.01)。     

参环毛蚓中溶栓活性蛋白酶的纯化和检测

参环毛蚓Pheretima aspergillum (E．Perrier)为《中华人民共和国药典》2000年版一部中收载的地龙药材来源之一。地龙始载于《神农本草经》，具有通络、利尿、清热、定惊、平喘之功，临床常用于高热神昏、惊厥抽搐、关节痹痛、半身不遂、高血压等。日本学者从赤子爱胜蚓中提取出类似尿激酶的物质，     

双胸蚯蚓溶栓酶对沙鼠缺血额叶皮质超微结构及离子的影响

采用结扎沙土鼠双颈总动脉20分钟后恢复血流制做脑缺血再灌注模型。应用透射电镜对额叶皮质超微结构进行观察,并采用电镜能谱技术对神经元随机检测Na~十Ca~卄等离子含量。结果表明,缺血的对照组神经元Na~十明显增高达16.43,而缺血后腹腔注入双胸蚯蚓溶栓酶的实验组显著下降为13.02,接近正常组的11.47;Ca~卄正常组为1.03,对照组增高达3.81,而实验组下降为2.44。同时实验组超微结构的损伤性改变明显轻于对照组。     

双胸蚯蚓溶栓酶对沙土鼠脑缺血再灌注脑匀浆中ET,TXB_2和6-keto-PGF_1α的影响

应用放免分析技术测定沙土鼠脑缺血再灌注模型脑匀浆中ET,TXB_2和6-keto-PGF_(1α)含量,并用干湿重量法测定脑组织含水量。结果显示双胸蚯蚓溶栓酶能明显降低沙土鼠脑缺血再灌注脑匀浆中ET和TXB_2的含量,减少脑组织含水量。提示双胸蚯蚓溶栓酶对缺血性脑损伤起保护作用。     

抗纤维蛋白-抗尿激酶双特异性单克隆抗体的体内外溶栓效果的研究

目的研究抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单克隆抗体在体内外的溶栓效力。方法通过分泌抗纤维蛋白单抗的杂交瘤细胞（变异株）与尿激酶免疫小鼠的脾细胞融合，获得分泌双特异性单抗（ｂｓＭｃＡｂｓ）杂交－杂交瘤细胞。采用ＥＬＩＳＡ法检测该ｂｓＭｃＡｂｓ与纤维蛋白和尿激酶的结合力。用１３１Ｉ血浆－血浆凝块溶解率法测定体外溶栓效力。用兔血栓模型测定体内溶栓效力。结果获得８株分泌抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单抗的杂交－杂交瘤细胞。ＥＬＩＳＡ实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ与纤维蛋白和尿激酶均有很强的结合力。体外溶栓实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ可使尿激酶的溶栓效力增强１５．５％。体内溶栓实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ的溶栓效力为尿激酶的１．６～２．１倍。结论单抗导向溶栓剂具有高度特异性和局部溶栓效力强等优点，值得进一步研究。     

改良双缩脲法测定血清总蛋白的方法与应用

目的探讨能消除脂质与葡聚糖双重干扰的血清总蛋白测定方法。方法用氢氧化钾代替Doumas法试剂中的氢氧化钠,使脂质的溶解度增大,以消除或减低脂质所致反应液混浊。优选调整酒石钾钠的浓度,以消除葡聚糖对测定的干扰。用正交法设计实验。优选氢氧化钾和酒石酸钾的最佳浓度。结果含氢氧化钾143mmol/L、酒石酸钾钠56.7mmol/L的改良试剂与含TG5.6mmol/L、葡聚糖60g/L的血清反应均不显混浊,可不做标本空白。TG>5.6mmol/L时,反应液混浊程度较Doumas法轻,可用标本空白纠正。对蛋白标准液和新鲜混合血清反应的吸收曲线相同。吸收峰530～560nm,最大峰值546nm,与Doumas法一致。改良试剂和Doumas试剂与蛋白反应的比吸光度分别为0.2992,0.3036L.g-1.cm-1。测定线性范围28～140g/L。回归方程y=0.8925 0.2727x,r=0.9995。与Doumas法平行测定外观正常的血清72例,结果无显著差异(t=0.99,P>0.2)。结论改良试剂性能稳定,成本低廉,既能消除脂质与葡聚糖的双重干扰,又保留了Doumas法的优点。适合手工、半自动和全自动生化分析仪测定血清总蛋白,应用效果满意。     

胸腹水腺苷脱氨酶活性测定对诊断结核性胸腹膜炎价值的探讨

腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）是嘌呤核苷代谢中的重要酶类。目前有关ＡＤＡ在某些疾病的诊断、治疗及发病机制中作用的研究很受关注（１）。笔者对７４例不同疾病患者胸腹水中的ＡＤＡ活性进行了测定,现将结果报告如下。１对象与方法１．１对象：７４例均为本院内科及肿瘤科住院...     

GC双内标法同时测定细辛挥发油中5种成分的含量

目的 建立毛细管气相色谱法同时测定细辛挥发油中5种主要成分(α-蒎烯、β-蒎烯、1, 8-桉叶素、黄樟素和甲基丁香酚)的方法。方法 采用挥发油提取器提取挥发油;以胡薄荷酮和间二甲苯为双内标物,用HP-5毛细管柱分离,火焰离子化检测器检测;以保留时间定性,内标法定量。结果 在所选择的色谱条件下,上述成分在12 min内获得较好的分离;5种成分与内标物的峰面积比值与其质量浓度有良好的线性关系,r>0.997 7;样品加标平均回收率为96.7%～99.4%,RSD为1.24%～2.31%。结论 本方法简单、快速、准确,可同时测定细辛挥发油中5种成分的含量,为细辛质量控制提供依据。     

双缩脲测定脑脊液总蛋白方法的探讨

目的：探讨用双缩脲试剂测定脑脊液总蛋白的方法，方法：使用Olympus1000型全自动生化分析仪，采用双缩脲试剂终点法测定20例脑脊液总蛋白。结果：该法线性可达20g/L，0．3、0．6、2．0g/L3种浓度的批内变异系数分别为11．1％、8．9％、2．3％，批间变异系数分别为20．1％、13．3％、4．2％；与磺基水杨酸钠浊度法比较。相关方程为Y＝－0．017＋1．054X，r=0.9962。结论可利用不经浓缩的双缩脲技术，在全自动生化分析仪上测定脑脊液总蛋白，方法简便易行，有足够的灵敏度。     

鼠源吲哚胺2,3-双加氧酶活性检测方法的建立

 目的  建立鼠源吲哚胺2,3-双加氧酶 (mouse indoleamine 2,3-dioxygenase,mIDO) 活性检测方法。方法 利用基因工程方法表达纯化重组mIDO (recombinant mIDO,rmIDO),建立酶水平mIDO活性检测体系;构建过表达mIDO的小鼠Lewis肺癌 (Lewis lung cancer,LLC) 细胞株,建立细胞水平mIDO活性检测体系。比较L-1-甲基色氨酸 (L-1-methyl tryptophan,L-1-MT) 在酶及细胞水平上对mIDO及人源IDO （human IDO,hIDO）的抑制作用,测定抑制类型、抑制常数Ki值及半数抑制浓度 (IC50) 值。 结果 L-1-MT对mIDO和hIDO均有抑制作用,抑制类型及抑制常数Ki值相似,但IC50值在酶水平及细胞水平上均有差异。 结论 mIDO酶活性检测体系是筛选IDO抑制剂的有效工具,与hIDO酶活性检测体系联用,能反映种属差异,可更好地利用小鼠模型来替代人类进行IDO抑制剂治疗疾病的研究。     

血清K+酶法测定单标准与双标准定标法的探讨

目的：探讨采用单标准及双标准定标法对酶法测定血清K^ 的影响。方法：在7170A生化仪上用酶法单标准（STD＝4.0mmol/L）和双标准或称差示分光光度法(STD1＝2.5mmol/L,STD2＝8.0mmol/L）分别定标对预先配制的10个不同浓度的标准液进行测定。结果：单标准定标测定绝对误差0.00－1.10mmol/L,平均0.36mmol/L;相对误差0.0％－13.4％,平均7.0％,双标准测定绝对误差0.00－0.15mmol/L,平均0.09mmol/L;相对误差0.0％－7.2%。结论：双标准定标法比单标准定标测定结果准确可靠,方法较标准曲线法简便实用。     

同时测定人肝微粒体中9种CYP450酶活性的LC-MS/MS方法

目的 建立一种同时测定人肝微粒体中9种CYP450酶活性的LC-MS/MS方法(鸡尾酒法),用于评估药物对CYP450酶活性的影响,以预判药物间发生相互作用的可能性.方法 使用9种不同酶的底物作为探针与人肝微粒体共同孵育,硝苯地平作为内标物质.用Agilent 1290系列液相色谱仪进行洗脱,所有代谢产物均在多反应监测...     

病毒性脑炎患儿IL-6、IL-8及TNF-α水平的测定及其临床意义

目的 探讨病毒性脑炎患儿血清、脑脊液中白细胞介素－6（IL－6）、白细胞介素－8（IL－8）、肿瘤坏死因子－α（TNF－α）水平的变化及其临床意义。方法 采用双抗体心酶联免疫法测定30例病毒性脑炎患儿血清、脑脊液中IL－6、IL－8、TNF－α水平，并与15例非中枢神经系统疾病患儿进行对照。结果 血清中的IL－6、IL－8、TNF－α的水平高于对照组（P＜0.05）；脑脊液中IL－6、IL－8、TNF-α水平较对照组明显升高（P＜0.01）。结论 IL－6、IL－8、TNF－α不仅具有抗病毒的作用，而且参与了病毒性脑炎的病理过程。     

血清白细胞介素－2受体的测定在脑血管性痴呆诊治中意义的探讨

目的 :检测脑血管性痴呆患者血清中可溶性白细胞介素 - 2 (s IL- 2 R)水平 ,评价 s IL- 2 R的测定在诊治脑血管性痴呆中的价值。方法 :采用双抗体夹心的 EL ISA法检测脑血管性痴呆患者血清中 s IL- 2 R的水平。结果 :脑血管性痴呆患者血清中的 s IL- 2 R水平较健康对照组显著增高 ,两组比较差异非常显著 (P <0 .0 1)。结论 :检测脑血管性痴呆患者血清中 s IL- 2 R水平 ,有助于了解患者的免疫功能变化及疗效观察