正常人外周血T淋巴细胞Ag-NORs表达分析

目的　对正常人外周血T淋巴细胞Ag- NORs含量进行初步分析。方法　将14 8例健康体检者按年龄分为三组:青年组、中年组、老年组,利用KL型肿瘤免疫图像分析系统检测外周血T淋巴细胞Ag- NORs含量,结果以银染核仁灰度面积与细胞核灰度面积比值(I. S % )表示。结果　T淋巴细胞Ag -NORs含量在各年龄组内男、女比较,均无显著性差异(P >0 . 0 5 )。中、老年组I S %值比青年组低(P分别小于0 . 0 5、0 . 0 1) ,老年组又比中年组稍低(P >0 .0 5 )。I S <6 %者所占比例在中、老年组中也远高于青年组。结论　外周血T淋巴细胞Ag -NORs含量存在随年龄递减的趋势,提示人体在逐步走向衰老的同时,T淋巴细胞的免疫活性也渐渐下降。在体检时可将T淋巴细胞Ag -NORs作为一个参考性的免疫指标,达到预防和早期发现疾病的目的。     

压电免疫芯片检测禽流感病毒H9亚型抗原的方法研究

目的 为用压电免疫芯片检测禽流感病毒抗原寻找一种可行的抗体固定方法.方法 以AT切型、基频10 mHz的石英晶体为材料,分别采用聚乙烯亚胺-戊二醛交联法、葡萄球菌A蛋白法将禽流感病毒H9亚型单克隆抗体固定在石英晶体的金膜电极表面构建禽流感压电免疫芯片,用于检测禽流感病毒H9抗原.结果 ①聚乙烯亚胺-戊二醛交联法构建的压电免疫芯片检测禽流感病毒H9抗原的线性范围为稀释度1∶10～1∶160,Y=-8.868X+73.514,r2=0.966 6,与H5抗原不存在交叉反应,与鸡胚分离法的符合率达到91.7%.②葡萄球菌A蛋白法若先固定抗体,则无法检测到抗原;如先进行抗原抗体反应再与葡萄球菌A蛋白结合,可以达到定性检测的效果.结论 聚乙烯亚胺-戊二醛交联法适合于构建禽流感病毒H9亚型抗原压电免疫芯片,其检测特异度、重复性和线性均满足检测要求;葡萄球菌A蛋白法在检测抗原时存在局限性,尚不能直接检测抗原.     

人外周血树突状细胞的体外扩增、鉴定及内吞能力的测定

目的在体外从人外周血中诱导、扩增树突状细胞(DCs).方法从健康人外周血中分离单个核细胞(PBMNCs),在rhGM-CSF、IL-4和TNF-α的诱导下培养扩增树突状细胞.光学显微镜观察其体外培养过程中的形态特征,流式细胞仪(FACS)分析其表型特征,混合淋巴细胞反应(MLR)检测其功能,辣根过氧化酶(HRP)内吞实验检测其群体内吞能力.结果 PBMNCs经过rhGM-CSF、IL-4和TNF-α诱导培养12d后,具典型的DCs形态,细胞表型为MHCⅡ类分子(HLA-DR)93.5%、CD80 96%、CD86 92.6%、CD1a 60.4%、CD83 82.6%和CD14 10.5%,具有极强的激发MLR的能力,显示成熟DCs的特征.DCs群体的内吞能力约在培养第6d达高峰,之后有明显下降.结论该方法是一种可靠的诱导、扩增DCs的方法,为DCs的深入研究和临床应用奠定了基础.     

Highly Pathogenic Avian Influenza Virus Infection of Mallards with Homo- and Heterosubtypic Immunity Induced by Low Pathogenic Avian Influenza Viruses

The potential role of wild birds as carriers of highly pathogenic avian influenza virus (HPAIV) subtype H5N1 is still a matter of debate. Consecutive or simultaneous infections with different subtypes of influenza viruses of low pathogenicity (LPAIV) are very common in wild duck populations. To better understand the epidemiology and pathogenesis of HPAIV H5N1 infections in natural ecosystems, we investigated the influence of prior infection of mallards with homo- (H5N2) and heterosubtypic (H4N6) LPAIV on exposure to HPAIV H5N1. In mallards with homosubtypic immunity induced by LPAIV infection, clinical disease was absent and shedding of HPAIV from respiratory and intestinal tracts was grossly reduced compared to the heterosubtypic and control groups (mean GEC/100 µl at 3 dpi: 3.0×10² vs. 2.3×10⁴ vs. 8.7×10⁴; p<0.05). Heterosubtypic immunity induced by an H4N6 infection mediated a similar but less pronounced effect. We conclude that the epidemiology of HPAIV H5N1 in mallards and probably other aquatic wild bird species is massively influenced by interfering immunity induced by prior homo- and heterosubtypic LPAIV infections.     

Delayed Hemolytic Transfusion Reaction Due to Appearance of Multiple Antibodies Following Transfusion of Apparently Compatible Blood

A delayed hemolytic transfusion reaction, appearing seven days after transfusions, characterized by jaundice, hemolysis and hemoglobinuria accompanied by the appearance of multiple antibodies in the patient's serum (anti-hr" (c) anti-rh" (E) and anti-Jk^b) is explained as an anamnestic phenomenon. The original sensitizing antigens and those which precipitated the recall mechanism may be traced to her 20-year-old son and to the single-unit transfusion which she received five years previous to the last admission, and to the transfusions given with the operation from which she recovered.
The important fact is that these latent antibodies failed to be detected by standard crossmatching tests (saline, high protein and Coombs) and by a pool of cells containing most of the antigens. The triple enzyme method was the only test which detected the anti-rh" (E) antibody.
The direct Coombs test became positive at the height of the reaction and persisted for 48 hours. Blood tests after 31/2 and 41/2 months revealed that both the anti-Jk^b and anti-rh" (E) antibodies had vanished and only anti-hr' (c) of low titer was still present.     

心肌病患者心肌中相关病毒的测定

目的：探讨炎症性心肌病、扩张型心肌病(idiopathic dilated cardiomyopathy，IDCM)、肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy，HCM)与心肌中细小病毒B19(parvovirus B19，PBl9)、腺病毒和肠病毒的关系。方法：利用多聚酶链反应(PCR)，比较30例炎症性心肌病、36例IDCM、13例HCM及36例对照组患者心内膜活检标本中PB19、腺病毒及肠病毒的检出率，并用荧光素探针实时定量PCR检测PB19拷贝数。结果：30例炎症性心肌病患者中有4例PB19阳性(13．3％)、1例腺病毒阳性(3．3％)、10例肠病毒阳性(33．3％)；36例IDCM中有3例PB19阳性(8．3％)、1例腺病毒阳性(2．8％)、7例肠病毒阳性(19．4％)；13例HCM中有2例PB19阳性(15，4％)、1例肠病毒阳性(7．69％)、腺病毒阴性。而对照组未检出病毒序列。PBl9量从70拷贝／μg至3900拷贝／ug，炎症性心肌病PB19DNA拷贝数高于IDCM组和HCM组。结论：PB19和肠病毒一样是炎症性心肌病、IDCM病因之一，可能与HCM发生也有一定关系，而腺病毒为非主要致病病毒；炎症性心肌病的高拷贝PB19DNA提示病毒感染是诱发心肌炎症反应的机制之一。     

西藏高原移居昆明藏族青年血液流变学检测分析

目的了解从西藏高原(海拔3 000～4 600m)进入昆明(1 880m)6个月后的67例藏族青年血液流变学指标状况.方法用R80A全自动血液流变分析仪检测藏族青年血液流变学指标并与对照组(昆明汉族健康青年)血液流变学指标结果进行比较.结果藏族组5项指标高于对照组,6项指标低于对照组,1项指标两组无显著差异.高于指标是:低剪切率全血粘度(ηb1s-1)、红细胞压积(HCT)、全血低切还原粘度(Lηr)、全血低切相对粘度(VIP)、红细胞聚集指数(VAI),P均<0.05;低于指标是:高剪切率全血粘度(ηb200s-1)、中剪切率全血粘度(ηb65s-1)、高切还原粘度(Hηr)、高切相对粘度(VIb)、红细胞刚性指数(IR)、红细胞变形指数TK,6项中除红细胞刚性指数(IR)P<0.01外,其它P<0.05; 无显著差异指标是血浆粘度(ηp),P>0.05.结论藏族青年其血液流变指标与当地汉族青年相比存在明显异常,西藏高原环境对世居藏族青年的血液流变学影响进入平原生活短期内不易改变;藏族青年血液流变学存在的主要问题是红细胞聚集性过强而变形性较弱.     

关于全血细胞的检测

全血细胞计数是临床检查最常规的项目,本文就全血分析仪检测系统、全细胞形态学检验及血细胞检验的影响因素等作一简述。     

血液HBP,CRP和WBC联合检测对儿童脓毒血症早期诊断价值研究

目的 探讨血液肝素结合蛋白(Heparin-binding protein,HBP)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和白细胞计数(White blood cell count,WBC)联合检测对儿童脓毒血症的早期诊断价值。方法 回顾性选取广州市番禺区石碁人民医院2015年2月1日～2017年2月1日收治的儿童脓毒血症患者44例作为脓毒血症组,搜集患儿在开始诊断为脓毒血症的前24 h为脓毒血症组A组,前48 h为脓毒血症B组,前72 h为脓毒血症C组,同期选取43例身体健康的体检者作为对照组。观察比较对照组与脓毒血症A,B和C组HBP,CRP和WBC的指标水平,并采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血液HBP,CRP和WBC联合检测对儿童脓毒血症早期诊断价值。结果 脓毒血症A,B和C组的HBP,CRP和WBC指标水平明显高于对照组,脓毒血症A组HBP,CRP和WBC指标水平明显高于脓毒血症B组、C组,各组对比差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示,脓毒血症A组HBP,CRP和WBC的最佳临界值分别为17.86 μg/L,16.79 mg/L和0.92×10⁹/L,预测脓毒血症的曲线下面积最大约0.934(0.869～1.002),0.862(0.755～0.967)和0.940(0.872～1.008),各指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。脓毒血症B组HBP,CRP和WBC的最佳临界值分别为13.06 μg/L,15.19 mg/L和0.67×10⁹/L,预测脓毒血症的曲线下面积最大约为0.899(0.813～0.981),0.694(0.540～0.852)和0.819(0.695～0.941),各指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。脓毒血症C组HBP,CRP和WBC的最佳临界值分别为10.32 μg/L,7.89 mg/L和0.29×10⁹/L,预测脓毒血症的曲线下面积最大约为0.822(0.703～0.941),0.719(0.569～0.864)和0.746(0.599～0.889),各指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 血液HBP,CRP和WBC联合检测对儿童脓毒血症早期诊断价值高,其中HBP的窗口期较宽,联合WBC,CRP共同诊断,其准确性、灵敏度更佳,值得临床推广应用。     

正常妊娠妇女中细胞因子mRNA表达的变化

目的通过研究正常妊娠妇女体内细胞因子mRNA的表达变化,了解T细胞介导的器官特异性自身免疫性疾病的活动度在妇女怀孕期间下降的原因.方法用一步法RT-PCR方法测定健康妊娠妇女及其对照组年龄相近的健康非妊娠妇女体内细胞因子mRNA的表达.结果与对照组相比,妊娠早、中妇女体内细胞因子IL-8、IL-2、IFN-γmRNA表达水平有显著意义的下降;TNF-αmRNA表达水平在两组中无显著性差别;只有20%的妊娠妇女IL-4和IL-10mRNA表达水平较低,与对照组相比,在妊娠中、晚期妇女中二者都有显著意义的下降;IL-8mRNA表达水平的变化与孕妇体内HCG水平变化相反.结论妊娠期间如患有器官特异性T细胞介导的自身免疫性疾病,其疾病发展进程与孕妇体内细胞水平免疫调节的变化呈相关性.     

GeXP多重RT-PCR技术在呼吸道病毒检测中的应用

目的 应用GeXP多重基因表达遗传分析系统多重RT-PCR技术检测急性呼吸道感染儿童呼吸道样本中的呼吸道病毒并探讨其在儿童呼吸道感染病毒检测中的价值。方法 回顾性检测2010年7月～2012年6月期间因疑似急性呼吸道感染就诊的1 800名儿科患者的呼吸道样本,应用GeXP多重基因表达遗传分析系统多重RT-PCR技术对呼吸道合胞病毒、鼻病毒等多种呼吸道病毒进行检测。采用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析。结果 GeXP多重RT-PCR方法检测到样本中的10种呼吸道病毒。样本中共有67.33%(1 212/1 800)的样本至少有一种病毒检测结果为阳性。这1 212份病毒阳性标本中,人类鼻病毒(HRV)阳性最多,为375份,阳性率20.83%; 其次为呼吸道合胞病毒(RSV)249份,阳性率13.83%; 其他依次为人类腺病毒(HADV)、人类副流感病毒3(HPIV-3)、人类博卡病毒(HBoV)、甲型流感(InfA)、人类副流感病毒4(HPIV-4)、流感C(InfC)、人类偏肺病毒(hMPV)和乙型流感病毒(Inf B); 阳性率分别为8.89%,6.5%,5.3%,5.3%,3.3%,1.5%,1.11%和0.67%。不同性别间患儿呼吸道病毒阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。研究中观察到13.5%(243/1 800)的病例同时感染两种或两种以上的病毒,其中两种病毒的混合感染为210例(11.67%),3种病毒混合感染为33例(1.83%)。呼吸道病毒的感染率存在季节差异,RSV大多在春季和冬季流行,HBoV,hMPV,InfA,Inf B和 HPIV-3大多是在春季流行,而HADV和HPIV-4主要在夏季流行,Inf C大多是在秋季流行。结论 GeXP分析系统多重RT-PCR方法是一个快速、高通量、高灵敏度且特异度强的检测分析方法,可用于急性呼吸道感染临床分子诊断和流行病学研究。