急性下呼吸道感染患儿病毒病原学及其临床特征

目的 了解急件下呼吸道感染(ALRI)住院患儿病毒感染情况及其临床特征.方法 收集2004-2006年冬季(11月至次年2月)因ALRI在北京儿童医院住院治疗的＜5岁患儿鼻咽吸出物333份.男230例,女103例;年龄1个月～4.8岁.采用PCR技术和病毒分离方法对鼻咽吸出物进行呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(AdV)、副流感病毒(PIV)1～4型、鼻病毒(RhV)、人偏肺病毒(hMPV)、冠状病毒(HCoV)及人博卡病毒(HBoV)检测.采用人喉上皮癌细胞和非洲猴肾细胞对鼻咽吸出物进行病毒分离,对阳性结果进行序列测定和鉴定.结果 ALRI 333例患儿中,病毒检测阳性123份(36.94%),其中RSV阳性102例,AdV、HBoV阳性各16例,RhV阳性1例,其中12例为双重阳性.未检测到PIV、hMPV及HCoV.333份鼻回吸出物中病毒分离得剑11株病毒株.经PCR扩增及序列测定证实均为AdV,包括AdV1型2株,AdV2型、AdV3型、AdV7型各3株.肺炎患儿病毒阳性检出率为30.35%,毛细支气管炎患儿病毒阳性检出率为62.50%,急性支气管炎患儿病毒阳性检出率为23.08%,毛细支气管炎患儿病毒阳性检出率高于肺炎和急性支气管炎患儿(χ2=24.75,19.66 Pa＜0.01).结论 RSV感染在北京儿章医院2004-2006年冬季ALRI住院患儿中占首位;感染的AdV血清型包括AdV 1型、AdV 2型、AdV 3型及AdV 7型;HBoV可能是ALRI的重要病原.毛细支气管炎患儿病毒感染检出率最高.     

90例儿童人博卡病毒感染临床分析

目的：探讨儿童人博卡病毒（HBoV）感染的临床特征。方法：采集843例下呼吸道感染患儿鼻、咽拭子标本,用多重RT-PCR方法检测HBoV和其他6种常见呼吸道病毒,分析HBoV阳性病例临床特征。结果：843例标本中检测出HBoV阳性90例（10.7%）,呼吸道合胞病毒（RSV）131例（15.5%）,流感病毒（IFV）117例（13.9%）,副流感病毒(PIV)84例（10.0%）,鼻病毒(RV)55例（6.5%）,冠状病毒(OC43)48例（5.7%）,人类偏肺病毒(HMPV)33例（3.7%）。HBoV合并其他呼吸道感染者45例（50%）,其中HBoV合并１种其他病毒感染者33例（37％）,合并2种其他病毒感染者11例（12％）,合并3种其他病毒感染者1例（1％）。伴喘息的患儿HBoV检出率高于不伴喘息的患儿（17.0% vs 9.2%,P<0.01）。HBoV阳性患儿常见的临床表现为频咳、喘息和发热。HBoV阳性组与RSV阳性组中喘息发生的构成比差异无统计学意义。结论：伴喘息发作的下呼吸道感染患儿中,HboV阳性检出率明显高于不伴喘息发作患儿,提示HBoV可能是除RSV外另一种引起儿童喘息的呼吸道病毒。HBoV与其他呼吸道病毒存在着混合感染。     

重庆地区婴幼儿重症肺炎呼吸道病毒病原分析

目的 了解重庆地区婴幼儿重症肺炎病毒病原的感染情况.方法 2006年12月至2008年3月,取ICU病房收集诊断为重症肺炎患儿的深部气道或机械通气气管导管内吸取物标本119例,采用RT-PCR或PCR方法 检测呼吸道合胞病毒(RSV)、人偏肺病毒(hMPV)、博卡病毒(HBoV)、腺病毒(ADV)、副流感病毒(PIV)1、2、3和流感病毒(IV)A、B等呼吸道病毒病原.结果 119例标本中病毒总检出例数为86例(72.3%),其中RSV检出率最高,为41.2%(49/119).有2种及以上病毒协同感染23例,占26.7%(23/86);RSV阳性中有19例存在协同感染,占38.8%(19/49).69例行细菌检测,其中53例为阳性,阳性率为76.8%.这69例标本中,病毒阳性率为76.8%;病毒细菌双阳性为41例,占59.4%.结论 (1)病毒感染仍是重庆地区婴幼儿重症肺炎的重要病因.(2)BSV是婴幼儿重症肺炎最常见病毒病原,其次为ADV和hMPV.(3)病毒的协同感染较在重症呼吸道患儿中可能较为普遍,但尚无证据说明病毒协同感染可加重病情.     

急性下呼吸道感染患儿病毒病原学分析

目的了解昆明地区小儿急性下呼吸道感染(ALRI)患儿病毒病原谱及病毒病原学流行特点。方法对昆明市儿童医院内科2005-10—2006-09,临床诊断为急性下呼吸道感染712例住院患儿鼻咽分泌物,应用直接免疫荧光法进行呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IVA、B型)、副流感病毒(PIV1、2、3型)7种病毒抗原检测,并对呼吸道病毒流行特点进行分析。结果712例ALRI患儿中检出阳性病例206例,阳性率28.93%。新生儿、婴儿占阳性病例的77.18%。阳性标本中检出RSV177株,占阳性标本的85.92%(177/206),其次为PIV2、ADV各9株分别占4.37%(9/206),检出PIV35株占2.43%(5/206)、IVA、PIV1各3株占1.46%(3/206),一年中未检出IVB病毒株。206例阳性患儿中新生儿、婴儿、幼儿RSV感染阳性率分别为27.18%、42.23%、16.51%,年龄组间RSV阳性率比较,差异存在统计学意义。婴儿组中检出混合感染阳性病例3例,其中RSV合并ADV感染2例,PIV2合并ADV感染1例。RSV高峰流行季节在每年7月至次年2月,流行季节持续近8个月,3～6月病毒感染阳性率呈下降趋势,呼吸道病毒感染流行具有明显季节性。结论RSV是昆明地区婴儿ALRI的主要病原,呼吸道病毒类型及病原流行季节存在地区差异。     

儿童呼吸道人类偏肺病毒呼吸道合胞病毒和流感病毒感染的临床特征比较

目的 了解人类偏肺病毒(hMPV)在苏州地区儿童呼吸道感粢中的感染情况;比较hMPV、呼吸道合胞病毒(RSV)和流感病毒(Inf)引起呼吸道感染的临床特征.方法 选取2005年11月至2006年10月苏州大学附属儿童医院呼吸科1932例急性呼吸道感染住院患儿.采用无茵负压吸引法采集新鲜痰液.直接免疫荧光法检测RSV,腺病毒,Inf A、B型,副流感病毒1、2、3型等7种常见呼吸道病毒;同时用逆转录.聚合酶链反应法(RTPCR)检测hMPV N基因,随机挑选部分阳性PCR扩增产物进行核苷酸测定并将所测序列进行比较分析.结果 1932例标本中hMPV阳性例数为128例(6.6%),其中hMPV合并其他呼吸道病毒感染5例(3.9%);hMPV检测阳性率在冬季呈现高峰;hMPV感染患儿的平均年龄为22.17月龄,较RSV和Inf感染患儿大;hMPV感染者临床特征与RSV和Inf感染相似,喘息在RSV和hMPV感染患儿中更为多见,发热则更多见于hMPV和Inf感染患儿.RSV感染后所致的首要疾病是毛细支气管炎,hMPV和Inf感染后所致的首要疾病是肺炎.单纯hMPV与hMPV合并其他呼吸道病毒感染临床表现差异无统计学意义(P＞0.05).结论 苏州地区部分儿童的呼吸道感染与hMPV有关;hMPV感染临床特征无特异性;hMPV在合并其他呼吸道病毒感染时并不加重病情.     

儿童急性下呼吸道感染病毒病原学分析

目的了解儿童急性下呼吸道感染病毒病原学特点。方法采用直接免疫荧光法(DIF),对2007年9月—2009年9月住院的5480例0～12岁下呼吸道感染患儿鼻咽分泌物进行8种病毒检测。结果5480例患儿中,2710例检出至少1种病毒,总检出率49.5%。呼吸道合胞病毒(RSV)检出最多,为1386例,占51.1%,其余,依次是偏肺病毒(hMPV)513例(18.9%),副流感病毒Ⅲ(PIVⅢ)338例(12.5%),腺病毒(ADV)192例(7.1%);流感病毒A(IFA)128例(4.7%),流感病毒B(IFB)79例(2.9%),副流感病毒Ⅰ(PIVⅠ)41例(1.5%),副流感病毒Ⅱ(PIVⅡ)33例(1.2%)。6个月以下年龄组阳性率最高,为43.5%。RSV、hMPV季节性较明显,主要集中在冬春季节(11月至次年4月)。肺炎、毛细支气管炎、支气管炎(伴喘息)、支气管炎(不伴喘息)和哮喘患儿病毒阳性率分别为47.4%、63.6%、50.5%、30.1%和43.5%。结论病毒是儿童急性下呼吸道感染的主要病原。发病年龄主要在婴幼儿,其中RSV和hMPV最常见。     

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目的探讨急性下呼吸道感染住院患儿病毒病原学情况,及其与年龄、呼吸道疾病的关系。方法选择温州医学院附属育英儿童医院2003年1月～2005年1月因急性下呼吸道感染住院治疗的儿童2073例,取其鼻咽分泌物,采用直接荧光免疫法检测7项呼吸道病毒抗原,分析其结果。结果2073例患儿送检标本,阳性1006份,阳性率48.5%。阳性标本中呼吸道合胞病毒(RSV)798例(79.3%),副流感病毒Ⅲ型(PIVⅢ)106例(10.5%),腺病毒(ADV)31例(3.0%),流感病毒A型(IVA)26例(2.6%),流感病毒B型(IVB)6例(0.6%),副流感病毒Ⅰ型(PIVⅠ)15例(1.5%)、RSV和IVA混合感染18例(1.8%),RSV和PIVⅢ混合感染3例(0.3%),RSV和PIVⅠ混合感染3例(0.3%),PIVⅡ未检测到。结论温州地区急性下呼吸道感染以RSV为主要病原,婴幼儿(尤其<6个月)病毒感染率较高,好发于冬春季节,以急性毛细支气管炎的检出率最高(61.3%)。     

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目的了解北京地区门诊儿童急性呼吸道感染的病毒病原学特点。方法 2010年3月至2011年2月在北京儿童医院门诊就诊的急性呼吸道感染患儿540例,每例患儿采集咽拭子标本1份。采用多重PCR试剂检测常见呼吸道病毒核酸,包括呼吸道合胞病毒(RSV)A、B型,鼻病毒(RV),副流感病毒(PIV)1～4型,流感病毒(IFV)甲、乙型,腺病毒(ADV),人偏肺病毒(HMPV),人冠状病毒(HCoV),人博卡病毒(HBoV)及肠道病毒(EV)。结果 540例门诊采集的急性呼吸道感染患儿的咽拭子标本中,306例检出至少1种病毒,总阳性率56.7%。其中33例检出2种病毒,1例检出3种病毒,混合感染率为6.3%。各种病毒中,IFV检出率最高占16.7%,其次是ADV(12.8%),EV(7.8%),PIV(7.2%),。IFV中以甲型IFV为主(占95.6%),PIV中以PIV3型为主(占66.7%),RSV检出以RSVA型为主,占79.3%。结论病毒是引起儿童急性呼吸道感染的重要病原,北京儿童医院急性呼吸道感染的主要病毒病原是IFV、ADV、EV、PIV。     

重庆地区人类偏肺病毒感染与小儿毛细支气管炎

目的探讨人类偏肺病毒(human metapneumovirus，hMPV)在重庆地区小儿毛细支气管炎中的感染情况，比较hMPV与呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起的毛细支气管炎的临床特点。方法用免疫荧光快速诊断方法，检测80例毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物中RSV、腺病毒(Ado)、流感病毒(Flu)A、B、副流感病毒(Para)1、2、3七种常见呼吸道病毒，采用RT-PCR的方法检测上述患儿鼻咽分泌物中hMPV的L基因和M基因。结果80例毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物中病毒检出率为65％，在病毒阳性检出标本中RSV感染占63．4％(33／52例)，Flu-B(3／52例)和Para-3(3／52例)均占5．77％，Para-1占1．92％(1／52例)，Flu-A与Flu-B混合感染占3．85％(2／52例)；80例患儿的鼻咽分泌物中发现10例为hMPVL和M基因同时阳性，其中单独hMPV阳性7例，3例为RSV与hMPV合并感染，hMPV阳性占病毒阳性检出标本的13．46％(7／52例)，hMPV与RSV合并感染为5．77％(3／52例)。结论RSV仍然是引起毛细支气管炎的首位病原，约为41．25％；hMPV感染在重庆地区小儿毛细支气管炎中居第二位，约占8．75％(7／80例)，仅从临床表现上很难鉴别hMPV感染与RSV感染。     

2003-2007年重庆地区急性下呼吸道感染患儿病毒监测情况

目的 分析重庆地区急性下呼吸道感染(ALRI)患儿2003-2007年病毒病原学构成及变化情况,探讨鼻咽分泌物(NPS)病毒抗原检测与血清病毒抗体检测对ALRI患儿病原学诊断的价值.方法 2003年4月-2007年10月从2 529例ALRI住院患儿吸取了 NPS标本,采刚免疫荧光法检测7种常见的呼吸道病毒抗原:呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、A型流感病毒(IA)、B型流感病毒(IB)、副流感病毒1、2、3型(PIV1、PIV2、PIV3),采用EIJSA方法检测55 887例ADV病毒血清IgM抗体,其中45 159例采用同样方法检测了 RSV病毒血清IgM抗体.结果 2 529例呼吸道病毒抗原检测阳性778份(30.76%).其中RSV阳性668份(85.86%),PIV3阳性75份(9.64%),IA阳性20份(2.57%).ADV阳性15份(1.93%),PIV1阳性仪1份(0.13%),且与RSV协同阳性.病毒血清RSV-IgM检测各年阳性率为0.9%～15.2%,ADV-IgM检测各年阳性率为0.6%～10.6%.RSV感染主要在冬春季节好发.结论 重庆地区ALRI中病毒感染仍然是小儿ALBI的最常见病原,且仍以BSV感染居首,有明显季节性,以冬春季节为著.2007年1-10月均能检测到RSV病原,阳性率在2月可达50%,提示2007年可能是RSV流行的高峰年.而PIV3、IA、ADV及PIV1感染率较低,IB及PIV2近5 a来均未发现.ILSV病毒抗原免疫荧光检测既快速又准确,与临床诊断较符合,优于抗体检测.实用儿科临床杂志,2009,24(10):768-770     

Clinical characteristics of human bocavirus infections compared with other respiratory viruses in Spanish children

BACKGROUND: Human bocavirus (HBoV) can be found in a substantial proportion of children with respiratory tract diseases. The relative importance of HBoV in viral respiratory tract illnesses is not yet well known. OBJECTIVE: In this study, we looked for HBoV in pediatric patients to determine the incidence of HBoV as single infection and compared it with other commonly found respiratory viruses to describe the clinical differences associated with HBoV infections in children. PATIENTS AND METHODS: A prospective study was conducted on children less than 14 years old, admitted with respiratory infection from September 2005 to August 2007 to the Pediatrics Department of the Severo Ochoa Hospital, Madrid, Spain. We studied the frequency of HBoV and 15 other respiratory viruses in nasopharyngeal aspirates and compared the clinical course of the infections caused by HBoV with those caused by other common respiratory viruses. RESULTS: Positive results were confirmed in 435 (61.2%) of the 710 children studied. A single virus was detected in 308 patients. HBoV was found in 99 (13.9%) samples, but it was recovered as a single virus in only 35. Most of patients with HBoV infection (75%) were aged < or =26 months. The most common clinical diagnosis was recurrent wheezing (53%), followed by bronchiolitis (32%). Clinical differences were observed between HBoV and respiratory syncytial virus (RSV) infections (children were older and bronchiolitis less frequent), adenovirus (fever less frequent in HBoV group), and rhinovirus-associated infections (less hypoxia in HBoV group). CONCLUSIONS: HBoV was the fourth most frequent single virus after RSV, rhinovirus, and adenovirus in children hospitalized because of respiratory infection. It was associated with recurrent wheezing and bronchiolitis showing a different clinical course from other virus in terms of diagnosis, fever, and age.     

1165例急性下呼吸道感染住院儿童的病毒病原学分析

目的：了解长沙地区急性下呼吸道感染(ALRTI) 住院儿童中常见呼吸道病毒的流行特点,为本地区儿童ALRTI的防治提供依据。方法：收集2007年9月至2008年8月诊断为ALRTI的住院患儿鼻咽抽吸物标本1165份,采用RT-PCR方法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)、流感病毒A(IFVA)、流感病毒B(IFVB)、副流感病毒1~3(PIV1~3)、偏肺病毒(hMPV)、冠状病毒NL63(HCoV-NL63)及冠状病毒HKU1(HCoV-HKU1);PCR方法检测腺病毒(ADV)、博卡病毒(HBoV);巢式PCR方法检测多瘤病毒WU(WUPyV）和多瘤病毒KI(KIPyV)。并对阳性标本进行基因测序以证实。结果：1165份标本中有871份检出了病毒,总检出率74.76%,其中RSV最为常见,检出率为27.03%,其次为HRV（17.33%）、PIV3（13.73%）及新发现病毒HBoV(8.67%)和hMPV(6.52%)。病毒总检出率在男女之间差异无统计学意义,但男性PIV3、hMPV和HBoV的阳性检出率高于女性。病毒阳性检出率在各年龄组之间差异有统计学意义（χ2=10.934,P=0.027）,以6个月至1岁以内年龄组检出率最高。病毒总检出率在四季分布差异有统计学意义（χ2=12.307,P=0.006）,以冬季检出率最高。结论：病毒病原在长沙地区儿童ALRTI中占重要地位,其中RSV、HRV及PIV3是主要病毒病原,近年新发现的HBoV和hMPV也占较高比例;病毒检出率以6个月至1岁以内年龄组最高;冬季病毒总检出率高于其他季节。     

Detection of new respiratory viruses in hospitalized infants with bronchiolitis: a three‐year prospective study

Aim: We have designed a study with the objective of describing the clinical impact of other viruses different from the respiratory syncytial virus (RSV) in hospitalized infants with bronchiolitis. Methods: A 3 year prospective study was conducted on infants admitted to the Paediatrics Department of the Severo Ochoa Hospital (Spain). We studied the frequency of 16 respiratory viruses. Clinical characteristics of RSV‐only infections were compared with other single agent viral infections. Results: Positive results were confirmed in 275 (86.5%) of the 318 children studied. A single virus was detected in 196 patients and 79 were dual or multiple viral infections. RSV was detected in 61.3% of total bronchiolitis. Rhinovirus (RV) was 17.4% of the identified virus, followed by human bocavirus (HBoV), adenovirus and metapneumovirus (hMPV). Only RV, HBoV and hMPV were significant as single infections. RSV patients were younger than HBoV (p > 0.0001) and hMPV (p = 0.025). Seasonality was clearly different between them. Children with RSV infection needed treatment in the intensive care unit more frequently than others. Conclusions: In hospitalized infants, RSV was the most frequent agent in bronchiolitis in winter, but other viruses were present in 47% of the patients. RV, HBoV and hMPV had a significant proportion of single infections. Clinical characteristics were similar amongst them, but seasonality was clearly different.     

Detection of human bocavirus in hospitalised children

Aim:   The objectives of this study are to assess the frequency of human bocavirus (HBoV) infection in hospitalised children and to study the clinical symptoms associated with the detection of HBoV.
Methods:   Two groups of hospitalised children were included in this study: group 1 consisted of 1946 children hospitalised from 1st September 2004 to 30th May 2005, and group 2 consisted of 448 children hospitalised from 1st November 2003 to 30th March 2004. The respiratory specimens were tested by polymerase chain reaction.
Results:   In the first group, HBoV was detected by polymerise chain reaction in 11/828 (1.3%) of nasal specimens that tested negative for other respiratory viruses. One child tested positive for HBoV in both a nasal aspirate and stool sample. In the second group, nasal specimens were tested for all respiratory viruses, including HBoV. The presence of HBoV infection was detected in seven children (1.6%). Detection of a mixed viral population was observed in four of these children. The main symptoms in children infected with HBoV were rhinitis (50%), cough (45%), dyspnoea (28%), wheezing (28%), fever (23%) and diarrhoea (22%). The final clinical diagnoses were bronchiolitis (seven children), rhinopharyngitis (five children), the exacerbation of asthma (two children) and pneumonia (one child). Moreover, four children have associated gastroenteritis.
Conclusion:   These results contribute to the interest in the HBoV detection in children. HBoV detection in hospitalised children with or without any other respiratory virus detection was essentially associated with lower respiratory tract infection and in a lower score with upper respiratory tract infection and gastroenteritis.     

长沙市急性下呼吸道感染并粒细胞减少症111例病毒病原学分析

目的 探讨儿童急性下呼吸道感染并粒细胞减少症病毒病原学的特点.方法 选取湖南省人民医院2007年6月- 2008年10月111例急性下呼吸道感染并粒细胞减少症(粒细胞减少组)及1014例急性下呼吸道感染但粒细胞数正常的住院患儿(粒细胞正常组).患儿入院第2天收集鼻咽分泌物标本,采用反转录(RT) -PCR、PCR或巢式PCR扩增方法进行病毒基因检测,并将阳性产物测序,经序列测定及对比分析后确定为所检测病毒.结果 粒细胞减少组与粒细胞正常组病种构成及性别构成比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).粒细胞减少组37例未检出病毒,74例检出至少有1种病毒;各种病毒中,呼吸道合胞病毒(RSV)检出率最高,其次是副流感病毒3(PIV3)、鼻病毒(HRV)及人博卡病毒(HBoV).粒细胞正常组295例术检出病毒,719例检出至少有1种病毒;RSV检出率最高,其次是PIV3、HRV及HBoV.2组病毒总检出率及各种病毒检出率比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).2组年龄段分布差异有统计学意义(x2=8.89,P=0.012).其中1个月～1岁年龄段差异最大(X2=8.83,P=0.003).结论 1.急性下呼吸道感染住院患儿粒细胞减少的发生与病毒感染无明显相关.2.大于1岁的急性下呼吸道感染住院患儿更易出现粒细胞减少.3.急性下呼吸道感染住院患儿粒细胞减少与性别及疾病种类无关.     

2009—2010年苏州地区博卡病毒感染住院患儿临床特征分析

目的探讨苏州地区因急性呼吸道感染住院患儿中人类博卡病毒(human bocavirus,HBoV)感染的临床特征。方法收集2009年1月—2010年12月因急性呼吸道感染住院的3 826例患儿的痰标本,应用实时PCR检测HBoV DNA,直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒、流感病毒(A、B)、副流感病毒(1～3)和腺病毒,同时采用逆转录PCR检测人偏肺病毒RNA,并进行细菌培养及荧光定量PCR检测支原体DNA,分析HBoV感染的临床特点及流行病学特征,并与呼吸道合胞病毒(RSV)进行比较。结果 3 816份标本共检测到HBoV 272例(7.13%),仅次于RSV;HBoV单独感染率为32.7%,与其他呼吸道病毒的合并感染率为18.38%,高于RSV和其他病毒的合并感染率(P<0.05)。HBoV感染全年均有发生,夏季最多;6～18月龄婴幼儿检出率最高,占48.17%。在住院患儿中,HBoV主要引起支气管肺炎(85.39%),临床症状主要表现为咳嗽(96.63%)、喘息(46.07%)、发热(56.18%)。与RSV相比,HBoV感染患儿的白细胞、中性粒细胞比例、CRP均高于RSV,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBoV是苏州地区小儿呼吸道感染的重要病原体之一,有单独的致病性,与RSV相比,在年龄、季节分布、临床症状、实验室指标等方面有明显差异。     

2009 甲型H1N1流感流行期间北京急性呼吸道感染儿童常见呼吸道病毒的研究

目的 了解2009至2010年甲型H1N1流感大流行期间北京地区急性呼吸道感染患儿中,除流感病毒外的其他几种常见呼吸道病毒感染的流行情况。 方法 设计并建立检测包括呼吸道合胞病毒（RSV）A/B亚型,副流感病毒(PIV)1、2、3型,腺病毒(ADV)和人博卡病毒(HBoV)在内的多重实时荧光PCR方法,并应用该方法对2009年6月至2010年2月甲型H1N1流感大流行期间,对首都儿科研究所附属儿童医院就诊的急性呼吸道感染患儿中甲型H1N1流感病毒检测阴性的咽拭子标本进行上述呼吸道病毒的核酸检测。 结果 新建立的多重RT-PCR方法最低可检测的目标基因含量为10~300拷贝数,未见与其他非目标病毒的交叉反应。本研究共检测标本849份,病毒检测总阳性率为39.0%（331份）,5岁以下占87.6%（290/331份）。各病毒的检测阳性率分别为RSV-A亚型1.4%（12份）,RSV-B亚型8.4%（71份）,PIV-1型8.2%（70份）,PIV-2型0.5%（4份）,PIV-3型3.9%（33份）,ADV 13.9%（118份）,HBoV 2.7%（23份）。 RSV检出以B亚型为主（85.5%）,流行高峰在2009年11月至2010年2月。PIV检出以PIV-1型及PIV-3型为主,PIV-1型的流行高峰在2009年7月至2009年10月,PIV-2型及PIV-3型的流行高峰在2009年6～9月。ADV病毒在研究期间均有较高检出率（平均为13.9%）,HBoV的流行高峰在2009年9～12月。 结论 除流感病毒外,ADV、RSV-B及PIV可能也是2009甲型H1N1流感流行期间引起儿童急性呼吸道感染的重要病原。比较以往的资料可见各病原在2009甲型H1N1流感流行期间的流行季节性及检出率基本未受到新型流感病毒的影响。