生长激素受体在结直肠癌中的表达及其意义

目的研究生长激素受体(GHR)在结直肠癌中的表达情况,了解生长激素(GH)在结直肠癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学法(IHC)测定100例结直肠癌标本及其附近正常黏膜中GHR的表达情况,同时测定Ki-67表达。分析结直肠癌组织与正常黏膜GHR的表达及其与临床病理因素和肿瘤的关系。结果结直肠癌中GHR表达(81%)明显高于正常黏膜(68%),GHR的表达与肿瘤分化程度、病理分期、肿瘤大小相关(P=0.047、P=0.003和P=0.017),并与肿瘤增殖相关(P<0.001)。结论GHR在结直肠癌组织中有较高的阳性表达,提示GHR的表达是结直肠癌发生、发展过程中的重要事件,结直肠癌患者应用GH应慎重。     

黏蛋白表达在结直肠癌中的意义

结直肠癌是我国常见的胃肠道恶性肿瘤,其发病率近年呈不断上升之势。随着发病率的增加,结直肠癌的研究也逐渐深入,以及分型亦也不断完善。而黏蛋白作为结直肠癌的特征之一,亦成为结直肠肠癌的研究热点。     

RUNX3蛋白在结直肠癌中的表达及意义

通过高通量组织芯片技术,制作石蜡组织微阵列,运用免疫组织化学ABC方法,检测RUNX3蛋白在癌旁及肿瘤组织中的表达特点,分析其与结直肠癌各病理特征之间的关系,探求该基因在结直肠癌中表达的生物学意义,以期为结直肠癌的早期诊断、预后评价和基因治疗指标的筛选提供有价值的实验依据。结直肠癌和癌旁组织均来自未经化放疗的诊断明确的结直肠癌手术切除标本62例及相应癌旁组织21例。采用石蜡组织微阵列技术,运用HE染色明确病理诊断,应用免疫组织化学染色方法,对RUNX3在非癌组织及结直肠癌中的表达情况进行检测与统计。实验数据采用SPSS11．5软件包进行统计学差异分析。结果显示：（1）在21例癌旁相对正常组织中和62例结直肠癌组织中,RUNX3阳性表达率分别为95．2％（20／21）和69．4％（43／62）,癌旁相对正常组织中RUNX3蛋白的阳性染色率高于结直肠癌组织（P=0．017）。在62例肿瘤中16例结肠肿瘤和46例直肠标本中RUNX3阳性率分别为（12／16,75．0％）,（31／46,67．4％）,两者无统计学差异（P=0．573）。（2）RUNX3的表达与肿瘤各病理指标之间关系：在45例溃疡型样本和17例隆起型样本中,RUNX3表达阳性率分别为62．2％（28／46）和88．2％（15／17）,二者之间有统计学差异（P=0．049）。在25例无淋巴结转移样本和37例有淋巴结转移样本中,RUNX3表达阳性率分别为84．0％和59．5％,二者之间有统计学差异（P=0．041）。RUNX3的表达在不同性别、年龄、分化程度、病变大小及不同浸润深度间无统计学差异。结果表明：（1）结直肠癌组织中RUNX3蛋白表达较癌旁黏膜组织呈现显著降低下调趋势,提示RUNX3蛋白表达下调可能与直肠癌的发生、发展有关。（2）RUNX3基因表达无年龄、性别、分化程度、病变大小、浸润深度间差异,但与肿     

环状RNA TADA2A在结直肠癌组织的表达及其对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:观察环状RNA TADA2A在结直肠癌组织中的表达及其对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测58对结直肠癌组织及癌旁组织中circTADA2A的相对表达量,分析其与患者临床病理特征间的关系。构建circTADA2A过表达质粒及对照质粒并分别转染结直肠癌细胞株(人结...     

生长抑素受体亚型在结直肠癌组织中的表达

目的　探讨结直肠癌组织中生长抑素受体亚型(SSTR1 SSTR5 )的表达和临床病理学意义。方法　免疫组织化学染色方法(SP法)检测12 7例结直肠癌组织和40例正常结直肠黏膜中SSTR 5种亚型的表达。结果　SSTR 5种亚型在结直肠癌组织和正常结直肠黏膜均有表达,两组SSTR表达的优势亚型都是SSTR1,结直肠癌组织中SSTR4表达明显高于正常结直肠黏膜(18.9%比2 .5 % ,P <0 .0 5 )。SSTR2、SSTR4、SSTR5在中高分化结直肠癌表达明显高于低分化结直肠癌表达(P <0 .0 5 ) ;淋巴结转移的结直肠癌SSTR1表达明显高于无淋巴结转移者(72 .2 %比5 4.5 % ,P <0 .0 5 ) ;溃疡型结直肠癌SSTR2表达明显降低(P <0 .0 5 ) ;此外,SSTR1表达率随Dukes分期呈升高趋势,而SSTR3 ,SSTR5则呈下降趋势,但没达到统计学水平。SSTR5种亚型表达均与患者年龄、性别、肿瘤位置、浸润深度、远处转移无明显相关。结论　结直肠癌组织中SSTR1是优势表达亚型,SSTR2、SSTR4、SSTR5亚型表达与癌恶性程度有关,可能在结直肠癌发展过程中发挥重要作用,应选择SSTR5亲和力强的SSTA治疗结直肠癌     

钙调神经磷酸酶信号转导通路在结直肠癌组织中的表达

目的检测钙调神经磷酸酶（CaN）信号转导通路在结直肠癌组织中的表达，分析CaN成员与结直肠癌临床病理特征的关系。方法应用Westem blot检测40例结直肠癌组织及其邻近正常黏膜中CaN Aα、CaN Aβ、CaNB与bcl-2蛋白表达，免疫组织化学法检测CaN在细胞水平的分布。结果结直肠癌组织中CaN信号传导通路成员CaN Aα、CaN Aβ、CaN B与bcl-2在结直肠癌组织中表达明显升高，分别为正常黏膜的3，45倍、3．67倍、4．31倍与3，18倍（P〈0．05）；CaN Aα与CaN郐表达水平与TNM分期较晚（Ⅲ／Ⅳ）有关（P〈0．05），CaN Aα与bcl-2在结直肠癌组织中表达情况呈线性相关，相关系数为0．493，P〈0．05。结论CaN信号转导通路持续活化可能在结直肠癌的发生中起重要作用。     

VHL基因在结直肠癌组织中的表达及其与生物学行为的相关性

为分析VHL基因在结直肠癌组织中的表达及其与生物学行为的相关性,选取本院收治的结直肠癌患者100例。以腹腔镜手术获取患者结直肠癌手术标本100份,纳入观察组。另选取结直肠癌旁正常组织100份,纳入对照组。分别检测2组PVHL和VHL基因,通过问卷调查患者年龄、性别及合并症,病理检查结直肠癌淋巴结转移、浸润、TNM分期及组织学分类。随访1年统计患者生存情况。结果显示,观察组VHL(+)、基因突变(+)率高于对照组(P <0.05),VHL(-)、基因突变(-)率低于对照组(P <0.05)。腺状癌、管状腺癌、黏液腺癌、未分化癌、腺鳞癌、小细胞癌的VHL阳性率高于阴性率(P <0.05),VHL基因突变比较差异有统计学意义(P <0.05)。不同组织学分类的结直肠癌VHL阳性率、阴性率比较差异无统计学意义(P>0.05),VHL基因突变比较差异无统计学意义(P>0.05)。VHL表达与结直肠癌患者年龄、性别、合并症无关(P>0.05),与淋巴结转移、肿瘤浸润深度、TNM分期有关(P <0.05)。VHL在结直肠癌中的表达情况与预后显著负相关(...     

Survivin和Caspase-3在结直肠癌中表达及临床意义

目的探讨Survivin和Caspase-3在结直肠癌中表达的临床意义,研究两基因与结直肠癌生物学特性之间的联系及两基因之间的关系。方法应用RT-PCR实验技术测定60例结直肠癌组织及40例癌旁正常组织标本中Survivin和Caspase-3mRNA的表达,分析两基因与肿瘤临床特性、生物学特性之间的相关性及其间的关系。结果Survivin在结直肠癌中的表达较癌旁正常组织明显升高（P〈0．05）,而在癌旁正常组织中未能检测到SurvivinmRNA。在癌组织中,Caspase-3的表达较正常组织明显降低（P〈0．05）。Survivin的表达与患者的性别、肿瘤大小、部位及组织分化程度无明显相关性,但与Dukes分期及有无淋巴结转移密切相关;而Caspase-3的表达仅与肿瘤的分化程度有关,且丽基因呈负相关。结论Survivin与Caspase-3在结直肠癌组织中表达均与癌旁正常组织存在差异,并与肿瘤的Dukes分期、淋巴转移和分化程度有关。因此我们可以推断Sur-vivin可能与肿瘤的侵袭性有着密切的联系;Caspase．3与肿瘤的恶性程度有关。单独或者联合检测两基因mRNA表达可以为临床治疗提供重要的参考依据。     

EZH2mRNA在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨zeste基因增强子同源物2（EZH2）mRNA在结直肠癌组织中的表达及其与结直肠癌临床病理特征的关系。方法采用PCR方法检测了27例结直肠癌患者的癌组织、癌旁组织和正常黏膜上皮组织中EZH2 mRNA的表达情况,并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果结直肠癌组织、癌旁组织及正常黏膜上皮组织中EZH2 mRNA的表达水平分别为3.01±1.29、1.20±0.69及0.87±0.37,其在结直肠癌组织的表达水平最高（P〈0.01）,而在癌旁组织和正常黏膜上皮组织中的表达差异无统计学意义（P=0.403）。结直肠癌组织中EZH2 mRNA的表达与其TNM分期（P=0.002）和组织分化程度（P=0.005）均有关,与年龄（P=0.388）、性别（P=0.963）、肿瘤直径（P=0.579）、组织学类型（P=0.945）、肿瘤位置（P=0.611）及淋巴结转移（P=0.449）均无关。结论 EZH2 mRNA在结直肠癌组织中呈高表达,可能在结直肠癌的发生和发展过程中起关键作用,可作为判断结直肠癌恶性程度及进程的参考指标之一。     

结直肠癌组织中生长抑素受体亚型表达与Ki67、bcl-2、p53的关系

目的 探讨生长抑素受体各亚型（SSTR1～SSTR5）在结直肠癌组织中的表达分别与癌细胞增殖、bcl-2、p53表达之间的关系。方法 免疫组织化学染色方法检测127例结直肠癌组织中SSTR1-SSTR5、Ki67、bcl-2、p53的表达，分析各SSTR亚型表达与癌细胞增殖，凋亡的关系。结果 SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4、SSTR5阳性表达率为：64．6％、36．2％、18．9％、18．9％、38．6％，SSTR2、SSTR3阳性表达的癌细胞Ki67增殖指数明显低于其阴性表达（P〈0．05）。在SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR5阳性表达组中bcl-2阳性表达率明显低于其阴性表达组（P〈0．05），5种亚型的表达均与p53表达无关。结论 SSTR2和SSTR3可抑制癌细胞增殖，SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR5通过下调bcl-2表达促进癌细胞凋亡，它们可能在结直肠癌发展过程发挥重要作用，应选择SSTR2或SSTR3亲和力强的生长抑素类似物（SSTA）治疗结直肠癌。     

125Ⅰ粒子组织间植入对大肠癌的抑制作用及其机制

目的探讨125Ⅰ粒子抑制大肠癌生长的作用及其机制.方法采用雄性BALB/C裸小鼠建立人类大肠癌HCT-8细胞株的裸小鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤鼠分5组(每组10只),对照组、空剂量组(0 Bq)、低剂量组(7.4×106 Bq)、中剂量组(14.8×106 Bq)、高剂量组(29.6×106 Bq),原位末端标记法检测肿瘤细胞凋亡的情况,免疫组织化学SP法染色检测血管内皮生长因子(VEGF),行微血管密度记数(MVD),同时检测p53蛋白表达情况.结果125Ⅰ粒子组织间植入治疗大肠癌,高、中、低剂量组抑瘤率分别为46.2%、34.0%、21.5%.在高剂量组中,p53蛋白表达增加,凋亡细胞增多,MVD及VEGF减少.结论(1)确证了125Ⅰ粒子对大肠癌治疗的有效性.(2)125Ⅰ粒子的推荐剂量14.8×106～29.6×106Bq.(3)125Ⅰ粒子组织间植入抑制肿瘤新生血管生成,同时p53蛋白表达量增加,细胞凋亡增多.     

cFLIP蛋白在大肠癌细胞中的表达及其对大肠癌细胞凋亡的影响

目的检测细胞型Fas相关死亡区域蛋白样β白细胞介素1转换酶抑制蛋白(cFLIP)在大肠癌细胞中的表达,探讨其在大肠癌细胞凋亡中的作用。方法应用Western蛋白印迹法检测3株人大肠癌细胞株中cFLIP蛋白的表达及大分子合成抑制剂放线菌素D(ActD,10μg/L)对SW620细胞cFLIP表达的影响,并运用四唑盐比色法(MTT法)检测cFLIP对SW620细胞凋亡的影响。结果SW1116及SW620细胞株cFLIP蛋白呈阳性表达,而LoVo细胞株呈阴性表达。ActD(10μg/L)可明显下调SW620细胞中cFLIP蛋白的表达水平,其作用1h以后,cFLIP表达水平开始下降(为0h的86%),作用24h后下降最明显(为0h的59%)。同时,抗Fas抗体(1mg/L)可最大程度地诱导28.8%的SW620细胞发生凋亡。结论cFLIP蛋白在大肠癌细胞中表达并可能在抑制大肠癌细胞凋亡中发挥重要作用。     

核糖核酸干扰抑制生存素表达诱导小鼠结肠癌细胞凋亡

目的筛选强效抑制生存素Survivin基因表达的小干扰核糖核酸(siRNA),探讨Sur- vivin基因抑制对小鼠结肠癌细胞凋亡的影响。方法根据siRNA的设计规则和Survivin序列,设计3段侯选siRNA,聚合酶链反应(PCR)法制备表达框；将siRNA表达框与Survivin-绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因表达质粒(pSurvivin-EGFP)共转染293T细胞,24～48 h后根据荧光强度筛选强效siRNA；再制备其表达质粒转染小鼠结肠癌CT26细胞,应用实时荧光定量(FQ)-聚合酶链反应和蛋白印迹(Western blot)法分析Survivin基因的表达；DNA末端标记(TUNEL)法和流式细胞仪(FCM)Annexin V/丙化碘锭(PI)双染色法检测细胞凋亡。结果筛选出1段高效抑制Survivin表达的siRNA,可使CT26细胞内Survivin mRNA拷贝数明显减少,抑制率为86．9%；蛋白表达水平亦显著降低；TUNEL检测显示转染48 h后RNA干扰组和对照组凋亡细胞数分别为(60．13±5．71)个和(5．47±0．63)个,两组差异有统计学意义(P＜0．01)；FCM检测转染后1、2、3、4 d凋亡细胞比率分别为2．1%、4．9%、11．7%和32．6%,对照组4个时间点凋亡率均低于1．5%,两组差异有统计学意义(P＜0．01)。结论siRNA能有效抑制小鼠结肠癌CT26细胞内Survivin基因表达并诱导结肠癌细胞凋亡。     

凋亡抑制基因存活素在膀胱癌中的表达及意义

目的　探讨膀胱癌组织中凋亡抑制基因存活素 (survivin)表达在膀胱癌发生发展中的作用。　方法　应用免疫组化 (SP)法 ,对 6 0例膀胱移行细胞癌组织标本中存活素的表达进行检测。男 4 8例 ,女 12例。平均年龄 5 9岁。病理分级Ⅰ级 16例 ,Ⅱ级 2 4例 ,Ⅲ级 2 0例。临床分期T113例 ,T2 15例 ,T3 2 1例 ,T411例。复发性膀胱癌 2 1例。 10例非肿瘤膀胱组织作对照。　结果　 6 0例膀胱癌组织中存活素阳性表达 36例 (6 0 .0 % ) ,10例非肿瘤膀胱组织存活素表达均为阴性。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱癌组织存活素阳性表达率分别为 37.5 % (6 / 16 )、6 6 .7% (16 / 2 4 )、70 .0 % (14 / 2 0 ) ,Ⅰ级与Ⅱ、Ⅲ级比较差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。T1、T2 、T3 、T4期膀胱癌组织存活素阳性率分别为 5 3.8% (7/ 13)、6 0 .0 % (9/ 15 )、6 1.9% (13/ 2 1)、6 3.6 % (7/ 11) ,呈逐渐增高趋势 ,但组间两两比较差异均无统计学意义 (P>0 .0 5 )。复发性膀胱癌存活素阳性率为 80 .9% (17/ 2 1)。　结论　存活素与膀胱癌发生发展有关 ,检测膀胱癌组织中存活素表达可能对判断膀胱癌预后有一定意义。     

FHIT mRNA在结直肠癌中的表达及其与细胞凋亡的相关性

目的研究脆性组氨酸三联体基因(FHIT mRNA)在结直肠癌组织中的表达以及与结直肠癌细胞凋亡的相关性。方法应用组织芯片技术制作正常直肠痔组织、腺瘤组织标本各16例及结直肠癌80例石蜡标本,采用原位分子杂交检测FHIT mRNA,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测结直肠癌细胞的凋亡指数。结果(1)正常直肠组织平均FHIT mRNA阳性细胞率为45.67%±9.39%,腺瘤组织平均阳性细胞率为23.45%±5.06%,结直肠癌组织平均阳性细胞率为15.1%±4.11%,三者比较,差异有统计学意义(P<0.01),结直肠癌患者不同年龄、性别、肿瘤部位、大小、血清CEA水平、组织学类型的FHIT mRNA阳性细胞率无统计学差异(P>0.05);不同分化程度、病理分期、淋巴转移的FHIT mRNA阳性细胞率有统计学差异(P<0.05);(2)FHIT mRNA表达程度不同的结直肠癌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)间存在显著性差异(P<0.01);(3)FHIT mRNA阳性细胞率高患者平均生存期为42.7个月,阳性细胞率低患者为29.8个月,前者的年累计生存率(88.10%,37/42)显著低于阳性细胞率低者(74.19%,23/31)(P<0.01)。结论FHIT基因可能参与结直肠癌细胞凋亡的调节,FHIT基因表达下降可能与结直肠癌的发生密切相关。     

神经母细胞瘤Survivin基因表达和细胞凋亡的研究

目的：探讨神经母细胞瘤（NB）Survivin表达和细胞凋亡。方法：应用免疫组织化学技术和DNA原位末端标记技术检测26例NB中Survivin基因表达和细胞凋亡。结果：NB中15例有Survivin表达阳性细胞检出，阳性检出率57．7％。神经节母细胞瘤（GNB）的阳性检出率为20．0％，NB为66．7％；预后差组织（UFH）组为88．9％，预后好（FH）组这41．2％；I－Ⅱ及ⅣS期为27．3％，Ⅲ－Ⅳ期为80．0％。NB组、UFH组、Ⅲ-Ⅳ期标本Survivin阳性表达率高于GNB、FH、I－Ⅱ及ⅣS期标本，P值分别为0．0823、0．0243、0．0105。17例有凋亡细胞检出NB中12例有Survivin阳性表达，Survivin标记指数与凋亡指数（AI）呈负相关（n=12,γ=-0.591）、与生存时间呈负相关（n=12,γ=-0.629），AI与生存时间则呈正相关（n=16,γ=0.563）。结论：Survivin引起的凋亡抑制与NB发生发展关系密切，是患者预后的重要指标。     

RNA干扰双位点抑制Survivin基因诱导雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡

目的研究采用RNA干扰技术抑制雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞中Survivin 基因的表达对PC-3细胞增殖及凋亡的影响。方法设计2条靶向Survivin mRNA的Survivin shRNA,克隆至同一质粒载体,并鉴定分析;质粒转染PC-3细胞,绘制细胞生长曲线;并于转染48 h 后进行Survivin基因蛋白表达及细胞凋亡检测。结果酶切鉴定、测序分析证实负载双片段Sur- vivin shRNA的质粒载体构建成功。转染PC-3细胞后,细胞生长曲线示实验组PC-3细胞增殖明显受抑制;转染后48 h．实验组、阴性对照组、空白对照组Survivin蛋白表达强度分别为(4．62± O．84)％、(38．83±7．96)％和(40．98±3．83)％,实验组与两对照组相比差异均有显著性意义(P< 0．05);转染48 h后PC-3细胞凋亡率开始增加。结论负载双片段Survivin shRNA的质粒载体转染PC-3细胞后能明显抑制PC-3细胞增殖,抑制PC-3细胞Survivin蛋白表达,并能诱导PC-3细胞凋亡。但诱导PC-3细胞凋亡最明显的时机需要进一步观察。     

Survivin和RASSF1A基因在大肠癌中的表达及其临床意义

为研究大肠癌组织中生存素(survivin)基因与Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因表达与大肠癌发生、发展的关系,利用逆转录PCR技术,测定60例大肠癌组织及20例癌旁组织中survivin基因与RASSF1A基因的mRNA表达情况;利用甲基化特异性PCR(MSP)技术对RASSF1A启动子甲基化情况进行了鉴...     

肾细胞癌中X染色体相关的凋亡抑制蛋白的表达与细胞凋亡的关系

目的 :探讨X染色体相关的凋亡抑制蛋白 (XIAP)在肾细胞癌中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法 :应用免疫组织化学技术和DNA原位末端标记技术 (TUNEL)检测 2 8例肾细胞癌中XIAP的表达与细胞凋亡。结果 :2 8例肾细胞癌XIAP阳性率为 5 7.1% ,9例正常肾组织XIAP阳性率为 11.1% ,差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。XIAP表达与肾细胞癌病理类型、病理分期和病理分级无明显相关 (P >0 .0 5 )。XIAP表达与AI呈负相关 (P <0 .0 1)。结论 :XIAP在肾细胞癌中表达对判断肾细胞癌的生物学特性无明显价值 ,但却为靶向XIAP的抗肾细胞癌治疗提供了理论依据。     

Smac和Survivin基因在肝癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨Smac和Survivin在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及两者在肝癌细胞凋亡中的作用和关系。方法免疫组织化学法检测50例肝癌组织、20例癌旁组织和15例正常肝组织中Smac和Survivin蛋白表达情况。逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测Smac和SurvivinmRNA表达情况。结果50例HCC标本中表达Smac有21例(42.0%),而除2例癌旁组织外,其他癌旁组织和正常肝组织中均见Smac表达;Survivin在癌组织、癌旁组织和正常肝组织中分别有46例、2例和0例表达;50例肝癌组织中Smac阳性率为40.0%(20/50),肝癌组织和非肝癌组织中Smac的表达差异具有统计学意义,Survivin在肝癌组织、癌旁组织和正常组织中阳性率分别为90.0%(45/50)、10.0%(2/20)和0%(0/15),肝癌组织和非肝癌组织中Survivin的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Smac在肝癌组织中低表达,其表达和Survivin呈明显的负相关,两者可能是肝癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环。