沙棘黄酮对大鼠肝脏CYP450酶mRNA表达的影响

目的:研究沙棘黄酮对CYP2d2、CYP2b1、CYP2c11和CYP2e1 mRNA表达的影响。方法:根据随机原则,将40只雄性大鼠分为空白对照组、阳性对照组、沙棘黄酮高剂量组、中剂量组和低剂量组。给药组分别灌胃400、200和100 mg/kg的沙棘黄酮提取物,空白对照组灌胃等容量蒸馏水,连续14d;阳性对照组从第8天开始腹腔注射苯巴比妥钠50 mg/kg,连续7d。给药结束后,检测大鼠血清生化指标,并采用实时荧光定量PCR方法测定各实验组大鼠肝脏CYP2c11、CYP2e1、CYP2d2和CYP2b1 mRNA的表达。结果:与空白对照组相比,各给药组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)、白蛋白(ALB)和肝重/体重比(L/W)未发生显著性改变,中剂量和低剂量组直接胆红素(DBIL)显著降低;高剂量组CYP2d2的mRNA表达显著上调,各给药组对CYP2b1,CYP2c11和CYP2e1的mRNA表达没有影响。结论:沙棘黄酮可以上调CYP2d2 mRNA的表达,提示沙棘黄酮可以调节大鼠CYP2d2酶的活性,即沙棘黄酮可能会诱导人CYP2D6酶的活性。当沙棘或沙棘黄酮与经CYP2D6代谢的药物合用时,可能发生草药-药物相互作用。因此,在临床实践中应给予足够的重视。     

脑内表达的CYP450基因参与内源性物质代谢研究进展

细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)为一类亚铁血红素蛋白超家族,其参与多种内源性及外源性物质(食物成分、药物及污染物等)的代谢与活化。关于CYP450基因,以往的研究主要集中在药物代谢方面,近年来的研究发现CYP450家族成员的作用不仅仅局限于药物代谢,还参与多种疾病的发生及发展进程,包括帕金森病(Parkinson’s disease,PD)、癌症、心肌病及心衰等。目前,关于脑组织内CYP450家族成员参与内源物质代谢的过程及机制尚不十分清楚。本文特总结了脑内表达的CYP450基因对机体内源物质代谢的研究进展,以期为探索脑内表达的CYP450基因的作用提供新的思路。     

LPL基因mRNA在精神分裂症模型大鼠脑组织中的表达

目的: 探讨脂蛋白酯酶(LPL)基因mRNA在精神分裂症模型大鼠前脑皮层、杏仁核、尾壳核和海马4个脑区中的表达,阐明其在精神分裂症发病中的作用机制。 方法: 选择围产期Wistar大鼠,模型组24只,对照组21只,建立苯环已哌啶(PCP)处理的大鼠精神分裂症动物模型,通过Morris水迷宫实验验证动物模型是否建立成功,并检测其认知改变,采用实时荧光定量PCR法检测LPL基因mRNA在精神分裂症模型大鼠前脑皮层、杏仁核、尾壳核和海马4个脑区中的表达。 结果: Morris水迷宫实验,与对照组比较,模型组大鼠找到平台的时间明显延长,为对照组的4.25倍(P<0.01);与对照组比较,模型组大鼠脑组织中前脑皮层和海马区LPL mRNA表达水平降低,分别下降了61.7%和89.0%(P<0.05)。 结论: LPL基因在大鼠前脑皮层和海马表达水平降低可能与精神分裂症有关联,并且可能与认知障碍存在一定的联系。     

eNOS基因在大鼠动脉硬化模型中的表达及意义

目的 建立大鼠动脉硬化模型并研究内皮-氧化氮合酶基因(eNOS)在模型鼠股-腘动脉中的表达.方法 在大鼠股-腘动脉内注入蒸馏水,通过低渗造成动脉内膜非机械性、浅表性损伤,联合高脂、高胆固醇等饲料饲养的方法,建立大鼠动脉硬化闭塞模型.术后15,30,90 d,应用免疫组化技术观察动脉闭塞的程度,应用SYBR染料法荧光定量PCR技术分别检测模型鼠下肢股.胭动脉中eNOS基因的表达.结果 术后大鼠血管内膜增厚、部分管腔闭塞.高脂+损伤后15 d、30 d和90 d的大鼠股-腘动脉中eNOS基因的相对表达量分别为0.7219±0.0417、0.6444±0.0129和0.4601±0.0276(P<0.05).结论 成功建立大鼠动脉硬化闭塞模型.eNOS基因在模型鼠的下肢股-腘动脉中表达下调.     

肝硬化大鼠模型肠上皮内淋巴细胞表达的研究

目的 研究肝硬化大鼠模型肠上皮内T淋巴细胞的表达,了解肝硬化肠黏膜免疫屏障功能的改变.方法 采用皮下注射40%四氯化碳诱导肝硬化模型,分离大鼠肠上皮内淋巴细胞,分别标记小鼠抗大鼠CD3、CD4、CD8单克隆抗体,流式细胞仪检测T淋巴细胞表达情况.结果 正常对照组和肝硬化模型组分离肠上皮内淋巴细胞数量分别为(2.3±0.5)×105 /cm、(3.4±1.1)×105 /cm,模型组高于对照组(P＜0.05);两组CD3+ T淋巴细胞比例分别为(80±6)%、(76±8)%,模型组有下降趋势,但两组间差异无统计学意义(P＞0.05);两组中CD4+ CD8+亚群细胞分别是(3.7±1.8)%、(6.9±3.3)%,模型组比例多于对照组(P＜0.05);CD4+ CD8-亚群细胞分别是(6.9±3.0)%、(4.4±1.4)%,模型组比例少于对照组(P＜0.05).结论 肝硬化大鼠模型肠上皮内T淋巴细胞表达的变化反映了肝硬化肠黏膜免疫屏障功能的改变.     

补肾化瘀方对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞CYP450表达的影响

目的观察补肾化瘀方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞CYP450蛋白表达的影响。方法运用补肾化瘀方对PCOS模型大鼠进行干预后,采用免疫组化法观察卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达。结果模型组与正常组比较,卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达在表达面积及表达强度上均低于正常组,差异具有统计学意义(P<0.01);补肾化瘀方中、高、低剂量组及妈富隆组用药后,卵巢颗粒细胞的CYP450的蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);其中补肾化瘀方中剂量对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达效果最佳。结论补肾化瘀方能增强PCOS大鼠卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达,调节卵巢内分泌失调,改善PCOS高雄血症,逆转卵泡的发育异常,使排卵成功。     

PAPⅠ基因在实验性急性胰腺炎模型大鼠中的表达

目的研究胰腺炎相关蛋白Ⅰ(pancreatitis assoc iated prote inⅠ,PAPⅠ)在急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)动物模型胰腺组织中的表达特点及意义。方法大鼠轻型胰腺炎(m ild acute pancreatitis,MAP)和重型胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型由逆行胰胆管注射1.5%及3.0%牛磺胆酸钠制备。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胰腺组织PAPⅠmRNA的表达,同时检测胰腺组织病理改变、湿/干质量比率、腹水量以评价炎症程度。结果PAPⅠmRNA在正常对照组无表达,AP造模后6 h即明显升高,24 h达高峰,48 h迅速下降。SAP组PAPⅠmRNA表达水平在6、24、48、72 h各时间点均显著高于MAP组(P<0.05)。同时PAPⅠmRNA表达与胰腺组织病理、胰腺组织湿/干质量比率和腹水量相关。结论PAPⅠmRNA的表达变化与AP时胰腺组织损伤程度相关。     

PAPⅠ基因在实验性急性胰腺炎模型大鼠中的表达

目的 研究胰腺炎相关蛋白Ⅰ(pancreatitis associated proteinⅠ,PAPⅠ)在急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)动物模型胰腺组织中的表达特点及意义.方法 大鼠轻型胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)和重型胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型由逆行胰胆管注射1.5%及3.0%牛磺胆酸钠制备.采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胰腺组织PAPⅠ mRNA的表达,同时检测胰腺组织病理改变、湿/干质量比率、腹水量以评价炎症程度.结果 PAPⅠ mRNA在正常对照组无表达, AP造模后6 h即明显升高, 24 h达高峰,48 h迅速下降.SAP组PAPⅠ mRNA表达水平在6、24、48、72 h各时间点均显著高于MAP组(P＜0.05).同时PAPⅠ mRNA表达与胰腺组织病理、胰腺组织湿/干质量比率和腹水量相关.结论 PAPⅠ mRNA的表达变化与AP时胰腺组织损伤程度相关.     

合成冰片对大鼠肝CYP450酶含量及CYP3A1 mRNA表达的影响

[目的]研究冰片对大鼠肝脏细胞色素氧化酶(cytochromeP450,CYP450)含量及其亚型CYP3A1m RNA表达的影响。[方法]istar大鼠合成冰片(设0.3gk/g和0.03gk/g剂量组,1次d/,连续7d)灌胃,以溶媒羧甲基纤维素纳(CM C-Na)和苯巴比妥钠为对照组,钙沉积法提取肝微粒体,紫外分光光度法测定CYP450含量,实时定量RT-PCR法检测肝脏CYP3A1m RNA的表达。[结果]0.3gk/g合成冰片口服可诱导大鼠肝脏CYP450酶含量增高(P<0.05),CYP3A1m RNA表达上调(P<0.05)。[结论]高剂量合成冰片口服可能影响肝脏药物代谢。     

小肠CYP450酶在药物代谢中的作用

小肠是口服药物的主要吸收器官,同时也是进行药物代谢的重要场所。小肠黏膜上皮细胞含有大量Ⅰ、Ⅱ药物代谢酶,其中以CYP450酶最为重要,参与众多药物的生物转化。小肠CYP450主要有CYP1A1、CYP2C9、CYP2C19、CYP2J2、CYP2D6、CYP3A 6种同工酶,其中CYP3A和CYP2C在小肠中表达最高,分别约占CYP450总含量80%和16%。与肝脏相比,小肠CYP450酶活性及其表达更易受到外源性化合物影响。本文重点讨论小肠CYP450s活性与表达及其在药物代谢中的作用以及由CYP450s的诱导或抑制引起的药物相互作用。     

曲马多对大鼠CYP450及其肝功能的影响

目的 考察曲马多依赖性大鼠模型肝脏CYP450酶活力及肝功能指标的变化。 方法 将30只SD大鼠分为空白组、阳性对照组和实验组,每组10只,各组分别以生理盐水、80 mg/(kg·d)苯巴比妥和60 mg/(kg·d)曲马多灌胃给药,建立曲马多依赖性大鼠模型;采用Cocktail体外孵育法结合液质联用(LC-MS)技术测定大鼠肝脏中CYP1A2、CYP2B1、CYP2C11、CYP2D2、CYP2E1、CYP3A1各同工酶酶活性;RT-qPCR技术对上述同工酶的mRNA表达水平进行检测;血生化仪分析肝功指标。 结果 ①与空白组相比,阳性对照组CYP1A2、CYP2B1、CYP2C11、CYP2E1、CYP3A1酶活性分别为(190.15±33.58)、(98.02±36.00)、(1 348.79±40.76)、(3 214.66±133.51)、(292.76±33.32)μg/ml,显著高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);②与空白组相比,阳性对照组CYP1A2、CYP2B1、CYP2C11、CYP2E1、CYP3A1 mRNA表达显著上调,分别上调(89.88±14.22)%、(95.12±16.00)%、(351.25±32.33)%、(556.85±42.88)%、(52.56±11.12)%,差异有统计学意义,CYP2D2 mRNA无明显变化。实验组CYP1A2、CYP2B1、CYP2E1、CYP2D2 mRNA表达分别上调(75.12±21.45)%、(66.32±18.14)%、(81.35±23.55)%、(382.74±33.25)%,差异有统计学意义,CYP2C11、CYP3A1 mRNA表达无明显变化。③在肝脏生化指标水平上,与空白组相比,阳性对照组和实验组ALT、AST、LDH含量均明显上升,差异有统计学意义。 结论 曲马多滥用会诱导大鼠CYP1A2、CYP2B1、CYP2E1和CYP2D2酶活性升高和肝脏损伤。      

CYP450含量及CYP2C、GST活性在DAB诱导大鼠肝癌形成过程中的变化

目的：研究肝脏的细胞色素P450（CYP45）的含量,反映CYP2C活性的氨基比林－N－去甲基化酶（ANDM）及谷胱苷肽－S－转移酶（GST）的活性水平在诱导原发性肝癌过程中的变化。方法：用观察肝脏的CYP450的含量,二甲基氨基偶氮苯（DAB）作为诱导剂,喂养Wistar雄性大鼠,ANDM和GST的活性水平。结果：与对照组相比,诱癌组CYP450含量及GST,ANDM的活性在2周时无显性差异,CYP450含量及ANDM的活性在第12,30周时明显降低,GST在12周时明显增高,而在30周时与对照组无差别,在形成肝癌的大鼠肝脏中,肝组织中的CYP450含量水平依次是：癌组织＜癌旁组织＜正常组织。结论：DAB诱导的原发性大鼠肝癌形成过程中肝脏的CYP450的含量有下降的趋势,DAB不能诱导ANDN活性,但能诱导增强GST的活性水平。     

CYP450IA1基因型在中国汉族人群的分布

细胞色素Ｐ４５０混合功能氧化酶ＩＡ１（ＣＹＰ４５０ＩＡ１）是一种与多环芳烃（ＰＡＨ）代谢活化及肺癌发生密切相关的酶，其活化表型与其基因型有关。本研究为探讨ＣＹＰ４５０ＩＡ１高诱导基因型在中国汉族人群的分布，对２０８名健康中国汉族人进行了ＣＹＰ４５０ＩＡ１基因型分析。结果：ＣＹＰ４５０ＩＡ１基因Ｖａｌ／Ｖａｌ型占８．６５％，Ｉｌｅ／Ｖａｌ型占４１．８２％，Ｉｌｅ／Ｉｌｅ型占４９．５１％，其中高诱导基     

细胞因子在大鼠溃疡性结肠炎模型中的表达研究

目的：探讨促炎细胞因子IL-6、TNF-α与抑炎细胞因子IL-10在三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇所致的溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）大鼠模型结肠组织中的表达,探讨其在该模型中的作用及意义。方法：雌性SD大鼠随机分为正常对照组及模型组,每组7只。正常对照组不造模,模型组用三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇溶液灌肠复制UC模型。观察两组实验大鼠体质量变化、大体及组织病理学改变,采用酶联免疫吸附法检测细胞因子（IL-6、IL-10、TNF-α）的含量。结果：与正常组比较,模型组大鼠结肠大体形态评分、组织学评分明显升高（0.00±0.00与5.43±1.27,1.29±0.49与6.71±0.95,P〈0.01）;与正常组比较,模型组大鼠结肠组织IL-6、TNF-α表达明显升高（102.13±7.12与188.27±11.65,87.39±6.74与121.51±8.56,P〈0.01）;IL-10表达明显下降（202.97±12.26与71.40±8.28,P〈0.01）。结论：促炎细胞因子IL-6、TNF-α与抑炎细胞因子IL-10的失衡在TNBS诱导的大鼠UC发病中起重要作用。     

枸杞多糖对大鼠CYP450酶的调控作用

目的：评价枸杞多糖对大鼠肝细胞色素P450（CYP450）酶活力和基因表达的调控作用。方法：SD大鼠随机分为实验组（低剂量组、高剂量组）和对照组,分别给予低高剂量（250、500 mg/kg）枸杞多糖和纯化水2周,于第15天同时给予4种探针药（非那西丁、安非他酮、甲苯磺丁脲、咪达唑仑）的混合溶液,测定给药后不同时间点探针药的浓度并计算药动学参数,推测相关CYP450酶活力变化。RT-PCR法用于观测CYP450的基因表达变化。结果：与对照组相比,高剂量组大鼠甲苯磺丁脲药动学参数CLz/F降低27%,AUC(0-t)和Cmax分别增加50%和28%;低剂量组大鼠咪达唑仑CLz/F和Vz/F分别降低了25%和35%,AUC(0-t)增加了38%;高剂量组大鼠咪达唑仑的CLz/F和Vz/F分别降低了34%和38%,AUC(0-t)、Tmax和Cmax分别增加了51%、50%和65%（P＜0.05）;非那西丁和安非他酮药动学参数差异无统计学意义（P＞0.05）。RT-PCR检测发现,与对照组比较,枸杞多糖能显著下调大鼠CYP2C11（高剂量组）、CYP3A1（低剂量组）和CYP3A1（高剂量组）mRNA水平,分别为56%、44%和68%,而对CYP1A2和CYP2B1没有影响。结论：枸杞多糖会降低CYP2C11和CYP3A1酶活力及mRNA表达水平。     

北京地区CYP450药物代谢基因的等位基因分布调查

目的调查北京地区人口中的药物代谢酶系CYP450基因的等位基因分布情况,并推算CYP450基因多态性位点的等位基因丰度和近交系数。方法在北京地区抽样使用Taqman方法进行CYP450相关的基因型检测,估算出涉及北京地区人口中5个CYP基因中的6个SNP位点等位基因分布情况和近交系数。结果 CYP3A4表现出最大的等位基因丰度差别,CYP2D6表现出最小的等位基因丰度差别。结论 CYP2D6和CYP2C19两个基因的基因型在北京市人口中呈现较高的多态性分布,医师在使用涉及到这两个基因参与代谢的药物时,可以参考CYP450基因型检测结果。     

脑内表达的CYP450 基因参与内源性物质代谢

细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)为一类亚铁血红素蛋白超家族,其参与多种内源性及外源性物质(食物成分?药物及污染物等)的代谢与活化?关于CYP450 基因,以往的研究主要集中在药物代谢方面,近年来的研究发现CYP450 家族成员的作用不仅仅局限于药物代谢,还参与多种疾病的发生及发展进程,包括帕金森病(Parkinson’s disease,PD)?癌症?心肌病及心衰等?目前,关于脑组织内CYP450 家族成员参与内源物质代谢的过程及机制尚不十分清楚?本文特总结了脑内表达的CYP450 基因对机体内源物质代谢的研究进展,以期为探索脑内表达的CYP450 基因的作用提供新的思路?     

内皮素基因在大鼠不同器官中的表达

目的；定量检测内皮素ｍＲＮＡ在大鼠心、肝、肺、肾等器官及培养的肾小球系膜细胞（ＭＣ）的表达。方法，半定量逆转录－我聚酶链反应（ＳｑＲＴ－ＰＣＲ）主Ｎｏｒｔｈｅｒｎ迷杂交方法。结果；内皮素ｍＲＮＡ在上棕器官及ＭＣ中均有表达，其表达水平从高到低依次为肺、心、肾、肝。结论：内皮素基因在不同器官有着不同表达；除血管内皮细胞外，ＭＣ是产生内皮素的又一细胞。     

内皮素基因在大鼠不同器官中的表达

目的：定量检测内皮素ｍＲＮＡ在大鼠心、肝、肺、肾等器官及培养的肾小球系膜细胞（ＭＣ）的表达。方法：半定量逆转录－多聚酶链反应（Ｓ＿ｑＲＴ－ＰＣＲ）技术及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交方法。结果：内皮素ｍＲ－ＮＡ在上述器官及ＭＣ中均有表达，其表达水平从高到低依次为肺、心、肾、肝。结论：内皮素基因在不同器官有着不同表达；除血管内皮细胞外，ＭＣ是产生内皮素的又一种细胞。     

神经生长因子基因在大鼠心肌组织中的表达

目的：观察神经生长因子（NGF）基因在生后不同时期大鼠心肌组织中的表达,方法：采用RT－PCR方法,半定量分析生后1天、15天、30天、60天、120天,360天大鼠心肌组织中NGFmRNA含量。结果：大鼠生后1天,心肌组织即NGFmRNA的表达;随着生后发育过程,表达量逐步增加,30天时达峰值;此后随鼠龄的增加,表达量呈级慢下降趋势,结论：大鼠心肌组织中NGFmRNA的表达量,随鼠龄的增加,而呈现出先升后降的动态变化趋势。