多种药物对肝癌细胞端粒酶活性的影响

目的：观察几种在肝部职常用的药物对肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１端粒酶活性的影响,进一步探讨它们的抗癌作用机制。方法：利用化疗药物顺铂,丝裂霉素Ｃ、阿霉素、５－氟尿嘧啶、干扰素、全反式维甲酸、叠氮胸苷处理肝癌细胞,然后使用ＴＲＡＰ方法观察处理的前后端粒酶活性的变化,同时利用流式细胞术观察细胞周期和凋广。结果：化疗药物顺铂和丝裂霉素Ｃ对肝癌细胞端粒酶活性有抑制作用,流式细胞术检测表明当端粒酶活性受到抑制     

三氧化二砷对人大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)注射液对人类大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响。方法采用活细胞观察法、台盘兰拒染法和四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法,严密观察As2O3注射液对人大肠癌细胞株LoVo和CoLo-320生长的影响;应用端粒重复序列扩增法(TRAP)—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染法检测As2O3注射液处理前、后大肠癌细胞端粒酶活性的变化。结果As2O3注射液能够显著地抑制LoVo和CoLo-320细胞株的生长,并对癌细胞的端粒酶活性具有明显的抑制作用,该作用呈现出一定的浓度和时间依赖性。结论As2O3注射液的确对于人大肠癌细胞株的生长具有显著的抑制作用,该作用可能与As2O3注射液能够抑制癌细胞的端粒酶活性密切相关。     

三氧化二砷联合氟尿嘧啶体外对人类大肠癌细胞生长及端粒酶活性的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)注射液与氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人类大肠癌细胞的生长及其端粒酶活性的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法观察As2O3注射液和/或5-FU对人类大肠癌细胞株LoVo和CoLo-320生长的影响;应用端粒重复序列扩增法(TRAP)—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染法检测As2O3注射液和/或5-FU处理前后大肠癌细胞端粒酶活性的变化。结果:与As2O3或5-FU单药作用相比,As2O3与5-FU联合应用可显著增强抑制人结肠癌细胞增殖作用,并对细胞端粒酶活性具有增强抑制作用。结论:与各单药相比较,As2O3注射液联合5-FU能够明显增强抗大肠癌作用,其机制可能与增强抑制癌细胞的端粒酶活性有关。     

三氧化二砷对人类肝癌细胞株端粒酶活性的影响

目的观察中药砒霜的主要成分——三氧化二砷(As2O3)对人类肝癌细胞株的端粒酶活性的影响,深入探讨As2O3注射液的抗肝癌作用机制。方法采用端粒重复序列扩增法(TRAP)结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染法,检测不同浓度和作用时间的As2O3对人类肝癌细胞株SMMC-7721和QGY-7703以及对人类正常肝细胞株L-02端粒酶活性的影响。结果人类正常肝细胞株L-02端粒酶活性为阴性,人肝癌细胞株SMMC-7721和QGY-7703端粒酶活性为阳性。不同浓度的As2O3作用24小时时对肝癌细胞株端粒酶活性未见明显抑制,而浓度20μg/ml和40μg/ml的As2O3作用48小时时可完全抑制其端粒酶活性,浓度为8、10、20和40μg/ml的As2O3作用72小时时可完全抑制其端粒酶活性。结论As2O3能够显著地选择性抑制人类肝癌细胞株端粒酶活性,且这种抑制作用呈现出典型的剂量相关性和时间依赖性。这可能是As2O3抗肿瘤作用的重要机制之一;同时提示As2O3注射液可能是一种优良的和具有临床实用价值的端粒酶抑制剂。     

HBX蛋白对正常肝细胞增殖及端粒酶活性的影响

目的:观察乙型肝炎病毒X(hepatitis B virus X,HBX)蛋白对L02肝细胞的转化作用及其对端粒酶活性的影响。方法:构建PEGFP-N1-HBX质粒,脂质体介导转染L02细胞,倒置荧光显微镜观察EGFP的表达。稳定转染后Western blotting检测L02细胞中HBX蛋白的表达,电子显微镜观察L02细胞的形态,MTT法检测细胞的增殖,RT-PCR检测L02细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,TRAP-PCR银染法检测L02细胞端粒酶活性的变化。结果:成功构建了PEGFP-N1-HBX质粒,稳定转染后L02细胞中有HBX蛋白的表达,且细胞形态明显幼稚化,有恶性变趋势,细胞增殖能力明显增加(P0.05),细胞hTERT mRNA表达明显增加,端粒酶被激活。结论:HBX蛋白可诱导正常肝细胞的恶性转化,上调hTERT mRNA的表达并能激活端粒酶。     

hTERT基因反义核酸对K562细胞端粒酶活性的影响

探讨人类端粒酶逆转录酶（ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ,ｈＴＥＲＴ）基因的反义寡核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓ ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ,ＡＳＯＮＤ）对Ｋ５６２细胞端粒酶活性的影响。方法：采用多聚酶链反应－酶联免疫测定（ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ）方法检测人工合成的反义脱氧寡核苷酸处理Ｋ５６２细胞前后端粒酶活性的改变,以逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）分     

三氧化二砷对恶性黑色素瘤A375细胞端粒酶活性的抑制作用

背景与目的 :研究三氧化二砷(As2O3)对人恶性黑色素瘤A375 细胞端粒酶活性的抑制作用,探讨砷及其化合物治疗恶性黑色素瘤的作用机制 ,为砷及其化合物治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。 材料与方法 :用TRAP_ELISA和TRAP_PAGE银染法测定A375 细胞端粒酶活性。结果 :As2O3 对人恶性黑色素瘤A375 细胞端粒酶活性抑制有明显的浓度和时间依赖关系。结论 :As2O3 对恶性黑色素瘤A375 细胞端粒酶活性抑制率随药物浓度的增加或作用时间的延长而提高     

中药对survivin基因影响的研究进展

全文介绍凋亡蛋白抑制剂（IAP）家族的新成员——survivin凋亡调控蛋白近年来的中西医研究状况，展示了活血化瘀药、清热药、以毒攻毒药三类抗癌中药在诱导细胞凋亡过程中对该基因的调控作用。     

p27kip1cDNA对胃癌细胞端粒酶活性及细胞周期的影响

目的　观察p2 7基因表达对胃癌SGC790 1细胞端粒酶活性及细胞周期的影响。方法　采用腺病毒介导的方法将p2 7kip1cDNA导入胃癌SGC790 1细胞中 ,应用TRAP -ELISA法检测细胞端粒酶活性的变化 ,流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果　转染了 p2 7kip1cDNA的细胞端粒酶活性显著下降 ,G1期细胞比率显著增高 ,细胞增殖指数显著降低。结论　外源性 p2 7基因的表达可使SGC790 1细胞生长停滞于G1期 ,端粒酶活性下降 ,Ad -p2 7kip1对治疗胃癌有潜在意义     

三氧化二砷对人肺腺癌A549细胞株生长及对Survivin基因表达的影响

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌细胞株A549的生长抑制作用和对Survivin基因表达的影响,探讨As2O3抑制肺癌细胞增殖的机制。方法:体外培养A549细胞,通过不同剂量的As2O3与A549细胞株共培养,以台盼兰染色后鉴定活细胞计数,计算细胞生长抑制率及存活率;进一步应用Western blot方法检测Survivin表达情况;分析三氧化二砷抑制Survivin的表达水平与A549细胞存活的相关性。结果:As2O3能明显抑制A549细胞株的生长,具有浓度和时间依赖性;As2O3能明显下调Survivin蛋白的表达水平,亦具有浓度和时间依赖性;且Survivin蛋白的表达下调与肿瘤细胞存活率成负相关。结论:As2O3在体外可以明显抑制A549细胞株的生长,并显著抑制Survivin基因的表达。     

Arsenic trioxide downregulates telomerase activity in HL-60 cells

Telomeres are the specialized nucleoproteincomplexes at the physical ends of eukaryoticchromosomes[1]. Telomere length decreases along with increasing cycles of cell divisions. Telomere shortening has therefore been proposed to play a role in cellular senescence. Telomerase is a protein-RNA enzyme complex that adds a six-base DNA sequence (TTAGGG) to the ends of chromosomes and thereby prevents their shortening. This enzyme is specifically activated in most malignant tumors but is usuall…     

三氧化二砷对HL-60细胞hTERT基因表达和端粒酶活性的影响

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)处理HL－60细胞前后人类端粒酶逆转灵酶（hTERT)基因表达和端粒酶活性的改变。方法：采用姬姆萨染色及碘化丙锭染色置流式细胞仪检测来观察细胞的凋亡，以RT－PCR分析hTERT 基因的mRNA表达水平；应用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白含量；利用多聚酶链反应－酶联免疫反应（PCR－ELISA）方法检测As2O3处理HL－60前后端粒酶活性的改变。结果：2umol/L As2O3诱导HL－60细胞凋亡的过程中，hTERT mRNA表达水平显著下降，细胞内hTERT蛋白含量也相应降低，其端粒酶活性明显受到抑制，结论：As2O3可通过下调hTERT基因的表达而抑制HL－6细胞的端粒酶活性。     

三氧化二砷对人肝癌细胞选择性抑制作用的实验研究

目的:明确三氧化二砷(As_2O_3)对人类肝癌细胞株和正常肝细胞株的体外抑制作用.方法:采用活细胞观察法、台盘兰拒拖染法和MTT比色法观察了As_2O_3对体外人肝癌细胞株QGY-7701、QGY-7703和正常人肝细胞株L-02生长的影响及其形态学变化.结果:As_2O_3能显著抑制人肝癌细胞QGY-7701和QGY-7703的生长,而对正常人肝细胞L-02无明显作用.As_2O_3作用48小时,对QGY-7701和QGY-7703细胞的IC50分别为1.537μg/ml和1.301μg/ml.结论:As_2O_3对人肝癌细胞有显著选择性抑制作用,而对正常肝细胞无明显影响,值得进一步探究其机理和临床应用价值.     

PTEN在三氧化二砷诱导肝癌细胞(SMMC-7721)凋亡中的作用

目的 研究PTEN在三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导肝癌细胞凋亡中的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测As2O3对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪定量检测各组细胞的凋亡率;Western blot方法检测各组细胞中PTEN蛋白的表达情况;用PTEN siRNA转染SMMC-7721细胞,观察其对As2O3诱导细胞凋亡作用的影响.结果 As2O3能显著抑制SMMC-7721细胞存活率,其抑制率呈剂量依赖关系;As2O3剂量依赖性诱导肝癌细胞凋亡;Western blot检测显示As2O3明显增加细胞中PTEN蛋白的表达;PTEN siRNA转染可减弱As2O3对SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用.结论 As2O3诱导SMMC-7721细胞凋亡可能与其诱导PTEN表达有关.     

亚砷酸注射液治疗原发性肝癌的Ⅱ期多中心临床研究

目的 评价亚砷酸注射液单药治疗原发性肝癌的客观疗效和不良反应,观察亚砷酸注射液在人体内的药代动力学变化。方法 11例中晚期原发性肝癌患者接受亚砷酸注射液单药治疗,给药方法为亚砷酸注射液7 ～8 mg/m2,静脉滴注,1次/d,连用14d为1个周期,间歇7～14 d,完成2个周期治疗后评价疗效和不良反应。有效和稳定的患者继续治疗到病变进展或不能耐受。结果 本组完成治疗且可评价疗效的患者共102例,其中治疗后部分缓解7例,稳定71例,进展24例;客观有效率为6.9％,临床获益率为76.5％;生活质量改善率为22.5％,镇痛有效率为71.7％。102例患者的中位疾病进展时间(TTP)为97d,中位生存时间(MST)为195 d。不良反应主要为可逆性的Ⅰ～Ⅱ度胃肠道反应和骨髓抑制。药代动力学结果显示,亚砷酸注射液在人体内的分布和清除符合二室模型特征,血浆清除半衰期为(23.94±18.39)h。结论 亚砷酸注射液治疗原发性肝癌有一定的疗效,且有明显的镇痛作用,能在一定程度上延长中晚期肝癌患者的TTP和MST,不良反应轻,患者可以耐受。     

三氧化二砷与顺铂合用抗人肝癌细胞株QGY-7701的实验研究

 目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3)与顺铂 (PDD)联合抗人肝癌细胞株QGY 770 1作用性质及其作用机制。方法　应用MTT法、流式细胞术分析和端粒酶活性检测等实验方法。结果　As2 O3与PDD联合应用在抑制肝癌细胞的生长繁殖、诱导肝癌细胞凋亡和抑制其端粒酶活性等方面均较各自单药的作用明显增强。结论　As2 O3与PDD联合应用具有明显的协同抗肝癌作用 ,其主要机制可能在于增强了抑制端粒酶活性。     

三氧化二砷与顺铂合用抗人肝癌细胞株QGY-7701的实验研究

目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3)与顺铂 (PDD)联合抗人肝癌细胞株QGY 770 1作用性质及其作用机制。方法　应用MTT法、流式细胞术分析和端粒酶活性检测等实验方法。结果　As2 O3与PDD联合应用在抑制肝癌细胞的生长繁殖、诱导肝癌细胞凋亡和抑制其端粒酶活性等方面均较各自单药的作用明显增强。结论　As2 O3与PDD联合应用具有明显的协同抗肝癌作用 ,其主要机制可能在于增强了抑制端粒酶活性。     

三氧化二砷在胃癌治疗中的应用

三氧化二砷(As2O3)是中药砒霜的主要成分,最初被用于治疗血液系统疾病.近年研究发现,其对多种实体瘤也有良好疗效,其中对胃癌疗效显著.研究证实,As2O3可以抑制胃癌细胞增殖及转移,诱导胃癌细胞凋亡和保护性自噬,抑制胃癌淋巴管和新生血管形成,影响胃癌细胞内端粒相关蛋白的表达.