脑欣口服液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤谷氨酸、一氧化氮合酶、钙离子影响的实验研究

目的：探讨脑欣口服液治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的机理。方法：将50只7d龄SD大鼠随机分为5组，即假手术组、模型组、大剂量组、中剂量组、小剂量组，每组10只，造模后按要求灌服相同体积的生理盐水和大、中、小剂量的脑欣口服液。结果：模型组与假手术组比较，GLU、NOS、Can含量升高，P〈0．05；大剂量组与模型组比较，GLU、NOS、Ca^2＋含量显著下降，P〈0．05；中剂量组与模型组比较，GLU、Ca^2＋均显著降低，P〈0．05；小剂量组与模型组比较，Ca^2＋水平显著降低，P〈0．05。结论：脑欣口服液抑制新生大鼠缺氧缺血性脑细胞凋亡的机理与降低GLU、NOS及Ca^2＋有关。     

灯盏花素对缺血再灌注沙土鼠海马ATP含量变化和兴奋性氨基酸释放的影响

目的 研究灯盏花素对缺血再灌注沙土鼠海马ATP含量、ATP酶活性和兴奋性氨基酸释放的影响。方法 脑缺血10min建立沙土鼠缺血再灌注模型。90只沙土鼠分为假手术组、脑缺血组和灯盏花素组。测定脑缺血后和再灌注1、12和24h海马ATP含量、ATP酶活性和兴奋性氨基酸含量。结果 脑缺血组,ATP、Na^＋-K^＋ATP酶和Ca^2＋-ATP酶含量明显下降（P〈0．01）,谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）、γ-氨基丁酸（GABA）含量明显增加（P〈0．01）,谷氨酰胺（Gln）含量在缺血时降低,再灌注后增加（P〈0．01）。灯盏花素组,ATP、Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶含量高于脑缺血组（P〈0．01）。Glu、Asp、GABA含量明显低于脑缺血组（P〈0．01）,Gln含量高于脑缺血组（P〈0．01）。结论 灯盏花素明显增加脑缺血及再灌注后ATP含量和ATP酶活性,降低兴奋性氨基酸释放,可减轻脑缺血再灌注损伤。     

Gua对培养的皮质神经元和成神经细胞瘤细胞钙超载的影响

目的：探讨Guattegaumerine（Gua）对H2O2、谷氨酸（glutamate，Glu）和缓激肽（bradykinin，BK）诱导的培养皮质神经元和成神经细胞瘤细胞内钙超载的影响。方法：采用钙荧光探针Furo-2／Am标记培养的细胞，荧光显微图象分析系统和双荧光波长分光光度计检测不同组细胞内钙荧光信号。结果：Gua能显抑制H2O2、谷氨酸引起的培养皮质神经[Ca^2＋]i升高（P〈0．05），亦明显抑制BK所诱导的培养人成神经细胞瘤细胞[Ca^2＋]i升高（P〈0．01）。结论：Gua具有一定的钙拮抗作用，其作用机制可能与其抑制外钙内流及抑制内质网钙释放有关。     

榄香烯抑制表皮生长因子诱导的晶状体上皮细胞增殖的信号转导机制

目的：研究榄香烯（elenene，Ele）抑制重组人表皮生长因子（recombinant human epidermal growth factor，rhEGF）诱导的晶状体上皮细胞（lens epithelium cell，LEC）增殖时对细胞内钙（Ca^2＋）、环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）、环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）的影响，探讨其抑制增殖的细胞信号转导机制。方法：采用rhEGF诱导LEC增殖后，用荧光分光光度法检测LEC内钙离子浓度（[Ca^2＋]i）、放射免疫分析法检测LEC内cAMP和cGMP含量，探讨Ele的影响。结果：（1）Ele组LEC内[Ca^2＋]i；比增殖组显著增高（P〈0．01）；（2）增殖组LEC内cAMP浓度比对照组明显下降、cGMP浓度比对照组明显升高（P〈0．01）；（3）Ele组LEC内cAMP浓度比增殖组显著升高、cGMP浓度比增殖组显著降低（P〈0．01）。结论：Ele抑制LEC增殖的作用是通过细胞内[Ca^2＋]i、cAMP和cGMP信号系统及多条信号转导途径的相互作用实现的，这可能是Ele抑制LEC增殖、防治后发性白内障的细胞和分子生物学机制。     

新生儿缺氧缺血性脑病血清IL-18和钙离子的动态变化及意义

目的通过监测新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿血清白介素-18（IL—18）和钙离子（Ca^2＋）的水平变化,探讨IL—18、Ca^2＋与HIE的相互关系及临床意义。方法HIE新生儿为HIE组,对照组为正常新生儿。2组分别于生后第1、3、7、14天测定血清IL—18和Ca^2＋,分析IL-18、Ca^2＋的变化及意义。结果HIE患儿生后第1、3、7天血清IL—18含量较对照组均有升高,Ca^2＋含量较对照组均有降低（P〈0．01）;且中、重度HIE患儿血清IL-18含量高于轻度HIE患儿,Ca^2＋含量低于轻度HIE患儿（P〈0．01）。第14天HIE组的IL—18、Ca^2＋含量与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论IL—18、Ca^2＋参与HIE的整个发病过程,检测血清中IL-18、Ca^2＋水平对判断HIE脑损伤的程度、病情发展及预后具有临床意义。     

NMDA受体2A亚单位mRNA和蛋白质在大鼠海马前脑缺血再灌注损伤中的变化

目的观察分析大鼠前脑缺血再灌注早期,NMDA受体2A亚单位mRNA和蛋白质表达的改变,探讨两者在缺血性脑损伤中的变化和相互关系。方法选择SD大鼠30只,随机为分正常对照组（NC组）6只,假手术对照组（SC组）12只,缺血再藻注组（IR组）12只,大鼠脑8μm厚石蜡切片,原位杂交染色,TUNEL染色,焦油紫染色。图像和镜下分析。结果（1）NR2A mRNA在海马的CA1区缺血24h后,显著高于NC组水平,是SC组的141．5％（P〈0．01）。（2）NR2A蛋白质水平在海马的CA1区缺血复灌48h后,显著下降,是SC组的59．3％（P〈0．01）。结论缺血性脑损伤早期中,NMDA受体2A亚单位mRNA和蛋白质表达并不呈现一致变化,提示缺血过程中2A亚单位的转录水平未受影响,而翻译水平受到了干扰。     

褪黑素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤表达NF-κB的影响

目的：探讨褪黑素（melatonin,MT）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用及作用机制。方法：新生健康7日龄Wistar大鼠120只,随机分为3组：假手术组（40只）、缺氧缺血模型组（40只）、MT治疗组（40只）,参照经典方法建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型,MT治疗组于模型制作完成后立刻注射MT10mg/kg1次于腹腔内,脑损伤组则于腹腔内注射等量的0.9%氯化钠注射液。各组分别于手术后6、24、48、72 h取脑组织切片,免疫组织化学方法检测核因子-κB（NF-κB）的表达.结果：与假手术组相比,缺氧缺血组NF-κB表达随时间的变化增加显著（P〈0.01）。与缺氧缺血组相比较,MT治疗组NF-κB表达在12,24,48h三个时间点中下降显著（P〈0.01）。结论：MT对HIBD后海马区神经细胞具有保护作用,其作用机制可能与抑制NF-κB在海马区的持续活化有关。     

APP17肽对缺氧缺血性脑病新生鼠皮质区GAP-43表达的影响

目的：观察APP（β—amyloid precursop protein,APP）17肽（APP695—319—335）肽段对缺氧缺血性脑病新生鼠皮质区GAP-43表达的影响。方法：将生后7d的新生大鼠随机分为假手术组、脑病组和APP17肽治疗组。采用一侧颈动脉结扎,然后放在缺氧仓内2h的方法制备缺氧缺血性脑病模型。应用免疫组化方法观察各组大鼠不同时期脑皮质GAP-43表达的变化。结果：免疫组化结果显示,脑病组较假手术组小鼠皮质区GAP-43免疫阳性细胞增加（P〈0．01）．治疗组较脑病组GAP-43免疫阳性细胞明显增多（P〈0．01）。结论：缺氧缺血性脑损伤后,皮质区GAP-43表达和合成增加,GAP-43的表达增加可能与神经元再生和轴突重塑有关,是脑缺氧缺血后神经细胞内源性代偿机制之一。APP17肽可能通过调节GAP-43的表达来增加神经细胞之间的突触联系,促进神经的生长起到营养神经的作用,从而改善缺氧缺血性脑病小鼠的预后。     

利多卡因对家兔心肌缺血/再灌注损伤氧自由基及Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2-ATPase的作用

目的观察利多卡因对心肌缺血再灌注损伤家兔血清GSH—P^2X、MDA及心肌组织Na^＋ - K^＋ - ATPase、Ca^2＋ - Mg^2＋ - ATPase的影响。方法24只家兔随机分为3组：假手术组（A组）、缺血／再灌注组（B组）、利多卡因组（c组）,每组8只。B组、C组阻断左冠状动脉前降支40min．再灌注90min．A组仅穿线不结扎。C组于开放冠状动脉再灌注前经颈静脉注射利多卡因5mg／kg,B、C组注射等量生理盐水。于再灌注90min取颈静脉血测定GSH—PX、MDA;再灌注90min后取心肌组织测定Na^＋ - K^＋ - ATPase、Ca^2＋ - Mg^2＋ - ATPase。结果血清GSH—PXB组较A、C组降低（P〈0．01）、血清MDAB组较A、C组升高;心肌组织Na^＋ - K^＋ - ATPase、Ca^2＋ - Mg^2＋ - ATPase B组较A、C组降低（P〈0．01）。结论利多卡因对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

依达拉奉对创伤性脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响

目的研究依达拉奉对创伤性脑损伤大鼠脑组织细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响。方法72只SD大鼠随机分为依达拉奉治疗组、对照组和假手术组，按伤后6、12、24、48h分成12组（每组6只）。建立大鼠自由落体脑损伤模型（Feeney’smodel），用免疫组织化学染色及原位细胞凋亡检测法（TUNEL法）测定各个组大鼠伤后6、12、24、48h脑组织Bcl-2蛋白表达和凋亡细胞数。结果依达拉奉治疗组各时间点细胞凋亡数均明显小于对照组及假手术组的（P〈0．01）；各个时间点的Bcl-2蛋白表达均明显高于对照组及假手术组的（P〈0．01）。结论依达拉奉可以上调创伤性脑损伤大鼠脑组织的Bcl-2蛋白表达，抑制细胞凋亡。     

窒息新生儿血电解质动态变化分析

目的分析窒息新生儿血清电解质动态变化及意义。方法窒息组新生儿343例按窒息程度分为轻度窒息组297例,重度窒息组46例;另设对照组41例。采用酶法测定血清K^＋、Na^＋、Cl^-、Ca^2＋浓度。结果窒息组新生儿血清K^＋、Cl^-、Ca^2＋水平显著低于对照组（均P〈0．01）;出生后24～48h血清K^＋、Na^＋、Cl^-、Ca^2＋水平显著低于24h内（均P〈0．01）;生后24—48h低钠血症、低氯血症、低钙血症的发生率显著高于24h（均P〈0．01）。轻、重度窒息组K^＋、Na^＋、Cl^-、Ca^2＋水平差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论新生儿窒息后48h内血清K^＋、Na^＋、Cl^-、Ca^2＋水平逐渐降低,电解质紊乱发生率逐渐增高,应常规动态监测血电解质变化以指导及时治疗。     

芦荟苷预处理对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡、TNF-α含量和Ca2+-ATPase活性的影响

摘要：目的研究芦荟苷（Barbaloin,Barb）对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型,实验分为假手术组、缺血再灌注组（IR）、Barb高、低剂量预处理组。采用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡指数（AI）,ELISA法测定血清TNF—α水平,化学法测定线粒体Ca^2＋-ATPase活性。结果与IR组比较,Barb组AI和TNF-α水平显著降低（P〈0．05或P〈0．01）,Ca^2＋-ATPase活性明显增高（P〈0．05）。结论Barb能明显抑制IR引起的心肌细胞凋亡,其作用可能与降低TNF-α水平和提高Ca2＋-ATPase活性有关。     

Memantine对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响

目的：研究美金胺(Memantine)对新生大鼠缺氧、缺血性脑损伤(HIBD)脑保护作用及机制。方法：应用新生7日龄Wistar大鼠随机分为假手术组、HIBD组、Memantine治疗组,采用结扎左侧颈总动脉并吸入8％O2 92％N2混合气体制成新生大鼠HIBD动物模型。于HIBD后即刻腹腔注射Memantine 20mg/kg或等量生理盐水,48h后处死,用放射免疫法测血清NSE水平,用硝酸还原酶法测血清NO水平．用H-E染色观察脑组织病理变化。结果：Memantine可使脑组织病理改变明显减轻,可降低血清中NSE浓度．可降低血清中NO浓度。结论：Memantine对脑缺氧缺血损伤具有脑保护作用;Memantine通过阻断NMDA受体减少毒性NO的生成,是其脑保护作用可能机制之一。     

小儿缺氧缺血性脑病的康复护理临床效果

目的探讨小儿缺氧缺血性脑病的康复护理临床效果。方法回顾分析368例患者的临床资料。结果康复组治疗前与治疗后比较NBNA评分P〈0．01显著差异性;对照组治疗前与治疗后比较NBNA评分P〈0．05有差异性。两组治疗后NBNA评分比较P〈0．01显著差异性。两组治疗后各能区智能发育商得分比较P〈0．01显著差异性。结论康复护理同时进行能够有效的提高缺氧缺血性脑病患儿治愈率、降低致残率。     

眼睛蛇毒心脏毒素对大鼠心肌细胞收缩及细胞内钙离子的作用

目的 研究眼睛蛇毒心脏毒素（Cardiotoxin，CTX）对心肌细胞的形态、收缩幅度和细胞内钙离子（[Ca^2＋]i）的作用。方法 应用荧光计量法（以Fura-2／AM为荧光染料）及光学成像系统来测定单个心肌细胞[Ca^2＋]i和收缩幅度。结果 0．001～1μmol／L的CTX使心肌细胞由杆状变成圆形，药物的作用从第1分钟时开始，到第20分钟时趋于稳定。在电刺激存在的情况下，1μmol／L的CTX最初导致电诱导的[Ca^2＋]i和收缩幅度瞬间增加，接下来[Ca^2＋]i时程延长，最终细胞对电刺激不敏感、突然收缩、[Ca^2＋]i持续增高。在缺乏电刺激的情况下，1μmol／L的CTX可诱导Ca^2＋震荡波、持续性[Ca^2＋]i增高，这种作用与40mmol／L的KCl和10mmol／L咖啡因所引起的[Ca^2＋]i瞬间增加不同。结论 CTX作用初期使[Ca^2＋]i增高，使细胞[Ca^2＋]。超载，同时伴随细胞形状的改变。     

原花青素对大鼠脑缺血再灌注损伤能量代谢的影响

目的：研究原花青素（procyanidin,GSP）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤代谢障碍的影响。方法：SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注模型组及GSP低、中、高剂量（50、100、200mg／kg）组。术前30min采用腹腔注射给予不同浓度的原花青素溶液,脑缺血2h后重复给药一次,假手术组和缺血再灌注模型组分别给予等量的生理盐水。采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血2h再灌注24h模型,观察不同剂量GSP对大鼠脑缺血再灌注后神经功能状态、脑组织含水量及乳酸含量、能量代谢酶（Na＋-K＋-ATP酶和Ca2＋-ATP酶）活性的影响。结果：与假手术组相比,缺血再灌注模型组大鼠神经功能缺损评分分值明显升高（P〈0．01）,脑组织含水量及乳酸含量均升高（P〈0．01）,Na＋-K＋ATPase、Ca2＋-ATPas的活性降低（P〈0．05）;与缺血再灌注模型组相比,GSP中、高剂量组大鼠神经功能缺损评分分值显著降低（P〈0．05）,且两组间无显著差异（P〉0．05）,低剂量组无显著差异（P〉0．05）;     

脑利钠肽后处理对高血脂大鼠缺血／再灌注心肌的保护作用

目的观察脑利钠肽后处理对高血脂大鼠缺血／再灌注心肌的保护作用。方法高血脂SD大鼠24只,随机分为3组：假手术组、缺血／再灌注组、脑利钠肽后处理组,每组8只。制备大鼠心肌缺血／再灌注模型。测定血清肌酸激酶（CK）、超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量和心肌梗死范围。结果再灌注结束后,脑利钠肽后处理组和缺血／再灌注组CK明显高于假手术组[分别为（758．11±39．94）,（815．19±40．85）,（219．17±22．63）U／L,P〈0．01],脑利钠肽后处理组CK低于缺血／再灌注组（P〈0．05）。脑利钠肽后处理组血清中SOD含量高于缺血／再灌注组,MDA含量低于缺血／再灌注组（P〈0．05）。脑利钠肽后处理组坏死区与缺血区比值低于缺血／再灌注组[分别为（33．0±5．2）％,（38．4±3．1）％,P〈0．05]。结论脑利钠肽后处理对高血脂大鼠缺血／再灌注心肌具有保护作用。     

姜黄素抑制尾加压素-Ⅱ诱导的人晶状体上皮细胞增殖及[Ca^2＋]i、cAMP、cGMP信号转导机制

目的：探讨姜黄素（curcumin,Cur）抑制尾加压素Ⅱ（urotensinⅡ,U-Ⅱ）诱导的人晶状体上皮细胞（human lens epithelial cell,HLEC）增殖及[Ca^2＋]i、cAMP、cGMP信号转导机制。方法：将U-Ⅱ诱导体外培养的HLEC发生增殖,并用不同浓度的Cur与其共同孵育后,用MTT法检测HLEC的活性;用流式细胞术（flowcytometer,FCM）检测HLEC增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达;用荧光分光光度法检测HLEC内游离钙离子浓度[Ca^2＋]i;用放射免疫分析法检测HLEC内环化腺苷酸（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）和环化鸟苷酸（cyclic guanosine monophosphate,cGMP）浓度。结果：U-Ⅱ组HLEC活性、PCNA蛋白表达和cGMP浓度均高于对照组（P〈0.01）;Cur组HLEC活性、PCNA蛋白表达和cGMP浓度均比U-Ⅱ组降低（P〈0.01）。U-Ⅱ组HLEC[Ca^2＋]i比对照组显著升高（P〈0.01）,U-Ⅱ组cAMP浓度比对照组显著降低（P〈0.01）;Cur组与U-Ⅱ组比较[Ca^2＋]i、cAMP浓度显著升高（P〈0.01）。结论：Cur可抑制U-Ⅱ诱导的HLEC增殖。[Ca^2＋]、cAMP-PKA、cGMP-PKG是其重要的细胞信号转导机制。Cur有可能成为防治后发性白内障的有效药物。     

急性胎兔宫内窘迫模型脑NO、iNOS和T—SOD变化实验研究

目的建立孕兔宫内窘迫模型,探讨胎兔脑一氧化氮（NO）、诱生型一氧化氮合酶（iNOS）和总超氧化物歧化酶口一SOD）含量变化规律。方法新西兰大白孕兔30只,随机分为空白对照组（n=12）、假手术组（n=9）和宫内缺血缺氧组（n=9）,宫内缺血缺氧组建立孕兔开腹子宫动脉结扎胎兔宫内窘迫缺血缺氧模型,分别开腹取各组胎兔脑匀浆液测定NO、iNOS和T—SOD含量,进行统计学比较。结果与空白对照组比较,假手术组和宫内缺血缺氧组NO、iNOS的含量显著升高（P〈0．01）,T—SOD的含量明显降低Ⅱ）〈0．01）,差异具有统计学意义。与假手术组相比,宫内缺血缺氧组NO、iNOS显著升高U）〈O．01）,差异具有统计学意义;T—SOD降低不显著（P=0．399）。结论通过检测孕兔宫内窘迫模型NO、iNOS和T—SOD显示,胎兔缺氧应激反应强烈,手术操作及子宫动脉结扎对脑组织内自由基含量影响显著。     

银杏叶提取物对局灶性脑缺血再灌注后线粒体损伤的保护作用

目的研究杏花雨注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑线粒体中SOD、ATPase、MDA的影响，探讨其抗脑缺血作用的机制。方法雄性SD大鼠63只，随机分为9组（n=7）。假手术组、4个缺血对照组（缺血2h分别再灌注0．5、1、2、4h组，其中缺血2h再灌注4h设为模型组），3个杏花雨注射液（A）治疗组（高、中、低剂量组），金纳多注射液（B）治疗对照组。治疗组分别于术后立即舌下静脉注射A5、10、20mg／kg，B10mg／kg。测定脑线粒体中SOD、ATPase活性和MDA含量、基质游离钙浓度。结果局灶性脑缺血再灌注后脑线粒体中MDA含量、基质游离钙浓度明显升高（P〈0．01），SOD、ATPase活性明显下降（P〈0．01）；A与B均能明显提高脑线粒体中SOD、ATPase活性（P〈0．01），减少MDA、游离钙（P〈0．01）；两种注射液同等剂量差异无显著意义（P〉0．05）。结论局灶性脑缺血再灌注后线粒体钙超载，自由基生成增加。杏花雨注射液可提高缺血再灌注大鼠脑线粒体总抗氧化活力，降低MDA、游离钙含量，保护缺血再灌注引起的神经元损伤。